免疫毒理學(xué)課件

第十章免疫毒理學(xué)一、概述1.免疫毒理學(xué)的發(fā)展及定義早期的免疫損傷現(xiàn)象：青霉素過敏、面包師皰疹1977年：Vos將外源化學(xué)物對免疫系統(tǒng)損傷與毒理學(xué)聯(lián)系起來1984年：國際化學(xué)品安全規(guī)劃署歐共體委員會免疫系統(tǒng)是毒性損傷的靶的研討會immunotoxicology免疫毒理學(xué)：immunotoxicology是應(yīng)用毒理學(xué)與免疫學(xué)的理論及實驗手段研究外來化學(xué)物等有害因素對機(jī)體免疫系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的影響及其作用機(jī)制，并評價這些有害因素的免疫毒性和／或針對其損害提供防治措施的科學(xué)。二、免疫系統(tǒng)對外源化學(xué)物的毒性反應(yīng)與機(jī)制免疫系統(tǒng)的組成免疫器官：胸腺、骨髓、脾、淋巴結(jié)、彌散的淋巴組織免疫細(xì)胞：T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞單核吞噬細(xì)胞免疫分子：免疫球蛋白IgA,IgM,IgA,IgD,IgE

補(bǔ)體細(xì)胞因子:IL-1~12,IFN-αβγ,TNF1.免疫系統(tǒng)的組成和功能免疫系統(tǒng)的功能①.識別并清除入侵的病原體及毒素②.清除體內(nèi)產(chǎn)生的腫瘤細(xì)胞維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定1.免疫抑制:主要表現(xiàn)：抗感染能力腫瘤易感性2.常見的免疫化合物:

多鹵代芳烴、多環(huán)芳烴、藥物、農(nóng)藥、嗜好品等（一）免疫抑制3.化學(xué)毒物的免疫機(jī)制直接作用：①損傷免疫細(xì)胞：

損傷骨髓干細(xì)胞，使免疫細(xì)胞生成減少：苯可導(dǎo)致白細(xì)胞減少和種類平衡失調(diào)

損傷中樞和外周免疫器官的淋巴細(xì)胞：許多重金屬可直接損傷B細(xì)胞，抑制體液免疫②干擾免疫應(yīng)答過程：

影響細(xì)胞膜表面分子：（受體、酶、表面特征分子）

干擾細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)調(diào)空系統(tǒng)間接作用：①影響神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)分泌系統(tǒng)免疫系統(tǒng)免疫調(diào)節(jié)（二）超敏反應(yīng)1.過敏反應(yīng)的類型:①速發(fā)型：致敏細(xì)胞釋放血管活性物質(zhì)毛細(xì)血管通透性改變導(dǎo)致腺體分泌增強(qiáng)哮喘、鼻炎②細(xì)胞毒型：IgGorIgM帶有相應(yīng)抗原靶細(xì)胞結(jié)合，活化補(bǔ)體，溶解細(xì)胞貧血、血小板減少免疫復(fù)合物組織中沉淀④遲發(fā)型：致敏TD細(xì)胞釋放淋巴因子單核巨噬細(xì)胞浸慢性炎癥如：接觸性皮炎③免疫復(fù)合型：抗原抗體浸潤、釋放水解酶如：慢性腎小球腎炎2.超敏反應(yīng)的主要表現(xiàn)：過敏性皮炎：“面包師皰疹”職業(yè)性哮喘：甲苯二異氰酸酯3.超敏反應(yīng)的機(jī)制自身免疫疾病1.自身免疫的主要表現(xiàn)外源化學(xué)物自身免疫應(yīng)答遺傳、營養(yǎng)

器官特異性疾病胰島素依賴性糖尿病多發(fā)性硬化癥非器官特異性疾病系統(tǒng)性紅斑狼瘡類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是否針對某一器官是否2.常見的外源化學(xué)物藥物：青霉素、本妥英、普魯卡因工業(yè)化學(xué)物：氯乙烯、石英環(huán)境化學(xué)物：多氯聯(lián)苯、多溴聯(lián)苯、重金屬3.發(fā)生機(jī)制化學(xué)毒物使機(jī)體失去自身銀免疫耐受自身抗體或自身應(yīng)答性TC免疫復(fù)合物或免疫損傷自身免疫性疾病針對血細(xì)胞溶血抗自身甲狀腺素受體甲抗抗腎小球基底膜Ⅳ膠原抗體腎小球腎炎常見病三.免疫毒性檢測方案檢測方案原則:能全面反映化學(xué)毒物對免疫系統(tǒng)的損傷評價藥物的免疫損傷包括免疫抑制過敏反應(yīng)自身免疫免疫源性不良免疫刺激1.免疫抑制骨髓抑制免疫器官重量和組織學(xué)改變血清球蛋白降低感染反生率增加腫瘤發(fā)生率增加免疫功能檢測溶血空斑試驗ELISAS試驗免疫原性：immunogenecity是指外源化學(xué)物引起免疫反映的能力。免疫原性與分子量有關(guān)：分子量免疫原性＞10,000強(qiáng)5,000---10,000稍弱

1,000---5,000難估計＜1,000半抗原2.免疫原性Ⅱ、Ⅲ超敏反應(yīng)沒有很好的檢測方法：

Ⅳ：豚鼠最大值試驗和Buecher試驗（局部封閉涂皮法）豚鼠最大值試驗：豚鼠頸背脊柱兩側(cè)脫毛福氏完全佐劑（FCA）受試物受試物與FCA的等量混合物

注射部位涂受試物第二次致敏用涂以受試物的濾紙，再次貼敷在上背部兩，激發(fā)接觸進(jìn)行皮膚反應(yīng)強(qiáng)度評分4.自身免疫檢測目前還沒有預(yù)測藥物自身免疫反應(yīng)的方法，但常用的有：鼠國窩淋巴結(jié)試驗和局部淋巴結(jié)試驗5.不良免疫刺激指化學(xué)物對免疫系統(tǒng)某些成分的任何抗原非特意性的、不適當(dāng)?shù)幕螂y以控制的活化作用。2.免疫功能評價①NK細(xì)胞活性的測定接觸外源化學(xué)物脾細(xì)胞和未接觸外源化學(xué)物脾細(xì)胞Cr標(biāo)記的細(xì)胞測量培養(yǎng)液中核素強(qiáng)度，評估NK細(xì)胞的活性②巨噬細(xì)胞功能檢測:巨噬細(xì)胞貼壁生長51Cr--雞紅細(xì)胞共同孵育棄去上清夜加氯化銨短暫培養(yǎng)，去除未倍吞噬的雞紅細(xì)胞加NaOH溶解紅細(xì)胞，測量核素強(qiáng)度③體液免疫功能的評價：受試物免疫動物，然后檢測抗體的生成量或抗體形成細(xì)胞數(shù)④細(xì)胞功能評價:常用方法有細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺傷實驗遲發(fā)型超敏反應(yīng)淋巴細(xì)胞增殖試驗細(xì)胞毒性T細(xì)胞殺傷實驗:目的:評價脾T細(xì)胞識別和溶解經(jīng)抗原處理靶細(xì)胞的能力經(jīng)絲裂霉素Ｃ處理的P815肥大細(xì)胞脾淋巴細(xì)胞收集致敏細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞51Cr-P815肥大細(xì)胞測量培養(yǎng)液中放射性強(qiáng)度⑤宿主抵抗力試驗檢測對不同病原體和同種移植腫瘤的能力3.超敏反應(yīng)和自身免疫反應(yīng)檢測Ⅰ型超敏反應(yīng)主動皮膚過敏實驗被動皮膚過敏試驗主動皮膚過