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白細(xì)胞介素1aQL-1a/IL-1F1)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒本試劑僅供研究使用Alpha1alphainterleukins(IL一1/IL一1fl)ELISAELISAkit白細(xì)胞介素操作步驟標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品loom,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50卩1,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取loom分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50卩1,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50卩1棄掉,再各取50卩1分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50卩1分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50卩1,混勻后從第七、第八孔中分別取50卩1加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50卩1,混勻后從第九第十孔中各取50卩1棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50卩1,濃度分別為90ng/L,60ng/L,30ng/L,15ng/L,7.5ng/L)。加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40卩1,然后再加待測(cè)樣品10卩1(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37°C溫育30分鐘。配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50卩1,空白孔除外。溫育:操作同3。洗滌:操作同5。顯色:每孔先加入顯色劑A50yl,再加入顯色劑B50pl,輕輕震蕩混勻,37C避光顯色15分鐘.終止:每孔加終止液50卩1,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。試劑盒性能:1?樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.92以上。2.批內(nèi)與批見應(yīng)分別小于9%和15%上海古朵生物科技ShanghaiGudiioBiotechnology上海古朵白細(xì)胞介素1a(IL-1a/IL-1F1)ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說(shuō)明書1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1個(gè)1個(gè)酶標(biāo)包被板1X481X962-8°C保存標(biāo)準(zhǔn)品:18pmol/L0.5mlX1瓶0.5mlX1瓶2-8°C保存標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5mlX1瓶1.5mlX1瓶2-8C保存酶標(biāo)試劑3mlX1瓶6mlX1瓶2-8C保存樣品稀釋液3mlX1瓶6mlX1瓶2-8C保存顯色劑A液3mlX1瓶6mlX1瓶2-8C保存顯色劑B液3mlX1瓶6mlX1瓶2-8C保存終止液3mlX1瓶6mlX1瓶2-8C保存濃縮洗滌液(20mlX20倍)X1瓶(20mlX30倍)X1瓶2-8C保存二胺氧化酶【ELISA試劑盒種屬】人大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等?!驹噭┖袡z測(cè)目的】用于測(cè)定血清血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。二胺氧化酶性能:靈敏度:最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。特異性:不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。問(wèn)題及解決辦法1.加入反應(yīng)終止液后,沒(méi)有吸光值或吸光值偏低。a.原因:未加入酶標(biāo)記物。解決辦法:請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行。b.原因:試劑盒內(nèi)容物未能充分回。解決辦法:確定試劑盒內(nèi)容物回溫后再進(jìn)行操作。c?原因:室溫太低。解決辦法:若室溫太低(<19。0,請(qǐng)于操作步驟4,適當(dāng)延長(zhǎng)溫育時(shí)間。d?原因:未使用試劑盒的清洗液清洗。解決辦
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