蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)-課件_第1頁(yè)
蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)-課件_第2頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

實(shí)驗(yàn)一

蛋白質(zhì)和氨基酸的

呈色反應(yīng)

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解蛋白質(zhì)和氨基酸的呈色反應(yīng)原理2、學(xué)習(xí)幾種常用的鑒定蛋白質(zhì)和氨基酸的方法。3、了解呈色反應(yīng)在定性和定量分析中的應(yīng)用。（一）雙縮脲反應(yīng)

1、原理

一切蛋白質(zhì)或二肽以上的多肽都有雙縮脲反應(yīng)，但有雙縮脲反應(yīng)的物質(zhì)不一定都是蛋白質(zhì)或多肽。

劑i]（二）茚三酮反應(yīng)

2、試劑

（1）蛋白質(zhì)溶液

（新鮮蛋清：水=1:9)

100ml（2）0.5%甘氨酸溶液

（3）0.1%茚三酮水溶液

（4）0.1%茚三酮-乙醇溶液

3、操作

（1）取2支試管分別加入蛋白質(zhì)溶液和甘氨酸溶液1ml，再各加0.5ml0.1%茚三酮水溶液，混勻，在沸水浴中加熱1~2分鐘，觀察顏色由粉色變紫色再變藍(lán)。

（2）在一小塊濾紙上滴一滴0.5%甘氨酸溶液，風(fēng)干后，再在原處滴一滴0.1%茚三酮乙醇溶液，在微火旁烘干顯色，觀察紫紅色斑點(diǎn)的出現(xiàn)。劑i]劑i]

（三）黃色反應(yīng)

1、原理

2、試劑（1）雞蛋清溶液

（2）頭發(fā)（3）指甲（4）0.5%苯酚溶液（5）濃硝酸

（6）0.3%色氨酸溶液

（7）0.3%酪氨酸溶液

（8）10%氫氧化鈉溶液

3、操作

向6個(gè)試管中分別按下表加入試劑，觀察各管出現(xiàn)的現(xiàn)象，有的試管反應(yīng)慢可略放置或用微火加熱。待各管出現(xiàn)黃色后，于室溫下逐滴加入10%氫氧化鈉溶液至堿性，觀察顏色變化。劑i]

（四）乙醛酸反應(yīng)1、原理紫紅色劑i]

2、試劑：(1)蛋白質(zhì)溶液雞蛋清：水＝1：20(2）冰醋酸(3)濃硫酸(分析純)3、操作向試管中加數(shù)滴蛋白質(zhì)溶液，再加冰醋酸約1ml,傾斜試管，謹(jǐn)慎地沿著管壁加濃硫酸(A．R．)約1ml，使其重疊，勿使兩者混合。靜置后，觀察在兩液界面上出現(xiàn)的紅紫色環(huán)，于水浴中微熱，可幫助顏色形成。用20%白明膠作乙醛酸反應(yīng)。白明膠分子中無(wú)色氨酸，所以不呈此反應(yīng)。劑i]

3、操作

取2支試管，按下表操作試劑管號(hào)蛋白質(zhì)

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