定量分析方法性能確認(rèn)

學(xué)習(xí)和討論內(nèi)容管理機(jī)構(gòu)的要求方法確認(rèn)的支持性文件方法的評價的主要內(nèi)容1現(xiàn)在是1頁\一共有48頁\編輯于星期四ALB試劑說明書現(xiàn)在是2頁\一共有48頁\編輯于星期四ALB試劑說明書現(xiàn)在是3頁\一共有48頁\編輯于星期四管理機(jī)構(gòu)的要求

2003年1月24日,美國醫(yī)醫(yī)療服務(wù)中心(CMS、theFinalCLIARule)公布.陳述：“實(shí)驗(yàn)室的分析方法（non-waived）必須要確認(rèn)其性能.”

現(xiàn)在是4頁\一共有48頁\編輯于星期四管理機(jī)構(gòu)的要求

使用美國食品及藥物管理局認(rèn)可的但未更改的方法，實(shí)驗(yàn)室要證實(shí)其方法的性能與生產(chǎn)廠家所建立方法的性能進(jìn)行比較?，F(xiàn)在是5頁\一共有48頁\編輯于星期四管理機(jī)構(gòu)的要求CLIA是根據(jù)分析方法的復(fù)雜性，方法分為三大類:1.Waivedtests(豁免試驗(yàn))2.Non-waivedunmodifiedtests–moderateandhighcomplexitytests(中度或高度試驗(yàn))3.Non-waived,modified(orin-housedeveloped)tests.(更改中度或高度試驗(yàn)或開發(fā)的試驗(yàn))現(xiàn)在是6頁\一共有48頁\編輯于星期四管理機(jī)構(gòu)的要求

Non-waived,未更改的中等和高度復(fù)雜性

化學(xué)、血液學(xué)etc.要求進(jìn)行四個方面的方法確認(rèn)1.重復(fù)性實(shí)驗(yàn)Replicationexperiment(estimateimprecision)2.方法學(xué)的比較Comparisonofmethods(estimateinaccuracy)3.線性實(shí)驗(yàn)Linearityexperiment(reportablerange)4.參考值的確認(rèn)Establishreferenceintervals.

現(xiàn)在是7頁\一共有48頁\編輯于星期四管理機(jī)構(gòu)的要求

Non-waivedtests更改的中等和高度復(fù)雜性或?qū)嶒?yàn)室開發(fā)的試驗(yàn)，要求進(jìn)行六個方面的方法確認(rèn)1.Precision精密度2.Accuracy準(zhǔn)確度3.Reportablerange可報告范圍4.ReferenceIntervals參考值范圍

5.Analyticalsensitivity(detectionlimit)分析靈敏度（最低檢測值）6.Analyticalspecificity(interferingsubstances)分析的特異性（干擾物質(zhì)）

現(xiàn)在是8頁\一共有48頁\編輯于星期四管理機(jī)構(gòu)的要求

《醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室管理辦法》檢查細(xì)則（通用要求）醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)保證檢測系統(tǒng)的完整性和有效性，對需要校準(zhǔn)的檢驗(yàn)儀器、檢驗(yàn)項(xiàng)目和對臨床檢驗(yàn)結(jié)果有影響的輔助設(shè)備定期進(jìn)行校準(zhǔn)?，F(xiàn)在是9頁\一共有48頁\編輯于星期四CAP-LAP的要求COM.40300AnalyticAccuracy/PrecisionPhaseIIThelaboratoryverifiesorestablishesanalyticaccuracyandprecisionforeachtest.COM.40400AnalyticSensitivityPhaseIIThelaboratoryverifiesorestablishestheanalyticsensitivity(lowerdetectionlimit)ofeachassay,asapplicable.COM.40500AnalyticInterferencesPhaseIIThelaboratoryverifiesorestablishesanalyticinterferencesforeachtest

COM.40600ReportableRangePhaseIIThereportablerange(analyticmeasurementrange)isverified/establishedforeachanalyticprocedurebeforeimplementationCOM.50000ReferenceIntervalsPhaseIIThelaboratoryestablishesorverifiesitsreferenceintervals(normalvalues).現(xiàn)在是10頁\一共有48頁\編輯于星期四方法確認(rèn)的支持性文件定量實(shí)驗(yàn)室方法的初步評價（CLSIEP10）臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評價（CLSIEP5）用患者標(biāo)本進(jìn)行方法學(xué)比較和偏倚評估（CLSIEP9）定量分析方法的線性（CLSIEP6）臨床化學(xué)干擾試驗(yàn)（CLSIEP7）基質(zhì)效應(yīng)的評價（CLSIEP14）精密度和準(zhǔn)確度性能的用戶證實(shí)(EP15-A)CLSIClinicalandLaboratoryStandardsInstitute現(xiàn)在是11頁\一共有48頁\編輯于星期四方法的評價的主要內(nèi)容方法確認(rèn)=評價誤差總誤差=系統(tǒng)誤差+隨機(jī)誤差.方法確認(rèn)的基本內(nèi)容:–評價不精密度(隨機(jī)誤差)–評價不準(zhǔn)確度(系統(tǒng)誤差)–可報告范圍的確認(rèn)(線性)–參考值的確認(rèn)(正常值范圍)

現(xiàn)在是12頁\一共有48頁\編輯于星期四方法的評價的主要內(nèi)容對于更改的中等和高度復(fù)雜性或?qū)嶒?yàn)室開發(fā)的試驗(yàn)，要增加二項(xiàng)內(nèi)容：–分析方法的靈敏度Analyticalsensitivity(limitofdetection)–分析方法的特異性Analyticalspecificity(interferingsubstance)現(xiàn)在是13頁\一共有48頁\編輯于星期四不精密度

指同一樣本在一定條件下多次重復(fù)測定得到的一系列單次測定值之間的接近程度，是表示測定結(jié)果中隨機(jī)誤差大小程度的指標(biāo)。用標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)描述不精密度的大小現(xiàn)在是14頁\一共有48頁\編輯于星期四不精密度

1.計算批內(nèi)（間）不精密度(CV或SD),并將與廠家批內(nèi)（間）不精密度比較

2.計算總不精密度(CV或SD)，并將與廠家總不精密度比較

3.不精密度分析目標(biāo)進(jìn)行比較現(xiàn)在是15頁\一共有48頁\編輯于星期四不精密度現(xiàn)在是16頁\一共有48頁\編輯于星期四CLIA88推薦最大測量不精密度現(xiàn)在是17頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度大批檢測結(jié)果的均值與真值的一致程度與系統(tǒng)誤差有關(guān)，常用偏倚表示不正確度現(xiàn)在是18頁\一共有48頁\編輯于星期四Page

19測量不正確度與檢測系統(tǒng)的關(guān)系檢測系統(tǒng)校準(zhǔn)品試劑分析儀現(xiàn)在是19頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度

評價準(zhǔn)確度的常用試驗(yàn)方法比較試驗(yàn)回收試驗(yàn)干擾試驗(yàn)現(xiàn)在是20頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度方法比較試驗(yàn)（comparisonofmethodsexperiment）將試驗(yàn)方法（待評價或待驗(yàn)證的方法）與比較方法（參考方法或準(zhǔn)確度已知的方法）進(jìn)行比較用于評價試驗(yàn)方法的恒定和比例系統(tǒng)誤差?，F(xiàn)在是21頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度方法要點(diǎn)：

–比較方法理想的比較方法=referencemethod–樣本個數(shù)：40份患者樣本

1/3低濃度1/3中濃度

1/3高濃度（可報告范圍）現(xiàn)在是22頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度統(tǒng)計學(xué)包括：

圖形分析Graphanalysis回歸分析Regressionanalysis偏差分析Biasanalysis可接受的標(biāo)準(zhǔn)Acceptablecriterion現(xiàn)在是23頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度圖形分析–差異圖:Y軸:試驗(yàn)方法與比較方法之差

X軸:比較方法的測定值

現(xiàn)在是24頁\一共有48頁\編輯于星期四不正確度–對比圖:Y軸:試驗(yàn)方法測定值

X軸:比較方法的測定值現(xiàn)在是25頁\一共有48頁\編輯于星期四回歸分析回歸方程Y=a+bXa為回歸線截矩，反映恒定系統(tǒng)誤差的大小,a=0時，表示無恒定系統(tǒng)誤差b為回歸線斜率，反應(yīng)比例系統(tǒng)誤差的大小，

b=1時，表示無比例系統(tǒng)誤差不正確度現(xiàn)在是26頁\一共有48頁\編輯于星期四相關(guān)系數(shù)（r）可幫助判斷測定的濃度范圍對于斜率和截矩的評估是否合適，而不能用于判斷方法是否可受。r>0.99,應(yīng)用線性回歸統(tǒng)計r<0.99,應(yīng)用配對t-test不正確度現(xiàn)在是27頁\一共有48頁\編輯于星期四

判斷差異能否被接受，應(yīng)在醫(yī)學(xué)決定水平與總可允許誤差比較。應(yīng)用方法比較的回歸方程,計算醫(yī)學(xué)決定水平的預(yù)期偏差.丨a+bXc）-Xc丨〈1/2TEa（CLIA88）不正確度現(xiàn)在是28頁\一共有48頁\編輯于星期四Page

29衡量質(zhì)量的兩個重要指標(biāo)測量的固有不精密度測量的不正確度總誤差允許總誤差TEA現(xiàn)在是29頁\一共有48頁\編輯于星期四總誤差（TE）

總誤差（TE）的估計TE=SE+RETE=bias+nSD

TE<<TEa（CLIA88）(n=2、3、4)現(xiàn)在是30頁\一共有48頁\編輯于星期四Page

31允許總誤差指標(biāo)與其他國家總誤差指標(biāo)檢驗(yàn)項(xiàng)目本標(biāo)準(zhǔn)TE(%)美國TE丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶16.0±20%

天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶15.0±20%

γ-谷氨?；D(zhuǎn)移酶11.0±20%

堿性磷酸酶18.0±30%

肌酸激酶15.0±30%

淀粉酶15.0±30%

乳酸脫氫酶11.0±20%

總蛋白5.0±10%

白蛋白6.0±10%

總膽紅素15.0±20%±6.84mmol/L血糖7.0±10%±0.33mmol/L肌酐12.0±15%±26.5μmol/L尿酸12.0±17%

尿素8.0±9%±0.71mmol/L總膽固醇9.0±10%

甘油三酯14.0±25%

氯離子4.0±5%

現(xiàn)在是31頁\一共有48頁\編輯于星期四測量不精密度和不正確度對質(zhì)量的影響現(xiàn)在是32頁\一共有48頁\編輯于星期四可報告范圍可報告范圍（reportablerange）指可以報告的所有結(jié)果范圍，包含兩種類型的范圍分析測量范圍（analyticalmeasurementrange，AMR）臨床可報告范圍（clinicalreportablerange，CRR）?，F(xiàn)在是33頁\一共有48頁\編輯于星期四評價分析方法能報告的可信的最低、最高的濃度范圍值。確認(rèn)廠家所提供該分析系統(tǒng)的可報告范圍是否一致。目的:可報告范圍現(xiàn)在是34頁\一共有48頁\編輯于星期四目測線性法最小二剩法線性評價NCCLS制訂并推出的評價方案（EP-6）多項(xiàng)式線性評價方案（2002）可報告范圍現(xiàn)在是35頁\一共有48頁\編輯于星期四紅色：S形蘭色：拋物線黑色：直線可報告范圍現(xiàn)在是36頁\一共有48頁\編輯于星期四可報告范圍樣本數(shù)量：驗(yàn)證線性：5-7個濃度水平，重復(fù)2次測定。建立線性：7-11個濃度水平，測定2-4次現(xiàn)在是37頁\一共有48頁\編輯于星期四目測線性法可報告范圍現(xiàn)在是38頁\一共有48頁\編輯于星期四可報告范圍現(xiàn)在是39頁\一共有48頁\編輯于星期四最小二剩法線性評價方案擬合的直線方程

Y=Ax+B

可報告范圍現(xiàn)在是40頁\一共有48頁\編輯于星期四1、b（在1.000.03范圍內(nèi))，a近于0，則可直接判斷該測定方法可報告范圍在實(shí)驗(yàn)已涉及濃度。2、

若b不接近1，a較大；若b0.97，或1.03，已有可能b和1之間有統(tǒng)計上顯著性差異。試著舍去某組數(shù)據(jù)，另作回歸統(tǒng)計。若縮小分析范圍后，回歸式有明顯改善，b近于1，a趨于0。此時，縮小的分析范圍是真實(shí)的可報告范圍。

進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)判斷和評價:可報告范圍現(xiàn)在是41頁\一共有48頁\編輯于星期四干擾試驗(yàn)是通過定量檢測樣本中的物質(zhì)所引起試驗(yàn)方法的系統(tǒng)誤差，以評價方法的準(zhǔn)確度。由干擾物質(zhì)引起的誤差通常是恒定系統(tǒng)誤差，與分析物的濃度無關(guān)系。干擾試驗(yàn)現(xiàn)在是42頁\一共有48頁\編輯于星期四

檢測限（limitofdetection）指檢測系統(tǒng)可檢測出的最低分析物濃度。包括檢測低限、生物監(jiān)測限和功能靈敏度。檢測限現(xiàn)在是43頁\一共有48頁\編輯于星