支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座專家講座

支原體又叫霉形體，屬柔膜體綱，是一類無細胞壁細菌，含有多形性，能經(jīng)過細菌濾器。是當(dāng)前已知能在無生命培養(yǎng)基中繁殖最小原核細胞型微生物。第17章支原體

（Mycoplasma）支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第1頁特點:(1)無細胞壁，細胞柔軟，多形性，能經(jīng)過細菌濾器

（多形性、可塑性、濾過性）

(2)在人工培養(yǎng)基中生長繁殖，形成“煎荷包蛋狀”菌落(3)基因組小，含有DNA和RNA(4)以二分裂或芽生方式繁殖(5)對青霉素有抵抗力

常污染試驗室培養(yǎng)細胞及生物制品支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第2頁一、形態(tài)與染色

外圍只有胞漿膜，常呈球狀、兩極狀、環(huán)狀、桿狀偶見分枝絲狀，無鞭毛，革蘭氏染色呈陰性，著色不良，姬姆薩或瑞氏染色良好，呈淡紫色。支原體細胞膜含有三層結(jié)構(gòu)，內(nèi)、外層主要是蛋白質(zhì)，中間層主要是脂質(zhì)(固醇含量高）。

支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第3頁二、培養(yǎng)特征

因為基因組小，合成能力較弱，營養(yǎng)要求較高，需添加外源脂肪酸、甾醇、輔酶I、氨基酸等。生長遲緩（2-6d長出微小菌落），菌落呈“荷包蛋狀”（豬肺炎支原體除外），菌落中心深入培養(yǎng)基中，致密、色暗；周圍長在培養(yǎng)基表面，較透明。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第4頁無細胞壁二分裂方式繁殖經(jīng)典菌落呈油煎蛋樣支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第5頁可在雞胚卵黃囊或絨毛尿囊膜上生長，有些菌株可致雞胚死亡。也能在細胞培養(yǎng)中生長，不一定引發(fā)細胞病變，但可妨礙病毒細胞培養(yǎng)。液體培養(yǎng)基中，生長數(shù)量少，不易見渾濁，僅有小顆粒沉于管底。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第6頁三、與細菌L型區(qū)分支原體L型遺傳上與細菌無關(guān)與原菌相關(guān)，常能夠回復(fù)需甾醇普通不需甾醇在普通培養(yǎng)基中穩(wěn)定大多需要高滲培養(yǎng)生長慢，菌落小菌落稍大0.1-0.3mm0.5-1.0mm菌落中心深埋于培養(yǎng)基中菌落生長于基質(zhì)表面，不易刮除，光亮、透明易于刮除，較暗、不透明液體培養(yǎng)混濁度低有一定混濁度

對洋地黃皂苷敏感不敏感

支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第7頁四、生理生化特征依據(jù)對糖類分解利用能力不一樣，分為兩群：一群能分解葡萄糖及其它各種糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，稱發(fā)酵型。另一群不分解糖，稱非發(fā)酵型，但能利用精氨酸作為碳源和能量起源。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第8頁慣用生理生化試驗：葡萄糖發(fā)酵和精氨酸水解試驗?zāi)蛩厮庠囼?區(qū)分脲原體與其它支原體)洋地黃苷敏感性試驗支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第9頁五、抗原及分型支原體抗原由細胞膜上蛋白質(zhì)和類脂組成。可用對應(yīng)抗血清做生長抑制試驗、代謝抑制試驗、免疫熒光試驗及ELISA等進行判定和分型。抵抗力較普通細菌弱，對理化原因敏感支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第10頁

病原性支原體經(jīng)常定居于各種動物呼吸道、泌尿生殖道、消化道粘膜表面及乳腺、眼等，引發(fā)牛傳染性胸膜肺炎、豬喘氣病、禽敗血霉形體感染等，傳輸路徑主要是呼吸道。單獨感染時，經(jīng)常癥狀輕微或無臨床表現(xiàn)，當(dāng)細菌或病毒等繼發(fā)感染或受外界不利原因作用引發(fā)疾病。特點是潛伏期長，慢性及地方性流行。主要毒力因子：胞黏素，與黏膜呼吸道上皮細胞纖毛相關(guān)，粘附造成纖毛損害并脫落從而使肺易發(fā)繼發(fā)感染。六、致病性支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第11頁七、診療直接鏡檢：形態(tài)多樣，意義不大。

分離培養(yǎng)：過濾除菌病料，進行細菌L型判定及2-3次克隆、純化（0.45μm過濾）。生理生化反應(yīng)：洋地黃苷、尿酶及葡萄糖、精氨酸分解試驗。縮小選取抗血清范圍，種判定必須用血清學(xué)方法最終確定，這與細菌判定到種只需作生理生化測定不一樣。

血清學(xué)檢驗：生長抑制試驗、代謝抑制試驗等支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第12頁第2節(jié)豬肺炎支原體豬地方流行性肺炎（豬喘氣?。┎≡Ｐ螒B(tài)多樣，大小不等，以環(huán)形為主。兼性厭氧，營養(yǎng)要求高，菌落不呈“荷包蛋狀”以哺乳仔豬和幼豬最為易感，表現(xiàn)為咳嗽和氣喘，發(fā)病率高，死亡率低。存在于病豬肺細支氣管和支氣管上皮細胞表面和纖毛，經(jīng)呼吸道傳輸，通常由病豬傳給低日齡易感豬，也可經(jīng)風(fēng)力傳輸數(shù)公里之遙。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第13頁雞毒支原體主要感染雞和火雞，引發(fā)慢性呼吸道?。–hronicRespiratoryDisease，CRD）。病原體存在于病雞和帶菌雞呼吸道、卵巢、輸卵管和精液中，可經(jīng)過垂直傳遞或交配將病傳遍整個雞群，雞群一旦染病難以徹底根除。在其它病原微生物繼發(fā)感染時加重病情。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第14頁嗜血支原體寄生于紅細胞表面，大多球狀。對青霉素及同類藥品有抗性，體外不能培養(yǎng)。感染多無臨床癥狀，在隱性感染動物體內(nèi)可存在多年之久。嗜血支原體含有黏附素，菌體黏附致使紅細胞凹陷進而破壞細胞骨架，增加其脆性。嗜血支原體感染主要特點是引致貧血，本質(zhì)是本身免疫病。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第15頁立克次體（Rickettsia）

立克次體是一類介于病毒與細菌之間原核細胞型微生物，專性細胞內(nèi)寄生。在形態(tài)結(jié)構(gòu)和繁殖方式等特征上與細菌相同，而在生長要求上又酷似病毒。這類微生物引發(fā)人和動物立克次體病（如Q熱、斑疹傷寒、恙蟲病等）?？山?jīng)氣溶膠傳染，是潛在生物武器。為紀(jì)念HowardTaylorRicketts而命名。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第16頁一、生物學(xué)特征

1.多形性，主要是球桿狀。2.大小介于細菌和病毒之間，多數(shù)不能經(jīng)過細菌濾器。3.革蘭氏陰性，有細胞壁

4.專性細胞內(nèi)寄生

5.以二分裂方式繁殖6.酶系統(tǒng)不完整，依賴宿主細胞提供ATP、輔酶I和輔酶A等才能生長支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第17頁支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第18頁7.對理化原因抵抗力不強，尤對熱敏感，對一些廣譜抗生素敏感，但對磺胺藥不敏感，反而能促進其生長。

8.致人畜疾病立克次體多寄生于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、血管內(nèi)皮細胞或紅細胞，寄生于虱、蚤、蜱、螨等節(jié)肢動物中，經(jīng)過叮咬感染人和動物。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第19頁二、致病性立克次體主要寄生于節(jié)肢動物腸壁上皮細胞中或進入它們唾液腺或生殖道內(nèi)。人畜主要經(jīng)這些動物叮咬而感染。侵入皮膚立克次體先在局部淋巴組織或小血管內(nèi)皮細胞中生長繁殖，引發(fā)內(nèi)皮細胞腫脹、增生、壞死；微循環(huán)發(fā)生障礙以及形成血栓；紅細胞滲出血管周圍組織，引發(fā)特征性皮疹。若菌體經(jīng)血流在全身各器官小血管內(nèi)皮細胞中大量增殖后再釋入血流會引發(fā)第二次菌血癥，使各血管形成血栓、壞死等。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第20頁主要病原性立克次體

種類 傳染源媒介昆蟲主要臨床表現(xiàn)免疫力 普氏立克次體人人體虱

發(fā)燒、頭痛、皮疹

持久（流行性斑疹傷寒）神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)損傷斑疹傷寒立克次體鼠鼠蚤

發(fā)燒、頭痛、皮疹

持久（地方性斑疹傷寒）鼠虱

恙蟲病東方體

鼠恙螨

局部黑色焦痂

持久（恙蟲熱）

發(fā)燒、頭痛、皮疹

內(nèi)臟損害貝納柯克斯體

家畜蜱

發(fā)燒、頭痛一定程度（動物間）心內(nèi)膜炎

支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第21頁普氏立克次體（R.prowazekii)人虱

人人

人虱流行性斑疹傷寒傳輸方式支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第22頁柯克斯體（Coxiella）此屬僅有組員貝氏柯克斯體，慣稱Q熱立克次體，引致Q熱。專性寄生，耐熱、嗜酸，含有濾過性，經(jīng)過氣溶膠即可傳染人類。形態(tài)：多為短桿狀，常成隊排列，無鞭毛，無莢膜，可形成芽孢。培養(yǎng)特征：不能在人工培養(yǎng)基上生長，通慣用雞胚或細胞培養(yǎng)。雞胚為卵黃囊接種。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第23頁抗原相變異：一個宿主依賴性變異現(xiàn)象，實質(zhì)是菌體脂多糖（LPS）抗原性變異。I相菌株具高度感染性，表面復(fù)雜碳水化合物阻斷了抗體與菌株表面蛋白結(jié)合。I相菌株經(jīng)雞胚或細胞培養(yǎng)可變?yōu)镮I相菌株，其表面蛋白暴露可被抗體結(jié)合，毒力減弱。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第24頁致病性：人畜共患，主要引發(fā)人類Q熱，表現(xiàn)為發(fā)燒、頭疼、肌痛等。吸入感染是最主要路徑，也可經(jīng)接觸污染物及吮食乳汁而感染。其感染靶細胞為單核細胞和巨噬細胞，肝臟巨噬細胞吞噬后將其帶入血循環(huán)而后定位于雌性動物生殖系統(tǒng)和乳腺，當(dāng)前對其發(fā)病機理缺乏了解。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第25頁微生物診療1.分離培養(yǎng)

采胎盤、子宮分泌物、乳汁及其它排泄物，病料接種易感動物腹腔,分離毒株作雞胚或細胞培養(yǎng),結(jié)合血清學(xué)試驗2.血清學(xué)試驗

采集急性期及康復(fù)期動物血清，用已知Ag作凝集試驗、補體結(jié)合試驗、ELISA等。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第26頁衣原體（Chlamydia）

衣原體是一類嚴(yán)格細胞內(nèi)寄生原核細胞型微生物，含有濾過性。介于立克次體和病毒之間，可引發(fā)人和家畜衣原體病。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第27頁一、生物學(xué)特點１．革蘭氏陰性，圓形或橢圓形

２．含DNA和RNA兩種核酸

３．細胞壁含有胞質(zhì)膜及外膜，但無肽聚糖。４．細胞內(nèi)寄生（雞胚或細胞培養(yǎng)、動物接種）5.

須利用宿主細胞三磷酸鹽和中間代謝產(chǎn)物作為能量起源。6．獨特發(fā)育周期，并以二分裂方式繁殖

7．對一些抗生素敏感支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第28頁獨特發(fā)育周期：兩種顆粒結(jié)構(gòu)元體（EB）：

小而致密，成熟型，有細胞壁高度易感性；2.網(wǎng)狀體（RB）：

大而疏松，繁殖型，無細胞壁，不具感染性。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第29頁衣原體發(fā)育周期支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第30頁包涵體（inclusion)：是衣原體在細胞空泡內(nèi)繁殖過程中所形成集團形態(tài)，內(nèi)含無數(shù)子代元體和正在分裂網(wǎng)狀體。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第31頁二、分類衣原體屬

親衣原體屬

較主要衣原體有以下4種：沙眼衣原體：人沙眼肺炎親衣原體：人急性呼吸道疾病鸚鵡熱親衣原體：畜禽肺炎、關(guān)節(jié)炎、流產(chǎn)，也可引發(fā)人肺炎牛羊親衣原體：牛羊關(guān)節(jié)炎、腦脊髓炎、腹瀉支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第32頁三、致病性衣原體引致各種動物和人各種炎癥，并可影響生殖系統(tǒng)。致病機理復(fù)雜，包括黏附、細胞內(nèi)生長及連續(xù)感染及散播等過程，而且與宿主免疫系統(tǒng)相互作用。它會分泌一個外膜蛋白糖脂外抗原使相鄰細胞變得易感。支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第33頁四、診療１．分離培養(yǎng)(1)人工培養(yǎng)基不生長，接種雞胚或鴨胚卵黃囊。(2)在感染細胞胞漿內(nèi)可觀察到各發(fā)育階段（包涵體）２．血清學(xué)試驗用已知Ag檢測未知Ab,采取補體結(jié)合試驗、瓊擴、ELISA等支原體醫(yī)學(xué)知識專題講座第34頁沙眼衣原體圓形或橢圓形原體經(jīng)Giemsa