診斷學(xué)血型與交叉配血

診斷學(xué)血型與交叉配血第1頁/共49頁2各種血液成分包括紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板及某種血漿蛋白在個體之間均具有抗原成分的差異，受獨特的遺傳基因控制。血型是各種血液成分的遺傳多態(tài)性標(biāo)記。血型系統(tǒng)：由若干個相互關(guān)聯(lián)的抗原抗體組成的血型體系。～1983年，已發(fā)現(xiàn)20多個人類紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，400多種血型抗原。“免疫血液學(xué)”重點講述與輸血工作有密切聯(lián)系的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。第2頁/共49頁3血型系統(tǒng)紅細(xì)胞血型系統(tǒng)ABO血型系統(tǒng)，1900年，Landsteiner發(fā)現(xiàn)Rh血型系統(tǒng)，1940年，Landsteiner和Weiner發(fā)現(xiàn)其他血型系統(tǒng)白細(xì)胞抗原系統(tǒng)血小板抗原及抗體血清蛋白成分的抗原特異性第3頁/共49頁4（一）ABO血型系統(tǒng)

1、ABO血型系統(tǒng)的抗原和抗體根據(jù)紅細(xì)胞表面是否具有A或B抗原，血清中是否存在抗A或抗B抗體，ABO血型系統(tǒng)可分為四型：ABO三個基因組成六種基因型：AA、AO、BB、BO、AB、OO；A、B為顯性基因，O為隱性基因，所以只有四種表現(xiàn)型A、B、O、AB。一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)血型紅細(xì)胞上抗原血清中抗體基因型AA抗BAA或AOBB抗ABB或BOO無抗A，抗BABABA、B無OO第4頁/共49頁5一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（一）ABO血型系統(tǒng)

1、ABO血型系統(tǒng)的抗原和抗體A或B抗原在胚胎期及出生時便能檢出，但敏感性較低，到20歲左右時才達(dá)高峰?？乖越K身不變，但到老年敏感性有所下降。A和B血型物質(zhì)除存在于紅細(xì)胞和其他組織細(xì)胞表面外，還廣泛存在于體液和分泌液中，以唾液中含量最豐富，腦脊液中無。案例一第5頁/共49頁6（一）ABO血型系統(tǒng)

1、ABO血型系統(tǒng)的抗原和抗體人在出生前尚未產(chǎn)生抗體，出生后3-6個月才開始出現(xiàn)，至青春期達(dá)高峰。產(chǎn)生抗體的功能可延續(xù)終身，但其效價隨著年齡增長而逐漸降低。天然抗體：無明確的抗原刺激而天然存在的抗體，主要是IgM。環(huán)境中廣泛存在的微生物、花粉、粉塵等與A或B血型抗原相似，通過隱性刺激產(chǎn)生血型抗體。免疫性抗體：由已知抗原刺激產(chǎn)生的抗體，主要是IgG。一般通過輸血、妊娠、注射三種途徑接觸同種異體抗原。一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第6頁/共49頁7天然抗體和免疫性抗體的區(qū)別第7頁/共49頁8（一）ABO血型系統(tǒng)

1、ABO血型系統(tǒng)的抗原和抗體抗A、抗B抗體：抗A與抗B主要是IgM，也有少量的IgG和IgA類抗體。分泌液和體液中多為IgA類抗體?？笰、B抗體：O型人血清中，以IgG為主。不是抗A和抗B的混合物。識別A抗原和B抗原的共同表位。一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第8頁/共49頁9（一）ABO血型系統(tǒng)

2、ABO血型的亞型（1）A亞型A1亞型紅細(xì)胞上有A1和A抗原，其血清中含有抗B抗體。A2亞型紅細(xì)胞上只有A抗原，血清中含有抗B抗體和少量抗A1抗體。AX亞型紅細(xì)胞與B型血清不發(fā)生凝集或凝集反應(yīng)甚弱，但卻能與O型血清發(fā)生凝集。血型鑒定時，應(yīng)加O型血清，以防將AX型誤定為O型。（2）B亞型亞型不多見，臨床意義不大。一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第9頁/共49頁10ABO血型的亞型第10頁/共49頁11（一）ABO血型系統(tǒng)

3、ABO血型鑒定和交叉配血試驗（1）ABO血型鑒定：ABO血型抗體能在生理鹽水中與相應(yīng)紅細(xì)胞抗原結(jié)合而發(fā)生凝集反應(yīng)。由于血液持續(xù)存在ABO抗體，所以血型鑒定必須正反定型。直接試驗（正定型、細(xì)胞定型）：用標(biāo)準(zhǔn)的抗A及抗B血清以鑒定被檢者紅細(xì)胞上的抗原。反轉(zhuǎn)試驗（反定型、血清定型）：用標(biāo)準(zhǔn)的A型及B型紅細(xì)胞鑒定被檢者血清中的抗體。只有抗原鑒定和抗體鑒定完全相符才能肯定其血型類別。一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第11頁/共49頁12患者在生病進(jìn)行治療的過程中，身體狀況不是始終保持一致的，當(dāng)血型抗原有一方表達(dá)減弱，有可能AB型就成了A型，或者B型就變異成了O型。因此，也許三家醫(yī)院存在驗錯血型的可能，也可能三家醫(yī)院都沒有驗錯，而是病人血型出現(xiàn)了變異。某些病人特別是腫瘤病人在生病治療時可能發(fā)生血型變異。案例二第12頁/共49頁13加入O型血清：檢出抗原性較弱的AX亞型紅細(xì)胞。加入O型紅細(xì)胞：檢出被檢者血清中是否含有與ABO血型系統(tǒng)無關(guān)的紅細(xì)胞異?？贵w。第13頁/共49頁14血型鑒定方法--玻片法第14頁/共49頁15血型鑒定方法--微柱凝膠法凝膠為填充物，只允許游離紅細(xì)胞通過抗A管、抗B管、抗D管：含抗體的凝膠，用于紅細(xì)胞上A、B及D抗原檢測A細(xì)胞、B細(xì)胞及Ctl管：不含血型抗體凝膠A細(xì)胞、B細(xì)胞用于檢測血漿中的抗體Ctl管用于自身對照ABO/D血型正反定型卡第15頁/共49頁16一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（一）ABO血型系統(tǒng)

3、ABO血型鑒定和交叉配血試驗（2）交叉配血試驗輸血前必須進(jìn)行交叉配血實驗。分別將供血者的RBC與受血者的血清及供血者的血清與受血者的RBC進(jìn)行的配合試驗。交叉配血試驗的意義（1）檢驗血型鑒定是否有誤。（2）檢驗血清中是否有不規(guī)則抗體。第16頁/共49頁17案例三第17頁/共49頁18凝集凝集不凝集不凝集交叉配血試驗交叉配血的主側(cè):供血者紅細(xì)胞+受血者血清交叉配血的次側(cè):供血者血清+受血者紅細(xì)胞

配血不合,不能輸血配血相合,可以輸血緊急情況少量緩慢輸血,密切觀察,如有輸血反應(yīng),立即停止不凝集第18頁/共49頁19一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（一）ABO血型系統(tǒng)

3、ABO血型鑒定和交叉配血試驗（2）交叉配血試驗配血方法1、生理鹽水法：無輸血史及妊娠史2、間接抗人球蛋白法：有反復(fù)輸血史及妊娠史，尤其是有輸血反應(yīng)史、生育過新生兒溶血病嬰兒的婦女、大量輸血時須同時做供血者之間的交叉配血實驗。3、卡式微柱凝膠法第19頁/共49頁20一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（一）ABO血型系統(tǒng)

4、ABO血型系統(tǒng)的臨床意義(1)輸血：堅持同型輸血。(2)新生兒同種免疫溶血?。耗赣H與胎兒血型不合引起血型抗原免疫所致的一種溶血疾病。主要見于O型母親、A或B型胎兒，可發(fā)生在第一胎。(3)ABO血型與器官移植(4)親緣鑒定、法醫(yī)鑒定、疾病相關(guān)性調(diào)查等案例四案例七案例八、九案例五、六第20頁/共49頁21案例四第21頁/共49頁22案例五孕婦陳某，24歲，血型O型RhD陽性；丈夫A型RhD陽性，預(yù)產(chǎn)期日入院。次日孕婦肝功能檢查異常：ALT:369U/L,TBIL:54μmol/L。剖腹生1子。3h后嬰兒皮膚、鞏膜黃染明顯。肝功能檢查：ALT:41U/L，TBIL:298μmol/L。用藍(lán)光照射及白蛋白注射治療黃疸進(jìn)行性加深，全身重度黃染，送上級醫(yī)院，已錯過換血治療的最佳時間，嬰兒病情進(jìn)展成核黃疸，大腦運動中樞受損。實驗室檢查見下表。鹽水法木瓜酶法抗人球蛋白試驗抗體放散試驗直接法間接法患兒-++/放散出IgG-A抗體產(chǎn)婦-+/+第22頁/共49頁23案例六孕婦華某，28歲，血型O型RhD陽性，3年前曾因IgG-抗A抗體效價1:256致死胎。丈夫血型A型，基因型AA型，RhD陽性。懷孕前數(shù)月口服甘草、黃芩、茵陳、大茵等中藥。懷孕1個月，測IgG-抗A效價1:8，繼續(xù)服中藥，每半個月復(fù)查，孕期IgG-抗A抗體效價控制在1:32內(nèi)。孕8個月剖腹產(chǎn)。嬰兒出生后肝功能檢查見表。

ALT(U/L)TBil(μmol/L)治療出生時1010觀察2d1215觀察5d2637藍(lán)光照10d2245藍(lán)光照20d3220觀察30d128出院正常值<40<10第23頁/共49頁案例七第24頁/共49頁25案例八父母子子ABOABO第25頁/共49頁26案例九父母O型→孩子B型？第26頁/共49頁27一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（二）Rh血型系統(tǒng)

1、Rh血型系統(tǒng)的抗原和抗體抗原主要有5種?？乖詮?qiáng)弱依次為D、E、C、c、e，以D抗原性最強(qiáng)。粗略地稱含D抗原的紅細(xì)胞為Rh陽性，不含D抗原的為Rh陰性。我國Rh陰性者甚為少見。Rh抗體主要是不完全抗體抗D抗體最常見主要為免疫性抗體，Rh陰性者接受Rh陽性血后通過免疫產(chǎn)生。絕大多數(shù)為IgG抗體第27頁/共49頁28一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（二）Rh血型系統(tǒng)

1、Rh血型系統(tǒng)的抗原和抗體Rh血型的亞型弱D最有臨床意義。弱D是D抗原的變異體，其免疫原性較弱。不能與所有的抗D血清發(fā)生反應(yīng)，易被誤定為Rh陰性。做為供血者，弱D是Rh陽性。如果將弱D血輸給Rh陰性受血者時，仍有產(chǎn)生抗D抗體的可能性，因此不能將弱D輸給Rh陰性的受血者。做為受血者，弱D是Rh陰性。當(dāng)弱D型人接受輸血時應(yīng)是Rh陰性血，否則可能產(chǎn)生抗D。第28頁/共49頁29一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（二）Rh血型系統(tǒng)

2、Rh血型系統(tǒng)的鑒定僅用抗D血清進(jìn)行鑒定，粗略地分為Rh陽性和陰性兩類。鑒定方法完全抗體：生理鹽水凝集試驗不完全抗體：膠體介質(zhì)法、木瓜酶法、抗人球蛋白法、微柱凝膠法等第29頁/共49頁30一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)（二）Rh血型系統(tǒng)

3、Rh血型系統(tǒng)的臨床意義（1）Rh血型系統(tǒng)所致的溶血性輸血反應(yīng)：Rh血型系統(tǒng)一般不存在天然抗體，故在第一次輸血時，不會發(fā)現(xiàn)Rh血型不合，Rh陰性的受血者接受了Rh陽性血液輸入后便可產(chǎn)生免疫性抗Rh抗體，再次輸入Rh陽性血液時，發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)。第一次輸血不必考慮Rh血型，第二次輸血需考慮Rh血型是否相同。第30頁/共49頁31謝小榕AB型Rh陰性1997年5月30日，車禍。天津醫(yī)院搶救時未做Rh血型鑒定，輸入了AB型Rh陽性的血。第二次取鋼板的手術(shù)不能再輸AB型Rh陽性血。以后存在生育障礙。2002年9月3日，二審判決要求天津醫(yī)院對謝小榕因輸血引起的損害后果承擔(dān)60%的責(zé)任，肇事司機(jī)承擔(dān)40%的責(zé)任。但判決也同時要求謝小容有防止損害結(jié)果發(fā)生的注意義務(wù)。即盡量注意保護(hù)自身安全，防止各種危險情況發(fā)生，避免各種醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)上記載的損害結(jié)果出現(xiàn)。案例十第31頁/共49頁32案例十一第32頁/共49頁33（二）Rh血型系統(tǒng)

3、Rh血型系統(tǒng)的臨床意義（2）新生兒Rh溶血病母親為RhD陰性，胎兒RhD陽性Rh溶血病一般不發(fā)生在第一胎由于自然界無Rh血型物質(zhì)第一次孕兒為Rh+，胎兒的RBC因某種原因(如胎盤絨毛脫落)進(jìn)入母體，或分娩時進(jìn)行胎盤剝離過程中血液擠入母體,孕婦體內(nèi)產(chǎn)生抗Rh的抗體。第二次妊娠時,孕婦體內(nèi)的抗Rh的抗體，通過胎盤導(dǎo)致胎兒溶血Rh陰性母親輸過Rh陽性血、有流產(chǎn)或人工流產(chǎn)史，也可發(fā)生在第一胎一、紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第33頁/共49頁34第34頁/共49頁35案例十二孕婦王某，25歲，孕7個月后死胎。病史：10歲時因貧血曾輸血多次。實驗室槍查：孕婦血型為O型RhD陰性，抗D強(qiáng)陽性，滴度1:128。臍血檢查見表。譜細(xì)胞Rh-hr鹽水法抗人球蛋白試驗DCEce1+0+++-+2+00++-+3++00+-+4+++0+-+5+0+++-+6++0++-+7++++0-+80+0++--900+++--10000++--第35頁/共49頁36二、其他血型系統(tǒng)1．白細(xì)胞抗原系統(tǒng)（1）白細(xì)胞抗原有兩類：第一類為白細(xì)胞上特有的抗原，如中性粒細(xì)胞上的NA、NB、ND等系統(tǒng)的抗原；第二類為其他血液成分共有的HLA抗原紅細(xì)胞血型抗原，即ABO等系統(tǒng)中含有的各種抗原。第36頁/共49頁37二、其他血型系統(tǒng)1．白細(xì)胞抗原系統(tǒng)（2）HLA檢測臨床意義HLA與移植HLA與輸血HLA與臨床：反復(fù)流產(chǎn)、胎兒血小板減少性紫瘢、粒細(xì)胞減少癥、早產(chǎn)、畸胎前期等可能與母胎的HLA系統(tǒng)相容有關(guān)。法醫(yī)：應(yīng)用HLA分型技術(shù)，排除親子或證實親子關(guān)系，可靠性可達(dá)95%以上。第37頁/共49頁38二、其他血型系統(tǒng)2．血小板血型系統(tǒng)（1）人類血小板上的抗原主要可分為兩大類：一類為非特異性抗原；另一類為特異性抗原，即血小板上所特有的，不存在于其它組織、細(xì)胞上的抗原，主要為HPA-1（舊稱Zw系統(tǒng)）、HPA-2(舊稱Ko系統(tǒng))等。（2）臨床意義血小板輸注無效輸血后紫癜（PTP）新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜第38頁/共49頁39

3．血清蛋白抗原血清蛋白抗原按其性質(zhì)，可分為免疫球蛋白、血清酶、血清蛋白及補(bǔ)體等幾類，這些蛋白有型的差異，具有抗原性和刺激同種不同個體產(chǎn)生抗體的特性，通常與輸血反應(yīng)有關(guān)的血清蛋白抗原主要是免疫球蛋白。二、其他血型系統(tǒng)第39頁/共49頁40思考題1.ABO血型系統(tǒng)的分類？2.ABO血型系統(tǒng)的臨床意義？3.輸血前為什么要進(jìn)行交叉配血試驗？4.交叉配血試驗的結(jié)果判斷？5.輸血的原則？6.配血方法的選擇？7.名詞解釋血型；交叉配血；直接試驗；反轉(zhuǎn)試驗第40頁/共49頁41測試題1.與O型血易混淆的A亞型是

A.A1

B.A2

C.A3

D.Am

E.Ax2.A亞型之間輸血可能引起輸血反應(yīng)的是：

A.A1與A2

B.A1與A3

C.A1與Am

D.A1與Ax

E.A2與A3第41頁/共49頁42測試題3.ABO血型鑒定采用的試驗為：

A、抗人球蛋白試驗B、鹽水介質(zhì)法

C、木瓜酶法D、蛋白酶法

E、膠體介質(zhì)法4.交叉配血的次側(cè)為：

A、受者紅細(xì)胞＋供者血清B、受者血清

C、供者紅細(xì)胞＋受者血清D、供者血清E、受者紅細(xì)胞5.ABO血型中能通過胎盤的抗體主要是：

A、IgA

B、IgM

C、IgG

D、IgEE、IgD第42頁/共49頁43測試題6.最主要的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)是：

A、ABO血型系統(tǒng)B、Rh血型系統(tǒng)

C、P血型系統(tǒng)D、Lewis血型系統(tǒng)E、Li血型系統(tǒng)7.ABO血型系統(tǒng)最重要的亞型是：

A、A型B、B型

C、O型D、AB型E、Ax第43頁/共49頁44測試題8、Rh血型系統(tǒng)的抗原中抗原性最強(qiáng)、臨床意義最重要的是：

A、C

B、E

C、DD、cE、e9、Rh血型系統(tǒng)是指：A、紅細(xì)胞抗原B、白細(xì)胞抗原C、血小板抗原D、血清蛋白抗