第四節(jié)胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)與應(yīng)用

細(xì)胞是機(jī)體組成的基本單位細(xì)胞細(xì)胞群組織機(jī)體小飛守角制作目前一頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點1.干細(xì)胞的概念：是指動物（包括人）早期胚胎及某些器官中具有自我復(fù)制和多向分化潛能的原始細(xì)胞。即未分化或未完全的種子細(xì)胞。干細(xì)胞（Stemcell）又叫起源細(xì)胞。2.干細(xì)胞作用：是重建、修復(fù)病損或衰老組織、器官功能的種子細(xì)胞。一、干細(xì)胞小飛守角制作目前二頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點專能干細(xì)胞多能干細(xì)胞全能干細(xì)胞按分化潛能按發(fā)育狀態(tài)胚胎干細(xì)胞成體干細(xì)胞3、干細(xì)胞的分類小飛守角制作目前三頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點專能干細(xì)胞：（multipotentstemcell）只能向一種或兩種密切相關(guān)的細(xì)胞類型分化。如上皮組織基底層的干細(xì)胞，肌肉中的成肌細(xì)胞。全能干細(xì)胞：（Totipotentstemcell）具有形成完整個體的分化潛能。如胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）多能干細(xì)胞：（pluripotentstemcell）具有分化出多種組織細(xì)胞，但有失去發(fā)育為個體的潛能。如造血干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞。小飛守角制作目前四頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點成體干細(xì)胞

成年動物的許多組織和器官，比如表皮和造血系統(tǒng)，具有修復(fù)和再生的能力。成體干細(xì)胞在其中起著關(guān)鍵的作用。在特定條件下，成體干細(xì)胞或者產(chǎn)生新的干細(xì)胞，或者按一定的程序分化，形成新的功能細(xì)胞，從而使組織和器官保持生長和衰退的動態(tài)平衡。小飛守角制作目前五頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點造血干細(xì)胞是體內(nèi)各種血細(xì)胞的唯一來源，它主要存在于骨髓、外周血、臍帶血中。造血干細(xì)胞的移植是治療血液系統(tǒng)疾病、先天性遺傳疾病以及多發(fā)性轉(zhuǎn)移性腫瘤疾病的最有效方法。與骨髓移植和外周血干細(xì)胞移植相比，臍血干細(xì)胞移植的長處在于無來源的限制，對HLA配型要求不高，不易受病毒或腫瘤的污染。造血干細(xì)胞小飛守角制作目前六頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點造血干細(xì)胞分化小飛守角制作目前七頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點骨髓；外周血；臍帶血；胎兒造血系統(tǒng)；胚胎干細(xì)胞。造血干細(xì)胞的來源造血干細(xì)胞的移植：1、采集供體者的造血干細(xì)胞（骨髓、外周血、臍帶血），并與受體進(jìn)行HLA配型；2、適度抑制受體免疫系統(tǒng)。小飛守角制作目前八頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點成人細(xì)胞或臍血(骨髓和血)/胎兒組織(專能/多能)。人工流產(chǎn)后的人類胎兒生殖組織(全能)。通過體外授精產(chǎn)生的人類胚胎，治療不育癥的夫婦不再需要(全能)。用捐贈者的配子通過體外授精創(chuàng)造的人類胚胎(全能)。女性供卵要非常慎重。通過體細(xì)胞核轉(zhuǎn)移技術(shù)(克隆技術(shù))產(chǎn)生的人類胚胎(全能)。以上都必須獲得當(dāng)事人的知情同意。4、干細(xì)胞的來源小飛守角制作目前九頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點1.概念：簡稱ES或EK細(xì)胞,是由早期胚胎或原始性腺中分離出來的未分化狀態(tài)的一類細(xì)胞.2.特點：（1）形態(tài):體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯。（2）功能:具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。（3）在體外培養(yǎng)的條件下，ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化。對它可以進(jìn)行冷凍保存，也可以進(jìn)行遺傳改造。二、胚胎干細(xì)胞小飛守角制作目前十頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點3、來源：早期胚胎囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)小飛守角制作目前十一頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點特點：具有增殖能力并保持未分化狀態(tài)、在一定條件下可以向各種組織和器官分化、易于進(jìn)行基因改造等。內(nèi)細(xì)胞團(tuán)：內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（未分化的細(xì)胞）具有很強(qiáng)的分化能力，可以進(jìn)一步分裂、分化，形成組織和器官，再逐步發(fā)育成個體。這些細(xì)胞被認(rèn)為具有全能性，稱為胚胎干細(xì)胞。小飛守角制作目前十二頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點外胚層中胚層內(nèi)胚層滋養(yǎng)層內(nèi)細(xì)胞團(tuán)囊胚(5-6d）移植和培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞（胚胎干細(xì)胞）小飛守角制作目前十三頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)小飛守角制作目前十四頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點4、胚胎干細(xì)胞的應(yīng)用理論研究（人體發(fā)育過程、發(fā)育機(jī)制和影響因素、體外細(xì)胞分化的理想材料）研究新藥（細(xì)胞藥理和毒理實驗，藥物致病機(jī)理）醫(yī)療手段（提供無免疫排斥的材料，用于疾病治療）改良品種（結(jié)合基因工程培育生長快、抗病力強(qiáng)、高產(chǎn)的新品種）小飛守角制作目前十五頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點來源于干細(xì)胞的組織可能用于治療的疾病

細(xì)胞類型 治療的疾病神經(jīng)細(xì)胞

中風(fēng)、帕金森氏病、老年癡呆癥、脊髓損傷、多發(fā)性硬化病 心肌細(xì)胞

心臟病發(fā)作、充血性心臟病產(chǎn)生胰島素的細(xì)胞糖尿病軟骨細(xì)胞 骨性關(guān)節(jié)炎血細(xì)胞 癌癥、免疫缺乏癥、遺傳學(xué)血液病、白血病肝細(xì)胞 肝炎、肝硬化皮膚細(xì)胞 燒傷骨細(xì)胞 骨質(zhì)疏松癥視網(wǎng)(眼)細(xì)胞 黃斑癥骨骼肌細(xì)胞 肌肉萎縮癥小飛守角制作目前十六頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點三、胚胎干細(xì)胞研究面臨的挑戰(zhàn)1、安全性問題（1）胚胎干細(xì)胞的研究給法律、倫理、國家安全等方面帶來沖擊。①受精卵是生物發(fā)育的起點，胚胎是生命開始階段，以窒息一個生命的代價去挽救另一個生命是否值得。

②可能導(dǎo)致克隆人的出現(xiàn)（2）觀點：不應(yīng)該反對以治療為目的的胚胎干細(xì)胞研究，而反對生殖性克隆。小飛守角制作目前十七頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)條件的優(yōu)化仍需進(jìn)一步研究。分化細(xì)胞的增殖是一個瓶頸問題，如何得到純化的分化細(xì)胞有很多工作要做。對胚胎干細(xì)胞向不同組織細(xì)胞的“定向分化”的條件尚不清楚，限制了其臨床應(yīng)用。2、其他技術(shù)方面的問題小飛守角制作目前十八頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點建立并完善維持體外增殖與定向分化的體系。研究轉(zhuǎn)基因或核移植胚胎干細(xì)胞的增殖與分化及其調(diào)控機(jī)制。誘導(dǎo)分化細(xì)胞的性能分析與鑒定。體外重構(gòu)重要的組織與器官，探索克服移植排斥反應(yīng)等的技術(shù)和方法。對于胚胎干細(xì)胞在組織原位再生修復(fù)中的作用機(jī)制與原位培養(yǎng)模式的探索。3、未來干細(xì)胞研究領(lǐng)域小飛守角制作目前十九頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)小飛守角制作目前二十頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點胚胎干細(xì)胞研究面臨的問題及解決辦法

l用于干細(xì)胞研究的胚胎來源困難;

l如何保持胚胎干細(xì)胞的全能性，并控制向特別類型細(xì)胞轉(zhuǎn)化？

l如何分離、純化干細(xì)胞？

l分化后的細(xì)胞是否有致瘤性？

l干細(xì)胞在體外發(fā)育成完整的器官尚難以做到;

l分化細(xì)胞移植仍有可能發(fā)生免疫排斥;

l倫理問題

小飛守角制作目前二十一頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點應(yīng)用前景：治療性克隆面臨難題：技術(shù)尚需突破社會倫理問題小飛守角制作目前二十二頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點觀點理由1.不符合倫理道德(1)把試管嬰兒當(dāng)作人體零配件工廠,是對生命的不尊敬;(2)早期的生命也有活下去的權(quán)利,拋棄或殺死多余的胚胎,無異于”謀殺”;(3)有人會濫用設(shè)計試管嬰兒技術(shù),而設(shè)計嬰兒性別;2.符合倫理道德(1)設(shè)計試管嬰兒是為了救人,是救治患者的最好,最快捷的辦法之一;(2)提供骨髓中造血干細(xì)胞并不會對試管嬰兒造成損傷;(3)臍帶血乃試管嬰兒的”身外之物”.3.中國政府的觀點中國衛(wèi)生部在《體外受精----胚胎移植及其衍生技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定,”實施體外受精----胚胎移植及其衍生技術(shù)必須獲得衛(wèi)生部批準(zhǔn)證書”.小飛守角制作目前二十三頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點一、掌握核心術(shù)語——(記準(zhǔn)、寫準(zhǔn)、理解透，把握內(nèi)涵和外延)胚胎工程解題策略1.胚胎工程（胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)）。2.胚胎發(fā)育［受精卵、卵裂、桑椹胚、囊胚（內(nèi)細(xì)胞團(tuán)、滋養(yǎng)層細(xì)胞）、原腸胚］。3.同期發(fā)情、超數(shù)排卵、沖卵。4.轉(zhuǎn)基因生物、生殖性克隆、治療性克隆、生物武器。小飛守角制作目前二十四頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點二、能概述精子、卵子發(fā)生過程和胚胎發(fā)育文字流程圖，并思考以下問題。小飛守角制作目前二十五頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點小飛守角制作目前二十六頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點1．要注意區(qū)分受精的標(biāo)志和受精過程結(jié)束的標(biāo)志。受精的標(biāo)志是卵黃膜和透明帶的間隙可以觀察到兩個極體，受精過程結(jié)束的標(biāo)志是雌、雄原核融合成合子。二、受精作用相關(guān)知識辨析2．要辨別三大反應(yīng)：頂體反應(yīng)、透明帶反應(yīng)、卵黃膜封閉作用。（1）發(fā)生的時間不同：頂體反應(yīng)是發(fā)生在精子與卵子相遇時；透明帶反應(yīng)是發(fā)生在精子觸及卵黃膜的瞬間；卵黃膜的封閉作用是發(fā)生在精子入卵后。（2）生理作用不同：頂體反應(yīng)是要形成精子穿越放射冠的通路；透明帶反應(yīng)是防止多精子入卵受精的第一道屏障；卵黃膜封閉作用則是防止多精子入卵受精的第二道屏障。小飛守角制作目前二十七頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點3．受精的準(zhǔn)備和受精過程要熟悉（1）受精的準(zhǔn)備：精子的成熟和獲能；卵細(xì)胞必須是減數(shù)第二次分裂中期。（2）受精過程——四步曲

第一步：精子穿越放射冠和透明帶。頂體反應(yīng)使頂體內(nèi)的酶釋放出來并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)，透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障。

第二步：精子進(jìn)入卵黃膜。卵黃膜封閉作用是防止多精入卵受精的第二道屏障。

第三步：原核形成。雄原核形成和雌原核形成。

第四步：合子形成。雌雄原核融合形成合子(受精卵)。小飛守角制作目前二十八頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點4．動物排出卵子的成熟程度不同，有的可能是次級卵母細(xì)胞，如豬、羊等；有的可能是初級卵母細(xì)胞，如馬、犬等，但它們都要在輸卵管內(nèi)進(jìn)一步成熟，當(dāng)達(dá)到減數(shù)第二次分裂的中期時，才具有與精子受精的能力。5．胚胎早期培養(yǎng)過程中有兩次用到了顯微鏡進(jìn)行檢查：①在進(jìn)行卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)前，要抽取卵母細(xì)胞在顯微鏡下檢查并挑選；②胚胎培養(yǎng)前要用顯微鏡檢查受精卵。小飛守角制作目前二十九頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點（1）受精的標(biāo)志和受精完成的標(biāo)志分別是什么？（2）卵裂期、桑椹胚和囊胚中細(xì)胞各具有什么特點？①卵裂期的特點：細(xì)胞有絲分裂使細(xì)胞數(shù)目增加，但胚胎總體積并不增加或略縮小，因此每個細(xì)胞的體積會隨分裂的進(jìn)行不斷縮小，但核內(nèi)遺傳物質(zhì)并未減少。②桑椹胚以前的細(xì)胞均未分化，細(xì)胞全能性最高，是胚胎分割的最佳時期。受精的標(biāo)志是卵黃膜和透明帶的間隙出現(xiàn)兩個極體；受精完成標(biāo)志是雌雄原核融合為合子。小飛守角制作目前三十頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點（3）體外受精的操作步驟是什么？答案培養(yǎng)液成分鹽類：無機(jī)鹽和有機(jī)鹽營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、核苷酸調(diào)節(jié)物質(zhì)：維生素、激素特有物質(zhì)：動物血清③桑椹胚至囊胚的發(fā)育過程中，細(xì)胞開始分化，是胚胎移植的最佳時期。但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割。其中個體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎膜和胎盤。①卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)。②精子的采集和獲能。③受精。（4）體外胚胎培養(yǎng)液的成分有什么？小飛守角制作目前三十一頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點三、胚胎移植1、胚胎移植成功與否的兩個重要條件（1）同種動物之間進(jìn)行胚胎移植易于成功。這里的“同種”是指“同物種”。（2）供、受體生理狀態(tài)要相同，為此必須做到：①供、受體母畜的發(fā)情時間一致。②移入受體子宮胚胎的位置應(yīng)該與其在供體內(nèi)的位置相同或相似。2、胚胎移植時間：不同動物其胚胎移植的時間不同。牛、羊要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段；小鼠、家兔在桑椹胚前；人胚胎可在4個細(xì)胞階段移植；幾乎所有動物不能到原腸胚階段移植，因為此時分化程度高，移植成功率很低。小飛守角制作目前三十二頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點3．胚胎移植的培育流程以牛胚胎移植為例：(1)選擇的對象包括良種公牛、母牛和普通母牛，處理是指對良種母牛和普通母牛做同期發(fā)情處理，以使其生殖器官的生理變化相同；同時要對良種母牛做超數(shù)排卵處理，以促其多產(chǎn)生卵子。(2)沖卵是指將早期胚胎從良種母牛子宮內(nèi)沖洗出來，而不是沖洗出卵子。(3)良種牛后代的遺傳特性是由供體公牛和母牛決定的，受體母牛只是提供了胚胎發(fā)育的場所，不影響后代的遺傳特性。(4)胚胎移植培育流程中有兩次使用促性腺激素，第一次是對供、受體進(jìn)行同期發(fā)情處理；第二次用于供體的超數(shù)排卵。小飛守角制作目前三十三頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點3．胚胎移植成功的保障(生理學(xué)基礎(chǔ))第一，供、受體生殖器官的生理變化是相同的。第二，哺乳動物的早期胚胎形成后，在一定時間內(nèi)不會與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。第三，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能。第四，供體胚胎可與受體子宮建立正常的生理和組織聯(lián)系，但移入受體的供體胚胎的遺傳特性，在孕育過程中不受任何影響。小飛守角制作目前三十四頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點

b.原理：細(xì)胞核的全能性。c.應(yīng)用：①快速繁育良種、特異、瀕危的動物，改良動物新品種。②利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)育種。③利用人工種子繁殖物種。④植物體細(xì)胞雜交育種。（1）無性繁殖①利用細(xì)胞核移植技術(shù)育種a.過程育種應(yīng)用小飛守角制作目前三十五頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點⑤核移植和植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代中都含有兩個親本的遺傳物質(zhì)；植物組織培養(yǎng)和人工種子產(chǎn)生的后代中都只含有一個親本的遺傳物質(zhì)。（2）有性繁殖①利用胚胎（分割）移植育種a.過程小飛守角制作目前三十六頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點b.原理：細(xì)胞（受精卵）的全能性。c.應(yīng)用：解決動物和人類的不育問題；提高良種家畜的繁殖能力。②單倍體育種技術(shù)小飛守角制作目前三十七頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點四、試管嬰兒與克隆技術(shù)

克隆人過程圖：會默畫出試管嬰兒和克隆人的過程圖，思考以下問題。試管嬰兒過程圖：小飛守角制作目前三十八頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點試管嬰兒克隆人技術(shù)基礎(chǔ)體外受精、胚胎移植核移植技術(shù)、胚胎移植生殖方式有性生殖無性生殖遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)來自兩個個體遺傳物質(zhì)主要來自核供體（1）上述兩過程的技術(shù)基礎(chǔ)、生殖方式、遺傳物質(zhì)方面有什么區(qū)別？小飛守角制作目前三十九頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點（2）治療性克隆與生殖性克隆有什么區(qū)別與聯(lián)系？類型項目治療性克隆生殖性克隆區(qū)別目的治療人類疾病用于生育，產(chǎn)生新個體水平細(xì)胞水平個體水平聯(lián)系

都屬無性繁殖；產(chǎn)生新個體、新組織，遺傳信息相同

小飛守角制作目前四十頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點鞏固提升1.下列有關(guān)動物胚胎移植的敘述中，錯誤的是（）A.受孕母畜體內(nèi)的受精卵或胚胎均能移植B.受體母畜必須處于與供體母畜同步發(fā)情的狀態(tài)C.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定的激素D.試管嬰兒只是受精及早期卵裂過程在試管中進(jìn)行A2.對于優(yōu)良種畜的胚胎移植的說法不正確的是()A.供體母牛必須是同一物種的良種B.受體母牛必須是同一物種的良種C.供體公牛必須是同一物種的良種D.受體母牛可以是同一物種的一般健康牛B小飛守角制作目前四十一頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點3.供體的胚胎移植到受體后，游離的胚胎在發(fā)育過程中形成胎盤與受體相連，并通過胎盤與受體的血液進(jìn)行物質(zhì)交換。以下說法正確的是()A.受體是為供體胚胎提供發(fā)育的條件B.受體與胚胎血型應(yīng)相同，否則會發(fā)生免疫排斥C.受體與胚胎血液混融在一起D.胚胎心肺功能都能正常運(yùn)行A4.在胚胎移植中供體的主要職能（）A.提供優(yōu)良的供體基因B.提供優(yōu)良遺傳特性的胚胎C.提供卵細(xì)胞D.提供精子B小飛守角制作目前四十二頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點5、下列關(guān)于滋養(yǎng)層細(xì)胞的敘述，不正確的是（）A.囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育成胎盤和胎膜B.可以用滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析性別鑒定C.囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞就是將來原腸胚的外胚層D.滋養(yǎng)層細(xì)胞沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列C6、采集的卵母細(xì)胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能的精子受精，以下原因不正確的是（ ）A.卵子從輸卵管中沖出也要經(jīng)歷類似精子獲能的過程B.動物排出的卵子成熟程度不同C.體外人工培養(yǎng)至減數(shù)分裂第二次分裂中期時，才算成熟D.沖出的卵子還需要培養(yǎng)一段時間由小變大D小飛守角制作目前四十三頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點9、利用胚胎干細(xì)胞治療肝衰竭，實現(xiàn)此過程的最重要原因是（）

A.細(xì)胞分裂B.細(xì)胞特化C.細(xì)胞分化D.細(xì)胞增殖10、“試管嬰兒”技術(shù)屬于()A.胚胎移植B.組織培養(yǎng)C.克隆技術(shù)D.基因工程A11.下列各項中與“試管嬰兒”的培育有關(guān)的是 （ ）①體外受精②體內(nèi)受精③主要在體外發(fā)育④主要在體內(nèi)發(fā)育⑤運(yùn)用基因工程技術(shù)⑥運(yùn)用胚胎工程技術(shù)A.①③⑥ B.②③⑥ C.①④⑥ D.①④⑤CC小飛守角制作目前四十四頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點

（1）圖中a、b、c過程分別是指

、

、

。（2）供體母牛的主要職能是

；受體母牛必須具備

。超數(shù)排卵沖卵胚胎移植只產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎健康的體質(zhì)和健康的繁殖能力12、（09·深圳3月）牛胚胎移植的基本程序如圖所示，請據(jù)圖回答：小飛守角制作目前四十五頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點（3）為了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是

；處理的時期是

；理由是

。（4）從哺乳動物早期胚胎或原始性腺中分離出來的細(xì)胞，稱為ES或EK細(xì)胞。這類細(xì)胞的形態(tài)特征有

。（5）你認(rèn)為胚胎移植技術(shù)在生產(chǎn)實踐中的主要意義有哪些？

。胚胎分割移植桑椹胚或囊胚期此時還未出現(xiàn)細(xì)胞分化或分化程度低體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯胚胎移植技術(shù)可以加快優(yōu)良種畜的繁殖速度，迅速推廣新品種關(guān)鍵信息“供體母牛”、“受體”、“提高牛胚胎利用率”小飛守角制作目前四十六頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點13.（09·南通期末調(diào)研）下圖是培育能產(chǎn)生凝血因子牛的過程示意圖，試回答相關(guān)問題：（1）為能從良種母牛體內(nèi)一次取得多枚卵子，可以采用

的方法。據(jù)報道，這種技術(shù)已經(jīng)被濫用于人類生育中，從而出現(xiàn)許多人工“多胞胎”，這種技術(shù)帶來的危害之一是

。注射促性腺激素影響胎兒的健康發(fā)育、對孕婦的身體不利等小飛守角制作目前四十七頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點（2）在過程③中，當(dāng)一個精子進(jìn)入卵細(xì)胞后會激發(fā)卵子發(fā)生反應(yīng)，如透明帶反應(yīng)等，其意義是

。（3）過程④中為保證人凝血因子基因能夠在受精卵中穩(wěn)定存在并表達(dá)，需要先將該基因與

結(jié)合，檢驗人凝血因子基因是否導(dǎo)入受精卵的方法是

。（4）過程⑥涉及的技術(shù)是

，為保證該過程的成功，一般應(yīng)選擇

相同的同種母畜。防止多精入卵載體運(yùn)用目的基因探針進(jìn)行檢驗（DNA分子雜交技術(shù)）`胚胎移植生理狀態(tài)小飛守角制作目前四十八頁\總數(shù)五十二頁\編于十七點14.（09·海南4月模擬）克隆羊“多利”的問世引