毒物分析第二章

毒物分析第二章第1頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第二章毒物分析的方法與特點(diǎn)第2頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一毒物分析：是應(yīng)用化學(xué)、物理、生物和現(xiàn)代儀器分析的原理和技術(shù)，對(duì)毒物可疑物質(zhì)進(jìn)行快速、準(zhǔn)確鑒別與測(cè)定的一門學(xué)科。一、毒物分析的性質(zhì)第3頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一為了搶救及醫(yī)療服務(wù)為了環(huán)境保護(hù)和衛(wèi)生監(jiān)測(cè)查明中毒原因，澄清事故二、毒物分析的目的和任務(wù)第4頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一三、對(duì)毒物分析人員素質(zhì)的要求具有化學(xué)及儀器分析的精湛技術(shù)；具有藥理和毒理的基礎(chǔ)知識(shí)；具有臨床醫(yī)療的常識(shí)第5頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一1.樣品純度較低：檢驗(yàn)樣品:包含在食品、嘔吐物、排泄物、尸體等之中非化學(xué)純或藥典標(biāo)準(zhǔn)的物質(zhì)，含有影響測(cè)定結(jié)果的物質(zhì)需要分離和凈化四、毒物分析的特點(diǎn)第6頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2.要求迅速準(zhǔn)確：毒物分析項(xiàng)目具有突然性：要求很快提供結(jié)果，且其結(jié)果務(wù)必準(zhǔn)確無誤。3.要求分析方法的靈敏度高：檢品量少，被測(cè)物濃度低（10﹣6-10﹣12

g）采用微量或半微量分析方法：較高靈敏度及專屬性第7頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一五、試樣采集1.認(rèn)真勘查現(xiàn)場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)勘查（環(huán)境、癥狀、尸檢、口供、調(diào)查資料…）對(duì)檢測(cè)對(duì)象的組分、檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物、選擇分析方法、及結(jié)論的可信性都有極其重要的意義。第8頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一顏面櫻紅色：一氧化碳；顏面潮紅：阿托平、河豚；顏面口唇青紫：亞硝酸鹽、苯胺、硝基苯；口鼻泡沫溢出：有機(jī)磷殺蟲劑、巴比妥、安妥等。特殊面容：第9頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一蒜臭味：有機(jī)磷殺蟲劑、黃磷、磷化鋅；酶臭味：六六六；酒精味：乙醇、甲醇和其他醇類；來蘇味：酚、甲酚；杏仁味：氰化物、硝基苯等。特殊氣味：第10頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一劇烈腹痛：強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、砷、汞化合物等。劇烈嘔吐與腹瀉：砷、汞化合物、巴豆、桐油、蓖麻等。口渴：磷化鋅、砷化合物等。流涎：有機(jī)磷殺蟲劑、烏頭以及砷化合物、汞化合物等。第11頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一昏睡、呼吸減慢：安眠藥、麻醉藥、嗎啡、一氧化碳、甲醇、乙醇等。痙攣：士的寧、氰化物、有機(jī)磷殺蟲劑等。瞳孔縮?。?jiǎn)岱?、有機(jī)磷殺蟲劑、巴比妥類等。瞳孔擴(kuò)大：阿托平、顛茄、烏頭、鉤吻、大麻、奎寧。其他：血色鮮紅：一氧化碳、氰化物；血呈醬油色：亞硝酸鹽、苯胺、硝基苯；廣泛性出血：敵鼠鈉鹽、肝素、蛇毒等。第12頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2.正確收集檢體:檢體應(yīng)收集含毒物最多的部分。檢體是否適當(dāng)，影響檢驗(yàn)成敗。甚至發(fā)生判斷錯(cuò)誤。因此以收集多種檢體為好。胃內(nèi)容物、嘔吐物量較大，可能尚未分解；血是分析CO的唯一檢體；尿檢驗(yàn)非揮發(fā)性毒物；肝、腎等是檢測(cè)重金屬中毒的較好檢體。第13頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第14頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一樣品被檢測(cè)物質(zhì)的分離、富集選擇合適檢測(cè)方法檢測(cè)六、毒物分析的一般方法第15頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一除蛋白質(zhì)萃取濃縮、富集（一）毒物的分離、富集采用適宜方法檢測(cè)第16頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一是測(cè)定血漿、血清、全血及組織勻漿等樣品中物質(zhì)的第一步目的：釋放結(jié)合型被檢測(cè)物質(zhì)，利于提取，保護(hù)儀器，防止干擾1.除蛋白質(zhì)加入沉淀劑和變性試劑

酶消化法

超濾法常見方法第17頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一加入沉淀劑和變性試劑使pro脫水：硫酸銨、與水混合有機(jī)溶劑(乙醇、甲醇、乙腈)使pro成不溶性鹽而沉淀：陰離子型沉淀劑（三氯醋酸、高氯酸、鎢酸、焦磷酸）、陽(yáng)離子型沉淀劑（含鋅鹽、銅鹽）第18頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一酶消化法

蛋白水解酶中的枯草菌溶素：酶解組織，使被檢測(cè)物質(zhì)析出。優(yōu)點(diǎn)：溫和條件下進(jìn)行，可避免某些被檢測(cè)物質(zhì)在酸中水解及高溫降解；可顯著改善對(duì)蛋白結(jié)合率強(qiáng)的被檢測(cè)物質(zhì)的回收率；可用有機(jī)溶劑直接提取消化液而無乳化生成的危險(xiǎn)；缺點(diǎn)：不適用于一些在高pH時(shí)易水解的被檢測(cè)物質(zhì)。第19頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一超濾法被檢測(cè)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物多為低分子化合物，與pro相比相差甚遠(yuǎn)，可用特殊微孔濾膜超濾不適合與pro結(jié)合力強(qiáng)的被檢測(cè)物質(zhì)影響被檢測(cè)物質(zhì)的回收率易堵塞第20頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一2.萃取液－液萃取液－固萃?。杭铀僖合噍腿」滔噍腿」滔辔⑤腿〉?1頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一溶液的pH調(diào)節(jié)提取溶劑的極性(1)、液－液萃取第22頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一溶液的pH調(diào)節(jié)最佳pH選擇主要與被檢測(cè)物質(zhì)的pKa值有關(guān)。pH＝pKa時(shí)，50%的被檢測(cè)物質(zhì)以非電離形式存在。堿性被檢測(cè)物質(zhì)最佳pH值要高于pKa值1-2個(gè)pH單位；反之，則低1-2個(gè)單位，可使90%被檢測(cè)物質(zhì)以非電離形式存在，易為溶劑提取。高解離被檢測(cè)物質(zhì)采用“離子對(duì)”技術(shù)進(jìn)行提取和定量體內(nèi)酸性物質(zhì)較多，在堿性條件下不會(huì)被萃取出來，故在pH值偏高的情況下進(jìn)行提取較好。第23頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一提取溶劑的極性滿足提取要求，極性盡可能小加入少量醇類(乙醇)可克服小極性溶劑(庚烷)提取能力弱的不足和減小被檢測(cè)物質(zhì)在容器表面的吸附損失利用不同極性的混合溶劑來提取被檢測(cè)物質(zhì)和凈化脂肪酸類，如己烷—甲醇

第24頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一定義：在較高溫度(50-200℃)和壓力(10.3-20.6Mpa或1000-3000psi)下用溶劑萃取固體或半固體樣品。溶出速度增快數(shù)十倍。特點(diǎn):有機(jī)溶劑用量少(10g樣品僅需溶劑15ml)、快速(1次萃取全過程僅需15min).（2）加速液相萃取(AcceleratedSolventExtraction,ASE)第25頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第26頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（3）、固相萃取聚丙烯管濾板樣品室填料(固相床)由液固萃取技術(shù)和柱相色譜技術(shù)結(jié)合發(fā)展而來無乳化現(xiàn)象溶劑多為水和甲醇，安全價(jià)廉萃取效率高速度快生物樣品離心后方能萃取多為一次性產(chǎn)品，成本高優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)第27頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一柱分兩類：一種是阻留全部樣品在柱上：親水性裝填物，可捕集全部樣品。樣品全部吸附在固相顆粒表面。采用一種與水不相混溶的有機(jī)溶劑如氯乙烷傾入柱中，洗提被檢測(cè)物質(zhì)。一種則僅阻留被檢測(cè)物質(zhì)及其相關(guān)物質(zhì)，較有選擇性?？裳b填疏水物(活性碳、聚苯乙烯或C18化學(xué)鍵合硅膠)或離子交換樹脂。疏水柱：吸附親脂性被檢測(cè)物質(zhì)，用有機(jī)溶劑洗提分離。離子交換柱：高極性、可電離的被檢測(cè)物質(zhì)。

第28頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一柱預(yù)處理（活化）平衡萃取柱裝載樣品洗去干擾物回收分析物第29頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（4）固相微萃取(Solid-phaseMicro-extraction)定義：以柱分離方式進(jìn)行操作，又稱為固相提取柱法。在固相萃取基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，保留了其所有的優(yōu)點(diǎn)，摒棄了其需要柱填充物和使用溶劑進(jìn)行解吸的弊病。固相物質(zhì):

氧化鋁、活性碳、硅藻土、離子交換樹脂、凝膠或C18化學(xué)鍵合硅膠等。洗脫相：采用不同溶劑洗脫被檢測(cè)物質(zhì)。第30頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第31頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一第32頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一固相微萃取分為兩步第一步是萃取，將針頭插入試樣容器中，推出石英纖維對(duì)試樣中的分析組分進(jìn)行萃??；第二步是在進(jìn)樣過程中將針頭插入色譜進(jìn)樣器，推出石英纖維中完成解吸、色譜分析等步驟。固相微萃取的萃取方式有兩種：石英纖維直接插入試樣中進(jìn)行萃取，適用于氣體與液體中的分析組分頂空萃?。涸嚇又袚]發(fā)性、半揮發(fā)性分析組分。第33頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一（1）KL-512氮吹儀氮?dú)饪焖?、連續(xù)、可控地吹到加熱樣品表面，實(shí)現(xiàn)樣品快速濃縮。由底盤、中心桿、樣品定位架、配氣系統(tǒng)等構(gòu)成。試管由定位架彈簧和托盤固定。氣體通過可調(diào)流量計(jì)到達(dá)配氣系統(tǒng)，經(jīng)軟管到各樣品針閥管，吹向溶液表面原理：3.濃縮、富集第34頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一性能：樣品位數(shù)：12適用于試管、錐形瓶、離心管試管尺寸Ф10-29mm，樣品容量1-50ml針閥控制各樣品位氮?dú)饬魉偌伴_關(guān)氮?dú)饬髁?-5L/min，壓力小于200kPa第35頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一MF-10A薄膜蒸發(fā)器NE-1001旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)器3.濃縮、富集-蒸發(fā)器第36頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一毒品檢驗(yàn)定性分析定量分析（二）毒物分析常用方法第37頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一毒物分析常用方法化學(xué)法儀器分析法生物法物理法色譜法光譜法質(zhì)譜法TLCHPLCGCCEUVIRAASFLu免疫分析法第38頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一七、導(dǎo)致待測(cè)物損失的因素一）吸附玻璃表面或膠塞：吸附脂肪胺類及含硫化物血樣中紅血球和纖維蛋白元凝塊的形成，常能引起待測(cè)物的共沉淀：措施：全血加入緩沖液后再行提取血球散開，被檢測(cè)物質(zhì)可從血球表面解吸：緩沖液的一定離子強(qiáng)度，可引起蛋白質(zhì)變性，形成疏松絮狀物-------減少被檢測(cè)物質(zhì)的物理性滯留和共沉淀的損失。第39頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一二）化學(xué)降解三）絡(luò)合

被測(cè)物質(zhì)分解物光、熱氧化水解微生物措施：采用溫和條件制備樣品，低溫、避光。被測(cè)物質(zhì)絡(luò)合物或配合物重金屬內(nèi)源性分子第40頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一四）蒸發(fā)被檢測(cè)物質(zhì)本身的揮發(fā)性（如苯丙胺）蒸發(fā)所得殘?jiān)赐耆苡谒拥男◇w積溶劑中因減壓濃縮引起溶液暴沸而導(dǎo)致?lián)p失在吹氮過程中被檢測(cè)物質(zhì)以氣溶膠形式逸出第41頁(yè)，共43頁(yè)，2023年，2月20日，星期一復(fù)習(xí)題一、選擇題：1.中毒者血呈醬油色中毒原因可能是：()