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2022-2023學(xué)年高二下生物期末模擬試卷注意事項(xiàng):1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫(xiě)在答題卡上。2.回答選擇題時(shí),選出每小題答案后,用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑,如需改動(dòng),用橡皮擦干凈后,再選涂其它答案標(biāo)號(hào)?;卮鸱沁x擇題時(shí),將答案寫(xiě)在答題卡上,寫(xiě)在本試卷上無(wú)效。3.考試結(jié)束后,將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.如圖是某蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)示意圖,圖中a鏈由21個(gè)氨基酸組成,β鏈由19個(gè)氨基酸組成,圖中“-S-S-”是在蛋白質(zhì)加工過(guò)程中由兩個(gè)“一SH”脫下2個(gè)H形成的下列有關(guān)敘述中,錯(cuò)誤的是()A.該蛋白質(zhì)最多含有20種氨基酸B.該蛋白質(zhì)分子中至少含有44個(gè)O原子C.形成該蛋白質(zhì)分子時(shí)相對(duì)分子質(zhì)量減少了686D.在該蛋白液中加入食鹽出現(xiàn)白色狀物,但結(jié)構(gòu)沒(méi)有發(fā)生變化2.基因工程能夠定向改變生物的某些性狀,目前已應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和環(huán)境保護(hù)等方面。下列選項(xiàng)中,屬于基因工程應(yīng)用的實(shí)例是()A.無(wú)子西瓜 B.四倍體葡萄 C.轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉 D.試管嬰兒3.為研究酵母菌的呼吸方式,某生物小組制作了如下圖中a—f所示裝置,下列判斷不合理的是A.若a裝置液滴不移動(dòng),b裝置液滴右移,說(shuō)明酵母菌僅進(jìn)行無(wú)氧呼吸B.若a裝置液滴左移,b裝置液滴右移,說(shuō)明酵母菌僅進(jìn)行有氧呼吸C.連接e→c→d,并從e側(cè)通氣,d中石灰水變渾濁,可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸D.連接f→d,d中石灰水變渾濁,可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了無(wú)氧呼吸4.以下關(guān)于基因操作工具的敘述,正確的是()A.DNA連接酶能夠催化核糖核苷酸之間形成磷酸二酯鍵B.限制酶能識(shí)別并切割DNA分子內(nèi)一段特定的核苷酸序列C.質(zhì)粒一般具有復(fù)制原點(diǎn)、酶切位點(diǎn)和抗生素合成基因D.DNA聚合酶將目的基因和載體連接形成重組DNA5.將不同植物的三個(gè)未發(fā)生質(zhì)壁分離的細(xì)胞置于同一蔗糖溶液中,形態(tài)不再變化后的細(xì)胞圖像如圖。則有關(guān)實(shí)驗(yàn)前各細(xì)胞液濃度的判斷,正確的是()A.B<A<C B.B>A>CC.B>A="C" D.B<A=C6.英國(guó)冒險(xiǎn)家貝爾?格里爾斯(BearGrylls)主持寫(xiě)實(shí)電視節(jié)目《荒野求生》,模擬探險(xiǎn)家在極為惡劣的環(huán)境下為脫離險(xiǎn)境,設(shè)法尋找回到文明社會(huì)的路徑,在前進(jìn)的道路上他沿繩滑落深谷、甚至徒手攀爬峭壁等,下列有關(guān)人體變化的敘述不正確的是A.人在恐懼緊張時(shí),在內(nèi)臟神經(jīng)的支配下,腎上腺素增多,作用于心臟,使心率加快B.人長(zhǎng)時(shí)間不吃飯、不喝水、不休息,其體內(nèi)抗利尿激素和胰高血糖素增多,促甲狀腺激素和甲狀腺激素均增多C.人體內(nèi)分泌腺產(chǎn)生的激素通過(guò)導(dǎo)管輸送到體液中,隨血液流到全身D.人在寒冷環(huán)境下甲狀腺激素與腎上腺素分泌增多,從而促進(jìn)骨骼肌與內(nèi)臟代謝活動(dòng)增強(qiáng),產(chǎn)熱量增加7.下圖中的甲、乙、丙表示細(xì)胞中的三種物質(zhì)。敘述不正確的是A.圖中的化學(xué)元素都屬于組成細(xì)胞的大量元素B.物質(zhì)甲構(gòu)成細(xì)胞膜的基本骨架C.物質(zhì)乙是生物體生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者D.物質(zhì)丙是RNA8.(10分)下圖表示糖類(lèi)的化學(xué)組成和種類(lèi),其相關(guān)敘述正確的是A.①②③依次為單糖、二糖、多糖,均可水解B.①②均可與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)出現(xiàn)磚紅色沉淀C.④⑤分別為纖維素、肌糖原,均可作為貯能物質(zhì)D.④可參與構(gòu)成植物的細(xì)胞壁,用酶可將其破壞二、非選擇題9.(10分)請(qǐng)根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識(shí),回答下列問(wèn)題:(1)制作高粱酒要用到的微生物是________。(2)果酒的制作:①傳統(tǒng)發(fā)酵時(shí),發(fā)酵液未經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的滅菌處理,雜菌卻不能正常生長(zhǎng)。這是由于果酒發(fā)酵的________________等條件抑制了雜菌的生長(zhǎng)。②溫度較高時(shí),果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短。其原因是______________。③喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后會(huì)變酸。其原因是________________。④葡萄酒變酸的反應(yīng)式可表示為_(kāi)___________。10.(14分)青蒿素是從黃花蒿莖葉中提取的抗瘧疾藥物。通過(guò)組織培養(yǎng)獲得青蒿素的途徑如圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。(1)外植體在接種前通??捎皿w積分?jǐn)?shù)為_(kāi)_______的酒精進(jìn)行消毒。(2)分化培養(yǎng)基一般不用2,4-D,原因是________________。(3)為了得到高產(chǎn)細(xì)胞系,通常利用酶在________________(填“蒸餾水”或“一定濃度的甘露醇溶液”)中去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體,原因是_________________。(4)對(duì)_______________進(jìn)行誘變處理,更容易發(fā)生基因突變,通過(guò)個(gè)體篩選可培育出青蒿素高產(chǎn)植株。與從植株提取青蒿素相比,細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)有______________________(回答2點(diǎn))。11.(14分)為了檢測(cè)高原訓(xùn)練對(duì)運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)的血紅蛋白含量的影響,需要對(duì)運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練前后的血紅蛋白進(jìn)行提取和分離,其步驟如下:(1)在紅細(xì)胞的洗滌操作中,血液離心后結(jié)果如圖所示,其中血紅蛋白位于__________(填“上清液”或“沉淀物”)。洗滌紅細(xì)胞時(shí),要用相當(dāng)于紅細(xì)胞液體體積5倍的___________洗滌紅細(xì)胞3次,然后加入蒸餾水到原血液體積,再加40%的_____________,攪拌約10min,使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)在樣品粗分離操作中,將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析。透析的目的是_______________。(3)血紅蛋白的純化是通過(guò)凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)___________電泳進(jìn)行純度鑒定。研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量___________(填“較大”或“較小”)的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來(lái)。在裝填色譜柱時(shí)不得有氣泡存在,原因是_______________________。(4)檢測(cè)結(jié)果顯示,經(jīng)過(guò)高原訓(xùn)練后,運(yùn)動(dòng)員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高,試分析其可能的原因______________________。12.纖維素是植物秸稈的主要成分,可利用纖維素酶將其降解為葡萄糖,隨后生產(chǎn)燃料酒精。某科研人員將纖維素酶用海藻酸鈉固定,形成凝膠小球,使它可以重復(fù)、穩(wěn)定使用,提高了利用率。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)用海藻酸鈉固定纖維素酶的方法稱(chēng)為_(kāi)_____法,在溶化海藻酸鈉時(shí)要求是_________。(2)該科研人員將纖維素酶和海藻酸鈉混合后,滴加到一定濃度的氯化鈣溶液中。其中,氯化鈣的作用是_______。若得到的凝膠小球中纖維素酶量少,原因可能是_________。(3)該科研人員進(jìn)一步“探究纖維素酶固定化后的熱穩(wěn)定性變化”。將固定化酶和游離酶置于60℃水浴中,每20min測(cè)定其活力一次,結(jié)果如圖所示。酶活力(U)的表示可用單位時(shí)間內(nèi)_____表示,據(jù)圖分析可知纖維素酶固定后熱穩(wěn)定性_______。根據(jù)游離酶的熱穩(wěn)定性,推測(cè)適宜在_____條件下保存酶。(4)纖維素酶也被廣泛應(yīng)用于洗滌劑,在用含纖維素酶的洗衣粉洗滌棉麻織物時(shí),纖維素酶的作用是_______。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】
根據(jù)題意和圖示分析可知:圖中a鏈由21個(gè)氨基酸組成,含20個(gè)肽鍵;β鏈由19個(gè)氨基酸組成,含18個(gè)肽鍵?!驹斀狻緼.構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸大約有20種,組成該蛋白質(zhì)的氨基酸共有40個(gè),故氨基酸最多含有20種,A正確;B.該蛋白質(zhì)中至少含有O原子數(shù)=肽鍵數(shù)+2×肽鏈數(shù)=38+2×2=42個(gè),B錯(cuò)誤;C.形成該蛋白質(zhì)分子時(shí)相對(duì)分子質(zhì)量減少18×38+2=686,C正確;D.在雞蛋清中加入一些食鹽,會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的溶解度降低而析出,該過(guò)程是鹽析,蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)沒(méi)有變化,D正確。2、C【解析】
1、植物基因工程的應(yīng)用:(1)抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物;(2)抗病轉(zhuǎn)基因植物;(3)抗逆轉(zhuǎn)基因植物;(4)轉(zhuǎn)基因改良植物品質(zhì).總之基因工程在農(nóng)業(yè)上用于生產(chǎn)高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的品種,能產(chǎn)生抗逆性品種。
2、動(dòng)物基因工程的應(yīng)用:(1)提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速度:外源生長(zhǎng)激素基因;(2)改善畜產(chǎn)品的品質(zhì);(3)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物;(4)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體;(5)基因工程藥物,如人胰島素、細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長(zhǎng)激素、干擾素等。【詳解】A、無(wú)籽西瓜是多倍體育種的應(yīng)用實(shí)例,A錯(cuò)誤;
B、四倍體葡萄也是多倍體育種的應(yīng)用實(shí)例,B錯(cuò)誤;
C、轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉是基因工程的應(yīng)用實(shí)例,C正確;
D、試管嬰兒技術(shù)是胚胎工程的應(yīng)用實(shí)例,D錯(cuò)誤。
故選C?!军c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟,了解基因工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)療等方面的應(yīng)用,再根據(jù)題干要求作出準(zhǔn)確的判斷。3、B【解析】
分析實(shí)驗(yàn)裝置圖:酵母菌進(jìn)行有氧呼吸消耗氧氣,產(chǎn)生二氧化碳;進(jìn)行無(wú)氧呼吸不消耗氧氣,但仍產(chǎn)生二氧化碳。a中的氫氧化鈉可以吸收二氧化碳,所以a中液滴移動(dòng)的距離代表酵母菌有氧呼吸消耗的氧氣量;b中蒸餾水不吸收氧氣和不吸收二氧化碳,所以b中液滴移動(dòng)的距離代表酵母菌呼吸作用釋放二氧化碳量與吸收氧氣量的差值。【詳解】若a裝置液滴不移動(dòng),說(shuō)明酵母菌沒(méi)有消耗氧氣,即酵母菌沒(méi)有進(jìn)行有氧呼吸;b裝置液滴右移,說(shuō)明酵母菌產(chǎn)生二氧化碳多于氧氣的吸收量,結(jié)合a、b裝置可知,酵母菌只進(jìn)行無(wú)氧呼吸,A正確;若a裝置液滴左移,說(shuō)明酵母菌進(jìn)行有氧呼吸消耗了部分氧氣;b裝置液滴右移,說(shuō)明酵母菌呼吸作用釋放二氧化碳量比吸收氧氣量多,即酵母菌同時(shí)進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸,B錯(cuò)誤;連接e→c→d,并從e側(cè)通氣,保證有氧條件,若d中石灰水變渾濁,可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了有氧呼吸,C正確;連接f→d,由于f是密閉裝置,若d中石灰水變渾濁,可驗(yàn)證酵母菌進(jìn)行了無(wú)氧呼吸,D正確?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握酵母菌有氧呼吸和無(wú)氧呼吸的過(guò)程及其相關(guān)氣體的變化,明確a、b裝置中氫氧化鈉和水的作用,進(jìn)而判斷兩個(gè)裝置中液滴移動(dòng)的距離的含義。4、B【解析】
限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂;DNA連接酶是在兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵;常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒等。【詳解】A.DNA連接酶能夠催化脫氧核糖核苷酸之間形成磷酸二酯鍵,A錯(cuò)誤;B.限制酶能識(shí)別并切割DNA分子內(nèi)一段特定的核苷酸序列,B正確;C.質(zhì)粒一般具有復(fù)制原點(diǎn)、酶切位點(diǎn)和抗生素抗性基因,以便對(duì)相應(yīng)的基因進(jìn)行操作,C錯(cuò)誤;D.將目的基因和載體連接形成重組DNA需要用到DNA連接酶,D錯(cuò)誤。5、B【解析】
1、滲透作用的發(fā)生水分的運(yùn)輸方向是從低濃度一側(cè)向高濃度的一側(cè)擴(kuò)散。
2、B未出現(xiàn)質(zhì)壁分離,C質(zhì)壁分離現(xiàn)象最明顯,所以實(shí)驗(yàn)前,B的細(xì)胞液濃度最高,C最低,即B>A>C?!驹斀狻緼、C都發(fā)生質(zhì)壁分離,C分離程度較大,說(shuō)明蔗糖溶液濃度大于細(xì)胞A和C細(xì)胞液濃度,且A細(xì)胞液濃度大于C,B沒(méi)有質(zhì)壁分離,說(shuō)明B細(xì)胞液濃度與蔗糖溶液相當(dāng),甚至大于外界溶液濃度,故實(shí)驗(yàn)前B>A>C。
故選B。6、C【解析】
A、人在恐懼緊張時(shí),在內(nèi)臟神經(jīng)的支配下,腎上腺素增多,作用于心臟,使心率加快,A項(xiàng)正確;B、人長(zhǎng)時(shí)間不喝水、不吃飯、不休息,體內(nèi)血糖濃度會(huì)降低,體內(nèi)水分減少,在這種情況下為維持血糖穩(wěn)定胰高血糖素分泌會(huì)增多,為維持滲透壓的穩(wěn)態(tài)抗利尿激素分泌增多。人長(zhǎng)時(shí)間不休息,,細(xì)胞代謝加快,促甲狀腺激素和甲狀腺激素均增多,B項(xiàng)正確;C、人體內(nèi)分泌腺?zèng)]有導(dǎo)管,C項(xiàng)錯(cuò)誤;D、人在寒冷環(huán)境下甲狀腺激素與腎上腺素分泌增多,從而促進(jìn)骨骼肌與內(nèi)臟代謝活動(dòng)增強(qiáng),產(chǎn)熱量增加,D項(xiàng)正確。故選C。7、D【解析】圖中的C、H、O、N、P都屬于組成細(xì)胞的大量元素,A正確;題圖顯示:物質(zhì)甲和丙都是由C、H、O、N、P五種元素組成,但甲是細(xì)胞膜的組成成分之一,丙是染色體的組成成分之一,據(jù)此推知,甲、丙依次表示磷脂、DNA,磷脂以雙分子層的形式排布,構(gòu)成細(xì)胞膜的基本骨架,B正確,D錯(cuò)誤;乙的基本組成元素是C、H、O、N四種,是細(xì)胞膜和染色體的組成成分之一,說(shuō)明乙是蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)是生物體生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者,C正確。8、D【解析】①、②、③依次代表單糖、二糖、多糖,單糖不可繼續(xù)水解,A錯(cuò)誤;①為單糖屬還原糖,在加熱條件下與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)將產(chǎn)生磚紅色沉淀,②中蔗糖不是還原性糖,B錯(cuò)誤;④、⑤分別為纖維素、肌糖原,肌糖原可貯存能量,可作為貯能物質(zhì),纖維素只能構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分,C錯(cuò)誤;④纖維素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分,用酶可將其破壞,D正確。【考點(diǎn)定位】糖類(lèi)的種類(lèi)及其分布和功能二、非選擇題9、酵母菌無(wú)氧、pH為酸性溫度較高時(shí)發(fā)酵酶活性增強(qiáng)、發(fā)酵速度更快酒精轉(zhuǎn)變成了醋酸【解析】
1、參與果酒制作的微生物是酵母菌,其新陳代謝類(lèi)型為異養(yǎng)兼性厭氧型.果酒制作的原理:(1)在有氧條件下,反應(yīng)式如下:;(2)在無(wú)氧條件下,反應(yīng)式如下:。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌,其新陳代謝類(lèi)型是異養(yǎng)需氧型,果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí),醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸;當(dāng)缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿??!驹斀狻浚?)酒精的制作需要用到的微生物是酵母菌。(2)①在果酒發(fā)酵的過(guò)程中,由于是在無(wú)氧、pH為酸性的條件下,酵母菌發(fā)酵最適宜,而抑制了其他微生物的生長(zhǎng)。②溫度較高時(shí)果酒發(fā)酵時(shí)間可縮短,原因是溫度較高時(shí)發(fā)酵酶活性增強(qiáng)、發(fā)酵速度更快。③喝剩的葡萄酒放置一段時(shí)間后變酸的原因是酒精轉(zhuǎn)變成了醋酸。④葡萄酒變酸是由于生成了醋酸,其反應(yīng)式:。【點(diǎn)睛】本題考查果酒和果醋制作的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記參與果酒和果醋制作的微生物的種類(lèi)及作用,掌握果酒和果醋制作的原理,能對(duì)兩者進(jìn)行比較,再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。10、70%2,4-D趨向于抑制植物形態(tài)的發(fā)生,一般不用于分化培養(yǎng)基一定濃度的甘露醇溶液獲得的原生質(zhì)體在蒸餾水中會(huì)吸水漲破(獲得的原生質(zhì)體要在一定濃度的甘露醇溶液中才能維持形態(tài))愈傷組織產(chǎn)量高、產(chǎn)物純度高、降低生產(chǎn)成本【解析】
圖示為通過(guò)組織培養(yǎng)獲得青蒿素的兩條途徑:一是通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗,再?gòu)那o葉中獲得相應(yīng)的產(chǎn)物;二是采用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得大量細(xì)胞,進(jìn)而獲得細(xì)胞產(chǎn)物?!驹斀狻?1)在接種前對(duì)外植體進(jìn)行消毒,通常用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精。(2)在分化培養(yǎng)上培養(yǎng)的目的是將愈傷組織誘導(dǎo)出試管苗。由于2,4-D趨向于抑制植物形態(tài)的發(fā)生,所以一般2,4-D不用于分化培養(yǎng)基。(3)植物原生質(zhì)體獲得的方法是:在0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境(較高滲透壓)下用纖維素酶和果膠酶混合液處理實(shí)驗(yàn)材料,將細(xì)胞壁消化除去,獲得球形的原生質(zhì)體。這是因?yàn)楂@得的原生質(zhì)體在蒸餾水中會(huì)吸水漲破,而在一定濃度的甘露醇溶液中才能維持其形態(tài)。(4)愈傷組織是經(jīng)過(guò)脫分化形成,其細(xì)胞分化程度低、分裂能力強(qiáng),容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變,所以對(duì)愈傷組織進(jìn)行誘變處理,更容易發(fā)生基因突變。與從植株提取青蒿素相比,細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)有:產(chǎn)量高、產(chǎn)物純度高、降低生產(chǎn)成本。【點(diǎn)睛】解答此題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解植物組織培養(yǎng)的具體過(guò)程及其應(yīng)用。在此基礎(chǔ)上,以圖示中的“箭頭指向和文字信息”為切入點(diǎn),結(jié)合題意對(duì)各問(wèn)題情境進(jìn)行分析解答。11、沉淀物生理鹽水甲苯去除分子量較小的雜質(zhì)SDS—聚丙烯酰胺凝膠較大氣泡會(huì)擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,使得到的紅色帶區(qū)歪曲、散亂,降低分離效果高原環(huán)境空氣稀薄,氧氣含量低,血紅蛋白含量會(huì)增加【解析】
根據(jù)蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬(wàn)別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗(yàn)步驟主要有:(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌(低速短時(shí)間離心),②血紅蛋白的釋放(需要加入蒸餾水和甲苯),③分離血紅蛋白(中速長(zhǎng)時(shí)間離心)。(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液,②透析。(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠色譜法(分配色譜法):①原理:分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快;分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢。②凝膠材料:多孔性,多糖類(lèi)化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過(guò)程:混合物上柱→洗脫→大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢→收集大分子→收集小分子。洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。④作用:分離蛋白質(zhì),測(cè)定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等。【詳解】(1)血紅蛋白在紅細(xì)胞內(nèi),而血液離心后的各種血細(xì)胞主要存在于沉淀物中,因此血紅蛋白位于沉淀物中。洗滌紅細(xì)胞時(shí),生理鹽水可以保持紅細(xì)胞不破裂,而5倍體積洗滌3次可以去除雜蛋白,得到更純的紅細(xì)胞。加入蒸餾水,紅細(xì)胞吸水破裂,加入40%的甲苯,溶解紅細(xì)胞膜,最終使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在袋內(nèi),因此透析可以去除相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。(3)血紅蛋白的純化是通過(guò)凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快;分子量小的分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢。因此,研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí),相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來(lái)。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會(huì)在色譜柱內(nèi)部形成無(wú)效的空隙,使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部的樣品分子從這些空隙中通過(guò),攪亂洗脫液的流動(dòng)次序,
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