實(shí)驗(yàn)六植物抗氧化酶活性的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)六植物抗氧化酶活性的測(cè)定第一頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二POD、SOD、CAT（AOX）（PPO）第二頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗氧化酶與植物抗逆性關(guān)系第三頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二JournalofExperimentalBotany,2009，60（2）：377–390H2O2H2O2第四頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二李忠光，2009.10第五頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二POD一、實(shí)驗(yàn)原理Peroxidase,POD第六頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二（ROS,H2O2）第七頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二PPOPolyphennoloxidase,PPO第八頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二抗氧化酶動(dòng)力學(xué)曲線第九頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二植物抗氧化酶提取和測(cè)定參考文獻(xiàn)第十頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二二、實(shí)驗(yàn)方法1、提?。悍謩e取0.5g實(shí)驗(yàn)材料→加入少許石英砂和3ml提取液（50mmol/LPBS,pH5.8,內(nèi)含0.１mmol/LEDTA,1%PVP）→充分研磨→轉(zhuǎn)入離心管中→用2ml提取液洗研缽→5000rpm離心10min→上清液定容至5ml→用于測(cè)定POD和PPO酶活性或分裝后轉(zhuǎn)至-20或-80℃保存。

第十一頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二2、POD測(cè)定：取POD反應(yīng)混合液（10mmol/L愈創(chuàng)木酚，5mmol/LH2O2,用PBS溶解）2.90ml，25℃水浴5min，加入酶液100ml（空白調(diào)零用提取液取代），立即記時(shí)，搖勻，讀出反應(yīng)30s和3min時(shí)的A470。用ε計(jì)算POD活性。3、PPO測(cè)定：取PPO反應(yīng)混合液（20mmol/L鄰苯二酚，用PBS溶解）2.8ml，25℃水浴5min，加入酶液0.2ml（空白調(diào)零用提取液取代），立即記時(shí)，搖勻，讀出反應(yīng)

30s和2min時(shí)的A410。以每分鐘A值變化0.01所需要的酶液的量為一個(gè)活力單位（U），則：第十二頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二PODactivities=

(mmol.g-1FWmin-1)PPOactivities=

(U.g-1FW)4、計(jì)算第十三頁(yè)，共十四頁(yè)，編輯于2023年，星期二5、思考題5.1簡(jiǎn)述