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多糖的檢測(cè)方法業(yè)。凝柱提粗糖得以HC法較上成研。種方是企質(zhì)糖:程提多,糖的色測(cè)是糖算糖但價(jià)單能定量,質(zhì)以法大酸酸-有題。定多糖的測(cè)定方法,目前有堿性酒石酸酸-苯酚法。樣少糖作準(zhǔn)品但被的純品并非每個(gè)實(shí)驗(yàn)室所能做到的,所含多糖是不同相對(duì)分所糖含量于1。法1.理取本品適定于250ml磨口水50m水浴回流2小液1l于100ml離管中醇75ml以4000rmin心10min棄去液,加15ml熱水90℃洗管中沉淀,以4000r/min離心30min上,用水=:),。2.解將離用50ml熱>0)少量多次轉(zhuǎn)移至250ml磨三瓶加入15ml濃凝水浴中回流2用40約15m)粗調(diào)Ph于PH計(jì)上調(diào)整H在6.87.2和的酸至100l容量瓶中,加水定容,。3.石定3.1各5l于150ml的加10ml蒸餾水及2粒玻入9.0ml。3.2將錐形瓶置電爐上迅速加熱,務(wù)必在2分鐘內(nèi)用標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液滴定每2秒1糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的總體積。同法平行操作三份,取其平均值(V。3.3定。3.3.1樣液預(yù)測(cè)各l于10l入10ml餾及2在2定樣定萄溶耗體積。3..2定精密吸取堿性酒石酸銅甲液與乙液各5.0ml于1l錐水10ml及玻珠2粒從定管滴加測(cè)少1ml的樣品解液,務(wù)必在2分鐘每2秒1滴速度藍(lán)為出平均耗積V。最后計(jì)算結(jié)以0.,糖換算成粗?jǐn)?shù)。硫酸苯酚比色法1、方提要中分×4在80和糖用價(jià)劑地高質(zhì)具糖的,酚-量并迅速脫水生成糖醛衍生物光。2、主儀器(;((3000r/in;(。3、試劑殊子。(1醇80%:20mL水中加醇80mL,混。(2鈉100g/L取100g氫氧化鈉,加至1體。(3取3.0gCuSO4?5H2O,30.0g檸檬酸鈉,加水溶解并稀釋至1L,,。(4劑液50mL水50m鈉12.5g其用。(5水50m入10mL銅試、10L,。(6酸10%取100L濃到800mL釋至1。(7酚50g/L:酚5.0至100mL。液置冰存1。(量5×105已品0.5000g加水溶定至50mL液1L含10.0mg。(9液1.0mL,置于100mL容瓶,水至刻度,混勻,置液1mL糖0.mg。4、測(cè)步驟(品:a確品5.0mL置于5L離心管中醇20m,混勻5min以30n心5i作4定至5.0L。b取b項(xiàng)液2L置于L入100g/L氫化鈉溶液2.0mL銅液2.L,沸水浴中煮沸2min,冷以3000rmn心5min去作3用10積液2.0mL溶至50mL樣品定液。(2液00.0.200.0.0、1.00m糖0、0.0、20.0、0.06、0.0、00g于25mL比色管中,準(zhǔn)確補(bǔ)至2.0mL入50g/L苯酚溶液1.0mL,濃硫酸10.0m沸2min,用度計(jì)在nmm比以濃標(biāo),度標(biāo)標(biāo)。(3液2.0mL置于2l入50g/L苯酚液1.0mL在酸10.0mL于旋浴中煮沸2min在485nmm色光計(jì)中含白實(shí)驗(yàn)。5、結(jié)計(jì)算X=[(1-m2)×1×3V]/m×V×4×6]式中X—樣品以聚計(jì)mg/g;m1—樣品測(cè)定液中葡聚糖的質(zhì)(m;m2—樣m;—樣品量(g;V1—樣品提mL;2多積mL;V3—(m;V—沉淀葡聚(m;V5—樣品測(cè)mL;V6(。6、準(zhǔn)確度與為87.8%~1108%,不行10次測(cè)標(biāo)為5.8%。中藥總多糖含量測(cè)定(苯酚酸比色法)供試液制備粉2.2糖0.22g,置燒瓶中水100ml置電爐上加熱回流提取1.5h放冷至室溫3004000rpm離心10min,用瓶收。到約15ml醇100ml淀15分鐘。轉(zhuǎn)淀于離心管中量80%棒皿,以30~400rpm心15min清中加入少量80%乙醇,離清留。于50水溶解沉淀至250ml量瓶中至250ml取5l置100ml,容度即品。標(biāo)準(zhǔn)曲線的取5℃干加水配制成0.85mg/ml取1.02.005.0ml于50ml搖勻得葡稀液2ml水20l置另一具塞試管中,各管分別加5新1ml酸5.0ml于40℃溫30min中5min述2.0ml所
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