中草藥接骨膏促進(jìn)骨折愈合作用的實驗研究

中草藥接骨膏促進(jìn)骨折愈合作用的實驗研究【摘要】目的探討民族醫(yī)藥中草藥接骨膏對家兔脛腓骨骨折愈合的影響。方法選用健康雄性家兔，均采用無菌手術(shù)造成機(jī)械性脛腓骨骨折動物模型，通過X線、病理組織學(xué)、及血清鈣、磷、血清堿性磷酸酶(AKP)檢測,觀察中草藥接骨膏促進(jìn)骨折愈合的作用。結(jié)果接骨膏實驗組及骨折挫傷散治療組與對照組比較：骨痂生長明顯加快、且新生骨出現(xiàn)早、范圍大，AKP活性增強(qiáng)()，且能影響血清Ca，P含量及Ca，P乘積的變化。結(jié)論中草藥接骨膏對骨折后骨修復(fù)和提高骨折愈合有明顯促進(jìn)作用。

【關(guān)鍵詞】中草藥接骨膏骨折

中草藥接骨膏是根據(jù)長江三峽地區(qū)民間接骨中醫(yī)鄭賢群先生驗方篩選整理而成［1］，主治跌打損傷、閉合性骨折、筋骨疼痛。該制劑在我院應(yīng)用已有十多年，臨床觀察發(fā)現(xiàn)具有明顯地活血化淤、消腫止痛、縮短骨折愈合時間的作用，目前已成為我院骨傷科治療骨折的常用藥。本實驗旨在通過觀察中草藥接骨膏對兔骨折模型愈合過程的影響，進(jìn)一步驗證其促進(jìn)骨折愈合的效果，并探討其對促進(jìn)骨折愈合的作用機(jī)理。

1材料與方法1藥品試劑及器材

中草藥接骨膏由獨正桿(又名光葡萄、野葡萄、山葡萄，屬葡萄屬科蛇葡萄之變種光葉蛇葡萄)、刺老苞(又名刺苞頭、鳥不踏、紅刺苞頭，屬五甲科植物槐木)、刺五加(又名五加皮、刺加皮)組成。以上3味藥均分別取根皮曬干，搗碎或切成小塊，按獨正桿∶刺五加∶刺老苞=2∶1∶1的比例混合加水煎煮，采用膏滋法置備成煎膏劑，成品為棕色稠膏，味甜微苦；骨折挫傷散，中成藥，由中國佳木斯制藥廠生產(chǎn)(批號001206)；生化分析儀OLYMPUSAU400，日本；切片機(jī)LeicaJungBiocut2035德國；AXIOSKOP2PLUS光學(xué)顯微鏡,德國ZEISS公司。2動物及分組大耳白色家兔72只，全部雄性，體重kg，湖北民族學(xué)院動物實驗中心提供。對家兔隨機(jī)分為3組，即模型對照組、接骨膏實驗組、骨折挫傷散治療組，每組24只。3動物模型制備及檢測方法3組實驗動物均在戊巴比妥鈉的麻醉下，按無菌操作術(shù)切開家兔右后腿，作脛腓骨中段橫形骨折，再用克氏針內(nèi)固定，縫合傷口。術(shù)后進(jìn)行3d抗感染治療，以防感染。造模成功后次日起灌胃給藥進(jìn)行實驗研究。實驗組采用接骨膏煎膏劑按g/kg·bw劑量灌胃給藥，1次/d，相當(dāng)于正常成人劑量5倍；治療組采用骨折挫傷散按g/kg·bw劑量用蒸餾水調(diào)成混懸液灌胃治療，1次/d，相當(dāng)于正常人劑量5倍；對照組采用等容積的生理鹽水灌胃。在實驗研究過程中的第7，15，30天，每組隨機(jī)抽取家兔8只，先行X線觀察骨痂陰影的形成和血清學(xué)檢測，再用空氣栓塞法處死，作病理組織學(xué)檢查觀察骨折處組織愈合程度。X線拍片判斷采用5分制標(biāo)準(zhǔn)［2］：未發(fā)現(xiàn)骨痂陰影；可見到骨痂陰影，骨折線比較模糊；有明顯骨痂生長，骨折線顯著模糊；有豐富骨痂生長，骨折線接近消失；骨折線消失，完全連接，接近骨化。血清學(xué)檢測：抽取各組中家兔空腹血5ml，用生化分析儀直接測定血清堿性磷酸酶(AKP)、血鈣、血磷的含量；病理組織學(xué)檢查：動物按計劃處死后，切取包括骨質(zhì)缺損兩端的大體標(biāo)本，經(jīng)脫鈣后常規(guī)處理標(biāo)本，行石蠟切片，用HE、Masson、PTAH3種染色，觀察骨缺損處血腫、細(xì)胞、膠原和新生骨情況。4數(shù)據(jù)分析

實驗數(shù)據(jù)采用SPSSFORWINDOWS軟件進(jìn)行t檢驗統(tǒng)計處理。

2結(jié)果

X線拍片觀察與對照組比較，實驗組和治療組骨缺損處骨痂陰影均出現(xiàn)早，骨痂生長速度快，骨痂陰影密度高()。結(jié)果見表1。表1接骨膏對家兔骨折愈合的影響(略)

對血清堿性磷酸酶(AKP)的影響造模后實驗觀察第7天，實驗組和治療組血AKP活性與對照組比較無明顯差異；造模后第15，30天，實驗組和治療組血AKP活性升高與對照組比較差異顯著(或)，且實驗組和治療組之間無差異性。結(jié)果見表2。表2接骨膏對血清堿性磷酸酶(AKP)的影響(略)

對血鈣(Ca)、磷(P)的影響造模后實驗觀察第7天，實驗組和治療組血Ca含量的降低、血P含量的升高及Ca，P乘積等指標(biāo)均有明顯變化，但與對照組比較無統(tǒng)計學(xué)意義；造模后15，30d，實驗組和治療組血Ca含量仍處于較低水平，但血P含量明顯的升高和Ca，P乘積值的增大與對照組比較差異顯著()。結(jié)果見表3。表3接骨膏對血鈣(Ca)、磷(P)的影響

病理組織學(xué)檢查

切片檢查發(fā)現(xiàn)實驗組和治療組動物兩骨端生長新骨的時間較早，軟骨區(qū)范圍大，軟骨內(nèi)成骨過程較快；對照組兩骨端出現(xiàn)新骨的時間較晚，軟骨區(qū)范圍較大，軟骨內(nèi)成骨過程較長，因而骨痂生長緩慢，直到第30天兩端骨痂均不能連接，中間仍存在著大片纖維組織區(qū)。

3討論

骨折愈合過程是一個復(fù)雜的組織學(xué)、生物學(xué)、神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)及骨生物力學(xué)的動態(tài)過程。臨床上，各種原因所致的骨折延遲愈合和骨折不愈合是常見病。中草藥接骨膏主要用于閉合性骨折早中期的治療，方中藥物功用：獨正桿祛風(fēng)活絡(luò)、止痛止血、散熱解毒、強(qiáng)筋健骨；刺老苞活血止痛、散淤消腫；刺五加祛風(fēng)除濕、接骨續(xù)筋。此方配伍符合骨折治療淤去、新生、骨合的傳統(tǒng)理論。本實驗我們采用了X線觀察，了解對骨痂形成的影響；病理組織學(xué)檢查，了解對骨折周圍血腫、骨痂形成、軟骨生成的影響；血清學(xué)檢測了解用藥后血清鈣、磷、AKP酶的變化。

實驗X線檢查結(jié)果，實驗組和治療組與對照組比較，骨缺損處骨痂陰影均出現(xiàn)早，骨痂生長速度快，骨痂陰影密度高，骨折修復(fù)明顯增快。病理學(xué)組織檢查，用藥組兩骨端生長新骨的時間較早，軟骨區(qū)范圍大，軟骨內(nèi)成骨過程較快，新生骨出現(xiàn)早、范圍大。血清學(xué)檢查顯示，用藥組血清中的堿性磷酸酶含量豐富，血鈣、血磷及鈣磷乘積值的增高等指標(biāo)均發(fā)生明顯變化?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)證實，AKP酶主要由成骨細(xì)胞產(chǎn)生，它是成骨細(xì)胞分化的早期指標(biāo)，是骨形成所必需的酶，其活性間接反映骨重建活躍性的改變和成骨細(xì)胞活動性的強(qiáng)弱，是一項觀察骨折愈合的重要指標(biāo)［3］。而血中鈣磷含量的高低又直接影響骨的鈣化與溶解。它們相互影響相互制約并受1,25-(OH)2D3、甲狀旁腺素及降鈣素的調(diào)節(jié)和控制［4］。血中鈣磷相互作用，其乘積在一個水平，超過一定限度，則沉淀為骨鹽。因此，鈣磷乘積升高有利于鈣鹽的沉積。

本實驗研究進(jìn)一步表明，中草藥接骨膏能增加AKP活性，促進(jìn)成骨細(xì)胞活動，并且降低血鈣，升高血磷，使鈣磷乘積高峰提前出現(xiàn)，促進(jìn)鈣鹽沉積，有利于骨折愈合。由此可見，中草藥接骨膏能夠縮短骨愈合過程和提高骨折愈合質(zhì)量，為臨床應(yīng)用提供了可靠的理論依據(jù)。

【參考文獻(xiàn)】

［1］袁昌錦，付天明，劉敏，等.中草藥接骨膏對家兔創(chuàng)傷性骨折愈合作用的實驗研究［J］.四川中醫(yī)，2005，23：34.

［2］甘銀凰，余南才.接骨膏