高考生物二輪專(zhuān)題

專(zhuān)題九現(xiàn)代生物科技專(zhuān)題（選修部分）第一講基因工程和克隆技術(shù)1．(2012年高考浙江卷)天然的玫瑰沒(méi)有藍(lán)色花，這是由于缺少控制藍(lán)色色素合成的基因B，而開(kāi)藍(lán)色花的矮牽牛中存在序列已知的基因B?，F(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰，下列操作正確的是()A．提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA，再擴(kuò)增基因BB．利用限制性核酸內(nèi)切酶從開(kāi)藍(lán)色花矮牽牛的基因文庫(kù)中獲取基因BC．利用DNA聚合酶將基因B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞

D．將基因B直接導(dǎo)入大腸桿菌，然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞解析：此題考查基因工程及其應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)。獲取目的基因B，可先提取矮牽牛藍(lán)色花的mRNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的DNA，再經(jīng)PCR技術(shù)擴(kuò)增，A正確；基因文庫(kù)構(gòu)建時(shí)是將目的基因與載體連接起來(lái)，形成重組載體，再導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存和擴(kuò)增，提取目的基因時(shí)不需使用限制酶，B錯(cuò)誤；連接目的基因與質(zhì)粒的酶是DNA連接酶，C錯(cuò)誤；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，不使用大腸桿菌，D錯(cuò)誤。答案：A2．(2012年高考廣東卷)培育草莓脫毒苗所采用的主要技術(shù)是()A．組織培養(yǎng)B．細(xì)胞雜交C．顯微注射D．核移植解析：本題主要考查現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)。由于植物分生組織中病毒很少或沒(méi)有病毒，常用莖尖通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒苗；細(xì)胞雜交通常用于培育雜種個(gè)體；顯微注射技術(shù)常用于基因工程，培育轉(zhuǎn)基因生物；核移植技術(shù)常用于培養(yǎng)克隆動(dòng)物。故只有A選項(xiàng)符合題意。答案：A

3．(2011年高考江蘇卷)在利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，相關(guān)敘述正確的是()A．用蒸餾水將NaCl溶液濃度調(diào)至0.14mol/L，濾去析出物B．調(diào)節(jié)NaCl溶液濃度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分雜質(zhì)C．將絲狀物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色D．用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同

解析：在物質(zhì)的量濃度為0.14mol/L的NaCl溶液中，DNA的溶解度最低，DNA存在于析出物中，故不能濾去析出物，A項(xiàng)錯(cuò)誤；利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，進(jìn)行相應(yīng)操作，可在實(shí)驗(yàn)中去除部分雜質(zhì)，B項(xiàng)正確；進(jìn)行DNA鑒定時(shí)，加入二苯胺試劑后再經(jīng)沸水浴才能出現(xiàn)藍(lán)色，C項(xiàng)錯(cuò)誤；用菜花作為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，要加入一定的洗滌劑和食鹽，進(jìn)行充分?jǐn)嚢韬脱心?，過(guò)濾后收集研磨液，D項(xiàng)錯(cuò)誤。答案：B

4．(2010年高考浙江卷)將無(wú)根的非洲菊幼苗轉(zhuǎn)入無(wú)植物激素的培養(yǎng)基中，在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是()解析：由題意知，培養(yǎng)基中無(wú)植物激素，故無(wú)法進(jìn)行正常的植物組織培養(yǎng)過(guò)程。而非洲菊可通過(guò)扦插方式用莖進(jìn)行繁殖，故此過(guò)程可相當(dāng)于植物扦插過(guò)程，最終可形成一完整植株。答案：B5．(2012年高考新課標(biāo)全國(guó)卷)根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段，其末端類(lèi)型有________和________。(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下：AATTC……GG……CTTAA為使運(yùn)載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割，該酶必須具有的特點(diǎn)是__________________________________________________________。

(3)按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類(lèi)，即________DNA連接酶和________DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是________，產(chǎn)物是________。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，常采用________技術(shù)。(5)基因工程中除質(zhì)粒外，________和________也可作為運(yùn)載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是_____________________________。解析錢(qián)：此題學(xué)考查泉基因取工程轉(zhuǎn)應(yīng)用云的相畫(huà)關(guān)知岡識(shí)。(1伍)D匠NA分子戲經(jīng)限疼制酶勉切割氧產(chǎn)生腫的DN誘A片段風(fēng)末端酬通常鎮(zhèn)有黏鼓性末凍端和沫平末臺(tái)端兩兩種類(lèi)絨型。(2帳)為使女運(yùn)載爬體與湯目的敬基因翅相連旁，應(yīng)燭使二灑者被總切割考后產(chǎn)巨生的踢末端睡相同巷，故亦用另攪一種德限制管酶切沸割產(chǎn)懷生的壞末端摘必須快與Ec爛oRⅠ切割拔產(chǎn)生走的末籠端相刪同。(3咳)根據(jù)公酶的牙來(lái)源盟不同借，DN證A連接恭酶分艙為E·co步liDN落A連接枕酶和T4DN閣A連接載酶。(4彈)以RN刮A為模覽板，聽(tīng)合成DN滔A的過(guò)浙程稱(chēng)阻為逆鉗轉(zhuǎn)錄余，若柿要體丈外獲烏得大室量DN受A分子晌，可夕以使泡用PC牽R技術(shù)湊。(5箱)在基工因工雖程中滴，通死常利身用質(zhì)分粒作熄為運(yùn)擴(kuò)載體鑼?zhuān)硇馐杀┚w類(lèi)和動(dòng)禾植物騾病毒儀也可霞作為奸運(yùn)載置體。(6氧)大腸鑒桿菌幻玉作為左受體糞細(xì)胞拾時(shí)，乖常用Ca2＋處理掩，使后之成灶為能鉤吸收驗(yàn)周?chē)璀h(huán)境逢中DN姻A分子券的感腐受態(tài)拉細(xì)胞迎。答案器：(1佩)黏性棋末端盜平彈末端(2鉤)切割肥產(chǎn)生假的DN前A片段費(fèi)末端鋼與Ec送oRⅠ切割徹產(chǎn)生蠟的相固同(其他占合理佛答案趴也可)(3狀)大腸扯桿菌T4(4佳)m茄RN退A(或RN億A)cD漲NA(或DN削A)PC巴R(5珠)噬菌探體越動(dòng)植輔物病脅毒(其他鐵合理紀(jì)答案華也可)(6鵝)未處蠅理的因大腸稻桿菌塘吸收優(yōu)質(zhì)粒(外源DN列A)的能臺(tái)力極猶弱(其他震合理灶答案表也可)6．(2闖01尊2年高見(jiàn)考福千建卷)肺細(xì)使胞中呈的le鎮(zhèn)t－7基因偵表達(dá)械減弱斥，癌廊基因RA餓S表達(dá)偶增強(qiáng)渣，會(huì)攝引發(fā)較肺癌緩。研擇究人舅員利削用基瞇因工春程技晉術(shù)將le斥t－7基因脆導(dǎo)入途肺癌尖細(xì)胞夜實(shí)現(xiàn)嶄表達(dá)蠻，發(fā)仿現(xiàn)肺諸癌細(xì)鑒胞的詳增殖站受到接抑制乳。該廉基因宴工程愉技術(shù)盾基本量流程拒如圖1。圖1圖2請(qǐng)回泊答：(1咱)進(jìn)行笨過(guò)程①時(shí)，軟需用__絮__圖__捏__酶切恥開(kāi)載遺體以游插入le增t－7基因滋。載澡體應(yīng)醫(yī)有RN主A聚合算酶識(shí)勸別和模結(jié)合惕的部拉位，臺(tái)以驅(qū)太動(dòng)le父t－7基因粉轉(zhuǎn)錄四，該悟部位托稱(chēng)為_(kāi)_向__透__畫(huà)__。(2墓)進(jìn)行壓過(guò)程②時(shí)，尖需用__擴(kuò)__律__妹__酶處街理貼炎附在黃培養(yǎng)嚇皿壁封上的開(kāi)細(xì)胞存，以澆利于外傳代劫培養(yǎng)師。(3粗)研究找發(fā)現(xiàn)滔，le塘t－7基因符能影鬧響癌恒基因RA套S的表隸達(dá)，塌其影灘響機(jī)淹理如羨圖2。據(jù)殘圖分暗析，絕可從技細(xì)胞吳中提鄙取__融__載__這__進(jìn)行呆分子尾雜交修，以敘直接鑰檢測(cè)le眼t－7基因賺是否圾轉(zhuǎn)錄軟。肺碰癌細(xì)轉(zhuǎn)胞增車(chē)殖受霸到抑旱制，壺可能擦是由業(yè)于細(xì)削胞中__趴__上__某__孤(R附AS切m夜RN眾A/忌RA忠S蛋白)含量辨減少翁引起兇的。解析撓：此題捧考查鐵基因箭工程艱應(yīng)用漲的相央關(guān)知捕識(shí)。(1滴)構(gòu)建腳基因證表達(dá)稀載體拼時(shí)，撈需要斑用同則種限稠制酶撞切割封目的級(jí)基因朱和載崖體，壤使之子產(chǎn)生粘相同狗的黏逮性末欺端。其載體碑應(yīng)有只啟動(dòng)暫子、娛終止條子和東標(biāo)記惜基因么，其相中啟質(zhì)動(dòng)子謊是RN浪A聚合洞酶識(shí)哪別和謊結(jié)合莫部位惱，驅(qū)賊動(dòng)基吸因轉(zhuǎn)按錄。(2浸)動(dòng)物容細(xì)胞米培養(yǎng)跪時(shí)，豈常用辯胰蛋困白酶戰(zhàn)處理崗貼壁像的細(xì)顆胞，黨使之匪相互妻分離振，以文利于輸傳代訓(xùn)培養(yǎng)云。(3節(jié))檢驗(yàn)峰目的叼基因燒是否食表達(dá)誰(shuí)，常扇用分端子雜麻交法扮。從項(xiàng)被導(dǎo)窩入目夕的基諷因的原細(xì)胞得內(nèi)提微取RN語(yǔ)A，與顯目的調(diào)基因封單鏈幣雜交轟，如饅果出磨現(xiàn)雜威交帶紙，說(shuō)范明目蠢的基柱因已痰轉(zhuǎn)錄搞。由伙圖2知，夾當(dāng)le科t－7基因蜓轉(zhuǎn)錄役出來(lái)籍的mi繁RN武A與癌畝基因RA找S轉(zhuǎn)錄水出的mR灘NA雜交碗時(shí)，批就會(huì)刺抑制RA岔S蛋白杰的產(chǎn)位生，額故肺涼癌細(xì)菠胞增耳殖受儀到抑六制，甲可能侄是由竟于細(xì)述胞中RA起S蛋白編含量芳減少瘋引起折的。答案束：(1辜)限制半性核哈酸內(nèi)孔切(或限益制)啟動(dòng)搏子(2叔)胰蛋遷白(3逝)R帽NARA島S蛋白1．DN最A(yù)重組纏技術(shù)偶的基橡本工維具2.操作蠅程序(1品)目的瀉基因胳的獲烏?、?gòu)幕鲆蛭募?xì)庫(kù)中稀獲取舒。②利用PC姐R技術(shù)苦擴(kuò)增膨：其牌實(shí)質(zhì)嚴(yán)是在傅體外加對(duì)目竭的基遍因進(jìn)絮行大架量復(fù)侮制。③用化齊學(xué)方誤法人翅工合忠成a．對(duì)抬于核揚(yáng)苷酸脂序列捉已知瞧的直胡接人賞工合裳成。(2翠)基因鉤表達(dá)孔載體投的構(gòu)殘建(基因澆工程匹的核懇心)①構(gòu)建昏目的落：使最目的皂基因奧在受至體細(xì)眨胞中盒穩(wěn)定湖存在算，并拌且可混以遺奏傳給夫下一駱代，床同時(shí)仔，使新目的驕基因示能夠槐表達(dá)姻和發(fā)夕揮作跨用。②一個(gè)滴基因耀表達(dá)閘載體譜的組咽成：劫目的偵基因掏、啟稠動(dòng)子籠、終吧止子浸、標(biāo)存記基癥因等(如圖地所示)。③構(gòu)建芽方法(3樓)將目垂的基幕因?qū)R入受東體細(xì)朽胞——轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化謝實(shí)質(zhì)禿：目床的基恰因整況合到筑受體敲細(xì)胞頓染色嘆體基蘭因組默中。(4綢)目的銀基因普的檢飯測(cè)和挑鑒定[特別金提醒](1繪)一般冠使用貨同一現(xiàn)種限續(xù)制酶凡切割踢目的搬基因削和載種體(載體朱上帶脖有標(biāo)預(yù)記基非因)。特住殊情商況下?tīng)C，只偉要切君下的雪末端弦相同響，也鄉(xiāng)豐可使耐用不遭同的譜限制妻酶。(2哈)目的劉基因峽導(dǎo)入賓受體遮細(xì)胞束不是罩基因房誠(chéng)工程越成功僻的標(biāo)漲志，幕基因矮工程器是否辦成功捕表現(xiàn)析在目雕的基考因是頓否成避功表敬達(dá)。[要點(diǎn)桑整合]1．蛋鋪白質(zhì)雙工程創(chuàng)與基凈因工駱程的雨比較2.基因及診斷激與基綠因治現(xiàn)療(1暗)基因繭診斷芝：DN腿A分子揪雜交資法(即DN混A探針押法)，該塞方法推是根添?yè)?jù)堿避基互騾補(bǔ)配致對(duì)原砍則，乓把互懂補(bǔ)的訂雙鏈DN遣A解開(kāi)拖，把然單鏈?zhǔn)械腄N佛A小片蹤蝶段用分同位靠素、孝熒光姜分子局或化兩學(xué)發(fā)綢光催傳化劑功等進(jìn)史行標(biāo)店記，粒之后方同被腦檢測(cè)斷的DN汁A中的雕同源妖互補(bǔ)秤序列芬雜交留，從攏而檢世出所洪要查禁明的DN娛A或基嫂因。(2偶)基因搶治療影的方魯法：新基因府置換凱、基揮因修珍復(fù)、境基因精增補(bǔ)而、基徑因失均活等基。(3震)基因顏治療各的途肥徑①體外刮基因椒治療般：先盒從病前人體新內(nèi)獲正得某背種細(xì)憶胞進(jìn)捕行培餅養(yǎng)，校然后淹在體嶼外完障成基幸因轉(zhuǎn)緞移，團(tuán)再篩遼選成粒功轉(zhuǎn)斬移的角細(xì)胞武擴(kuò)增蒼培養(yǎng)燃，最喉后重宵新輸染入患勇者體慮內(nèi)。墊如腺議苷酸滴脫氨勤酶基位因的并轉(zhuǎn)移說(shuō)。②體內(nèi)蔬基因舟治療圈：用帆基因酷工程狂的方攜法，爛直接豪向人棕體組礦織細(xì)錢(qián)胞中棄轉(zhuǎn)移豬基因嚇的治抽療方補(bǔ)法。(4縣)基因許治療企的過(guò)適程(以鐮古刀型婆細(xì)胞最貧血屈癥的勁治療諸過(guò)程攝為例)3.徒DN店A的粗懂提取致與鑒醒定(1問(wèn))基本貞原理①DN齒A在不殖同濃萬(wàn)度的Na俗Cl溶液壟中的練溶解盯度不叫同，艙在0.傻14敗m識(shí)ol懶/L的Na蛇Cl溶液可中的弦溶解啞度最兵低。②DN屈A不溶鋪于酒涼精溶懇液。③DN猶A不被虧蛋白陜酶水候解。④DN糊A可被勉二苯灘胺染顯成藍(lán)凍色。(2蟲(chóng))主要厲步驟澇：選普取材尚料→破碎娘細(xì)胞封，獲柜取含DN邊A的濾由液→去除徹濾液究中的銅雜質(zhì)→DN場(chǎng)A的析卸出與斑鑒定已。(3勇)注意患事項(xiàng)①選擇嫂動(dòng)物津細(xì)胞慢時(shí)，尿細(xì)胞庫(kù)比較景容易虎破碎只，選槍擇植巖物細(xì)依胞時(shí)腸則要轉(zhuǎn)先溶鉤解細(xì)稅胞膜(如加伙洗滌硬劑、期研磨范等)。②以鳥(niǎo)耀類(lèi)血早液為事材料歡時(shí)，涂需向哀血液擴(kuò)中加吊入檸渣檬酸男鈉抗朽凝。③二苯冶胺需鋤現(xiàn)用斑現(xiàn)配多。1．下宅圖為瞞利用委生物勻技術(shù)你獲得貧生物竟新品弊種的吧過(guò)程勁示意鮮圖。捏據(jù)圖澆回答賺：(1喉)隨著副科技域發(fā)展適，獲播取目捏的基致因的固方法嬌也越發(fā)來(lái)越體多，床若乙稀圖中路的“肆抗蟲(chóng)杜基因育”是銷(xiāo)利用鞏甲圖什中的謊方法倡獲取叨的，遭該方報(bào)法稱(chēng)忍為_(kāi)_積__繩__含__剖__辦__。圖匹中①劉過(guò)程目與細(xì)寄胞中DN秀A復(fù)制依過(guò)程匯相比螺，該戴過(guò)程積不需廣要__題__弓__運(yùn)__伶__連__酶。③是旱在__悟__凳__共__弟(填“仍酶的徐名稱(chēng)景”)作用莫下進(jìn)途行延籠伸的浙。(2以)在培靠育轉(zhuǎn)房誠(chéng)基因霞植物增的研礦究中豎，卡遮那霉絹素抗舞性基招因(ka問(wèn)nr)常作顛為標(biāo)踐記基匙因，洲只有下含卡北那霉錢(qián)素抗建性基情因的李細(xì)胞擾才能層在卡嗎那霉稠素培格養(yǎng)基炭上生施長(zhǎng)。嚇乙圖慣為獲原得抗本蟲(chóng)棉匪技術(shù)備的流勉程。A過(guò)程鳳需要遠(yuǎn)的酶啊有__貝__鐮__浩__、__焦__衰__辮__。圖賽中將巷目的林基因描導(dǎo)入音植物膜受體劉細(xì)胞鹽采用毛的方敬法是__棕__付__功__。C過(guò)程廳的培晨養(yǎng)基姓除含矩有必勿要營(yíng)瞎養(yǎng)物照質(zhì)、玻瓊脂毯和激笑素外落，還絮必須奏加入__艦__毯__沖__。(3涂)離體何棉花功葉片繩組織躺經(jīng)C、D、E成功雕地培皮育出鼻了轉(zhuǎn)旱基因派抗蟲(chóng)捐植株鎮(zhèn)，此錘過(guò)程傭涉及右的細(xì)箱胞工日程技種術(shù)是__尼__鞋__跪__，該淘技術(shù)呼的原籠理是__稱(chēng)__續(xù)__沉__怨__抱__鉛__辜__霧__豬__還__喚__漫__肆__央__笑__今__單__悅__燭__啞__或__歡__晨__凳__助__躲__畢__墨__糟_。(4臂)檢測(cè)艇目的太基因獵是否辜轉(zhuǎn)錄擁出mR傻NA的具藥體方賓法是繡使用__憲__甚__泊__與提舒取出括的__賀__喉__謀__做分詳子雜早交。(5份)科學(xué)述家將腹植物胳細(xì)胞聽(tīng)培養(yǎng)望到__球__字__淹__，包送上人澤工種蘇皮，碎制成降了神翅奇的甜人工踐種子楊，以逆便更蝕好地上大面籌積推饞廣培蹦養(yǎng)。解析胸：(1勤)圖甲廣是利緩用目統(tǒng)的基場(chǎng)因作術(shù)為模懲板的沾基因練體外簡(jiǎn)擴(kuò)增收過(guò)程鄉(xiāng)豐，即危利用收了PC槳R技術(shù)例擴(kuò)增聽(tīng)目的恢基因她。圖堂甲中①過(guò)程燈利用占高溫蹤蝶使DN莖A雙鏈擇解旋艇，因截是在替高溫木環(huán)境甘下合鐘成DN證A，故及所需礦的DN射A聚合啞酶是應(yīng)熱穩(wěn)鼓定性學(xué)較高流的Ta灶q酶。(2椒)圖乙束中A過(guò)程撫是獲中得重已組質(zhì)垮粒的質(zhì)過(guò)程弦，該港過(guò)程秘需要嚷用限丹制性伶內(nèi)切觀酶對(duì)涼質(zhì)粒酒、目訪的基劣因進(jìn)溫行切查割，芒再在DN州A連接扮酶的看催化熱作用沫下形陡成重監(jiān)組質(zhì)益粒。歐因土貌壤農(nóng)部桿菌濟(jì)易侵艙染植愁物細(xì)引胞，埋故一嫩般用缸土壤億農(nóng)桿攤菌轉(zhuǎn)估化法偵將目支的基成因?qū)钊胫渤蔽锛?xì)談胞。將培養(yǎng)歡基中蹲加入端卡那功霉素跌是為除了篩藥選導(dǎo)斜入重穗組質(zhì)蓋粒的納受體史細(xì)胞收。(3沿)利用鄙植物觀組織圣培養(yǎng)遍技術(shù)滅可以簡(jiǎn)將帶閃有目費(fèi)的基零因的恩植物啦細(xì)胞匹培育爛成轉(zhuǎn)慎基因湊植株起，該細(xì)技術(shù)櫻利用分了植解物細(xì)我胞全泡能性噸原理賄。(4粒)因mR群NA堿基舊可以逼與目洋的基棉因模別板鏈址堿基渡互補(bǔ)識(shí)配對(duì)暢，故那可用秋標(biāo)記朵的目防的基床因作武探針遠(yuǎn)對(duì)細(xì)施胞中寒的mR菌NA進(jìn)行烈檢測(cè)睛，以刪確定敢目的旱基因藏是否行轉(zhuǎn)錄忙。(5稱(chēng))將培低養(yǎng)到箱分化霞出不暖定芽查的胚蓬狀體龜包上鉛人工袍種皮殊，可始以獲穗得人針工種述子。答案脾：(1盲)利用PC我R技術(shù)鉤擴(kuò)增砍目的批基因和解濟(jì)旋治熱穩(wěn)孕定DN雄A聚合跪酶(Ta蹦q酶)(2脅)限制檔性核級(jí)酸內(nèi)如切酶DN鏈A連接撇酶予農(nóng)桿臂菌轉(zhuǎn)嘉化法卡那檢霉素(3襖)植物孟組織蜘培養(yǎng)懇細(xì)狹胞全鐵能性(4戰(zhàn))標(biāo)記刃的目柿的基序因mR忙NA分子(5延)胚狀浮體(或答執(zhí)“不探定芽乖”“冶頂芽臉”“載腋芽從”也逆可)[核心邀強(qiáng)化]1．植刺物組封織培林養(yǎng)和浪動(dòng)物味細(xì)胞即培養(yǎng)灰的區(qū)烤別[特別座提醒](1超)植物括組織損培養(yǎng)雀的目亞的不濕同，優(yōu)培養(yǎng)寺階段帝不同羊：若揮生產(chǎn)舞人工備種子者，則溜培養(yǎng)天到胚密狀體割階段洪；若鞠提取須細(xì)胞服產(chǎn)品欲，則飼一般繳培養(yǎng)監(jiān)到愈輩傷組味織階欺段；棍若培乓養(yǎng)新帳個(gè)體析，則糞應(yīng)培者養(yǎng)到亂試管紋苗階尖段。(2困)動(dòng)物西細(xì)胞屈工程憲常用鼻的技滔術(shù)手栽段有為：動(dòng)踢物細(xì)月胞培則養(yǎng)(基礎(chǔ))、動(dòng)襖物細(xì)棚胞融匯合、瓜動(dòng)物雄細(xì)胞宗核移濟(jì)植、覆生產(chǎn)抵單克凡隆抗津體等突。2．植垃物體木細(xì)胞嗎雜交抵和動(dòng)合物細(xì)集胞融客合的吼比較[特別穴提醒](1璃)在誘丘導(dǎo)劑惠的作莫用下趁進(jìn)行震細(xì)胞樣融合正，兩銳兩融肌合形紋成的域雜種梯細(xì)胞娛有三仗種：AA型、BB型和AB型，暗只有AB型才款是我鋪們所吳需的訓(xùn)雜種缸細(xì)胞念，因使此需意要用沒(méi)選擇駛培養(yǎng)燒基進(jìn)拔行篩伐選。(2征)動(dòng)物孫細(xì)胞墊融合差和植勢(shì)物體能細(xì)胞意雜交賓產(chǎn)生病的后遣代中尺都含過(guò)有兩旦個(gè)親搜本的駛遺傳至物質(zhì)翠；植花物組士織培錯(cuò)養(yǎng)和端人工行種子困產(chǎn)生職的后香代中輩都只惹含一秀個(gè)親沙本的棟遺傳蹄物質(zhì)渴。(3被)植物耐體細(xì)妻胞雜爺交后鍋的細(xì)倉(cāng)胞具驕有全弟能性勺，動(dòng)晴物細(xì)暫胞融孤合后論的產(chǎn)殃物沒(méi)淋有全歷能性截。[要點(diǎn)蕩整合]1．植圈物體慶細(xì)胞窩雜交(1貪)表示貪細(xì)胞煩融合蹈完成妄的標(biāo)哨志是硬新的固細(xì)胞愉壁的戰(zhàn)生成突。(2骨)植物陣體細(xì)櫻胞雜殃交的信終點(diǎn)辛是培性育成蓬雜種錄植株吳，而冶不是權(quán)形成勾雜種核細(xì)胞坐就結(jié)循束。專(zhuān)雜種孔植株粥的特膜征：煉具備東兩種摧植物檔的遺獸傳特私征，品原因蠻是雜激種植蹤蝶株中太含有咬兩種里植物棟的遺啊傳物慈質(zhì)。(3攪)體細(xì)通胞雜許交即罰兩個(gè)透細(xì)胞搞融合狹成一臣個(gè)細(xì)訊胞，沒(méi)不管母染色蘿體、傾基因跡組還屢是染簽色體紙組都征采用甘直接插相加燙的方食法。狹若一湊植物如細(xì)胞級(jí)含有2N條染般色體失，2個(gè)染獸色體具組，誘基因真型為Aa碼bb，另唉一植僑物細(xì)蹦胞含煉有2M條染總色體殊，2個(gè)染馬色體壯組，陪其基悠因型股為cc獲Dd，則鑒新植厚株應(yīng)喊為四蓮倍體權(quán)，其假體細(xì)亮胞中娛染色培體為2N＋2M，基儉因型廊為Aa講bb儲(chǔ)cc味Dd。2．單伶克隆女抗體(1鳥(niǎo))生產(chǎn)押?jiǎn)慰舜嗦】够梵w的爽方法焰有三病種①利用膠動(dòng)物她細(xì)胞王融合杰技術(shù)脾形成哥的雜筒交瘤榜細(xì)胞歲生產(chǎn)貍單克翁隆抗飼體；②將目傘的基牧因?qū)Т_入漿朗細(xì)胞假，利礙用基庫(kù)因工固程生王產(chǎn)單森克隆避抗體短；③利用蜘動(dòng)物毫細(xì)胞渣核移殺植技拘術(shù)生膜產(chǎn)單藍(lán)克隆犬抗體東。(2殼)制備隊(duì)單克碑隆抗軋?bào)w過(guò)瓶程中傷有兩翠次篩發(fā)選在單波克隆頑抗體管的制牢備過(guò)病程中首，要略獲得晌較多膽的雜碎交瘤噸細(xì)胞艘必須歐經(jīng)過(guò)蔑多次康篩選逆。第一架次篩怖選是精將未丙融合偉的B淋巴炒細(xì)胞神、骨瓣髓瘤驕細(xì)胞色以及BB融合葬、瘤激瘤融贊合的嚇細(xì)胞村通過(guò)唉選擇欣培養(yǎng)套基淘敢汰，純篩選乳出B瘤融泡合的皇細(xì)胞捕。第二集次篩菜選是臉將產(chǎn)娘生特咬定抗加體的B瘤細(xì)請(qǐng)胞通政過(guò)細(xì)珠胞培氏養(yǎng)用幸相應(yīng)惹抗原島檢測(cè)海的辦拐法篩輸選出相來(lái)。有因?yàn)榭緩捏w淋內(nèi)取類(lèi)免疫此過(guò)的B淋巴爆細(xì)胞勢(shì)時(shí)取折出很吧多種矩，形防成的筐雜交喂瘤細(xì)顏胞有筐很多澇種，灑所以屑需篩綁選出正產(chǎn)生腫特定閃抗體騰的雜悠交瘤括細(xì)胞包。2．科舒學(xué)家際用小裝鼠骨氏髓瘤哈細(xì)胞逝與某煮種細(xì)顛胞融齡合，疾得到喘雜交晚細(xì)胞巷，經(jīng)亡培養(yǎng)屆可產(chǎn)淺生大增量的蒜單克陜隆抗斬體，命下列嫩有關(guān)扎敘述圍正確嫌的是()A．雜雷交瘤號(hào)細(xì)胞花的獲銷(xiāo)得是B細(xì)胞輔與骨蒙髓瘤津細(xì)胞蹲的融撫合B．用竄纖維引素酶族處理B淋巴所細(xì)胞磚與小杰鼠骨壇髓瘤漂細(xì)胞C．培殊養(yǎng)獲宜得的喘雜交雞瘤細(xì)攻胞既芽可以島產(chǎn)生愧干擾忙素，灣也可例以在工體外呆無(wú)限饒?jiān)鲋矰．篩狹選雜訴交瘤績(jī)細(xì)胞氏，并路從中航選出艱能產(chǎn)鞋生所段需抗蜘體的補(bǔ)細(xì)胞請(qǐng)群，皆培養(yǎng)翼后提拒取單憤克隆侵抗體解析般：小鼠透的骨僅髓瘤拆細(xì)胞援與經(jīng)奇過(guò)免饞疫的B淋巴呆細(xì)胞手融合煌成雜左交瘤拌細(xì)胞猶，在吼體外物培養(yǎng)餐的條逼件下家無(wú)限嫂繁殖苗，產(chǎn)烏生特速異性駛的單憐一抗寒體，滾不產(chǎn)孤生干守?cái)_素評(píng)，A、C錯(cuò)。抱動(dòng)物咸細(xì)胞刊沒(méi)有書(shū)細(xì)胞崗壁，阻融合怠之前貞不需喪要酶擠解法鋒去掉薯細(xì)胞杰壁，B錯(cuò)。答案池：D一、貫區(qū)分隨一個(gè)勝至多循個(gè)限恭制酶務(wù)切點(diǎn)矮與每忘種酶辭一個(gè)餃切點(diǎn)1．一斃個(gè)至駕多個(gè)它限制盞酶切搜點(diǎn)：網(wǎng)作為志載體肢必須書(shū)具有苦一個(gè)沉至多惱個(gè)限境制酶那切點(diǎn)扎，以自便與袖外源融基因吩連接堵。2．每爺種酶唇一個(gè)仆切點(diǎn)答：每汽種酶蝦的切輝點(diǎn)最跡好只尾有一晶個(gè)。鑒因?yàn)閲@某種蠟限制唇酶只雷能識(shí)類(lèi)別單牙一切永點(diǎn)，權(quán)若載蓮體上拿有一限個(gè)以疾上的頃酶切鳴點(diǎn)，這則切蠟割重剩組后說(shuō)可能為丟失紙某些侄片段茂，若艱丟失喬的片癢段含柳復(fù)制擔(dān)起點(diǎn)角區(qū)，物則進(jìn)跨入受渾體細(xì)絡(luò)胞后起便不傘能自謝主復(fù)且制。落一個(gè)絹載體貍?cè)糁徊庞心持t種限影制酶啟的一結(jié)個(gè)切清點(diǎn)，櫻則酶營(yíng)切后相既能巾把環(huán)姨打開(kāi)澡接納慰外源DN屋A片段尚，又績(jī)不會(huì)查丟失坑自己挖的片鄭段。二、作根據(jù)垮受體型種類(lèi)吹確定葵基因騾工程若的受滿體細(xì)勺胞受體線種類(lèi)裳不同需，所戶用的宴受體蟻細(xì)胞炒種類(lèi)用也不抵相同井。1．植漠物：籃由于丘植物歪細(xì)胞養(yǎng)有全奪能性擺，植鐵物體加細(xì)胞語(yǔ)經(jīng)過(guò)觸植物鈴組織提培養(yǎng)沉能夠棟形成焦生物逆體，溫所以寄植物融的受歡體細(xì)淋胞一孤般是婦體細(xì)踩胞。2．動(dòng)緞物：頌由于篇?jiǎng)游锬屑?xì)胞擦沒(méi)有貫全能調(diào)性，橋不能只由一處個(gè)體升細(xì)胞霸培養(yǎng)肌成一是個(gè)個(gè)季體，點(diǎn)所以僻動(dòng)物永基因昏工程勉的受濕體細(xì)纖胞不環(huán)是體緊細(xì)胞悲，而吸是受豎精卵住。3．微賽生物困：多娃用原語(yǔ)核生晴物細(xì)項(xiàng)胞，掌因?yàn)槭猎顺嵘镫p繁殖華快，服多為剪單細(xì)泄胞，送遺傳敞物質(zhì)撐相對(duì)序較少稅。三、旋轉(zhuǎn)化鄭的含匠義及奮實(shí)質(zhì)目的窩基因古進(jìn)入陵受體忽細(xì)胞紐奉內(nèi)，塵并且懂在受菊體細(xì)碎胞內(nèi)廚穩(wěn)定唉維持互和表脹達(dá)的雹過(guò)程僅，稱(chēng)阿為轉(zhuǎn)剖化。餃轉(zhuǎn)化史的實(shí)賞質(zhì)是偵目的霜基因丸整合幅到受左體細(xì)環(huán)胞染卷色體糟基因夏組中蜘，從慌而使宣受體幸生物滾獲得眉新的鐵遺傳灘特性飯的現(xiàn)妹象，伯從其似變化浙的實(shí)釣質(zhì)看證，這雞種變嗚異屬店于可皮遺傳悲變異帖中的謠基因弱重組桿。四、荒容易植混淆睬的三楚種細(xì)椅胞——雜種乞細(xì)胞竿、重惰組細(xì)谷胞和哭雜交晉細(xì)胞1．雜蠅種細(xì)寧胞：宵植物罷體細(xì)毛胞雜僻交過(guò)扣程中護(hù)，兩平種細(xì)踢胞去翠掉細(xì)賄胞壁傭之后紅形成嫂的原槳生質(zhì)枯體融后合，屑融合睜的原蝴生質(zhì)現(xiàn)體形兩成細(xì)從胞壁保之后疾形成篩的細(xì)維胞叫緞雜種慶細(xì)胞幸。2．重仍組細(xì)揚(yáng)胞：索體細(xì)駕胞的或細(xì)胞柱核移執(zhí)植到丑去核蛙卵母頂細(xì)胞統(tǒng)之后散形成幫的細(xì)乏胞叫鮮重組弄細(xì)胞境。3．雜刑交細(xì)鉆胞：音動(dòng)物偶細(xì)胞披融合磨形成蓄的細(xì)襪胞常旅稱(chēng)為躍雜交識(shí)細(xì)胞嬸。五、紋從結(jié)昨果來(lái)侄分析肅原理1．植鮮物體駛細(xì)胞沃雜交屠：植酷物體巨細(xì)胞驢雜交脹包含星兩個(gè)謙過(guò)程抵，一皆是植槍物細(xì)訂胞融睜合，垮二是亮雜種達(dá)細(xì)胞君的植洲物組熱織培嘆養(yǎng)。攜其最緣瑞終結(jié)容果是嶺形成呆雜種紐奉植株斤，產(chǎn)榨生了日一個(gè)獻(xiàn)生物示體，完因此冠其原賽理是奪：細(xì)棍胞膜在的流售動(dòng)性戒和細(xì)哀胞的拿全能畏性。2．動(dòng)塵物細(xì)博胞融復(fù)合：寸動(dòng)物黃細(xì)胞否融合知形成膚雜交朋細(xì)胞孫，雜畜交細(xì)返胞進(jìn)溪行細(xì)導(dǎo)胞培坑養(yǎng)，包獲得侄大量冒的克潑隆細(xì)午胞，買(mǎi)但沒(méi)稀有形郊成生唉物體仍，因練此動(dòng)競(jìng)物細(xì)老胞融鼠合的周原理第是細(xì)守胞增卷殖和警細(xì)胞繭膜的凡流動(dòng)悼性，妄不包煩含細(xì)稍胞全才能性威。六、脅克隆扮動(dòng)物屠與試躺管動(dòng)責(zé)物認(rèn)萍識(shí)的曉誤區(qū)1．誤區(qū)薄一：試管撤動(dòng)物認(rèn)與克鐮隆動(dòng)辟物的昆產(chǎn)生代都是污無(wú)性血生殖沾。糾正活：試籮管動(dòng)運(yùn)物的史產(chǎn)生滴是有部性生透殖，飼克隆懷動(dòng)物獨(dú)的產(chǎn)棵生是彈無(wú)性殊生殖執(zhí)。2．誤區(qū)籌二：試管含動(dòng)物(哺乳鉛類(lèi))的產(chǎn)刑生是清在體鋤外進(jìn)災(zāi)行的道，克偷隆動(dòng)編物(哺乳房誠(chéng)類(lèi))的產(chǎn)準(zhǔn)生是旨在體警內(nèi)進(jìn)樓行的禾。糾正愛(ài)：試面管動(dòng)蓄物(哺乳門(mén)類(lèi))和克慕隆動(dòng)碗物(哺乳腦類(lèi))早期腫胚胎糧之前越都是右在體笨外進(jìn)累行的住，早遞期胚蘿胎經(jīng)伶過(guò)胚易胎移長(zhǎng)植之孝后是爺在體久內(nèi)進(jìn)自行的3．誤區(qū)琴三：胚胎這移植姜的優(yōu)木勢(shì)是艱充分妹發(fā)揮坑雌性睬優(yōu)良眼個(gè)體穿的繁按殖潛擊力，改因此掠胚胎拐移植成的胚脆胎只并能來(lái)也自體察內(nèi)受夠精的遼胚胎湖。糾正去：胚織胎移挖植的四胚胎羽有三辨?zhèn)€來(lái)竹源：朵體內(nèi)崗正常剝受精側(cè)產(chǎn)生狹的胚盈胎、周核移悼植產(chǎn)廉生的號(hào)重組敞細(xì)胞倆培養(yǎng)瓣而來(lái)揀的胚材胎、輔體外衫受精頁(yè)產(chǎn)生五的早牧期胚巾胎。［例1］(2植01陵1年高個(gè)考四攪川卷)北極腸比目究魚(yú)中毒有抗貝凍基藍(lán)因，械其編貴碼的魂抗凍搭蛋白浴具有11個(gè)氨捧基酸貌的重郵復(fù)序閣列，護(hù)該序挪列重及復(fù)次牌數(shù)越度多，啊抗凍手能力休越強(qiáng)乞。下識(shí)圖是卷獲取打轉(zhuǎn)基遷因抗打凍番混茄植交株的賣(mài)過(guò)程得示意攏圖，轟有關(guān)笑敘述遇正確攔的是()A．過(guò)鎮(zhèn)程①獲取雜的目箭的基葉因，佩可用齒于基膨因工偏程和幅比目鏟魚(yú)基交因組城測(cè)序B．將伐多個(gè)蝴抗凍阻基因懇編碼薪區(qū)依街次相極連成辜能表晃達(dá)的快新基抬因，懷不能惱得到愧抗凍需性增拼強(qiáng)的發(fā)抗凍預(yù)蛋白C．過(guò)厭程②構(gòu)成底的重泄組質(zhì)叨粒缺賠乏標(biāo)自記基以因，撥需要殖轉(zhuǎn)入這農(nóng)桿替菌才攜能進(jìn)殃行篩窄選D．應(yīng)書(shū)用DN投A探針盜技術(shù)易，可雨以檢鞏測(cè)轉(zhuǎn)平基因新抗凍旦番茄先植株需中目使的基慣因的瞞存在喝及其家完全芽表達(dá)[解析]因?yàn)閭ヒ环N丸氨基濤酸可斥能對(duì)火應(yīng)多異種密府碼子逆、真耀核生牌物體跌內(nèi)的順基因攜含有搶內(nèi)含狹子等狀因素嘆，導(dǎo)歲致逆嗓轉(zhuǎn)錄渾合成提的目豬的基醋因與組原基主因有慘較大能的差專(zhuān)異，環(huán)所以龜人工離合成練的目盼的基絹因不密能用醒于比今目魚(yú)施基因征組測(cè)茂序，A選項(xiàng)慕錯(cuò)誤脾；抗?fàn)€凍蛋舊白的11個(gè)氨腰基酸曠的重熟復(fù)序圍列重冶復(fù)次影數(shù)越裕多，怠抗凍叼能力久越強(qiáng)門(mén)，并鮮不是脫抗凍竄基因月的編頁(yè)碼區(qū)俯重復(fù)淚次數(shù)貝越多梢抗凍著能力脂越強(qiáng)鳳，抗境凍基編因編堡碼區(qū)躁依次雨相連唯形成斥的新?lián)窕蛲Ｒ巡幌⑹窃粊?lái)的良抗凍簽基因嶺，因懇此不冠能得捐到抗楊凍性告增強(qiáng)堆的抗里凍蛋濁白，B選項(xiàng)盤(pán)正確去；農(nóng)烤桿菌辟轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)法是頌將目鐵的基倆因?qū)а耆胫矎V物細(xì)揀胞的肢最常懇用方都法，升不是傷為了桿篩選告含有虹標(biāo)記猾基因總的質(zhì)租粒，C選項(xiàng)銅錯(cuò)誤奶；應(yīng)瓶用DN末A探針千技術(shù)唇，可挨以檢伶測(cè)轉(zhuǎn)采基因剃植物鏈中目份的基懲因的糊存在蓋，但廟不能杜完成鍛對(duì)目片的基饒因表參達(dá)的鞠檢測(cè)圈，D選項(xiàng)扎錯(cuò)誤艙。[答案]B［例2］(2燦01完2年高挖考山常東卷)毛角滴蛋白Ⅱ型中泥間絲(K席IF竄Ⅱ)基因蔽與絨德山羊舒的羊者絨質(zhì)惜量密貌切相學(xué)關(guān)。天獲得守轉(zhuǎn)KI耍FⅡ基因崗的高撲絨質(zhì)葡絨山蒸羊的呢簡(jiǎn)單榴流程通如圖雀。(1漁)過(guò)程①中最辭常用與的運(yùn)河載工膨具是__惜__活__潮__，所寬需要銀的酶乳是限狐制酶蠅和__巧__比__出__。(2要)在過(guò)裝程②中，寨用__袖__破__斧__處理?yè)螌⑵て谀w組壺織塊臣分散之成單追個(gè)成龍纖維戒細(xì)胞恭。在鑄培養(yǎng)先過(guò)程裝中，杠將成固纖維鋒細(xì)胞線置于5%稅CO2的氣自體環(huán)淡境中伏，CO2的作皇用是__疼__鋪__充__。(3桂)在過(guò)容程③中，舞用__友__鹽__童__處理灘以獲問(wèn)取更勺多的嫌卵(母)細(xì)胞憶。成厲熟卵(母)細(xì)胞屈在核旱移植淹前需殼要進(jìn)曠行__判__養(yǎng)__盟__處理蜻。(4遣)從重顫組細(xì)惱胞到輕早期禽胚胎弓過(guò)程坡中所肝用的透胚胎鍋工程歌技術(shù)妖是__瓶__友__悟__。在約胚胎塑移植把前，譽(yù)通過(guò)__尼__誼__漏__技術(shù)根可獲剛得較稼多胚就胎。[解析]此題巖綜合稍考查能基因近工程英、細(xì)些胞工西程、育胚胎臨工程毛等知駐識(shí)。(1踢)構(gòu)建扒基因耀表達(dá)甚載體網(wǎng)時(shí)，插一般鐘需用抓同一取種限爬制酶提切割材目的型基因踏和載厘體，貧以產(chǎn)身生相途同黏炸性末等端，旦并用DN抖A連接樂(lè)酶連就接成鄰重組儲(chǔ)表達(dá)戒載體澇。常襖用的刺載體堤是質(zhì)爪粒。(2渾)利用嚴(yán)胰蛋艦白酶參或膠凡原蛋筍白酶貴可將千動(dòng)物兵組織腫分散元成單洪個(gè)細(xì)糖胞。針動(dòng)物腿細(xì)胞陡培養(yǎng)賽時(shí)，臭需將零細(xì)胞小置于5%嚇C懶O2的氣強(qiáng)體環(huán)醫(yī)境中濱，CO2的作眠用是襲維持波培養(yǎng)菊液的pH。(3方)運(yùn)用題超數(shù)斬排卵責(zé)法可抓獲得吵更多洲的卵香母細(xì)冒胞，濤常用南的激羨素是辣促性倍腺激宋素或紫促濾況泡素添。成杜熟卵捧細(xì)胞蒜在核暫移植學(xué)前要魂進(jìn)行孝去核優(yōu)處理顆。(4犯)核移救植時(shí)行獲得辟的重價(jià)組細(xì)籍胞經(jīng)排過(guò)早礎(chǔ)期胚杠胎培兇養(yǎng)，楚可以量獲得粗早期來(lái)胚胎稻。為躺獲得扛更多礙胚胎模，可務(wù)以使宋用胚爐胎分指割法透。[答案](1堡)質(zhì)粒DN腹A連接工酶(2醋)胰蛋地白酶(或膠然原蛋述白酶)維持婦培養(yǎng)絡(luò)基(液)的pH(3緊)促性砍腺激香素(或促路濾泡隸素，雞孕馬籌