DB36T 1800-2023 靈芝菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20CCSB30

DB36發(fā)布發(fā)布江西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局2024010120230701江 西 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB36/T1800—2023靈芝菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程TechnicalregulationsforspawnproductionofGanodermalingzhiDB36/T1800DB36/T1800—2023DB36/T1800DB36/T1800—2023II目??次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術(shù)語(yǔ)和定義 1場(chǎng)地環(huán)境 2設(shè)施設(shè)備 2生產(chǎn)技術(shù) 2菌種生產(chǎn)檔案 4IIII前??言本文件按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由江西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件起草單位：江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)應(yīng)用微生物研究所。本文件主要起草人：胡佳、魏云輝、戴丹、彭新紅、孫鵬。11GB/T12728中確定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1靈芝Ganodermalingzhi靈芝俗稱赤芝、紅芝、靈芝草等，是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴中藥材，隸屬于擔(dān)子菌門（Basidiomycota）、蘑菇AaricoceesoporaesGanoerataceaGanoderm。3.2菌種spawn生長(zhǎng)在適宜基質(zhì)上具有結(jié)實(shí)性的菌絲純培養(yǎng)物。包括母種（一級(jí)種）、原種（二級(jí)種）和栽培種（三級(jí)種）。3.3母種stockculture經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，也稱為一級(jí)種。3.4原種motherspawn3 術(shù)語(yǔ)和定義靈芝菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了靈芝菌種生產(chǎn)的場(chǎng)地環(huán)境、設(shè)施設(shè)備、生產(chǎn)技術(shù)、菌種生產(chǎn)檔案。本文件適用于工廠化生產(chǎn)企業(yè)或?qū)I(yè)合作社生產(chǎn)靈芝母種、原種和栽培種。規(guī)范性引用文件GB5749 生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則GB/T12728 食用菌術(shù)語(yǔ)NY/T528 食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1276 母種生產(chǎn)母種生產(chǎn)PDA稱取200100L水煮沸20n～30n100m20g葡萄糖和15g～20g瓊脂粉，pH自然。分裝和滅菌將配制好的PDA培養(yǎng)基分裝至18mm×180mm或20mm×200mm玻璃試管的1/3處。試管口應(yīng)保持干保持30min。制作斜面滅菌后的試管冷卻至60℃左右，將試管傾斜擺放在操作臺(tái)桌面上，試管口比試管底部高1.0cm～1.5cm，做成培養(yǎng)基斜面，斜面長(zhǎng)度約為試管長(zhǎng)度的2/3。26 生產(chǎn)技術(shù)具備配料室、裝袋室、滅菌室、接種室、培養(yǎng)室、貯藏室等設(shè)施。5.2 基本設(shè)備粉碎機(jī)、磅秤、天平、高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋、操作臺(tái)、超凈工作臺(tái)或接種箱、空調(diào)、除濕機(jī)、培養(yǎng)架、恒溫培養(yǎng)箱、冰箱、顯微鏡等。生產(chǎn)量大的菌種廠還應(yīng)配備攪拌機(jī)、裝袋機(jī)。由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物，也稱為二級(jí)種。3.5栽培種plantingspawn場(chǎng)地環(huán)境生產(chǎn)場(chǎng)地選擇528的規(guī)定。生產(chǎn)用水生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749的規(guī)定。設(shè)施設(shè)備基本設(shè)施336.1.8 母種保藏在1℃～4℃下避光保藏，保藏期不超過90d。無(wú)菌檢測(cè)隨機(jī)抽取3%～5%的試管斜面（每批抽樣量不得少于10支），在30℃±2℃下培養(yǎng)2d，檢查有無(wú)微生物菌落，無(wú)菌落的為合格。接種超凈工作臺(tái)或接種箱在接種前用紫外滅菌燈照射30min以上，接種人員要注意清潔衛(wèi)生，嚴(yán)格按無(wú)3cm接種鏟在母種試管中挑取3mm～5mm直徑的菌塊迅速轉(zhuǎn)接到待接斜面培養(yǎng)基上，接種位置為培養(yǎng)基斜面前端1cm培養(yǎng)接種后的試管置于253天和第7天分別進(jìn)行逐個(gè)檢驗(yàn)，挑出未活、污染和生長(zhǎng)不良的不合格試管。菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)母鐘感官質(zhì)量要求見表1。表1 母種感官要求項(xiàng)目要求容器完整、無(wú)損、潔凈試管塞干燥、潔凈、松緊適度，能透氣和濾菌斜面長(zhǎng)度斜面頂端距試管塞底部距離40mm～50mm接種塊大小邊長(zhǎng)3mm～5mm，厚2.5mm～3mm菌種外觀菌絲生長(zhǎng)量菌絲剛長(zhǎng)滿斜面或占斜面2/3以上菌絲體特征整齊濃密、絲狀或絨毛狀，潔白菌落邊緣均勻、整齊角變無(wú)拮抗現(xiàn)象無(wú)原基無(wú)脫壁無(wú)斜面背面外觀培養(yǎng)基貼壁、不干縮，顏色均勻、無(wú)暗斑、無(wú)明顯色素氣味有靈芝菌種特有的香味，無(wú)酸、臭、霉等異味原種、栽培種生產(chǎn)培養(yǎng)料培養(yǎng)料應(yīng)符合NY5099的規(guī)定。配方一：木屑78%，麥麩20%，石膏1%，過磷酸鈣1%。配方二：棉籽殼80%，麥麩18%，石膏1%1%。配方三：棉籽殼50％，木屑30％，麥麩17％，蔗糖1％，石膏1％，石灰1％。拌料按照培養(yǎng)料配方準(zhǔn)確稱取生產(chǎn)所需各種原材料。將原料加水混合后充分拌勻。培養(yǎng)料含水量控制在60%～65%。裝袋（12cm～17cm）×（22cm～28cm）×0.005cm的低壓聚乙（15cm～17cm）×（35cm～38cm）×0.005cm的低壓聚乙烯滅菌4h內(nèi)升溫至100℃后保持冷卻滅菌結(jié)束后，待滅菌鍋內(nèi)溫度降至60℃～70℃，趁熱將料袋搬運(yùn)到潔凈的接種室內(nèi)自然冷卻。接種2875%（袋培養(yǎng)接種后的菌袋放在培養(yǎng)室內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)室要求環(huán)境干凈衛(wèi)生，且通風(fēng)、避光、保溫條件良好，溫度控制在23℃～281276和GB/T8321的規(guī)定。培養(yǎng)期檢查培養(yǎng)3d后開始不定期檢查，及時(shí)清理污染雜菌、生長(zhǎng)不良等不合格菌袋。菌種質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)原種和栽培種感官質(zhì)量要求見表2。455生產(chǎn)檔案應(yīng)載明生產(chǎn)地點(diǎn)、時(shí)間、數(shù)量、培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)條件、菌種來(lái)源、操作人、技術(shù)負(fù)責(zé)人、檢驗(yàn)記錄、菌種流向等內(nèi)容。生產(chǎn)檔案應(yīng)當(dāng)保存至菌種售出后2年。在1℃～4℃下避光保藏，保藏期不超過50d。7 菌種生產(chǎn)檔案表2 原種和栽培種感官要求項(xiàng)目要求容器完整、無(wú)損、潔凈棉塞或無(wú)棉塑料蓋干燥、潔凈、松緊適度，能透氣和濾菌