不同原因逼尿肌不穩(wěn)定模型的建立及尿動力學(xué)測定結(jié)果比較

不同原因逼尿肌不穩(wěn)定模型的建立及尿動力學(xué)測定結(jié)果比較

強制性尿肌緊張（t）是臨床上最常見的尿肌緊張綜合征之一。它是導(dǎo)致尿頻、尿急、尿失禁和其他臨床癥狀的最常見原因。在嚴重的情況下，腎、排尿、腎衰竭等疾病也會導(dǎo)致腎衰竭。引起DI的原因較多,其中較常見原因有以下幾類:①膀胱出口梗阻:一般認為DI是膀胱出口梗阻后逼尿肌代償反應(yīng)的一種表現(xiàn)形式;②神經(jīng)源性:常見于有骶髓上神經(jīng)病變或損害者,如脊髓外傷、腫瘤、腦血管意外等;③特發(fā)性:最常見,因其尚無明確的病因故稱為特發(fā)性。本實驗通過建立上述原因所致逼尿肌不穩(wěn)定動物模型以及對尿流動力學(xué)檢測結(jié)果分析,為進一步進行DI的后續(xù)研究提供幫助。1大鼠尿動力模型的建立1.1動物分組:健康雌性SD大鼠80只,體質(zhì)量180~220g,3~4月齡,購自第三軍醫(yī)大學(xué)實驗動物中心,所有大鼠引進后均行充盈性膀胱測壓,根據(jù)測壓結(jié)果將動物分為穩(wěn)定組和原發(fā)性不穩(wěn)定組17只(IDI),其中穩(wěn)定組又采用隨機分組法分為脊髓損傷組(SCI)20只、膀胱流出道梗阻33只(BOO)組和正常對照組10只(Control)。其中SCI組和BOO組于膀胱造瘺后1周分別行L1~2脊髓橫斷術(shù)和膀胱流出道部分結(jié)扎術(shù)以制作逼尿肌不穩(wěn)定模型。并于術(shù)后6周再行膀胱壓力容積測定。1.2主要儀器:Nidoc970型尿動力儀(成都電子科技大學(xué)維信有限公司);AVI-270微量灌注泵(3M公司,美國)。1.3動物模型的建立:大鼠均用1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)腹腔注射麻醉。1.3.1膀胱造瘺:麻醉后仰臥位固定,取下腹部正中切口,切開顯露膀胱,于膀胱頂部插入直徑為1mm導(dǎo)管,荷包縫合固定于膀胱壁上。導(dǎo)管經(jīng)皮下隧道自頸背部皮膚引出,妥善固定,外口以消毒塑料塞封閉。1.3.2BOO模型制作方法:以直徑為1mm的探子插入尿道,切開顯露膀胱,細心游離膀胱頸部與尿道交界處,用3-0絲線環(huán)形結(jié)扎尿道,松緊以牽拉探子周圍組織可隨之移動,而探子又可以輕易拔出為度。1.3.3SCI模型制作方法:俯臥位,切開暴露T12~L3椎板,于L1~2處橫斷脊髓,縫合皮膚。1.3.4動物護理:①適量使用抗生素:慶大霉素0.5mg/kg,腹腔注射,1/d,共2d;②SCI組大鼠自造瘺管間斷排空膀胱,4/d;③保持造瘺管通暢,慶大霉素液(1∶50)沖洗導(dǎo)管,1/隔日。妥善固定造瘺管,防止脫落及移位;④保持動物籠清潔干燥,術(shù)后單獨喂養(yǎng),予常規(guī)飲食。1.4充盈性膀胱測壓:大鼠1%戊巴比妥腹腔注射麻醉(40mg/kg),以硬膜外導(dǎo)管經(jīng)尿道插入膀胱,導(dǎo)管經(jīng)三通管與尿動力儀及微量灌注泵相連。輕壓腹部,排空膀胱尿液,生理鹽水以0.2ml/min的速度灌注膀胱。參照大鼠DI的判斷標準,在膀胱低壓充盈期出現(xiàn)造成膀胱內(nèi)壓升高超過15cmH2O(1cmH2O=0.098kPa)的逼尿肌收縮時即為DI。同時記錄膀胱最大容積,膀胱充盈期間壓力-容積變化曲線,膀胱順應(yīng)性C=△V/△P。模型成功后膀胱測壓經(jīng)造瘺管,其余操作同上。1.5統(tǒng)計學(xué)處理:數(shù)據(jù)以xˉ±sxˉ±s表示,采用SPSS10.10統(tǒng)計分析軟件行單變量方差分析。2結(jié)果2.1重新兩模型成功組充盈性膀胱測壓檢測,正常大鼠中逼尿肌不穩(wěn)定(IDI)發(fā)生率為21.3%(17/80);BOO模型組33只,尿路感染,尿漏死亡4只,模型成功29只,其中22只出現(xiàn)DI,發(fā)生率為75.9%;SCI組20只,尿路感染,造瘺管脫出導(dǎo)致模型失敗共2只,模型成功18只,其中18只出現(xiàn)DI,發(fā)生率為100%。對照組(Control)10只全部存活。2.2參考圖。4.各種模型組和對照組的填充膀胱壓積曲線：見圖1.43討論3.1模型的構(gòu)建3.1.1臨床癥狀中的不良反應(yīng)特發(fā)性逼尿肌不穩(wěn)定通常指沒有明確的病因(如梗阻或者神經(jīng)源性因素等),而患者的確存在尿頻、尿急、急迫性尿失禁等臨床癥狀者。臨床上,大約有10%的男性和29%的女性患者存在著特發(fā)性逼尿肌不穩(wěn)定,但是對于其生理或者病理生理變化還缺乏研究,治療上也以對癥為主,效果不佳。我們測定在正常大鼠中IDI的發(fā)生率為21.3%,與李新等結(jié)果相近,低于文獻的報道。3.1.2對于陰道粘結(jié)的影響膀胱流出道梗阻(BOO)是引起逼尿肌不穩(wěn)定的常見原因,在男性多以良性前列腺增生為主。關(guān)于BOO動物模型的方法,在模型制作中最為重要的是應(yīng)盡量避免非梗阻因素對逼尿肌功能的影響。本實驗采用的方法關(guān)鍵在于選擇探子的口徑和掌握尿道結(jié)扎的力度。內(nèi)徑太粗或者結(jié)扎尿道過松,達不到梗阻目的,內(nèi)徑太細或者結(jié)扎過緊往往因完全性急性尿潴留及局部組織缺血壞死,導(dǎo)致模型動物短期內(nèi)死亡,另外分離膀胱頸部尿道時,應(yīng)避免過多銳性分離,防止損傷膀胱下動脈導(dǎo)致出血感染,同時避免損傷膀胱以及陰道造成尿漏;本方法優(yōu)點在于對近端尿道結(jié)扎后內(nèi)徑均為1mm,保證成年大鼠形成的梗阻程度和效果接近一致,同時對尿道及膀胱頸局部損傷小,成本低,手術(shù)時間短,模型存活率高87.9%(29/33),DI發(fā)生率為75.9%(22/29),適合于較大數(shù)量的動物實驗研究,值得推廣。3.1.3損傷髓胞的檢測引起逼尿肌不穩(wěn)定的眾多原因中,除BOO外,骶髓上脊髓損害最為常見,其所引起的膀胱功能障礙稱之為神經(jīng)源性膀胱(neurogenicbladder),尿動力學(xué)檢查表現(xiàn)的逼尿肌不穩(wěn)定稱之為逼尿肌反射亢進(detrusorhyperreflexia)。本試驗通過損傷脊髓來建立逼尿肌反射亢進模型。損傷大鼠脊髓可采用多種方法,有胸高位、胸低位及腰高位等。如果損傷脊髓平面過高,則動物常因呼吸衰竭和植物神經(jīng)反射亢進而死亡;本試驗選用腰1~2平面損傷脊髓,在保證骶髓排尿中樞(S2~4)完整性的同時,還減少了自主神經(jīng)反射異常等機體功能變化對膀胱排尿功能的影響,同時也減少了創(chuàng)傷對機體的影響,從而可以更好的研究脊髓損傷后低位排尿中樞與膀胱逼尿肌功能之間的關(guān)系。結(jié)果證明,本方法建立模型,動物存活率高90%(18/20),其中1例因膀胱造瘺管脫出導(dǎo)致模型失敗,另1例因尿路感染死亡,DI發(fā)生率為100%(18/18)。3.2低順應(yīng)性人類社會功能異常導(dǎo)致sda的結(jié)果逼尿肌在外力作用下的可擴展性稱為逼尿肌的順應(yīng)性(complianceC)。在體內(nèi)可用膀胱內(nèi)單位壓力改變引起容積改變的大小表示。本研究顯示,與正常對照組相比,膀胱出口梗阻6周后,BOO組膀胱最大容量及順應(yīng)性均明顯增大(P<0.05),表明膀胱流出道梗阻早期,膀胱功能處于代償期,容積增大,表現(xiàn)為高順應(yīng)性膀胱;隨著梗阻時間的進一步延長,梗阻程度進一步加重,膀胱功能失代償,出現(xiàn)低順應(yīng)性膀胱。IDI組膀胱容量以及順應(yīng)性和正常對照組相比無顯著性差異(P>0.05)。SCI組膀胱容量及及順應(yīng)性與正常對照組相比均減小(P<0.05),正常情況下,儲尿期上行性神經(jīng)將膀胱充盈的信息不斷傳入大腦,下行性神經(jīng)不斷地將抑制逼尿肌收縮的指令下達到脊髓逼尿中樞,以保證儲尿期內(nèi)無逼尿肌的收縮。L1~2損傷后,骶髓逼尿肌中樞保持完整,但失去了上位神經(jīng)中樞的反饋調(diào)節(jié),因而自發(fā)的產(chǎn)生興奮,引起逼尿肌無抑制性收縮,逼尿肌反射亢進,導(dǎo)致膀胱順應(yīng)性減低,容量減小,尿動力學(xué)檢查表現(xiàn)為低容量低順應(yīng)性膀胱。綜上所述,膀胱流出道梗阻,骶上性脊