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文檔簡介
植物解剖與制片技術(shù)PlantAnatomyandSectioningTechnology學(xué)時(shí)分配:理論課4學(xué)時(shí);實(shí)驗(yàn)課24學(xué)時(shí)。教學(xué)目的:通過對(duì)植物制片技術(shù)的掌握,為研究植物胚胎學(xué)、植物解剖學(xué)、作物栽培、遺傳育種等教學(xué)、科研提供必備的技術(shù)。主要參考書目:1植物顯微技術(shù),王灶安主編,農(nóng)業(yè)出版社;2植物制片技術(shù),李正理編著,科學(xué)出版社;3《西北植物學(xué)報(bào)》,《植物研究》,《武漢植物學(xué)研究》,《植物分類學(xué)報(bào)》等學(xué)術(shù)雜志。考核方式:撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告:對(duì)所觀察的器官結(jié)構(gòu)進(jìn)行詳細(xì)的描述并作進(jìn)一步的討論,附上植物器官顯微結(jié)構(gòu)圖。植物顯微制片技術(shù)
植物制片的類型和方法切片法:徒手切片法
石蠟切片法滑走切片機(jī)切片法半薄切片法超薄切片法非切片法:離析法壓片法整體封存法石蠟法制片原理與方法
一、材料的選擇與分割
1.新鮮、健康、有代表性的材料;
2.生長發(fā)育的不同階段;3.大小適當(dāng),0.5cm左右.
二、殺生、固定與保存
殺生:固定:
1根據(jù)固定目的物本身的結(jié)構(gòu)性質(zhì);
2分割大的材料;
3抽氣;
4標(biāo)記.(整染)
固定液的配置及使用:
FAA固定液:適用范圍:根、莖、葉、花藥、子房固定時(shí)間:24h低溫配方:福爾馬林5ml
冰醋酸5ml70%酒精90ml
卡諾固定液:適用范圍:根尖、花藥、子房固定時(shí)間:小于24h,15-30分鐘配方:ab
純酒精15ml30ml
氯仿5ml
冰醋酸5ml1ml
保存:
70%酒精三、脫水
作用:1
除去組織內(nèi)的水分;
2使石蠟順利進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)脫水劑:
1酒精:50%--70%--85%--95%--100%(梯度脫水)
2二氧雜環(huán)己烷
3正丁醇
4叔丁醇
5丙酮
四、透明作用:1
使材料透明、干凈;
2便于包埋劑及封固劑的進(jìn)入透明劑:
1二甲苯:1/2純酒精+1/2二甲苯——二甲苯
2甲苯或苯;
3氯仿
4丁香油、香柏油等五、浸蠟
1低溫浸蠟:40℃左右(1夜)
2高溫浸蠟:58℃左右(6小時(shí)以內(nèi))六、包埋
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