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2023/10/15Copyright?Jiangyong轉基因西紅柿請您欣賞2023/10/15Copyright?Jiangyong抗蟲害作物2023/10/15Copyright?Jiangyong2023/10/15Copyright?Jiangyong番木瓜優(yōu)良抗病品種2023/10/15Copyright?Jiangyong金大米2023/10/15Copyright?Jiangyong地雷探測草擬南芥2023/10/15Copyright?Jiangyong不會引起過敏的大豆2023/10/15Copyright?Jiangyong轉基因芥菜可減輕土壤污染2023/10/15Copyright?Jiangyong彩色玉米2023/10/15Copyright?Jiangyong巨型鮭魚2023/10/15Copyright?Jiangyong熒光魚2023/10/15Copyright?Jiangyong超級奶牛2023/10/15Copyright?Jiangyong培育出人耳的小鼠2023/10/15Copyright?Jiangyong轉基因豬2023/10/15Copyright?Jiangyong基因工程1944年確認了遺傳的物質基礎是DNA。1953年JWatson和FCricK提出了DNA雙螺旋結構模型,1958年MMesselson和FWStahl證實了DNA半保留復制的機制,揭示了生物界遺傳性狀能世代遺傳的分子奧秘。重要的里程碑:雙螺旋結構的確立

1962年WSzybalski和ESzybalski

用人類DNA去轉化人類細胞,發(fā)現Ca2+有刺激DNA轉移入細胞的作用,是人工轉移遺傳物質給其它細胞的第1次嘗試。

1965年,Jacobf基因操縱子.1968年,NirenbergM,遺傳密碼.1967年Nirenberg提出遺傳工程可用于人類的基因治療。

60年代分子生物學作為一門獨立學科正式出現70年代初Graessmann和Dicumako莫定了用顯微注射法轉移基因。

1972年Grahant等對磷酸鈣介導的DNA轉移過程進行了詳細的研究,使這技術能被普遍接受和應用。

1972年,P.Berg:構建第一個DNA重組分子

2種病毒DNA的重組

1973年,S.S.Cohen:第一個基因克隆實驗基因工程的開始

1977年,基因工程產品的出現

H.W.Boyer,第一個基因工程產品(SS)

somatostatin

生長素釋放抑素70年代出現基因工程并有初步成果基因重組技術80年代的代表性研究領域基因工程產品的開發(fā)應用定點突變的研究與應用癌基因的發(fā)現

DNA-蛋白質分子相互辨認

PCR技術的出現人類基因組計劃開始醞釀90年代基因診斷技術漸趨成熟基因治療合法化人類基因計劃的啟動分子生物學各分支學科的建立與發(fā)展從20世紀50年代起,分子生物學領域的研究成果共獲得40項諾貝爾醫(yī)學-生理科學獎,說明分子生物學在生命科學研究中的重要性

根據桑格法開發(fā)的DNA自動定序機使一周(24小時運轉)解讀100萬甚至幾百萬個堿基成為可能。它為“人類基因組計劃”立下了汗馬功勞

2023/10/15Copyright?Jiangyong理論基礎DNA是遺傳物質的證明DNA雙螺旋結構和中心法則的確立遺傳密碼的破譯工程技術基因轉移載體的發(fā)現工具酶的發(fā)現DNA合成和測序技術的發(fā)現DNA體外重組的實現重組DNA表達實驗的成功第一例轉基因動物的問世PCR技術的發(fā)明基因工程:就是重組DNA技術,指在體外將不同來源的DNA進行剪切和重組,形成雜合DNA或稱嵌合DNA分子,然后將其導入特定的宿主細胞,得到大量擴增和表達,使宿主細胞獲得新的遺傳特性,產生新的基因產物。2023/10/15Copyright?Jiangyong已學:基因工程的“專用工具”基因的剪刀——限制性核酸內切酶基因的針線——DNA連接酶基因的運輸工具——運載體分子手術刀----限制性核酸內切酶(限制酶)磷酸二酯鍵EcoRI、SmaI限制酶提醒①切割的化學鍵為磷酸二酯鍵。②在切割目的基因和運載體時要求用同一種限制酶,目的是產生相同的黏性末端。③將一個基因從DNA分子上切割下來,需要2個限制酶,同時產生4個黏性末端2023/10/15Copyright?Jiangyong限制性核酸內切酶(限制酶)來源:主要從原核生物中分離化學本質:蛋白質作用:能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。特性:特異性。即限制酶識別特定的脫氧核苷酸序列,切割特定位點切割后的DNA末端:黏性末端;平末端分子縫合針----DNA連接酶功能:將切下來的DNA片段拼接成新的DNA分子種類T4DNA連接酶:既能“縫合”雙鏈DNA片段互補的黏性末端,也能“縫合”雙鏈DNA的平末端(效率低)E·coliDNA連接酶:只能將雙鏈片段互補的黏性末端連接常用載體質粒λ噬菌體的衍生物動植物病毒基因進入受體細胞的載體(分子運輸車)2023/10/15Copyright?Jiangyong2023/10/15Copyright?Jiangyong(1)載體是基因運輸工具,在基因操作過程中,使用載體有兩個目的:一是用它作為運載工具,將目的基因送到宿主細胞中去;二是利用它在宿主細胞內對目的基因進行大量復制。

(2)種類:質粒(既存在于原核生物細菌中,也存在

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