透皮促滲劑對(duì)鹽酸丁丙諾啡凝膠體外透皮特性的影響

透皮促滲劑對(duì)鹽酸丁丙諾啡凝膠體外透皮特性的影響

丁丙醇是一種混合的抗高血壓藥物，具有強(qiáng)烈的鎮(zhèn)痛作用，對(duì)生理功能的影響小。對(duì)疼痛和依賴的藥物治療沒有影響。一般采用肌肉或緩慢靜脈注射，6～8h重復(fù)給藥，口服首過效應(yīng)明顯，生物利用度僅為10%～15%。透皮治療系統(tǒng)具有提高藥物生物利用度、避免重復(fù)給藥、維持穩(wěn)定的血漿藥物治療濃度等優(yōu)點(diǎn)。目前，國內(nèi)尚未見有關(guān)丁丙諾啡透皮給藥的實(shí)驗(yàn)報(bào)道。作者制備了鹽酸丁丙諾啡凝膠（BHG），觀察透皮促滲劑氮酮和油酸對(duì)該給藥系統(tǒng)的影響，并探討鹽酸丁丙諾啡（BH）經(jīng)皮給藥的可行性。1材料和方法1.1儀器、試劑和儀器改良Franz擴(kuò)散池（山本制作所，日本），Waters高效液相色譜儀（515泵，996-UV檢測儀，7725進(jìn)樣器，美國），HJ-6多頭磁力攪拌器（金壇市富華電器有限公司），循環(huán)恒溫水浴加熱器（上海市實(shí)驗(yàn)儀器廠），卡波姆940（上海申新制藥廠），BH晶體（天津藥物研究所），丙二醇（汕頭新宇化工廠），油酸（汕頭西隴化工廠），氮酮（廣州精細(xì)化學(xué)工業(yè)公司）。1.2方法1.2.1．0.質(zhì)量分?jǐn)?shù)實(shí)驗(yàn)分為無促滲劑組和促滲劑組，其中無促滲劑組又分為含0.5%、1.0%、2.0%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）BH3組；促滲劑組根據(jù)含促滲劑不同又分為氮酮、油酸和混合組，氮酮組再分為含1%、2%、4%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）氮酮3組，油酸組在含1%BH基礎(chǔ)上，再分含2%、4%、6%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）油酸3組，混合組含4%油酸+4%氮酮。1.2.2加緩沖液及卡波姆840在已稱量的空白燒杯中加入BH晶體，用丙二醇溶解后加入促滲劑，加緩沖液至處方總量的90%，均勻撒入2.0g卡波姆940，然后靜置24h；加緩沖液至100g，攪拌均勻，得到BHG。1.2.3中心提供了學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供無毛小鼠體質(zhì)量為（25±5)g,由第一軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。無毛小鼠斷頭處死，取背部皮膚，剝離皮下脂肪，用打孔器取下直徑1.0cm的皮膚樣品，用生理鹽水沖洗干凈，-10℃冷藏。1.2.4色譜條件的確定檢測條件為C18柱（250mm×4.6mm），流動(dòng)相：甲醇-乙氰-2%醋酸銨-醋酸（62∶5∶31∶2），流速1ml/min，檢測波長280nm。精密稱取BH晶體20mg，置于50ml量瓶內(nèi)，加甲醇溶解并稀釋至刻度；精密吸取1、2、3、4、5、6ml，分別置于10ml容量瓶內(nèi)，加流動(dòng)相至刻度，得到系列標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別吸取25μl注入色譜儀，以BH峰面積對(duì)BH濃度作回歸處理，相關(guān)系數(shù)r=0.999，表明藥物濃度與色譜峰面積成線性關(guān)系，保留時(shí)間約4.8min。實(shí)驗(yàn)表明，擴(kuò)散池中的其他成分對(duì)藥物的高效液相色譜法測定沒有干擾。色譜圖見圖1。1.2.5透皮吸收促進(jìn)劑用量的測定—透皮裝置和方法將攪拌子放入Franz擴(kuò)散池，加入14.5ml磷酸鹽接受液（pH7.4），把小鼠皮置于上下兩室之間，真皮面向接受液，分別將各組不同配方BHG均勻涂于皮膚上。將擴(kuò)散池置于恒溫水浴槽（35℃）中，磁力攪拌器置于水浴槽下，攪拌速度為200r/min。分別于0.5、1、2、4、8、12、24、36h時(shí)取樣1ml，每次取樣后往擴(kuò)散池內(nèi)加入1ml接受液。樣品經(jīng)15000r/min離心，取上清液25μl進(jìn)行色譜檢測。隨行外標(biāo)法計(jì)算每個(gè)時(shí)間點(diǎn)接受液的藥物濃度，并按公式計(jì)算藥物累積滲透量和透皮滲透率。計(jì)算公式為：Js=Pe△C=1/A(dM/dt)，其中Js為穩(wěn)態(tài)透皮速率（μg/cm2·h),Pe為有效滲透系數(shù)（cm/h），△C為藥物擴(kuò)散濃度差，A為有效滲透面積（約0.785cm2),dM/dt為單位時(shí)間透皮的藥物累積量。每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。1.3統(tǒng)計(jì)處理應(yīng)用SPSS10.0軟件處理數(shù)據(jù)，多組Js比較行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)方差分析，多重比較采用SNK法。2結(jié)果2.1組比較見表1無促滲劑3組Js分別為（0.69±0.11）、（0.90±0.14）和（1.18±0.10）μg/cm2·h，提高率分別為0.76、1.00和1.31，組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。2.2促進(jìn)滲透劑組以含1%BH的無促滲劑組為對(duì)照。混合組促滲效果最明顯，Js為（13.22±1.27）μg/cm2·h。各組Js比較見表1。2.3合組患者釋放規(guī)律曲線對(duì)照組、4%氮酮組、4%油酸組、混合組24h內(nèi)藥物釋放規(guī)律曲線見圖2，可見促滲劑使凝膠的釋放規(guī)律由一級(jí)動(dòng)力學(xué)模型向近似零級(jí)動(dòng)力學(xué)模型轉(zhuǎn)變。3促滲劑濃度及用量藥物的理化性質(zhì)和藥物動(dòng)力學(xué)特性是影響其透皮速率的重要因素。BH分子質(zhì)量為504g/mol，熔點(diǎn)為262℃，油水分配系數(shù)為427，比較適合透皮吸收。但在未加促滲劑的條件下，BHG對(duì)皮膚滲透作用較弱，其釋放呈一級(jí)動(dòng)力學(xué)模型，僅提高藥物含量不能顯著提高Js，難以達(dá)到生物治療所要求的血藥濃度。透皮促滲劑是提高藥物透皮率的常用方法，已被廣泛接受的Barry脂質(zhì)-蛋白分配理論認(rèn)為，促滲劑的作用機(jī)制可能是：對(duì)增加藥物、共溶劑進(jìn)入角質(zhì)層起協(xié)同作用；破壞角質(zhì)層的高度有序結(jié)構(gòu)，增加其流動(dòng)性；與角質(zhì)層內(nèi)蛋白質(zhì)相互作用。促滲劑濃度與其促滲作用不成比例。油酸為常用的透皮促滲劑，能夠插入皮膚脂質(zhì)，形成不對(duì)稱的空間構(gòu)型，產(chǎn)生細(xì)微的易于滲透的流動(dòng)性孔道，同時(shí)降低角質(zhì)層脂質(zhì)雙分子層的相轉(zhuǎn)變溫度，增加膜脂運(yùn)動(dòng)自由度和流動(dòng)性。油酸濃度過高能產(chǎn)生皮膚損傷，其常用量<10%。與預(yù)想的濃度促滲劑越高促透皮作用越強(qiáng)不同，4%油酸組具有最高滲透率，4%油酸組Js高于6%組（P<0.01），可能原因是高濃度油酸破壞基質(zhì)卡波姆的分子膠聯(lián)結(jié)構(gòu)，影響B(tài)H從儲(chǔ)庫釋放。氮酮是20世紀(jì)80年代研制的新型促滲劑，其促透機(jī)制可能是與角化層間質(zhì)的脂質(zhì)發(fā)生作用，增加其流動(dòng)性，減少藥物的擴(kuò)散阻力，但其控制藥物通過完整皮膚的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制尚未明確。有文獻(xiàn)報(bào)道0.1%～5%氮酮有明顯的促滲作用，但其促滲效果并不與其濃度成正比，過高的濃度可能增加凝膠粘稠性，不利于凝膠透皮。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明，氮酮濃度高于2%時(shí)其促滲能力呈下降趨勢?；旌蟽煞N或多種促滲劑具有比單一促滲劑更好的促滲效果，對(duì)于難以透皮吸收的藥物，氮酮和油酸合用對(duì)透皮吸收有近似相加的結(jié)果。本實(shí)驗(yàn)混合組Js有顯著