基于uvfp的舒筋活血片定量化評(píng)價(jià)

基于uvfp的舒筋活血片定量化評(píng)價(jià)

根據(jù)“健康中國與健康中國”戰(zhàn)略研究報(bào)告，中醫(yī)藥和其他中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)應(yīng)納入國家衛(wèi)生和福利體系。進(jìn)一步提高傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的安全性、有效性和質(zhì)量。中藥質(zhì)量控制方法創(chuàng)新面臨新的時(shí)代發(fā)展機(jī)遇,因此開拓現(xiàn)代儀器分析技術(shù)的新方法迫切而重要。紫外光譜分析技術(shù)在藥物定量方面有著重要作用,但因特征信息單一導(dǎo)致其在中藥指紋圖譜研究方面未引起足夠重視。由于中藥提取液中包含藥味整體化學(xué)物質(zhì)組分,測(cè)定其一定波段范圍的紫外指紋圖譜(UVFP)可作為鑒定中藥的簡(jiǎn)捷準(zhǔn)確的新的整體定量技術(shù)手段。紫外光譜能定量檢測(cè)中藥不飽和化學(xué)鍵及共軛體系的化學(xué)物質(zhì)的總含量,尤其190~400nmUVFP對(duì)飽和化學(xué)鍵n→σ*也能產(chǎn)生較好地檢測(cè),這為中藥UVFP定量方法所含信息的準(zhǔn)確度提供了重要保證。依據(jù)UVFP特征性,本文提出了紫外指紋圖譜指數(shù)、信息量指數(shù)、波動(dòng)量指數(shù)和信息波動(dòng)量指數(shù)等理論以及紫外指紋定量法,形成UVFP超信息特征的數(shù)字化和定量化評(píng)價(jià)方法,并用190~400nmUVFP成功評(píng)價(jià)舒筋活血片(ShujinHuoxuetablet,SJHXT)質(zhì)量。SJHXT由紅花、香附(制)、狗脊(制)、香加皮、絡(luò)石藤、伸筋草、澤蘭葉、槲寄生、雞血藤和自然銅(煅)10味藥組方。有舒筋活絡(luò)和活血散瘀之功效,用于筋骨疼痛、肢體拘攣和腰背酸痛。文獻(xiàn)有薄層掃描法和高效液相色譜法測(cè)定一種或幾種成分含量,均無法準(zhǔn)確反映SJHXT質(zhì)量。本文建立了SJHXT數(shù)字化和定量化UVFP并籍此評(píng)價(jià)其質(zhì)量,力求客觀準(zhǔn)確地表征其化學(xué)組分的整體含量特征。本文將UVFP研制成一種能從多維數(shù)字化和定量化角度鑒別和精準(zhǔn)評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的新的有效技術(shù)方法,實(shí)現(xiàn)利用UVFP清晰、便捷和精確定量化地揭示中藥復(fù)雜巨系統(tǒng)的總體量化特征。1紫外fp超過信任的數(shù)字理論1.1紫外指數(shù)理論1.1.1組分檢測(cè)和定量評(píng)價(jià)把中藥紫外光譜各點(diǎn)看作指紋的峰點(diǎn)來代表不同化學(xué)組分在該波長的吸光度加和,利用UVFP全峰點(diǎn)可準(zhǔn)確定量評(píng)價(jià)中藥整體質(zhì)量,除不能有效檢測(cè)飽和化學(xué)鍵組分外,其具有信息充分和定量準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)。1.1.2指紋分辨率i1.1.3指紋頻率1.1.4指紋可靠性lr1.1.5吸光度總成分由指紋譜與橫軸圍成的面積,是代表中藥中所有化學(xué)成分的吸光度總和。采用辛普森積分法,峰點(diǎn)越多時(shí)計(jì)算積分越準(zhǔn)確。AUC是評(píng)價(jià)中藥全化學(xué)物質(zhì)總含量指標(biāo),當(dāng)ρ=1時(shí)即LR。1.1.6均化系數(shù)i1.1.7指紋空間利用率h1.1.8表中的輸入樣品數(shù)量q是把1mg中藥原料(制劑)提取液進(jìn)樣后測(cè)定UVFP,以表觀質(zhì)量表示中藥化學(xué)成分含量(單位為mg)。1.1.9中藥表面吸收系數(shù)e一定波長時(shí),由1mg中藥原料(中藥制劑)的提取液所產(chǎn)生的吸光度,見(9)式,通常用極大值表征中藥UVFP特征。1.1.1有效信息指數(shù)ls和有效信息的指數(shù)l是綜合信號(hào)大小、均化性(γ)、分辨率(β)和有效信息量的指數(shù),見(10)式。F代表指紋總強(qiáng)度、均化性、分辨率和信息量大小,它直接反映指紋信息多寡和信號(hào)大小及均化性。1.1.11.標(biāo)準(zhǔn)fr指數(shù)q1.1.12.固波長指數(shù)fr1.1.1中藥原料制劑表觀質(zhì)量f將1mg中藥原料(制劑)提取液進(jìn)樣后在200nm連續(xù)譜段檢測(cè)獲得的F,稱為相對(duì)指紋指數(shù)Fr,見(13)式。它綜合指紋總強(qiáng)度、均化性、信息量、波段效率和中藥原料(制劑)表觀取量等多維信息。n為指紋數(shù)、γ為均化系數(shù)、β為指紋分辨率、Ai為指紋吸光度、A0是n個(gè)指紋點(diǎn)幾何均數(shù)、Q是與一次進(jìn)樣量相當(dāng)?shù)闹兴幵?制劑)表觀質(zhì)量(μg)。當(dāng)DAD檢測(cè)器采集1000個(gè)峰點(diǎn)Ai=1.0時(shí),若γ=0.1、ρ=1和β=1,則F≤100;由絕對(duì)進(jìn)樣量決定Fr<100。1.2紫外信息理論1.2.1峰點(diǎn)熵si根據(jù)信息量理論定義光譜各峰點(diǎn)熵見(14)式,pi為各峰點(diǎn)吸光度歸一化值見(15)式,Ai是各峰點(diǎn)吸光度,AT是總吸光度。1.2.2總熵s1.2.3信息指數(shù)i1.2.4標(biāo)準(zhǔn)信息指數(shù)iq1.2.5內(nèi)部波長信息指數(shù)i1.2.6相對(duì)潛在風(fēng)險(xiǎn)指數(shù)由1mg中藥原料(制劑)提取液進(jìn)樣后,在200nm波段檢測(cè)獲得I稱為相對(duì)信息量指數(shù)Ir,見(20)式。它綜合信息量總強(qiáng)度、均化性、波段效率和取樣量等多維信息。1.2.7指數(shù)反比i1.3指紋偏差倍率1.3.1駐點(diǎn)數(shù)(Nsp)是指紋上一階導(dǎo)數(shù)為零點(diǎn)個(gè)數(shù)即曲線上的極值點(diǎn)數(shù),Nsp代表指紋波動(dòng)性。Nsp越大波動(dòng)度越大,但平滑會(huì)使之減少。1.3.2指紋極差(R)是指紋極大值與極小值之差,能表征曲線上指紋分布最大變異范圍和離散程度,R越大則離散越大。1.3.3極差倍率(Rstd)是最大吸光度與光譜極差R之比,見(22)式,反映指紋分布變異性和離散程度,Rstd越大離散越強(qiáng)。1.3.4中位比(m)是平均吸光度與最大吸光度之比,見(23)式,可反映指紋點(diǎn)集中趨勢(shì),m<0.5說明吸光度較小點(diǎn)多,m>0.5說明吸光度較大點(diǎn)多,當(dāng)m=1說明指紋所有點(diǎn)均等,此時(shí)均化性最好但特征性很差。1.4紫外波動(dòng)指數(shù)理論1.4.1信號(hào)傳遞度指數(shù)化率為4.是考慮指紋均化性γ、駐點(diǎn)數(shù)Nsp、極差倍率Rstd、有效信息熵和總強(qiáng)度的指數(shù),見(24)式,它綜合反映信號(hào)總強(qiáng)度、有效信息量、均化性和波動(dòng)度大小。當(dāng)最理想時(shí)γ=1、Nsp=0、m=1和Rstd→∞,顯然,此時(shí)AF為各點(diǎn)吸光度常用對(duì)數(shù)和,AF越大則均化性、信息量和信號(hào)越大。1.4.2標(biāo)準(zhǔn)波動(dòng)指數(shù)alrq1.4.3定波長波動(dòng)量指數(shù)afr將UVFP折算成在200nm波段獲得的AF稱為定波長波動(dòng)量指數(shù)AFr(λ),見(26)式。波段越小則波動(dòng)率越高,AFr(λ)是整合指紋總強(qiáng)度、有效信息量、均化性、波動(dòng)度和波段效率等信息。1.4.4相對(duì)波動(dòng)量指數(shù)afr由1mg中藥原料(制劑)提取液進(jìn)樣后,在200nm波段檢測(cè)獲得AF稱為相對(duì)波動(dòng)量指數(shù)AFr,見(27)式。是綜合指紋總強(qiáng)度、有效信息量、均化性、波動(dòng)度、波段效率和中藥原料(制劑)取量等多維波動(dòng)信息指數(shù)。1.5信息波動(dòng)指數(shù)的譜法1.5.1彈性指數(shù)是考慮均化性γ、駐點(diǎn)數(shù)Nsp、極差倍率Rstd和空間效率以及有效信息量,能反映總信息量波動(dòng)性的指數(shù),見(28)式。當(dāng)最理想時(shí)γ=1、Nsp=0、Rstd=∞時(shí)有,AI越大則有效空間信息量的波動(dòng)度越大。1.5.2標(biāo)準(zhǔn)信息的波動(dòng)指數(shù)q1.5.3波長信息波動(dòng)量指數(shù)將UVFP折算成在200nm波段獲得的AI稱為定波長信息波動(dòng)量指數(shù)AIr(λ),見(30)式。波段越小則指紋鑒定效率越高,AIr(λ)整合了信號(hào)總強(qiáng)度、有效空間信息量、均化性、波動(dòng)度和波段效率等信息。1.5.4相對(duì)信息波動(dòng)量指數(shù)由1mg中藥原料(制劑)提取液進(jìn)樣后,在200nm波段檢測(cè)獲得AI稱為相對(duì)信息波動(dòng)量指數(shù)AIr,見(31)式。是綜合信號(hào)總強(qiáng)度、有效空間信息量、均化性、波段效率和中藥原料(制劑)取量等多信息指數(shù)。1.5.5反演率a'1.6宏定量相似度pm監(jiān)測(cè)和類uvfp、mi紫外指紋定量法是以光譜點(diǎn)為計(jì)算單元,用宏定性相似度Sm監(jiān)測(cè)紫外指紋數(shù)量和分布比例,見(33)式;用宏定量相似度Pm監(jiān)測(cè)紫外指紋含量狀況,見(34)式,同時(shí)用變動(dòng)系數(shù)α限定紫外指紋變異性,見(35)式。xi與yi分別為樣品和對(duì)照UVFP各峰點(diǎn)吸光度,mRFP和mi分別為對(duì)照UVFP和樣品的進(jìn)樣質(zhì)量。用Sm、Pm和α鑒定中藥質(zhì)量。2建立rap方法2.1在aglent0103中的應(yīng)用紫外光譜能反映中藥中化學(xué)組分π→π*,n→π*及n→σ*化學(xué)鍵信息,由于不同的化學(xué)成分體系紫外吸收曲線具有指紋特征,故UVFP可用于中藥及其制劑質(zhì)量鑒定。采用流動(dòng)注射分析(FIA)方式采集UVFP,見圖1,即用空管路替代色譜柱,以DAD采集在線紫外信號(hào)至樣品無吸收為止,在Agilent1100高效液相色譜系統(tǒng)下完成分析。該系統(tǒng)流動(dòng)相與試樣間混合狀態(tài)高度重現(xiàn),故該法具有穩(wěn)定和重現(xiàn)的特點(diǎn)。2.2測(cè)定數(shù)據(jù)的平均化階段采用第2種方法標(biāo)準(zhǔn)(對(duì)照)UVFP生成方法有2種,(1)采用10批以上有代表性的中藥原料(藥材、提取物、配方顆粒等)或各類中成藥經(jīng)優(yōu)化的提取方法獲得的供試液所獲得紫外光譜全峰點(diǎn)進(jìn)行均化計(jì)算得到標(biāo)準(zhǔn)(對(duì)照)UVFP,是一個(gè)平均化模式。(2)用地道藥材(標(biāo)準(zhǔn)藥材)或標(biāo)準(zhǔn)中成藥制劑的供試液直接進(jìn)樣測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)(對(duì)照)紫外UVFP,一般為連續(xù)測(cè)定6次的平均化模式。顯然首推第2種方法更可取和更易實(shí)現(xiàn)隨行對(duì)照定量,當(dāng)然固定好恒定參照系是定量UVFP研究的關(guān)鍵所在。排除不同儀器間系統(tǒng)誤差對(duì)照UVFP可作為直接定性定量的標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)。2.3uvfp的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性依據(jù)樣品提取方法,可建立a.水溶性成分UVFP,b.脂溶性成分UVFP,c.全成分UVFP,d.特征有效組分群UVFP,提取方法的恒定性決定著UVFP的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性特征。UVFP具有測(cè)定快速(分析時(shí)間<1min),穩(wěn)定性和重現(xiàn)性高,定量信息豐富(因波長范圍寬),定量準(zhǔn)確度高和數(shù)字化特征顯著等特征。因此紫外UVFP盡管定性特征性單一,但所提供峰點(diǎn)的定量信息具有全面性和整體性,其全面反應(yīng)了中藥中化學(xué)成分中不飽和化學(xué)鍵產(chǎn)生的定量全信息,從整體角度考慮其比HPLC紫外單波長檢測(cè)具有更全面和更準(zhǔn)確的特點(diǎn)。3實(shí)驗(yàn)部分3.1儀器、設(shè)備和儀器Agilent1100型液相色譜儀(DAD檢測(cè)器、四元低壓梯度泵、在線脫氣裝置、自動(dòng)進(jìn)樣器),ChemStation工作站(Agilent科技有限公司),Sarturius-BS110S分析天平(北京賽多利斯天平有限公司),DHG-9140A鼓風(fēng)干燥箱(上海合恒儀器設(shè)備有限公司)。3.2藥品、制劑、專四品種、專藥開發(fā)概況見表1甲醇(色譜純,山東禹王實(shí)業(yè)有限公司禹城化工廠),磷酸(色譜純,沈陽經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)試劑廠),無水乙醇(分析純,康科德科技有限公司),水為去離子水。14批SJHXT中S1、S6、S13和S14三門峽莘原制藥有限公司(批號(hào):101006、100311、110713、110701);S2和S9河北世濟(jì)唐威藥業(yè)有限公司(批號(hào):D11155、D11158);S3山東健民藥業(yè)有限公司(批號(hào):100302);S4河南省百泉制藥有限公司(批號(hào):100701);S5長春經(jīng)開藥業(yè)有限公司(批號(hào):20090502);S7河南明康制藥有限公司(批號(hào):20110302);S8和S10洛陽君山制藥有限公司(批號(hào):110601,101104);S11哈藥集團(tuán)三精黑河藥業(yè)有限公司(批號(hào):101201);S12丹東藥業(yè)集團(tuán)有限公司(批號(hào):101102133)。此14批SJHXT均購自于沈陽市藥店。3.3提取濾液制備濾液制備液取SJHXT10片,精密稱定,除去薄膜衣并研碎,取約2.78g,精密稱定,加甲醇50mL,回流提取1h,過濾,殘?jiān)蛹状?0mL再回流提取1h,過濾,殘?jiān)偌铀?0mL繼續(xù)回流1h,濾液減壓濃縮至16mL,加入95%乙醇84mL,靜置12h后,將濾液與前2次濾液合并后減壓濃縮至16mL,用甲醇定容至25mL,搖勻即得。3.4色譜條件、標(biāo)準(zhǔn)曲線Agilent聚四氟乙烯(PTFE)管(650mm×0.12mm),柱溫(30.0±0.15)℃,流動(dòng)相為色譜甲醇,流速0.5mL·min-1,進(jìn)樣量0.2μL,檢測(cè)波長190~400nm(DAD),采集間隔1nm,狹縫寬度1nm。4結(jié)果與討論4.1試驗(yàn)條件和方法的研究4.1.1速度選擇4.1.2紫外吸收光譜auc的測(cè)定按“3.4”項(xiàng)下檢測(cè)條件,在流速0.5mL·min-1平衡柱系統(tǒng),在進(jìn)樣量分別為0.10、0.20、0.30、0.50、0.70、0.90和1.10μL考察190~400nm紫外吸收光譜。結(jié)果AUC與絕對(duì)進(jìn)樣量Q(mg)呈良好線性關(guān)系:AUC=20471+193120Q,r=0.996,線性范圍0.10~1.10μL(制劑表觀質(zhì)量為0.0108~0.1189mg?；?D譜并扣除Nearestbaseline提取峰頂點(diǎn)紫外光譜,以吸光度在600~800mAU為宜,最終確定進(jìn)樣量0.20μL,見圖2B。4.1.3檢測(cè)時(shí)間和穩(wěn)定性試驗(yàn)將S2號(hào)供試液進(jìn)樣0.20μL,記錄6波長(210、228、246、265、286和326nm)非分離色譜圖和190~400nm在線紫外光譜。因所有組分在1min內(nèi)出峰完全,故確定檢測(cè)時(shí)間為1min,此系統(tǒng)理論板數(shù)≥54。4.1.4精密度和穩(wěn)定性試驗(yàn)將S2號(hào)SJHXT-UV供試液連續(xù)進(jìn)樣6次,記錄6波長下非分離色譜圖和190~400nm在線紫外光譜。以228nm時(shí)非分離色譜圖考察進(jìn)樣精密度,計(jì)算其保留時(shí)間RSD均<1.1%,峰面積RSD<1.1%。表明進(jìn)樣精密度很好。同時(shí)取S2號(hào)供試液,分別在樣品制備后0、1、2、3和4h進(jìn)樣,結(jié)果保留時(shí)間RSD均<1.2%,峰面積RSD<1.4%。表明樣品在4h內(nèi)基本穩(wěn)定。4.2指紋圖譜評(píng)價(jià)采用FIA法測(cè)定14批SJHXTs在190~400nmUVFP見圖3,將14批樣品CSV文件導(dǎo)入孫國祥等開發(fā)的“中藥光譜指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)3.0”軟件,參照HPLC指紋圖譜結(jié)果選則S1、S2、S9和S12以外的10批SJHXTs文件按均值法計(jì)算紫外對(duì)照指紋圖譜(UV-RFP),以其評(píng)價(jià)14批樣品Sm、Pm和α值,依據(jù)UVFQM標(biāo)準(zhǔn)鑒定S7和S9質(zhì)量好(3級(jí))、S10質(zhì)量良好(4級(jí))、S4和S8質(zhì)量一般(6級(jí))、S6質(zhì)量差(7級(jí)),其余質(zhì)量均劣(8級(jí)),見表1。4.3指紋圖譜結(jié)果分析用孫國祥等開發(fā)的“中藥光譜指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)3.0”軟件評(píng)價(jià)SJHXT-UVFP見表1。(1)β=1及ρ=1說明指紋點(diǎn)數(shù)和單色光純度符合要求。(2)LR=14125~86672,A0=48~318,A=67~411,AUC=14090~86528,說明指紋信號(hào)強(qiáng)度較高。(3)γ=0.759~0.897,δ=0.656~0.819說明指紋均化性很好。(4)Nsp=7~11,R=209~1250,Rstd=1.019~1.053說明指紋分布較均勻。m=0.264~0.565說明吸光度較小點(diǎn)多。(5)F=10.1~16.6,S=5~5.2,I=24.8~46.2,AF=15.6~33.5,AI=16~39.8說明其指紋總強(qiáng)度較高、均化性較好、所含信息量豐富、指紋圖譜波動(dòng)度較小,但以S1波動(dòng)度最大。Fr=14.0~17.9,Ir=41.1~59.5,AFr=16.0~33.5和AIr=15.2~37.9都較高,說明此圖譜波段效率和中藥原料(制劑)提取液中所含化學(xué)成分信息都很高。Fr(λ)、Ir(λ)和AFr(λ)均高于原來F和I值,說明波段效率高;Fr(q)、Ir(q)、AFr(q)和AIr(q)均高于原來F和I值,說明樣品所含化學(xué)信息量豐富。(6)其中S1的F=29.8,I=83.2,AF=83,AI=124.2均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他批次,說明該批次圖譜波動(dòng)性較大。(7)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,把SJHXT的16個(gè)指數(shù)的±15%作為限度來控制14批SJHXT,對(duì)于F、Fr、Fr(t)和Fr(q)四指數(shù)來說,S6和S7低于低限(LPL),S1和S5均高于高限(HPL);對(duì)于I、Ir、Ir(t)和Ir(q)四指數(shù)來說,S6、S7、S13和S14均低于LPL,S1和S5高于HPL;對(duì)于AF、AFr、AFr(t)和AFr(q)四指數(shù)來說,S6和S7低于LPL,S1、S5、S8和S12均高于HPL;對(duì)于AI、AIr、AIr(t)和AIr(q)四指數(shù)來說,S6、S7、S13和S14均低于LPL,S1、S3、S5、S9和S12均高于HPL,結(jié)果見表2。4.4與其他批數(shù)法比較對(duì)比SJHXT的HPLC指紋圖譜和UVFP的評(píng)價(jià)結(jié)果可知,除S5和S9質(zhì)量等級(jí)相差5級(jí),其余各批次評(píng)價(jià)結(jié)果均相差2級(jí)以下,由于UVFP是以波段為210nm數(shù)據(jù)按點(diǎn)來計(jì)算總含量,其結(jié)果更準(zhǔn)確,而文獻(xiàn)方法是在228nm測(cè)定的HPLC指紋圖譜,結(jié)果具有片面性,見圖4。5峰點(diǎn)和波長的選取及指紋指數(shù)的計(jì)算本文提出了紫外指紋圖譜指數(shù)、信息量指數(shù)、波動(dòng)量指數(shù)和信息波動(dòng)量指數(shù)等理論以及紫外指紋定量法,形成中藥紫外指紋圖譜超信息特征的數(shù)字化和定量化評(píng)價(jià)方法。應(yīng)用“中藥光譜指紋圖譜超信息特征數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)3.0”軟件對(duì)SJHXT-UVFP隱含的定性和定量信息進(jìn)行挖掘,共建立46個(gè)超信息特征參數(shù)。用流動(dòng)注射分析(FIA)法采集190~400nmUVFP來重點(diǎn)反映中藥化學(xué)組分中的π→π*,n→π*和n→σ*化學(xué)鍵定性定量信息。評(píng)價(jià)出S7和S9質(zhì)量好(3級(jí)),S10質(zhì)量良好(4級(jí)),S1波動(dòng)度很大表明該中藥可能加入了其他西藥化學(xué)成分。本文利用UVFP對(duì)SJHXT嘗試進(jìn)行數(shù)字化和定量化整體質(zhì)量評(píng)價(jià),是表征中藥化學(xué)組分總含量特征的創(chuàng)新。本文開拓了多維數(shù)字化和定量化UVFP鑒別和精準(zhǔn)評(píng)價(jià)中藥質(zhì)量的新方法,實(shí)現(xiàn)了利用UVFP定量化評(píng)價(jià)中藥復(fù)雜巨系統(tǒng)的總質(zhì)量。若連續(xù)光譜相鄰波長間隔為△λ,狹縫寬度為d(nm),則定義指紋分辨率見(1)式,n為測(cè)定峰點(diǎn)數(shù),λ1和λ2分別為掃描起始和結(jié)束波長。相鄰波長間隔越大(△λ越大)或狹縫d越小則n越大,即采集峰點(diǎn)越多或單色光越純。因此β代表峰點(diǎn)多少和單色光純度,在指紋點(diǎn)足夠豐富和單色光純度滿足要求時(shí)β越大越好,通常β=1。是單位波長內(nèi)采集峰點(diǎn)數(shù),見(2)式,一般為1,也可以為2。是連續(xù)光譜各峰點(diǎn)吸光度總和,見(3)式。Ai(Ti)為第i個(gè)光波長的吸光度(透光率),LR代表信號(hào)總強(qiáng)度,一般越大越好。指紋點(diǎn)分布均化性直接影響指紋特征性,當(dāng)峰點(diǎn)呈直線時(shí)特征性最差。計(jì)算和指紋向量間夾角余弦即求出與定性相似度系數(shù)γ,見(4)式。為平均吸光度,γ越接近1則信號(hào)均化性越好,但特征性越差。信號(hào)強(qiáng)度也可用峰點(diǎn)幾何平均吸光度A0和平均吸光度表示,見5~6式。當(dāng)時(shí),有γ≈1表明特征性越差。兩者比δ稱為幾平比,見(7)式,同樣δ越接近1,特征性越差。是指紋AUC占最大光譜面積的百分?jǐn)?shù),見(8)式。由1mg中藥原料(制劑)的提取液進(jìn)樣后檢測(cè)獲得的F稱為標(biāo)準(zhǔn)指紋指數(shù)Fr(q),見(1