病原細菌采樣技術(shù)

病原菌采樣技術(shù)廣州市CDC2011.12.06主要內(nèi)容標本的正確采集和處理選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法常見病原菌標本的采集食物中毒檢材的處理一、正確采集和處理標本無菌操作血液、腦脊液及穿刺液等---嚴格無菌操作糞便、肛拭子和咽拭子等---避免雜菌污染盛放容器無菌，防破碎容器采集時間和部位盡量在使用抗菌藥物之前選擇合適的部位采集送檢時間和方法標本做好標記，包括姓名，日期，標本類型，項目等信息填好送檢單，立即送檢不能及時送檢者，置運送培養(yǎng)基，4℃保存運送特殊病原菌如腦膜炎球菌應(yīng)35-37℃保溫運送安全防護防止污染、傳播和自身安全防護二、選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法根據(jù)：標本來源、可能存在的病原菌血液、腦脊液

1.腦脊液標本直接涂片染色鏡檢2.培養(yǎng)基：血培養(yǎng)瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麥康凱平板）/EMB（伊紅美藍平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培養(yǎng)基）3.培養(yǎng)方法：同時在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)糞便、肛拭子GN、SS、MAC/EMB、堿性胨水、TCBS、NYE痰、咽拭子1.直接涂片染色鏡檢2.BAP、CA、SA、BCYE（軍團菌培養(yǎng)基）3.在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)中段尿1.做細菌計數(shù)2.BAP、MAC/EMB、CA膿液、分泌物1.可直接涂片染色鏡檢2.EB(增菌肉湯)、BAP、MAC/EMB、CA3.在需氧、厭氧環(huán)境培養(yǎng)生殖道標本1.部分標本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SA眼耳口鼻標本1.部分標本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA三、常見病原菌標本的采集血液、腦脊液采血時間與次數(shù)

用藥前24小時內(nèi)采3~4次血液標本，可使細菌檢出率高達99%；一般在病人發(fā)熱初期1~2天內(nèi)或發(fā)熱高峰時采集采血部位

一般從肘靜脈采血，亞急性細菌性心內(nèi)膜炎等病人則從肘動脈或股動脈采血采血量

成人5~10ml/次，嬰幼兒1~5ml/次，血量與培養(yǎng)基比例以1:10為宜腦脊液

采集3~5ml/次，35-37℃保溫，立即送檢糞便標本自然排便采集法

挑取有膿血、粘液或絮狀物部分置采便盒/保存液/增菌液中送檢直腸拭子采集法

置C-B保存液/增菌液中送檢呼吸道標本咽拭采集法

盡量避免口腔正常菌群污染自然咯痰法

用清水反復漱口，用力自氣管深部咳出當日第一口膿痰，置無菌容器中盡快送檢小兒取痰法氣管鏡采集法胃內(nèi)采痰法

結(jié)核病人可用此法采集氣管穿刺法

用于厭氧菌培養(yǎng)呼吸道標本采集注意事項痰液標本以晨痰為佳，咳前要充分漱口，減少口腔正常菌群的污染采集的痰液標本必須是肺深部的痰液而不是唾液標本采集后及時送檢，以防某些細菌在外環(huán)境中死亡。作結(jié)核分枝桿菌或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時送檢，應(yīng)放入4℃冰箱，以免雜菌生長做結(jié)核分枝桿菌檢查，最好收集24小時痰液有1/4到1/2肺部感染的病人可能發(fā)生菌血癥，可同時做血培養(yǎng)尿液標本中段尿采集法腎盂尿采集法

確定菌尿是否來自腎臟膀胱穿刺尿采集法

用于厭氧菌培養(yǎng)四、食物中毒采樣原則和標本處理

（一）食物中毒采樣原則代表性原則：所采的樣本能真正反映被采樣的總體水平。典型性原則：

應(yīng)根據(jù)中毒癥狀，可疑中毒物性質(zhì)采集可能含毒量最多的樣本，如中毒者吃剩的食物、餐具（未洗刷）。適時性原則：及時采樣，盡快送檢。適量性原則：采樣數(shù)量應(yīng)根據(jù)檢驗項目和目的而定，但每份樣本不少于檢驗需要量的三倍，以便供檢驗、復檢和留樣備用。程序原則：采樣、送檢、留樣和出具報告必須按規(guī)定的程序進行，各階段都要有完整的手續(xù)，責任分明。樣本種類和數(shù)量糞便：2ml(g)嘔吐物或洗胃液：5