病原細(xì)菌采樣技術(shù)

病原菌采樣技術(shù)廣州市CDC2011.12.06主要內(nèi)容標(biāo)本的正確采集和處理選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法常見病原菌標(biāo)本的采集食物中毒檢材的處理一、正確采集和處理標(biāo)本無菌操作血液、腦脊液及穿刺液等---嚴(yán)格無菌操作糞便、肛拭子和咽拭子等---避免雜菌污染盛放容器無菌，防破碎容器采集時(shí)間和部位盡量在使用抗菌藥物之前選擇合適的部位采集送檢時(shí)間和方法標(biāo)本做好標(biāo)記，包括姓名，日期，標(biāo)本類型，項(xiàng)目等信息填好送檢單，立即送檢不能及時(shí)送檢者，置運(yùn)送培養(yǎng)基，4℃保存運(yùn)送特殊病原菌如腦膜炎球菌應(yīng)35-37℃保溫運(yùn)送安全防護(hù)防止污染、傳播和自身安全防護(hù)二、選擇合適的培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法根據(jù)：標(biāo)本來源、可能存在的病原菌血液、腦脊液

1.腦脊液標(biāo)本直接涂片染色鏡檢2.培養(yǎng)基：血培養(yǎng)瓶/管、BAP（血平板）、MAC（麥康凱平板）/EMB（伊紅美藍(lán)平板）、CA（巧克力平板）、SA（沙保培養(yǎng)基）3.培養(yǎng)方法：同時(shí)在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)糞便、肛拭子GN、SS、MAC/EMB、堿性胨水、TCBS、NYE痰、咽拭子1.直接涂片染色鏡檢2.BAP、CA、SA、BCYE（軍團(tuán)菌培養(yǎng)基）3.在需氧、厭氧和CO2環(huán)境培養(yǎng)中段尿1.做細(xì)菌計(jì)數(shù)2.BAP、MAC/EMB、CA膿液、分泌物1.可直接涂片染色鏡檢2.EB(增菌肉湯)、BAP、MAC/EMB、CA3.在需氧、厭氧環(huán)境培養(yǎng)生殖道標(biāo)本1.部分標(biāo)本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA、SA眼耳口鼻標(biāo)本1.部分標(biāo)本直接涂片染色鏡檢2.EB、BAP、MAC/EMB、CA三、常見病原菌標(biāo)本的采集血液、腦脊液采血時(shí)間與次數(shù)

用藥前24小時(shí)內(nèi)采3~4次血液標(biāo)本，可使細(xì)菌檢出率高達(dá)99%；一般在病人發(fā)熱初期1~2天內(nèi)或發(fā)熱高峰時(shí)采集采血部位

一般從肘靜脈采血，亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等病人則從肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血采血量

成人5~10ml/次，嬰幼兒1~5ml/次，血量與培養(yǎng)基比例以1:10為宜腦脊液

采集3~5ml/次，35-37℃保溫，立即送檢糞便標(biāo)本自然排便采集法

挑取有膿血、粘液或絮狀物部分置采便盒/保存液/增菌液中送檢直腸拭子采集法

置C-B保存液/增菌液中送檢呼吸道標(biāo)本咽拭采集法

盡量避免口腔正常菌群污染自然咯痰法

用清水反復(fù)漱口，用力自氣管深部咳出當(dāng)日第一口膿痰，置無菌容器中盡快送檢小兒取痰法氣管鏡采集法胃內(nèi)采痰法

結(jié)核病人可用此法采集氣管穿刺法

用于厭氧菌培養(yǎng)呼吸道標(biāo)本采集注意事項(xiàng)痰液標(biāo)本以晨痰為佳，咳前要充分漱口，減少口腔正常菌群的污染采集的痰液標(biāo)本必須是肺深部的痰液而不是唾液標(biāo)本采集后及時(shí)送檢，以防某些細(xì)菌在外環(huán)境中死亡。作結(jié)核分枝桿菌或真菌培養(yǎng)的痰液如不能及時(shí)送檢，應(yīng)放入4℃冰箱，以免雜菌生長做結(jié)核分枝桿菌檢查，最好收集24小時(shí)痰液有1/4到1/2肺部感染的病人可能發(fā)生菌血癥，可同時(shí)做血培養(yǎng)尿液標(biāo)本中段尿采集法腎盂尿采集法

確定菌尿是否來自腎臟膀胱穿刺尿采集法

用于厭氧菌培養(yǎng)四、食物中毒采樣原則和標(biāo)本處理

（一）食物中毒采樣原則代表性原則：所采的樣本能真正反映被采樣的總體水平。典型性原則：

應(yīng)根據(jù)中毒癥狀，可疑中毒物性質(zhì)采集可能含毒量最多的樣本，如中毒者吃剩的食物、餐具（未洗刷）。適時(shí)性原則：及時(shí)采樣，盡快送檢。適量性原則：采樣數(shù)量應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目和目的而定，但每份樣本不少于檢驗(yàn)需要量的三倍，以便供檢驗(yàn)、復(fù)檢和留樣備用。程序原則：采樣、送檢、留樣和出具報(bào)告必須按規(guī)定的程序進(jìn)行，各階段都要有完整的手續(xù)，責(zé)任分明。樣本種類和數(shù)量糞便：2ml(g)嘔吐物或洗胃液：5