實驗三 植物營養(yǎng)器官和繁殖器官的觀察及實驗九 差示分光光度法測定維生素B1片的含量

學號：姓名：班級：生物技術1實驗三植物營養(yǎng)器官和繁殖器官的觀察實驗目的：了解植物營養(yǎng)器官和繁殖器官的基本結構特點。理解植物各繁殖器官結構與機能的關系。實驗原理：植物的營養(yǎng)器官和繁殖器官分別指根、莖、葉和花、果實、種子兩大類在植物體中起不同作用的器官。在高等植物中，根、莖和葉是植物體個體行使生長的主要器官，也是植物體的主要的結構系統，它們完成從營養(yǎng)物質的吸收、合成、運輸到支持、蒸騰等各種功能?；ā⒐麑嵑头N子是植物完成生殖作用、延續(xù)后代的主要器官。植物的營養(yǎng)器官為繁殖器官完成其生殖作用積累物質基礎，而生殖作用產生的種子也標志著植物體生長作用的開始。實驗步驟：根的觀察：（一）根的初生結構：1.表皮：為根的最外面一層細胞。細胞排列緊密，細胞壁薄，內有液泡。2.表層：位于表皮與中柱之間。3.中柱：表皮以內的結構，由中柱鞘、木質部、韌皮部、薄壁組織組成。（二）根的次生結構：1.周皮：由木栓形成層、木錠層和栓內層組成。2.次生韌皮部：在周皮以內的薄壁細胞，具維管射線。3.形成層：次生韌皮部以內，有幾層近似梭形的扁平薄壁細胞。4.次生木質部：在形成層以內，有細胞直徑較大的導管和維管射線。莖的觀察:(一)雙子葉植物的初生結構：1.表皮：莖的最外層細胞、外壁角質化，并有角質層。2.皮層：位于表皮與中柱之間，3.中柱皮層以內的中軸部分。由維管束、髓和髓射線組成。(二)單子葉（禾本科）植物莖結構：1.表皮。2.基本組織：在表皮以內，多由薄壁細胞組成，維管束散生其中。3.維管束：散生在基本組織中，邊緣的維管束較小，中央較大，有維管束鞘、木質部、韌皮部。葉的觀察：（一）一般植物葉的內部結構：1.表皮。2.葉肉：位于上下表皮之間的一些薄壁細胞，明顯的分成柵欄組織（在上表皮下，細胞圓柱狀，排列整齊，細胞間隙小，細胞內含有許多葉綠體）、海綿組織（在柵欄組織和下表皮之間，細胞形狀不規(guī)則、排列疏松、間隙大）。3.葉脈（二）禾本科植物葉的內部結構：1.表皮2.葉肉：無明顯柵欄組織與海綿組織。3.葉脈：葉脈平行花的觀察：1.花柄及花托2.花萼3.花冠4.雄蕊群5.雌蕊果實的觀察：（一）果實的構造及類型（二）種子的構造實驗結果：思考討論：大部分單子葉植物僅有初生生長，沒有次生結構。對于生活在溫帶或亞熱帶的一些多年生木本植物來說，每年春季，形成層細胞分裂快，生長快，產生的木質部量少，細胞排列緊密，形成少量材質緊密的晚材。在莖的橫切面上，每一年的次生木質部都從早材漸變到晚材，前一年的晚材與下一年的早材間分界明顯，如此形成若干同心紋輪，稱為年輪。植物葉多為扁平狀，擴大了葉的表面積，與其進行光合作用和蒸騰作用的生理功能相適應，葉片下表面氣孔數目多于上表面，這有利于減少植物蒸騰作用。而松針等葉片為細長針形的結構也與它們適應于低溫和干旱環(huán)境的功能相一致。實驗九差示分光光度法測定維生素B1片的含量一、實驗目的1．掌握差示分光光度法的基本原理。2．熟悉標準曲線定量的操作方法。二、實驗原理（一）差示分光光度法（簡稱△A法），它保留了通常的分光光度法簡便、快捷、直接讀數的優(yōu)點，又無需事先分離，并能消除干擾。方法：取兩份相等的供試液，分別制成兩種不同的化學環(huán)境（如在其一中加酸或堿，改變pH或在其一中加能與供試品發(fā)生某種化學反應的試劑），然后將它們稀釋至同樣濃度后，分置于樣品池和參比池中，于適當波長處，測定吸光度的差值（△A）。應用條件：①供試品在不同的化學環(huán)境中以不同的分子形式存在，它們的吸收光譜有顯著的差異；②干擾物的吸收不受測定時化學環(huán)境的影響，光譜行為不變。定量依據：設x、y分別代表在兩種不同的化學環(huán)境中供試品的存在形式，它們在測定波長處的吸光度以Ax、Ay表示，背景和干擾的吸收度以AZ表示，AZ不受測定時化學環(huán)境改變的影響。根據吸光度加和性原則：即在供試液的一定濃度范圍內△A值與其濃度C呈線性關系，并消除了AZ的干擾，可用標準曲線法或對照法定量。（二）維生素B1片的測定維生素B1分子中具有共軛雙鍵結構，在紫外區(qū)有吸收，其紫外吸收隨溶液pH的變化而變化。在pH7的磷酸鹽緩沖液中具有兩個吸收峰，在232~233nm處，=345；在266nm處，=255。在pH2時，最大吸收在246nm處，=425?？捎糜诰S生素B1片的差示分光光度法的測定。三、實驗方法(一)測定波長的選擇精密稱取維生素B1100mg，用水溶解并稀釋成100ml，精密量取2ml二份，分別用緩沖液(pH7.0)和鹽酸液(pH2.0)稀釋成100ml，以相應溶劑為空白，測定紫外吸收光譜。再將前者放于參比池，后者放于樣品池，繪制差示吸收光譜(見圖11)。差示光譜圖表明在247nm處有最大差示吸收值(△A)，確定247nm為測定波長。(二)標準曲線繪制精密稱取干燥至恒重的維生素B1100mg，置100ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度,搖勻，作為貯備液。精密量取1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml貯備液各二份，分別置100ml量瓶中，一份用緩沖液稀釋至刻度；另一份用鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻。取上述五組濃度相同，pH不同的溶液，在247nm處分別測定差示吸收值(△A)。以濃度C為橫坐標，以差示吸收值△A為縱坐標繪制標準曲線或進行回歸，求得回歸方程和相關系數。(三)樣品測定取本品20片，精密稱定，研細。精密稱取適量粉末(約相當于維生素B150mg)，置50ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，棄去初濾液，精密量取續(xù)濾液2ml二份，分別置100ml量瓶中，分別用緩沖液和鹽酸液稀釋至刻度，搖勻。將前者置參比池中，后者置樣品池中，在247nm波長處測定差示吸收值。由標準曲線求得維生素B1，濃度，計算維生素Bl片的標示量％。本品含維生素Bl(C12H17ClN4OS·HCl)應為標示量的90.0％～110.0％。四、注意事項