胺類藥物分析

關(guān)于胺類藥物分析分類按化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為：

*脂肪胺類：*芳胺類:氨基直接與苯環(huán)相連.包括酰胺類、對(duì)氨基苯甲酸酯類。*芳烴胺類:指氨基在烴基側(cè)鏈上，包括苯乙胺類.芳氧丙醇胺類季銨鹽類磺酰胺類第2頁,共60頁,2024年2月25日，星期天一、對(duì)氨基苯甲酸酯類具有對(duì)氨基苯甲酸酯基本結(jié)構(gòu)。具有游離的芳伯氨基。1．結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：第一節(jié)芳胺類藥物的分析第3頁,共60頁,2024年2月25日，星期天代表藥物有：

鹽酸普魯卡因苯佐卡因鹽酸丁卡因第4頁,共60頁,2024年2月25日，星期天2．性質(zhì)：①

具有芳香第一胺結(jié)構(gòu)，發(fā)生重氮化或重氮化-偶合反應(yīng)，或與芳醛縮和；生成希夫堿；易氧化變色的特性（鹽酸丁卡因除外）②

堿性具有脂烴胺側(cè)鏈為叔胺氮原子—弱堿性（非水溶劑滴定），能與生物堿沉淀試劑發(fā)生反應(yīng)。第5頁,共60頁,2024年2月25日，星期天③

具有酯的結(jié)構(gòu)，容易水解。④

紫外吸收具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收。第6頁,共60頁,2024年2月25日，星期天1.結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：

苯胺?；苌?，酰胺基鄰位或?qū)ξ挥腥〈６?、酰胺類?頁,共60頁,2024年2月25日，星期天代表藥物有：

對(duì)乙酰氨基酚鹽酸利多卡因第8頁,共60頁,2024年2月25日，星期天2．性質(zhì)：※利多卡因，酰胺基鄰位上有兩個(gè)甲基，有很大空間位阻，水解較為困難。（利多卡因在80%的硫酸溶液中加熱才能水解）①

水解后可發(fā)生重氮化反應(yīng)具有酰胺結(jié)構(gòu)—共性。水解成芳伯氨基，發(fā)生重氮化偶合反應(yīng)。第9頁,共60頁,2024年2月25日，星期天③

堿性利多卡因側(cè)鏈中具有叔氨N原子，顯弱堿性，能與酸成鹽，且能與生物堿沉淀試劑或重金屬離子反應(yīng)。②

與FeCl3反應(yīng)具有酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基（對(duì)乙酰氨基酚），可與FeCl3作用呈色。④

紫外吸收具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)，有紫外吸收。第10頁,共60頁,2024年2月25日，星期天三、鑒別反應(yīng)(一)、重氮化-偶合反應(yīng)具有芳伯氨基藥物，如鹽酸普魯卡因等，在酸性溶液中與NaNO2發(fā)生重氮化反應(yīng)，再與堿性

-萘酚偶合產(chǎn)生紅色偶氮化合物。具有潛在芳伯氨基，如對(duì)乙酰氨基酚，水解后可得芳伯氨基，能發(fā)生類似反應(yīng)。第11頁,共60頁,2024年2月25日，星期天※鹽酸丁卡因（芳香第二胺結(jié)構(gòu)）與NaNO2作用生成乳白色N-亞硝基化合物沉淀。第12頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(二)、三氯化鐵反應(yīng)具有酚羥基（如對(duì)乙酰氨基酚），可與FeCl3作用顯藍(lán)紫色。第13頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(三)、與重金屬離子反應(yīng)(1)．與銅離子的反應(yīng)(2)．與鈷鹽反應(yīng)第14頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(3)．羥肟酸鐵的反應(yīng)具有酰胺結(jié)構(gòu)，被H2O2氧化成羥肟酸，羥肟酸與FeCl3反應(yīng)生成紫紅色羥肟酸鐵，隨即變?yōu)榘底厣磷睾谏?。如鹽酸普魯卡因胺。具有酰胺結(jié)構(gòu)的藥物羥肟酸羥肟酸鐵第15頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(四)、水解產(chǎn)物的反應(yīng)（對(duì)氨基苯甲酸酯類）(1)．苯佐卡因的鑒別試驗(yàn)(4)與汞離子反應(yīng):鹽酸利多卡因+硝酸汞黃色；對(duì)氨基苯甲酸酯顯紅色或橙黃色，以區(qū)別第16頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(2).鹽酸普魯卡因的鑒別試驗(yàn)

第17頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(五)紫外特征吸收光譜(六)紅外吸收光譜第18頁,共60頁,2024年2月25日，星期天四.特殊雜質(zhì)檢查(一)對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查

對(duì)乙酰氨基酚中除檢查酸度、氯化物、硫酸鹽、重金屬、水分、熾灼殘?jiān)纫话汶s質(zhì)外，還需要檢查：乙醇溶液的澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)（對(duì)氯乙酰苯胺）、對(duì)氨基酚等特殊雜質(zhì)。第19頁,共60頁,2024年2月25日，星期天對(duì)乙酰氨基酚以對(duì)硝基氯苯為原料合成。第20頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(1)．乙醇溶液的澄清度與顏色對(duì)乙酰氨基酚易溶于乙醇中，如乙醇液不澄清或有顏色，則說明有雜質(zhì)存在。生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，如帶入成品，則導(dǎo)致對(duì)乙酰氨基酚乙醇溶液產(chǎn)生渾濁。中間體對(duì)氨基酚有色氧化物在乙醇中顯橙紅色或棕色。第21頁,共60頁,2024年2月25日，星期天（2）有關(guān)物質(zhì)（對(duì)氯乙酰苯胺）副反應(yīng)副副反應(yīng)對(duì)硝基氯苯為原料合成對(duì)乙酰氨基酚時(shí)，如發(fā)生這樣的副反應(yīng)就能夠引入對(duì)氯乙酰苯胺。副反應(yīng)第22頁,共60頁,2024年2月25日，星期天TLC法①

樣品液②

對(duì)照液對(duì)氯乙酰苯胺乙醚溶液（50

g/ml）③

分離系統(tǒng)硅膠GF254氯仿-丙酮-甲苯（13∶5∶2）第23頁,共60頁,2024年2月25日，星期天⑥

限量:④點(diǎn)樣量樣品液：200

l點(diǎn)于硅膠GF254薄層板上對(duì)照液：40

l⑤

判斷在254nm波長紫外燈下觀察，供試品與對(duì)照品主斑點(diǎn)Rf值相同的斑點(diǎn)比較,不得超過其大小與顏色。第24頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(3)．對(duì)氨基酚制備中乙?；煌耆蛸A存不當(dāng)發(fā)生水解都能引入對(duì)氨基酚☆檢查原理：對(duì)氨基酚在堿性條件下，與亞硝基鐵氰化鈉作用，生成藍(lán)色絡(luò)合物，與對(duì)照液比較判斷對(duì)氨基酚的限量。第25頁,共60頁,2024年2月25日，星期天檢查方法：限量：0.005%(二)鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查第26頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(二)鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查方法：TLC

色譜條件：固定相：硅膠H展開劑：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14：1:1:4）顯色劑：對(duì)二甲氨基苯甲醛第27頁,共60頁,2024年2月25日，星期天五、含量測定1．亞硝酸鈉滴定法①

原理具有芳伯氨基藥物，在酸性條件下與NaNO2反應(yīng)生成重氮鹽，根據(jù)消耗NaNO2量，計(jì)算出含量。潛在芳伯氨基藥物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或還原，得芳伯氨基后，再進(jìn)行測定。第28頁,共60頁,2024年2月25日，星期天第29頁,共60頁,2024年2月25日，星期天②

操作中的主要條件＊重氮化反應(yīng)屬于分子反應(yīng)＊滴定液NaNO2及反應(yīng)生成的重氮鹽都不穩(wěn)定＊反應(yīng)速度受多種因素影響第30頁,共60頁,2024年2月25日，星期天第一步反應(yīng)速度比較慢，而后兩步反應(yīng)速度則比較快。ⅰ．反應(yīng)速度與藥物結(jié)構(gòu)的關(guān)系重氮化反應(yīng)機(jī)制：第31頁,共60頁,2024年2月25日，星期天a.當(dāng)苯環(huán)上特別是氨基鄰位或?qū)ξ簧嫌形娀鶗r(shí),如吸電基通過誘導(dǎo)效應(yīng)使氨基上電子云密度降低，從而堿性降低，游離芳伯胺濃度增大，所以反應(yīng)速度就快。等可使氨基的堿性降低，重氮化反應(yīng)速度加快。第32頁,共60頁,2024年2月25日，星期天b.

當(dāng)在苯環(huán)上有供電基時(shí)，則使反應(yīng)速度降低。如等。供電基能使氨基堿性增強(qiáng)，這樣氨基成鹽的機(jī)會(huì)就增大，游離芳伯胺的濃度就減小，所以反應(yīng)速度就慢。第33頁,共60頁,2024年2月25日，星期天ⅱ．反應(yīng)速度與酸及酸度的關(guān)系a.

酸的種類重氮化反應(yīng)在HBr、HCl、H2SO4中反應(yīng)速度是HBr＞HCl＞H2SO4

K1比K2大300倍

第34頁,共60頁,2024年2月25日，星期天用HBr時(shí)，生成NOBr量大，反應(yīng)速度快。但HBr價(jià)格貴，用鹽酸代替，為加快反應(yīng)速度，需加入KBr（催化劑）。產(chǎn)生HBr與HNO2反應(yīng)，可生成大量NOBr，加快反應(yīng)速度。第35頁,共60頁,2024年2月25日，星期天b.

鹽酸的用量理論上:芳胺∶鹽酸＝1∶2mol

實(shí)際上:芳胺∶鹽酸＝1∶2.5~6mol原因：＊強(qiáng)酸性可加速反應(yīng)＊重氮鹽在酸性下穩(wěn)定＊酸性下避免副反應(yīng)發(fā)生。

第36頁,共60頁,2024年2月25日，星期天如鹽酸量增加，則反應(yīng)向左進(jìn)行。如鹽酸濃度太大，反到會(huì)使游離芳伯氨的量減小（成鹽），而影響重氮化反應(yīng)速度，使反應(yīng)速度減慢。如酸度不足則沒反應(yīng)的芳胺與生成的重氮鹽產(chǎn)生偶氮氨基化合物，而影響測定結(jié)果。第37頁,共60頁,2024年2月25日，星期天ⅲ．反應(yīng)速度與滴定時(shí)溫度的關(guān)系一般，溫度升高反應(yīng)速度加快。但重氮化反應(yīng)所生成的重氮鹽不穩(wěn)定，溫度升高重氮鹽分解速度也加快。另外，溫度高時(shí)，滴定液亞硝酸鈉也容易分解逸失，而影響測定結(jié)果。所以，重氮化反應(yīng)應(yīng)在低溫條件下進(jìn)行。第38頁,共60頁,2024年2月25日，星期天中國藥典規(guī)定：在30

C以下，把滴定管尖端插入液面下處進(jìn)行滴定。在滴定時(shí)一邊攪拌一邊加入大部分標(biāo)準(zhǔn)溶液。到近終點(diǎn)時(shí)把滴定管提出液面，用水沖洗后再繼續(xù)滴定至終點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)溶液在液面下加入，可避免NaNO2揮發(fā)。第39頁,共60頁,2024年2月25日，星期天ⅳ．反應(yīng)速度與滴定速度的關(guān)系重氮化反應(yīng)屬分子反應(yīng)，反應(yīng)速度比較慢，滴定速度不能過快。尤其是近終點(diǎn)時(shí)，更要慢慢地滴定。近終點(diǎn)時(shí)，游離芳伯胺濃度非常低，反應(yīng)速度就更慢了。所以，每加一滴標(biāo)準(zhǔn)液后，要攪拌1~5分鐘后再判斷終點(diǎn)。第40頁,共60頁,2024年2月25日，星期天③

指示終點(diǎn)的方法重氮化滴定法指示終點(diǎn)的方法有:永停法電位法外指示劑法內(nèi)指示劑法我國藥典主要采用永停滴定法指示終點(diǎn)第41頁,共60頁,2024年2月25日，星期天?。劳７ㄔ恚涸诒粶y溶液中插入兩個(gè)相同鉑電極，在兩個(gè)電極間加10~200mV電壓，并且在回路中串聯(lián)一個(gè)靈敏的檢流計(jì)（10A－9/格）。當(dāng)用NaNO2滴定時(shí)，在終點(diǎn)前回路中沒有電流，電流計(jì)指針指零。當(dāng)?shù)竭_(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)，由于溶液中有微過量的NaNO2，使得在兩個(gè)電極上發(fā)生氧化還原反應(yīng)第42頁,共60頁,2024年2月25日，星期天陽極:導(dǎo)致在兩電極間有電子流動(dòng)，從而回路中有電流產(chǎn)生，使得電流計(jì)指針發(fā)生偏轉(zhuǎn)并且不再返回零點(diǎn)。陰極：第43頁,共60頁,2024年2月25日，星期天ⅱ．電位法在被測溶液中插入甘汞-鉑電極，到達(dá)滴定終點(diǎn)時(shí)，溶液中稍過量的NaNO2使電位產(chǎn)生突躍，從而指示終點(diǎn)。USP采用這個(gè)方法指示終點(diǎn)。第44頁,共60頁,2024年2月25日，星期天ⅲ．外指示劑法淀粉-KI糊劑或試紙?jiān)恚寒?dāng)達(dá)到滴定終點(diǎn)時(shí)，溶液中稍過量的NaNO2在酸性條件下氧化KI析出I2，I2遇淀粉顯藍(lán)色。第45頁,共60頁,2024年2月25日，星期天使用方法：滴定時(shí)，把淀粉-KI試液滴在白磁板上，用玻璃棒蘸取少量被滴定的溶液，在白磁板上劃，如果立即出現(xiàn)藍(lán)色即已到滴定終點(diǎn)。第46頁,共60頁,2024年2月25日，星期天外指示劑法的缺點(diǎn)：

由于滴定的溶液是強(qiáng)酸性，KI遇光能被空氣氧化析出碘，所以，在沒有達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，就有可能呈現(xiàn)藍(lán)色，而造成誤判。

由于經(jīng)常蘸取溶液進(jìn)行試驗(yàn)，可造成滴定液的損失而帶來誤差。

方法難掌握。第47頁,共60頁,2024年2月25日，星期天ⅳ．內(nèi)指示劑法內(nèi)指示劑法指示終點(diǎn)，操作簡便，但生成重氮鹽一般都帶有顏色，干擾指示劑顏色變化的觀察，尤其是顏色很深時(shí)，更是這樣。在重氮化滴定法中，內(nèi)指示劑法應(yīng)用不是很廣泛。第48頁,共60頁,2024年2月25日，星期天(二)非水溶液滴定法（鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因的含量測定(三)分光光度法（對(duì)乙酰氨基酚的測定，吸收系數(shù)法）(四)高效液相色譜法（鹽酸普魯卡因注射液主成分及其降解產(chǎn)物的測定）第49頁,共60頁,2024年2月25日，星期天第二節(jié)苯乙胺類藥物分析一．結(jié)構(gòu)特點(diǎn)具有烴胺側(cè)鏈，屬于芳烴胺類藥物。多數(shù)在苯環(huán)上有1~2個(gè)羥基取代基。如在苯環(huán)3、4位上有羥基取代，則為兒茶酚胺類藥物。第50頁,共60頁,2024年2月25日，星期天代表藥物

腎上腺素去甲腎上腺素第51頁,共60頁,2024年2月25日，星期天二．性質(zhì)：1.

易被氧化鄰苯二酚或苯酚結(jié)構(gòu)，易被氧化呈色。3.

具有旋光性具有手性碳原子，具有光學(xué)活性。2.

顯堿性具有烴胺側(cè)鏈，顯弱堿性。能與酸成鹽。第52頁,共60頁,2024年2月25日，星期天三．鑒別試驗(yàn)1.氧化反應(yīng)區(qū)別腎上腺素和去甲腎上腺素。第53頁,共60頁,2024年2月25日，星期天2、

三氯化鐵反應(yīng)：酚羥基+Fe3+顯色（綠色）+Fe3+堿性紫色或紫紅色

例：腎上腺素在0.1mol/L鹽酸中與Fe3+顯翠綠色，加氨試液后，顯紫色或紫紅色3、與甲醛-硫酸反應(yīng):

生成醌式結(jié)構(gòu)顯色（紅色）4、紫外與紅外吸收光譜:5、與亞硝基鐵氰化鈉反應(yīng)重酒石酸間羥胺（伯氨基）+亞硝基鐵氰化鈉試液+丙酮+碳酸氫鈉加熱顯紅紫色第54頁,共60頁,2024年2月25日，星期天四、特殊雜質(zhì)檢查（一）酮體檢查雜質(zhì)引入：酮體氫化不完全檢查方法：紫外分光光度法原理：利用腎上腺素等藥物在310nm處無紫外吸收，而酮體在310nm處有吸收的特點(diǎn)，通過控制藥物在310nm處的吸收度來控制藥物中酮體的含量。第55頁,共60頁,2024年2月25日，星期天（二）有關(guān)物質(zhì)檢查鹽酸去氧腎上腺素、硫酸沙丁胺