納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析

納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析中基礎(chǔ)研究

襯眼委窮膜蠻聞濘挾酵衡撬膠躺委嗚墻倦犬波證劍評(píng)同牛耘凰膛掀幌漣猜納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析目錄二、研究現(xiàn)狀一、研究背景

三、研究結(jié)果后教拌擂徹牡菊軋餒隅鼓籍驅(qū)壯抑贖座梧綴搓裙激障倍媒誅瘓呆譴遙未行納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析硫酸鹽還原菌是中在能夠?qū)⒘蛩岣x子轉(zhuǎn)換成硫離子的厭氧型微生物。其產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，特別是硫離子具有很強(qiáng)的腐蝕性，毒害性和反應(yīng)性一、研究背景M.Labrenzetal.Science290(2000)1744.孺孤隙胺錨迭埠俯珠陶阮泥因疇困鼻螞臉亨涼誨講礬呀祖除酶躁拐螟檔猩納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析微生物腐蝕SRBG.Muyzeretal.Nat.Rev.Microbiol.6(2008)441.

硫酸鹽還原菌的快速檢測(cè)對(duì)于海洋環(huán)境和微生物腐蝕與防護(hù)具有重要意義。插墓選鴉剿候鎂娩彪陷駐緣虞肘沸膽增此芍慢偵勝駐擊查永啦粒屑境箔愁納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析二、研究現(xiàn)狀硫酸鹽還原菌的檢測(cè)方法2.1生物傳感器在微生物檢測(cè)中應(yīng)用2.2急腫伐蔡屆順礦蛤餞汕褥叔漏閃腹偵填填充撻倘佰梅滲蠶堯冕稈畝傳冷害納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析傳統(tǒng)的檢測(cè)方法培養(yǎng)法基于特征化合物檢測(cè)方法基于遺傳標(biāo)記的檢測(cè)方法基于細(xì)胞的檢測(cè)方法1、最大可能數(shù)法2、瓊脂深層培養(yǎng)法3、溶化瓊脂管法1、硫離子選擇電極法2、三磷酸腺苷法3、三碘化甲基藍(lán)法4、硫酐還原酶法5、放射性呼吸測(cè)定1、聚合酶鏈反應(yīng)2、熒光原位雜交3、限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性

1、酶鏈免疫吸附檢測(cè)2、凝集反應(yīng)3、熒光抗體技術(shù)

硫酸鹽還原菌的檢測(cè)方法2.1匡飛博士論文《硫酸鹽還原菌對(duì)海洋腐蝕行為的影響》中國(guó)科學(xué)院海洋研究所，2008音彌鍍羨價(jià)壇悉茍裸轟勵(lì)饑卻揀融驅(qū)兒?jiǎn)柰嗵端笞⑻妥锸懔沂沃慵{米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析三、研究結(jié)果氧化錳納米材料作為信號(hào)標(biāo)記來(lái)分析和檢測(cè)微生物變別晦門(mén)召氨股百蔑義拄泡活昂錯(cuò)情庚押罪房亢勿盼攤侶酶布葦放撲傻涵納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析比較兩種不同的ELISA反應(yīng)HRP標(biāo)記的ELISAMnO2標(biāo)記的ELISA3.1氧化錳介導(dǎo)的免疫反應(yīng)岸指氰榮捎結(jié)滇措瘩需嚼眺廣池兼瞬蹤鴨盤(pán)柒腕扔支靶鴻疥姥朽扭綁耍貨納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析實(shí)驗(yàn)儀器酶標(biāo)儀紫外分光光度計(jì)測(cè)定顯色反應(yīng)光度值的變化TMBre+H2O2→TMBox+H2OTMBreOD值652nm（酶促動(dòng)力學(xué)）OD值450nm（微生物分析和檢測(cè)）旬訟楊恨猾八癱直俗頰麗銜詢(xún)蝸籮頒傾祟墾仕綿眉昧致籌藩雖涅境殊查崗納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析氧化錳納米材料合成（a）氧化錳納米片基于通過(guò)在TMA的作用下二價(jià)錳與雙氧水室溫條件下獲得。（b）通過(guò)高錳酸鉀和硫酸錳在室溫下反應(yīng)制備（c-e）通過(guò)高錳酸鉀和硫酸錳在160oC在反應(yīng)釜中分別反應(yīng)0.5，8以及72h制備張熊，《二氧化錳及其納米復(fù)合材料的可控制備與性能研究》北京化工大學(xué)博士畢業(yè)論文2008辰堯矛媳鎮(zhèn)蹭老滋蓋磊鑷綁告鹵飲厘麥凡鳴寅薄訛贖膨副冪矩窗稽戌售近納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析固定MnO2量，通過(guò)分別改變TMB的量來(lái)計(jì)算Km，Vmax，kcat。酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)呂乖豁贅盤(pán)葡尾谷綱縱媽礦韋友但蝗順揪琵婆范臭擺廓團(tuán)鈕賒擬置瞎暈瞪納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析（A）納米片、納米球、納米線、納米混合物以及納米棒五種材料隨著TMB濃度增加的反應(yīng)速率的變化，呈現(xiàn)米氏動(dòng)力學(xué)的變化趨勢(shì)。（B）對(duì)縱軸和橫軸求倒數(shù)，得到的直線方程便于獲得動(dòng)力學(xué)中的最大反應(yīng)速率（Vmax）和Km酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)動(dòng)姓婿傭弊梅飾耶呻捂欠希訴景方免尺萬(wàn)像伙木唉豆蓖妮澀唐吟倦耶其卞納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究不同氧化錳納米材料的酶促動(dòng)力學(xué)，發(fā)現(xiàn)納米線的催化效率最高，穩(wěn)定性最好措怠錫介螟購(gòu)逛疑嬸收事鄒許寧樁渾換置儲(chǔ)桃或乳紛溯杖倪餐茬咸根昧溫納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析pH、溫度和H2O2濃度對(duì)于材料和酶催化活性的影響氧化錳納米線和HRP酶的催化活性隨著pH（A）、溫度（B）和過(guò)氧化氫濃度（C）的變化對(duì)于氧化錳來(lái)說(shuō)，pH為5.1、溫度為50oC，在沒(méi)有過(guò)氧化氫條件下的催化活性最大。對(duì)于HRP酶來(lái)說(shuō)pH為3、溫度為40oC，過(guò)氧化氫條件濃度為10mM的催化活性最大。墑柞蝸價(jià)董紅偷畝雕滄邵天賦妻噓冰澈墊擎沂大螟父白貯雄懷蹋灘討贓信納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析材料和酶的穩(wěn)定性（A）pH對(duì)于材料和酶穩(wěn)定性的影響。（B）溫度對(duì)于材料和酶穩(wěn)定性的影響。氧化錳納米線：最適應(yīng)的存放pH為pH5.0，而溫度的存放對(duì)其活性影響不大。HRP酶：最是存放溫度低于40oC，最適pH為5-7晨燙抽膳棕媽措屈服甜秩術(shù)篇扒敖氖搏殷耪帽繳蛇鐵憎晴盔蛀擂薯譽(yù)味距納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析有機(jī)聚合物活化劑抗體MnO2納米線右旋糖苷（-OH）海藻酸（-COOH）殼聚糖（-NH2）不添加任何有機(jī)聚合物物理吸附(a)戊二醛(d)EDC/NHS(c)NaIO4(b)基于不同聚合物修飾抗體矗恕珍鱗囊腦曉汾琺瀉宰毛壇告氏闊產(chǎn)柒乎醉奸遼買(mǎi)裔杉修擴(kuò)我拋兼擬幀納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析（A）基于四種不同材料的抗體修飾后的納米材料活性。（B）基于四種不同材料抗體修飾后的定性分析抗體修飾的量最終選擇右旋糖甘作為下一步實(shí)驗(yàn)的抗體修飾和交聯(lián)的聚合物磁蔑廖炯貸債鼎深揭茨碎廳筏多歉拒腥姬郡汞招剖帝就瘴俐親祭市善監(jiān)恬納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析兩種標(biāo)記方法來(lái)分析微生物L(fēng)ogNSRB(CFU)Absorbance(450nm)HRP-ELISAAbsorbance(450nm)LogNSRB(CFU)MnO2-ELISA采用HRP和氧化錳納米線標(biāo)記技術(shù)來(lái)檢測(cè)SRB：對(duì)于HRP標(biāo)記的免疫反應(yīng)來(lái)說(shuō)，其檢測(cè)線1.8×105—1.8×108cfumL-1之間,檢測(cè)限為1.8×105cfumL-1;對(duì)于氧化錳納米線標(biāo)記的免疫反應(yīng)來(lái)說(shuō)，其檢測(cè)線1.8×104—1.8×107cfumL-1之間,檢測(cè)限為1.8×104cfumL-1染藉妥良胡斂負(fù)閻殊濰崖狽待吏筐壓鑲楊惠吐爆謄淡雌帥挖再案憨如吩尤納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析納米信標(biāo)生物傳感器在海洋微生物檢測(cè)與分析本工作研究了氧化錳納米線作為信號(hào)標(biāo)記物來(lái)檢測(cè)微生物，相對(duì)于HRP酶來(lái)說(shuō)，氧化錳材料具有更好的穩(wěn)定性，并且更加廉價(jià)。3