【關(guān)于新冠病毒感染檢測(cè)的質(zhì)量管理的文獻(xiàn)綜述3000字】

關(guān)于新冠病毒感染檢測(cè)的質(zhì)量管理的文獻(xiàn)綜述新型冠狀病毒肺炎具有早期隱匿、無癥狀，潛伏期較長(zhǎng)，影像顯示肺部無典型改變甚至無改變的特點(diǎn)，為臨床診斷和鑒別診斷帶來了極大的困難[1]。下文將對(duì)新冠病毒感染檢測(cè)的方法及質(zhì)量管理展開綜述。一、抗原檢測(cè)方式1.抗原檢測(cè)蘇疾的研究指出，抗原是指所有能誘導(dǎo)機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)。新冠病毒是一種核糖核酸（RNA）病毒，有刺突蛋白（S）、膜蛋白（M）、包膜蛋白（E）和核衣殼蛋白（N）4種結(jié)構(gòu)蛋白，可經(jīng)過B細(xì)胞上免疫球蛋白的辨識(shí)或經(jīng)抗原呈現(xiàn)細(xì)胞的處理并與主要組織相容性復(fù)合體結(jié)合成復(fù)合物再活化T細(xì)胞，引發(fā)連續(xù)的免疫反應(yīng)，可被用于抗原檢測(cè)的目標(biāo)蛋白。結(jié)構(gòu)蛋白N是新冠病毒里量最大的抗原，感染后會(huì)在人體咽部釋放出來，可檢測(cè)此抗原判斷是否感染新冠病毒[2]。SARS-CoV2-抗原檢測(cè)SARS-CoV2-抗原檢測(cè)能在初期快速識(shí)別感染SARS-CoV2-的患者,特別是在實(shí)時(shí)RT-PCR結(jié)果難以獲得的情況下,能有效防止病毒傳播,以及保證患者得到及時(shí)救治[3]。SARS-CoV2-抗原檢測(cè)是基于S和N蛋白。S蛋白位于病毒顆粒的表面,因此可能更容易被免疫系統(tǒng)識(shí)別,N蛋白主要包裝病毒基因組RNA,在病毒復(fù)制、組裝、釋放和干擾宿主細(xì)胞的過程中發(fā)揮重要作用[4]?！缎鹿诓《究乖瓩z測(cè)應(yīng)用方案(試行)》指出了抗原檢測(cè)適用人群：（1）到基層醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)就診，伴有呼吸道、發(fā)熱等癥狀且出現(xiàn)癥狀5d以內(nèi)的人員。（2）隔離觀察人員，包括居家隔離觀察、密接和次密接、入境隔離觀察、封控區(qū)和管控區(qū)內(nèi)的人員。（3）有抗原自我檢測(cè)需求的社區(qū)居民[5]。2.質(zhì)量管理劉義蘭等圍繞醫(yī)院參與全員新冠病毒核酸檢測(cè)采樣管理進(jìn)行闡述,重點(diǎn)對(duì)組織管理,采樣前準(zhǔn)備,采樣點(diǎn)、采樣臺(tái)及采樣人員設(shè)置,采樣過程管理,標(biāo)本管理,醫(yī)療廢棄物處理,支持督導(dǎo)管理及采樣后續(xù)管理等進(jìn)行規(guī)范,為醫(yī)院管理者組織參與核酸檢測(cè)采樣提供參考借鑒[6]。二、血清抗體檢測(cè)方式1.血清抗體檢測(cè)曠翠萍等將采集有靜脈血的干燥管用3000r/min離心10min分離血清；采用博奧賽斯（天津）生物科技有限公司Axceed260化學(xué)發(fā)光測(cè)定儀開展檢測(cè)；試劑盒為博奧塞斯SARS-CoV-2抗體化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑（IgM批號(hào)：G20205304，國(guó)械注準(zhǔn)：20203400182；IgG批號(hào)：G20200050004，國(guó)械注準(zhǔn)：20203400183）。將20μl血清樣品添加到980μl樣品稀釋液中，混勻5s，靜置15min后開始實(shí)驗(yàn)。樣本的發(fā)光值與其中的新冠病毒IgG/IgM抗體濃度呈正相關(guān)，并通過相對(duì)光單位（RLU值）和內(nèi)置的校準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算，超過1S/CO截?cái)嘀蹬袛酁殛?yáng)性[7]。2.質(zhì)量管理梁詠梅等為了測(cè)量新冠病毒核蛋白(N)的血清抗體IgG和刺突(S)蛋白R(shí)BD的IgM抗體水平，使用經(jīng)過充分驗(yàn)證的ELISA試劑盒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)（北京萬泰生物制藥企業(yè)有限公司）。參與實(shí)驗(yàn)的工作人員必須經(jīng)過嚴(yán)格的生物安全防護(hù)培訓(xùn)與實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作培訓(xùn)。檢測(cè)人員在實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作，強(qiáng)化防治污染的意識(shí)，及時(shí)學(xué)習(xí)，不斷提高實(shí)驗(yàn)操作能力與數(shù)據(jù)分析能力。對(duì)使用儀器進(jìn)行驗(yàn)證、校準(zhǔn)，對(duì)操作人員、儀器、不同批號(hào)試劑進(jìn)行比對(duì)，均符合要求；對(duì)弱陽(yáng)性樣本使用至少來自2個(gè)不同廠家但包被抗原一致的試劑進(jìn)行復(fù)核檢驗(yàn)；對(duì)陽(yáng)性標(biāo)本均經(jīng)2次復(fù)核。當(dāng)日每批次檢測(cè)均設(shè)立陰陽(yáng)性質(zhì)控，陰陽(yáng)性質(zhì)控品檢測(cè)結(jié)果符合預(yù)期時(shí)判斷在控，如若不符合則判斷失控，分析失控原因，調(diào)整后重新檢測(cè)樣本[8]。三、核酸檢測(cè)方式1.核酸檢測(cè)目前，sars-cov-2的核酸檢測(cè)技術(shù)是基于實(shí)時(shí)熒光RT-PCR。RT-PCR技術(shù)已在臨床實(shí)驗(yàn)室中應(yīng)用多年。其檢測(cè)系統(tǒng)成熟[9]。它不僅具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、檢測(cè)周期短、定量檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)，而且可以動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。病毒感染及治療效果[10]。然而，由于實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)sars-cov-2的陽(yáng)性率較低，檢測(cè)的準(zhǔn)確性受到業(yè)內(nèi)人士的高度質(zhì)疑。陽(yáng)性率低的主要原因可能有以下幾點(diǎn)[11]。根據(jù)國(guó)家衛(wèi)生委發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)技術(shù)指南》，用于檢測(cè)sars-cov-2的樣本類型包括上呼吸道樣本(如咽拭子、鼻拭子等)、下呼吸道樣本(如呼吸道噴霧劑、支氣管沖洗液、深咳痰等)、結(jié)膜拭子、糞便標(biāo)本、抗凝血標(biāo)本等。最高的陽(yáng)性檢出率仍在探索中[11]。此外，sars-cov-2的感染途徑還不完全清楚，最佳采樣時(shí)間也不確定。如果樣品中病毒載量濃度低于檢出限，將不可避免地出現(xiàn)假陰性結(jié)果；此外，目前實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果顯示，下呼吸道樣本中srs-cov-2核酸檢測(cè)的檢出率是最高的冠狀病毒診療方案(最新版本)[12]。痰液是核酸檢測(cè)的首選樣本，但臨床檢測(cè)所需的樣本多為上呼吸道樣本。采集質(zhì)量的差異必然會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的陰性結(jié)果[13]。2.質(zhì)量管理由于環(huán)境條件和實(shí)驗(yàn)設(shè)備的限制，RNA病毒核酸穩(wěn)定性較差，容易降解，容易產(chǎn)生假陰性[14]。蘇娟等研究證實(shí)srs-cov-2的基因組結(jié)構(gòu)由5'untranslateregion(UTR)、轉(zhuǎn)錄復(fù)合物(orf1ab)、S基因、E基因、M基因、N基因和3'UTR從上到下依次組成。除了讀取之外，還有一些未知的幀序列。實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)srs-cov-2DNA需要根據(jù)這些具體結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步設(shè)計(jì)。理論上，探測(cè)到的目標(biāo)越多，探測(cè)率(靈敏度)越高。然而，在實(shí)際的研發(fā)中，目標(biāo)數(shù)量越多，設(shè)計(jì)前綴和查詢就越復(fù)雜，這無疑會(huì)給設(shè)計(jì)方法和產(chǎn)品加工帶來更多的困難[15]。根據(jù)美國(guó)疾病控制與預(yù)防中心的建議，orf1ab是準(zhǔn)確率最高的靶點(diǎn)，e基因是一線篩查的靶點(diǎn)，N基因是額外的靶點(diǎn)。因此，目前的sars-cov-2DNA檢測(cè)試劑盒可分為單靶點(diǎn)(orf1ab+N基因/E基因)、雙靶點(diǎn)(orf1ab+N基因/E基因)和三個(gè)靶點(diǎn)(orf1ab+N基因+E基因)。不完整的目標(biāo)設(shè)計(jì)自然會(huì)降低檢測(cè)率。此外，研究與開發(fā);D、生產(chǎn)sars-cov-2應(yīng)急檢測(cè)試劑盒缺乏足夠的臨床應(yīng)用驗(yàn)證和系統(tǒng)驗(yàn)證。擴(kuò)增區(qū)域的突變和試劑批次的變化可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果；此外，目前的檢測(cè)試劑是用來提取RNA的:質(zhì)量不保證，定量測(cè)量樣品通常是用于擴(kuò)增而不是RNA拷貝數(shù)。目前大多數(shù)檢測(cè)試劑盒的檢出限為500份/ml，有的檢出限為200份/ml，檢出限過低，可能會(huì)影響最終的擴(kuò)增效果，導(dǎo)致錯(cuò)誤的陰性結(jié)果[16]。此外，影響核酸檢測(cè)分析的因素還有很多，如采樣周期、樣品的正確儲(chǔ)存和運(yùn)輸、實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范、結(jié)果的正確判斷和解釋等。問題可能導(dǎo)致不可靠的結(jié)果[17]。[2]蘇疾.抗原檢測(cè)助力戰(zhàn)勝新冠疫情[J].江蘇衛(wèi)生保健,2022(05):56.[3]許玉玲,王海霞,李金月,夏向群,黃學(xué)勇.新型冠狀病毒抗原檢測(cè)膠體金法與核酸檢測(cè)實(shí)時(shí)熒光RT-PCR方法比較[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2022,38(07):791-794.[4]明焱,馮汝鵬,樸永杰.基于新冠病毒熒光檢測(cè)的RT-qPCR溫控系統(tǒng)[J].電子測(cè)量技術(shù),2022,45(06):18-23.[5]新冠病毒抗原檢測(cè)應(yīng)用方案(試行)[J].全科醫(yī)學(xué)臨床與教育,2022,20(04):293-294.[6]劉義蘭,金艷,陳秋香,陳慶,方紅梅,耿力,劉倩,呂冬梅,莫蓓蓉,宋錦平,王莉,吳艷艷,楊起,張紅梅,周依群,周鳳,朱小平,朱震宇,祝毅,程范軍.醫(yī)院參與全員新冠病毒核酸檢測(cè)樣本采集管理專家共識(shí)[J].護(hù)理學(xué)雜志,2022,37(05):1-4.[7]曠翠萍,王恩運(yùn),李博生,李林濤,陳偉紅,宋鐵,孔東峰,葉秋燕,王艷梅,張家兒,江仕清,陳戊申,史蓉婕.血清抗體檢測(cè)在一起本地傳播新冠肺炎聚集性疫情溯源調(diào)查中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2021,48(22):4192-4196.[8]梁詠梅,岳營(yíng),李立博,樊文娟,姜靜靜,姜文國(guó).新冠肺炎患者出院6個(gè)月后血清抗體水平的檢測(cè)[J/OL].上海預(yù)防醫(yī)學(xué):1-5[2022-05-26].[9]張祎,李飛飛,汪琳,任彤.新冠病毒核酸檢測(cè)免疫磁珠富集前處理研究[J].中國(guó)口岸科學(xué)技術(shù),2022,4(03):60-65.[10]余靜怡,余方友.新冠病毒實(shí)驗(yàn)室常見檢測(cè)方法[J/OL].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2022(04):635-640[2022-05-26].[11]錢揚(yáng)會(huì),董建英.2019新型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與預(yù)防研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2020,17(10):1457-1459+1463.[12]KunnumakkaraAB,RanaV,ParamaD,et.al.COVID-19,cytokines,inflammation,andspices:Howaretheyrelated?[J].LifeSciences,2021:(119201).[13]顧兵.新冠病毒檢測(cè)技術(shù)和臨床科研策略[J].中華臨床實(shí)驗(yàn)室管理電子雜志,2021,9(03):192.[14]蒯文和,吳忠蘭,韓坤,馬學(xué)平,張薇,楊東智,曹慜,袁芳,趙建華.新冠病毒核酸檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制措施建立初探[J].中國(guó)公共衛(wèi)生管理,2021,37(06):838-841.[15]蘇娟,梁丹,黎薇,莫艷玲,廖劍洪,鄭煥英,柯昌文.基于微量病毒中和抗體試驗(yàn)的新冠肺炎臨床確診病例血清樣本的抗體檢測(cè)方法評(píng)價(jià)[J].中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志,2021,35(06):680-683.[16]MathuriaJP,YadavR,RajkumarLaboratorydiagnosisofSA