GB 5040-2003 柑桔苗木產(chǎn)地檢疫規(guī)程（正式版）

ICS65.020.40GB5040—2003代替GB5040—1985IGB5040—2003本標(biāo)準(zhǔn)代替GB5040—1985《柑桔苗木產(chǎn)地檢疫規(guī)程》。本標(biāo)準(zhǔn)與前版標(biāo)準(zhǔn)相比有如下變化：修訂后的標(biāo)準(zhǔn)在檢疫性有害生物中增加了1995年農(nóng)業(yè)部新公布的檢疫對象；在有害生物的檢測方中關(guān)于無疫產(chǎn)地及非疫產(chǎn)地生產(chǎn)點理念，名詞術(shù)語和概念與有關(guān)國際標(biāo)準(zhǔn)保持一致。同時，對前版標(biāo)準(zhǔn)部分條文中的一些提法做了適當(dāng)修改。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A、附錄B、附錄C均為規(guī)范性附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部種植業(yè)管理司歸口。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心。物檢疫站、四川省資中縣植保植檢站。本標(biāo)準(zhǔn)委托全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心負責(zé)解釋。本標(biāo)準(zhǔn)1985年首次發(fā)布，本次為第一次修訂。1GB5040—2003柑桔苗木產(chǎn)地檢疫規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)適用于實施柑桔產(chǎn)地檢疫的植物檢疫機構(gòu)和所有柑桔種苗繁育單位(個人)。2術(shù)語和定義因植物檢疫的目的而單獨管理的生產(chǎn)點。3檢疫性有害生物柑桔黃龍病菌Liberobacterasianticum(CitrusHuanglongbing)柑桔潰瘍病菌Xanthomonascampestrispv.citri(Hasse)Dye柑桔大實蠅Bactrocera(Tetradacus)minaxEnderlein蜜柑大實蠅Bactrocera(Tetradacus)tsuneonis(Miyake)柑桔小實蠅Bactroceradorsalis(Hendel)4無檢疫性有害生物苗木的培育柑桔苗木的繁育單位或個人，必須填交產(chǎn)地檢疫申報表(見表1),經(jīng)當(dāng)?shù)刂参餀z疫機構(gòu)審核同意后方可進行繁育。2GB5040—2003申報單位(農(nóng)戶):聯(lián)系人：聯(lián)系電話：地址：種植地點種植地塊種植面積/667m2(畝)品種種苗來源預(yù)計播期預(yù)計種苗數(shù)量/kg(株)隔離條件合計植物檢疫機構(gòu)審核意見：審核人：植物檢疫專用章注1:本表一式二聯(lián)，第一聯(lián)由審核機關(guān)留存，第二聯(lián)交申報單位。注2:本表僅供當(dāng)季使用。4.2苗圃地的選定4.2.1選在無檢疫性有害生物地區(qū)。4.2.2在柑桔黃龍病發(fā)生區(qū)，苗圃地要符4.3繁殖材料的采集和消毒消毒技術(shù)見附錄A。4.4苗圃母本園的建立消毒技術(shù)見附錄B。4.5苗圃防疫措施4.5.1禁止攜帶未經(jīng)消毒的柑桔種子、苗木和果實進入苗圃。4.5.2苗圃內(nèi)使用的工具要新置專用，使用后要用10%漂白粉水溶液或1%次氯酸鈉溶液消毒，用清水沖洗后晾干備用。4.5.3嚴(yán)格防除柑桔木虱。5現(xiàn)場檢驗5.1由植物檢疫人員在苗木夏梢轉(zhuǎn)綠后、秋梢轉(zhuǎn)綠后和出圃前進行產(chǎn)地檢查5.2在全面目測檢查的基礎(chǔ)上，用隨機取樣法檢查(取樣10個以上)。苗木在1萬株以下查全部，1萬株至10萬株查30%,10萬株以上查15%。5.3記錄檢查結(jié)果，詳細填寫產(chǎn)地檢疫田間調(diào)查記錄表(見表2)。3GB5040—2003表2柑桔苗木產(chǎn)地檢疫田間調(diào)查記錄表調(diào)查日期接穗來源育苗單位繁育地點砧木品種接穗品種育苗時間苗木數(shù)量消毒方法隔離條件調(diào)查株數(shù)可疑株數(shù)黃龍病潰瘍病田間調(diào)查情況(檢疫性有害生物發(fā)生情況)調(diào)查人5.4柑桔苗木調(diào)運時，100株以下全部檢查；10000株以下抽樣檢查6%～10%;10000株以上抽樣檢查3%～5%。時送回實驗(檢驗)室確診鑒定。6.2柑桔檢疫性有害生物識別鑒定見附錄C。7檢驗結(jié)果表3檢疫檢驗報告單對應(yīng)申報號樣本編號取樣日期植物名稱品種名稱取樣部位檢驗方法檢驗結(jié)果檢驗人(簽名)審核人(簽名)單位蓋章4GB5040—20038疫情處理并派人監(jiān)督執(zhí)行。表4植物檢疫處理通知書聯(lián)系人聯(lián)系電話植物名稱種植地點種植面積種苗數(shù)量kg(株)檢驗結(jié)果處理意見檢疫員(簽字):站長(簽字):植物檢疫站(蓋章)注：第一聯(lián)交申報單位(人),第二聯(lián)留植物檢疫機關(guān)。9簽證5GB5040—2003表5產(chǎn)地檢疫合格證有效期至檢疫日期作物名稱品種名稱種植面積田塊數(shù)目種苗數(shù)量kg(株)種苗來源種植單位檢疫結(jié)果簽發(fā)機關(guān)(蓋章)檢疫員注1:本證第一聯(lián)交生產(chǎn)單位憑證換取植物檢疫證書，第二聯(lián)留存檢疫機關(guān)備查。注2:本證不作《植物檢疫證書》使用。6GB5040—2003A.1種子消毒A.1.1器材A.1.2消毒步驟A.1.2.1在恒溫器內(nèi)注入55℃~56℃熱水，并使之自動控制在55℃±0.3℃之內(nèi)，若用保溫茶桶注入水溫略高一點的熱水，使桶內(nèi)水溫達到55℃~57℃(不高于57℃);A.1.2.3取出立即投入恒溫器或保溫茶桶內(nèi)，投入種子后注意并記錄水溫變化，使水溫保持在55℃±A.1.3其他A.2接穗采集和消毒A.2.1采集接穗采自無病區(qū)、病區(qū)內(nèi)隔離健康老樹和6年生以上無病果園中的健康植株。水桶，1個；水盤，1個；消毒用塑料盤(或桶)4個；方盤2個；放大鏡3個；500mL量筒(或量杯)1A.2.2.2消毒步驟A.2.2.2.1用放大鏡逐條檢查接穗，淘汰A.2.2.2.2配1000單位/mL鹽酸四環(huán)素液備用；A.2.2.2.3把接穗置于四環(huán)素液中浸2h,浸漬過程A.2.2.2.4在700單位/mL硫酸鏈霉素和1%乙醇的混合液中浸30min,取出靜置20min～30min,A.2.3其他7GB5040—2003(規(guī)范性附錄)母本園接穗消毒技術(shù)恒溫接穗消毒箱或超級恒溫器，1臺；水桶，1個；鏈霉素，200萬單位；量筒(500mL),1個；標(biāo)準(zhǔn)溫B.2消毒步驟B.2.1用放大鏡仔細檢查接穗，除去帶病斑的芽條。B.2.2消毒箱加溫(水浴加溫),使箱內(nèi)濕熱空氣達49℃,并保持49℃±0.3℃。B.2.3把接穗倒置放入消毒箱內(nèi)，迅速加蓋，待溫度回升至49℃時，開始計算處理時間，保持49℃±0.3℃,并維持50min。B.2.4處理完畢，把接穗立即取出，轉(zhuǎn)入38℃~40℃含1%乙醇的700單位/mL鏈霉素溶液中(即每100mL鏈霉素加入1mL乙醇),浸30min。B.2.5取出后在潔凈的器皿上放置20min～30min,沖洗，表面水分晾干后用紗布保存待用。8GB5040—2003(規(guī)范性附錄)C.1柑桔潰瘍病C.1.1癥狀檢查C.1.3分離C.1.3.1取小塊病組織用無菌水沖洗后放入0.5mL～2.0mL無菌水，用滅菌玻棒研碎，在室溫下浸泡15min～20min,將抽片(10片以上),離心濃縮后做適當(dāng)稀釋，在28℃人工培養(yǎng)基上(20個培養(yǎng)皿以上劃線)培養(yǎng)，挑取單菌落。色陰性。采集溫室中生長的感病品種柑桔苗的幼頂葉，用自來水沖洗10min,1%次氯酸鈉溶液表面消毒1min～4min,在無菌條件下用滅菌蒸餾水徹底沖洗，然后針刺葉片背面造成傷口，背面朝上放于盛有1%水洋菜的培養(yǎng)皿中，每個傷口(5個～10個針眼)加10μL～20μL病斑水抽提液，在25℃~30℃有光條件下培養(yǎng)5天~7天后，觀察針刺傷口的反應(yīng)，通常一周內(nèi)形成典型的組織進裂癥狀。如果需要做C.1.5血清學(xué)檢驗C.1.5.1抗血清制備：由經(jīng)檢疫機構(gòu)確認的單位C.1.5.3免疫熒光測定(IF):由經(jīng)檢疫機構(gòu)確認的單位提供診斷試劑盒，按統(tǒng)一方法檢測。C.1.6致病性鑒定C.2柑桔黃龍病C.2.1主要診斷依據(jù)是田間出現(xiàn)的“葉片斑駁型黃化”和“黃梢”。葉片斑駁型黃化即葉片轉(zhuǎn)綠后從主、側(cè)脈附近和葉片基部開始黃化，黃化部分9GB5040—2003C.3柑桔大實蠅C.3.1用肉眼或低倍放大鏡檢查柑桔苗圃周圍桔園果實外部有無產(chǎn)卵孔、幼蟲脫果孔。的現(xiàn)象?；野咨×鸭y。未熟先黃現(xiàn)象不明顯。注意與蝽象為害及機械刺傷的區(qū)別。蝽象危害及機械刺傷刺點不突出，也不凹陷，橫剖白皮層無暈C.3.1.2脫果孔：孔內(nèi)大外小，深達瓤瓣，外緣整齊光滑(注意與吸果夜蛾成蟲刺孔的區(qū)別：吸果夜蛾刺孔內(nèi)外大小一致，邊緣多數(shù)整齊，有時有汁液溢出。與卷葉蛾幼蟲蛀孔的區(qū)別：卷葉蛾幼蟲蛀孔外大30個左右的指突(注意與蜜柑大實蠅幼蟲的區(qū)別。蜜柑大實蠅幼蟲前氣門“T”字形，兩邊略彎曲，有33個～35個指突，與小實蠅的區(qū)別在于小實蠅的幼蟲前氣門呈環(huán)柱形，有10個～13個指突),后氣門腎臟形，氣門板上有3個長橢圓形裂口，外側(cè)有4叢細毛群(外露氣管叢),內(nèi)側(cè)中間1個扣狀突(蜜柑大實蠅有5叢細毛群；柑桔小實蠅后氣門新月形，外側(cè)4叢細毛群特多，內(nèi)側(cè)扣狀突較大而明顯)。C.3.3成蟲：體長12mm～13mm(不包括產(chǎn)卵器),翅展20mm～24mm。黃褐色。胸部背面具鮮黃色和黑褐色條紋，常在正中構(gòu)成“人”字形紋。胸部具有肩板側(cè)鬃1對，背側(cè)鬃前后各1對，后翅上鬃2對，小盾鬃1對。腹部卵圓形，背面中央有一黑色縱紋與第3腹節(jié)前緣黑色