藥物的鎮(zhèn)痛作用

【實驗目的】8/12/2024freeteamplatefrom11.學習痛閾測定及三種痛覺測定方法。2.觀察嗎啡或哌替啶的鎮(zhèn)痛作用。【實驗原理】疼痛是臨床常見的病癥之一。它除了表現(xiàn)為痛覺即由傷害性刺激引起的一種主觀感受外，還經常在痛覺的基礎上伴發(fā)并表現(xiàn)出各種痛反應如自主神經反應、軀體防御反應和心理情感及行為反應等為減輕疼痛而在臨床上應用的鎮(zhèn)痛（催眠）藥、鎮(zhèn)痛藥和麻醉藥等，一般就是通過提高痛覺閾值來達到鎮(zhèn)痛目的。本實驗應用熱板法和化學刺激法，觀察鎮(zhèn)痛藥嗎啡或哌替啶對小白鼠痛覺閾值的影響及其表現(xiàn)。8/12/2024freeteamplatefrom2一、熱板法【材料與方法】一、實驗動物：雌性小白鼠，18～22g。二、器材與藥品：Woolfe熱板、天平、1ml注射器2支、注射針頭、鼠籠、秒表、0.1％鹽酸嗎啡或0.4%鹽酸哌替啶、生理鹽水。8/12/2024freeteamplatefrom3三、方法與步驟：⒈篩選實驗動物⑴將浴槽加滿水并使水面接觸熱板，通過控溫儀裝置使熱板表面溫度維持在55±1℃，然后將小白鼠置于熱板上，密切觀察它的活動；在正常情況下，大多數(shù)小白鼠在熱刺激下出現(xiàn)不安的表現(xiàn)如舉前肢、抬后肢、跳躍等。但以上指標不穩(wěn)定而不宜作為痛閾指標，若將舔后爪出現(xiàn)的時間作為疼痛反應的指標，則更具客觀性。⑵當小白鼠出現(xiàn)舔后爪時，立即記錄時間并同時將其取出（以免燙傷足部），該時間即為小白鼠的痛閾值。用此法篩選痛閾值在30s以內的小鼠以供實驗用。8/12/2024freeteamplatefrom48/12/2024freeteamplatefrom5⑶取已選出的小白鼠4只稱重，隨機分為兩組即對照組和實驗組（每組2只），按上述方法分別測定給小白鼠注射藥物和生理鹽水前的痛閾值。

⑷實驗組小白鼠腹腔注射0.1%鹽酸嗎啡10mg/kg(0.1ml/10g)或0.4%鹽酸哌替啶40mg/kg（0.1ml/10g）、對照組小白鼠腹腔注射等容量生理鹽水，并于注射后15、30、45min分別再次測定小鼠痛閾值。其中，對于60s不舔后爪的小鼠，痛閾按60s計算。

8/12/2024freeteamplatefrom6⑸匯總實驗結果，用下列公式計算痛閾改變百分率:

痛閾改變百分率＝（用藥后平均痛閾值－用藥前平均痛閾值）/用藥前平均痛閾值×100%

5.將給藥前、后小白鼠痛閾值記入下表。并計算各時間點的痛閾改變百分率。以橫坐標表示時間、縱坐標表示痛閾改變百分率，繪出用藥后15min、30min、45min小鼠的痛閾改變百分率時效曲線。8/12/2024freeteamplatefrom7給藥后前小白鼠痛閾值8/12/2024freeteamplatefrom8動物只數(shù)給藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）15min30min45min實驗組對照組痛閾改變百分率時效曲線8/12/2024freeteamplatefrom9【注意事項】1.熱板法個體差異大，實驗動物應預先篩選。一般以疼痛反應在30s以內者為敏感鼠可供實驗用。2.小鼠應選雌性，因雄性小鼠遇熱陰囊松弛，易與熱板接觸而影響實驗結果。3.用藥后小鼠痛閾值超過60s者應立即取出，以防止燙傷足部而影響實驗結果，其痛閾值按60s計算。8/12/2024freeteamplatefrom10二、化學刺激法【材料與方法】一、實驗動物：小白鼠，18～22g，雌雄不限。二、器材與藥品：天平、1ml注射器2支、注射針頭、鼠籠、0.4%鹽酸哌替啶、生理鹽水、0.6％醋酸或1％酒石酸銻鉀溶液。8/12/2024freeteamplatefrom11三、方法與步驟：1.取體重相近的小白鼠4只稱重，隨機分為2組即實驗組和對照組（每組2只），并觀察每組動物的活動情況。2.實驗組小白鼠腹腔注射1％鹽酸哌替啶40mg/10g（0.1ml/10g）,對照組腹腔注射點等容量的生理鹽水。8/12/2024freeteamplatefrom128/12/2024freeteamplatefrom133.20min后，兩組小白鼠均腹腔注射1％酒石酸銻鉀0.1ml/10g或0.6%醋酸0.1ml/10g，并觀察15min內各組出現(xiàn)扭體反應的動物數(shù)。如在注射藥物之后，小白鼠會因腹腔受刺激而出現(xiàn)強烈的腹痛，進而外在地表現(xiàn)為扭體反應（腹部內凹、軀干和后腿伸張、臀部抬高等）。此時將給藥組與對照組相比，若前者使扭體反應發(fā)生率減少50％以上，即可認為哌替啶產生了鎮(zhèn)痛作用。8/12/2024freeteamplatefrom144.匯總實驗結果，將各組發(fā)生扭體反應和未發(fā)生扭體反應的小鼠記入下表，并計算藥物鎮(zhèn)痛百分率

藥物鎮(zhèn)痛百分率＝（實驗組無扭體反應數(shù)－對照組無扭體反應數(shù)）/對照組扭體反應數(shù)×100％。

8/12/2024freeteamplatefrom15小白鼠發(fā)生和未發(fā)生扭體反應數(shù)目的統(tǒng)計動物數(shù)扭體反應數(shù)無扭體反應數(shù)實驗組對照組【注意事項】1.酒石酸銻鉀或醋酸需臨用時配制,若存放過久，作用會明顯減弱2.哌替啶給藥劑量要準確，否則劑量過大會造成呼吸抑制，劑量過小則不出現(xiàn)作用。8/12/2024freeteamplatefrom16三、甩尾法【材料與方法】一、實驗動物：小白鼠，18～22g，雌雄不限。二、器材與藥品：恒溫水浴箱、天平、1ml注射器3支、注射針頭、小鼠固定器、0.4%鹽酸哌替啶、30%安乃近、生理鹽水。8/12/2024freeteamplatefrom17三、方法與步驟：1.取體重相近的小白鼠3只稱重，觀察每只動物的活動情況。將小鼠裝入小鼠固定器，暴露鼠尾，將鼠尾的1/3~1/4浸入55℃熱水中，約6s內小鼠出現(xiàn)甩尾動作，作為小鼠痛閾值。超出6s的小鼠應棄除。2.甲鼠腹腔注射0.4％鹽酸哌替啶40mg/kg（0.1ml/10g）,乙鼠腹腔注射3%安乃近300mg/kg（0.1ml/10g）,丙鼠腹腔注射點等容量的生理鹽水。并于注射后10、20、30、40min分別再次測定小鼠痛閾值。其中，對于60s不甩尾的小鼠，痛閾按60s計算。8/12/2024freeteamplatefrom188/12/2024freeteamplatefrom193.匯總實驗結果，用下列公式計算痛閾改變百分率:

痛閾改變百分率＝（用藥后平均痛閾值－用藥前平均痛閾值）/用藥前平均痛閾值×100%

4.將給藥前、后小白鼠痛閾值記入下表。并計算各時間點的痛閾改變百分率。

8/12/2024freeteamplatefrom20給藥后前小白鼠痛閾值動物只數(shù)給藥前痛閾值（s）給藥后痛閾值（s）10min20mion30min