《植物中游離氨基酸的測定GBT+30987-2020》詳細(xì)解讀

《植物中游離氨基酸的測定GB/T30987-2020》詳細(xì)解讀contents目錄1范圍2規(guī)范性引用文件3術(shù)語和定義4全自動氨基酸分析儀法(第一法)5高效液相色譜法(第二法)6液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(第三法)contents目錄附錄A(資料性附錄)氨基酸化合物信息及定量限附錄B(資料性附錄)21種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖附錄C(資料性附錄)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參數(shù)參考條件011范圍1范圍標(biāo)準(zhǔn)適用范圍：該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了植物中游離氨基酸含量的測定方法，適用于茶葉、中藥材、煙葉等植物樣品中21種游離氨基酸的測定。丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、胱氨酸、γ氨基丁酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、賴氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、絲氨酸、茶氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、纈氨酸。方法種類：包括全自動氨基酸分析儀法(第一法)、高效液相色譜儀法(第二法)和液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法(第三法)三種方法。此標(biāo)準(zhǔn)不僅為植物中游離氨基酸的測定提供了標(biāo)準(zhǔn)化的方法，而且對于研究植物的氨基酸代謝、抗逆生理以及植物產(chǎn)品的加工、品質(zhì)鑒定等具有重要意義。通過這些方法的應(yīng)用，可以準(zhǔn)確地測定植物中的游離氨基酸含量，進(jìn)而了解植物的營養(yǎng)成分、代謝狀態(tài)以及抗逆性等信息，為植物科學(xué)研究和產(chǎn)品開發(fā)提供有力支持。022規(guī)范性引用文件保證了實驗用水的純度和質(zhì)量，從而確保游離氨基酸測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。為植物中游離氨基酸的測定提供了基礎(chǔ)支持，確保實驗條件的一致性和可重復(fù)性。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了分析實驗室用水的級別、技術(shù)要求和試驗方法。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法規(guī)定了茶葉磨碎試樣的制備方法以及干物質(zhì)含量的測定方法。為植物樣品，特別是茶葉中游離氨基酸的測定提供了標(biāo)準(zhǔn)化的前處理步驟。確保了不同實驗室之間測定結(jié)果的可比性和準(zhǔn)確性，為茶葉質(zhì)量控制和品質(zhì)評價提供依據(jù)。在《植物中游離氨基酸的測定GB/T30987-2020》中，規(guī)范性引用文件起到了至關(guān)重要的作用。它們不僅為本標(biāo)準(zhǔn)的實施提供了技術(shù)支持和操作指南，還確保了測定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。通過遵循這些規(guī)范性引用文件，研究人員和檢測人員能夠更好地理解和執(zhí)行本標(biāo)準(zhǔn)，從而為植物中游離氨基酸的測定提供有力保障。GB/T8303-2013茶—磨碎試樣的制備及其干物質(zhì)含量測定033術(shù)語和定義定義指以游離狀態(tài)存在于植物體內(nèi)的氨基酸，不與其他分子結(jié)合，具有生物活性。特點游離氨基酸在植物體內(nèi)起著重要的生理作用，如參與蛋白質(zhì)合成、調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育等。3.1游離氨基酸3.2植物樣品取樣方法應(yīng)選擇新鮮、無病蟲害的植物樣品，避免使用腐爛、變質(zhì)的樣品。取樣時應(yīng)盡量保證樣品的均勻性和代表性。定義指用于測定游離氨基酸含量的植物組織或器官，如茶葉、中藥材、煙葉等。定義指利用全自動氨基酸分析儀對植物樣品中的游離氨基酸進(jìn)行定性和定量分析的方法。原理該方法基于氨基酸與茚三酮的顯色反應(yīng)，通過比色法測定氨基酸的含量。全自動氨基酸分析儀能夠自動完成樣品的進(jìn)樣、反應(yīng)、檢測和數(shù)據(jù)處理等過程，提高了測定的準(zhǔn)確性和效率。3.3全自動氨基酸分析儀法（第一法）指利用高效液相色譜儀對植物樣品中的游離氨基酸進(jìn)行分離和定量分析的方法。定義該方法利用高效液相色譜技術(shù)將氨基酸分離，并通過紫外檢測器或熒光檢測器進(jìn)行檢測。該方法具有分離效果好、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，適用于復(fù)雜樣品中氨基酸的測定。原理3.4高效液相色譜儀法（第二法）定義指利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對植物樣品中的游離氨基酸進(jìn)行定性和定量分析的方法。原理該方法結(jié)合了液相色譜的分離能力和質(zhì)譜的定性能力，能夠?qū)Π被徇M(jìn)行準(zhǔn)確的定性和定量分析。該方法具有靈敏度高、分辨率好、抗干擾能力強等優(yōu)點，適用于復(fù)雜樣品中痕量氨基酸的測定。3.5液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（第三法）044全自動氨基酸分析儀法(第一法)利用各種氨基酸組分的結(jié)構(gòu)不同、酸堿性、極性及分子大小不同，在陽離子交換柱上將它們分離。采用不同pH值和離子濃度的緩沖液，將各氨基酸組分依次洗脫下來。洗脫下的氨基酸與另一流路的茚三酮試劑混合，在特定溫度（通常為115～120℃）下進(jìn)行顯色反應(yīng)，生成在570nm有最大吸收的藍(lán)紫色產(chǎn)物（羥脯氨酸與茚三酮反應(yīng)生成黃色產(chǎn)物，在440nm有最大吸收）。原理儀器全自動氨基酸分析儀，包括陽離子交換柱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等。試劑茚三酮試劑、不同pH值和離子濃度的緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)氨基酸溶液等。儀器與試劑操作步驟1.樣品處理去除樣品中的脂肪雜質(zhì)，必要時進(jìn)行酸水解，使蛋白質(zhì)完全變成氨基酸。2.上柱分析將處理后的樣品上柱，利用陽離子交換柱分離各種氨基酸。3.顯色與檢測分離后的氨基酸與茚三酮試劑混合顯色，通過檢測器在特定波長下測定吸光度。4.數(shù)據(jù)處理利用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對檢測到的信號進(jìn)行自動處理，計算各氨基酸的含量。優(yōu)點全自動操作，分析速度快，準(zhǔn)確度高，可同時測定多種氨基酸。局限性優(yōu)點與局限性對樣品的前處理要求較高，需要去除干擾物質(zhì)；某些特殊氨基酸可能需要額外的分離和檢測條件。0102應(yīng)用范圍適用于茶葉、中藥材、煙葉等植物樣品中游離氨基酸的測定?？蓴U展應(yīng)用于食品、飼料、生物樣品等領(lǐng)域中氨基酸的分析?！啊?55高效液相色譜法(第二法)基于氨基酸與衍生化試劑的反應(yīng)，生成具有紫外吸收或熒光的衍生物通過檢測衍生物的峰面積或峰高，定量測定氨基酸的含量利用高效液相色譜技術(shù)分離和測定游離氨基酸原理如鄰苯二甲醛（OPA）、9-芴甲氧羰酰氯（FMOC-Cl）等衍生化試劑用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線和定量測定氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品用于色譜分離的溶劑系統(tǒng)，如磷酸鹽緩沖液、乙腈等流動相試劑和材料010203進(jìn)樣器用于將樣品注入色譜系統(tǒng)高效液相色譜儀具備紫外或熒光檢測器色譜柱適用于氨基酸分離的專用色譜柱儀器和設(shè)備1.樣品處理2.衍生化反應(yīng)將衍生化后的樣品注入色譜系統(tǒng)，記錄色譜圖和峰面積或峰高，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算氨基酸的含量。5.樣品測定利用氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于樣品的定量測定4.標(biāo)準(zhǔn)曲線制作選擇合適的流動相、流速、柱溫和檢測波長等參數(shù)3.色譜條件設(shè)置將植物樣品粉碎、提取游離氨基酸，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)膬艋蜐饪s將提取的氨基酸與衍生化試劑反應(yīng)，生成可檢測的衍生物操作步驟066液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(第三法)方法原理利用液相色譜對樣品中的游離氨基酸進(jìn)行分離。通過串聯(lián)質(zhì)譜對分離后的氨基酸進(jìn)行定性定量分析。操作步驟樣品制備按照標(biāo)準(zhǔn)方法提取植物樣品中的游離氨基酸。液相色譜條件設(shè)置選擇合適的色譜柱、流動相及洗脫梯度等條件。質(zhì)譜條件設(shè)置設(shè)定質(zhì)譜掃描范圍、碰撞能量等參數(shù)以優(yōu)化信號檢測。數(shù)據(jù)處理與分析利用專業(yè)軟件對采集的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，包括峰識別、定量計算等。能夠準(zhǔn)確識別并定量多種游離氨基酸。方法優(yōu)勢高選擇性對低濃度的氨基酸也能實現(xiàn)有效檢測。高靈敏度適用于多種植物樣品中游離氨基酸的測定。廣泛適用性注意事項樣品處理過程中要避免氨基酸的降解或污染。01液相色譜和質(zhì)譜的條件需根據(jù)具體樣品和儀器進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整。02數(shù)據(jù)分析時應(yīng)確保準(zhǔn)確性和可靠性，避免誤判或漏檢。0307附錄A(資料性附錄)氨基酸化合物信息及定量限附錄A(資料性附錄)氨基酸化合物信息及定量限附錄A提供了關(guān)于氨基酸化合物的重要信息和定量限，這是確保測定準(zhǔn)確性和可靠性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。以下是對該附錄的詳細(xì)解讀：氨基酸化合物信息：此部分列出了在測定中可能遇到的各種氨基酸，包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸等21種游離氨基酸。對于每一種氨基酸，都提供了詳細(xì)的化學(xué)信息，如分子式、分子量等，這些信息對于后續(xù)的定量分析和質(zhì)量控制至關(guān)重要。定量限：針對每一種氨基酸，附錄A都給出了具體的定量限。定量限是一個重要的參數(shù)，它定義了能夠被準(zhǔn)確測量的氨基酸的最小量。這有助于確保在測定過程中，即使對于含量非常低的氨基酸，也能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。此外，附錄A還可能包含關(guān)于如何處理和解釋測定結(jié)果的建議或指導(dǎo)，以及可能遇到的干擾因素和相應(yīng)的解決措施。這些信息對于實驗人員來說都是非常寶貴的，可以幫助他們更好地理解和執(zhí)行這項國家標(biāo)準(zhǔn)。08附錄B(資料性附錄)21種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖色譜圖概述色譜圖是一種通過色譜分析技術(shù)獲得的圖譜，用于展示不同物質(zhì)在色譜柱上的分離情況。本附錄提供的色譜圖是21種氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜圖，可作為實驗過程中的參考。根據(jù)色譜圖中的峰形和出峰時間，可以識別出不同的氨基酸成分。峰識別通過對色譜圖中各氨基酸峰的積分，可以計算出各氨基酸的含量。峰面積計算觀察色譜圖中各峰的分離情況，評價色譜柱的分離效果，以確保測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。分離效果評價色譜圖分析要點010203方法驗證在實驗過程中，可以通過對比標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖與實測樣品色譜圖，驗證測定方法的準(zhǔn)確性和可靠性。定性分析通過對比樣品色譜圖與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖，可以初步判斷樣品中含有的氨基酸種類。定量分析結(jié)合峰面積計算方法，可以對樣品中各氨基酸進(jìn)行定量分析，得出各氨基酸的具體含量。色譜圖在測定中的應(yīng)用09附錄C(資料性附錄)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參數(shù)參考條件附錄C(資料性附錄)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜參數(shù)參考條件色譜柱選擇適合的色譜柱是液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜分析中的關(guān)鍵步驟，通常根據(jù)目標(biāo)氨基酸的分子量和極性來選擇。流動相質(zhì)譜條件流動相的組成和梯度設(shè)置對于分離效果和分析時間有重要影響，需要根據(jù)具體氨基酸的性質(zhì)進(jìn)行調(diào)整。質(zhì)譜部分的參數(shù)設(shè)置包括離子源類型、電離電壓、離子傳輸管溫度等，這些參數(shù)會影響離子的生成和檢測靈敏度。數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)處理包括譜圖解析、定量分析和質(zhì)量控制等步驟，需要使用專業(yè)的軟件進(jìn)行操作。此外，該標(biāo)準(zhǔn)還規(guī)定了全自動氨基酸分析儀法和高效液相色譜儀法兩種測定方法，以及適用于茶葉、中藥材、煙葉等植物樣品中21種游離氨基酸的測定范圍。這些內(nèi)容的詳細(xì)解讀有助于更好地理解和應(yīng)用