臨床微生物標(biāo)本的采集與送檢

臨床微生物標(biāo)本

的采集(cǎijí)與送檢共六十五頁主要(zhǔyào)內(nèi)容標(biāo)本采集的意義和原則標(biāo)本的運(yùn)送(yùnsònɡ)與拒收原則各種標(biāo)本的采集何時采

怎么采

采多少

怎么送？共六十五頁標(biāo)本采集共六十五頁標(biāo)本采集

60%以上的實(shí)驗(yàn)誤差發(fā)生在分析前！標(biāo)本采集正確與否與檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性有密切的關(guān)系(guānxì)!因此，我們應(yīng)掌握正確的標(biāo)本采集方法。共六十五頁標(biāo)本(biāoběn)采集的意義正確(zhèngquè)的微生物標(biāo)本采集和運(yùn)送是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提共六十五頁掌握正確的標(biāo)本采集(cǎijí)方法

為保證標(biāo)本(biāoběn)的質(zhì)量，獲得陽性結(jié)果，應(yīng)掌握正確的標(biāo)本(biāoběn)采集方法、采集量和采集時間并應(yīng)及時送檢，特殊標(biāo)本還需注明采集時間。共六十五頁基本(jīběn)原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即(lìjí)送檢5.混有正常菌群標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)6.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑。7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗(yàn)?zāi)康墓擦屙摌?biāo)本(biāoběn)的運(yùn)送原則1、所有的標(biāo)本都必須立即送往實(shí)驗(yàn)室，最好在2h內(nèi),保存時間不應(yīng)超過24h.2、最佳的臨床標(biāo)本送檢首先取決于所獲取標(biāo)本的量.量少的標(biāo)本應(yīng)在采集后15-30min內(nèi)送檢.3、對環(huán)境敏感的微生物如志賀菌、奈瑟氏菌和流感嗜血桿菌（對低溫敏感）應(yīng)立即處理，禁止冷藏脊髓(jǐsuǐ)液和生殖道、眼部、內(nèi)耳道標(biāo)本。共六十五頁標(biāo)本(biāoběn)的拒收原則無標(biāo)簽、無檢驗(yàn)單不檢測，并與送檢的醫(yī)生和護(hù)士聯(lián)系。送檢延誤不接收，提醒送檢者，要求重新采集。送檢容器不當(dāng)(bùdānɡ)或滲漏不接收，告知送檢者，要求重新采集。標(biāo)本不符合要求不接收，聯(lián)系送檢者，指出不符合要求之處，要求重新采集符合試驗(yàn)要求的標(biāo)本.共六十五頁臨床微生物檢驗(yàn)(jiǎnyàn)常見標(biāo)本血液、骨髓標(biāo)本尿液糞便痰及上呼吸道(shànghūxīdào)標(biāo)本穿刺液標(biāo)本（腦脊液、膽汁、胸腹水等）膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本生殖道標(biāo)本共六十五頁一、血培養(yǎng)(péiyǎng)標(biāo)本采集共六十五頁血培養(yǎng)(péiyǎng)送檢指征病人出現(xiàn)以下臨床表現(xiàn)，或同時具備以下幾種臨床表現(xiàn)時應(yīng)采集血培養(yǎng)。1、發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）2、寒戰(zhàn)3、白細(xì)胞增多(zēnɡduō)（＞10×109/L，特別有“核左移”時）4、粒細(xì)胞減少（成熟的多形核白細(xì)胞＜1×109/L）5、血小板減少6、皮膚、粘膜出血7、昏迷8、多器官衰竭9、血壓降低10、呼吸加快11、特殊情況：可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低溫外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)增加尿液和腦脊液培養(yǎng)。共六十五頁血培養(yǎng)(péiyǎng)采集須知應(yīng)在抗生素應(yīng)用前或停藥一周后采集標(biāo)本，如不能停用抗生素，應(yīng)于下次抗生素應(yīng)用前采集！對懷疑(huáiyí)菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集２套以上血培養(yǎng)標(biāo)本。共六十五頁血培養(yǎng)(péiyǎng)采集容器法國梅里埃公司(ɡōnɡsī)血培養(yǎng)儀配套血培養(yǎng)瓶共六十五頁血培養(yǎng)標(biāo)本采集(cǎijí)方法1、皮膚消毒2、培養(yǎng)瓶消毒：(1)用75％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞子。(2)酒精作用60s。(3)在血液注入血培養(yǎng)瓶之前，用無菌紗布或棉簽清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后(ránhòu)注入血液。3、血液注入血培養(yǎng)瓶中，輕輕顛倒混勻，以防血液凝固。共六十五頁血培養(yǎng)采集(cǎijí)次數(shù)成年患者(huànzhě)：推薦同時采集２－３套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本）。嬰幼兒患者：推薦同時采集２次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。原因：血培養(yǎng)做1套的檢出率為65%。做2套和3套檢出率的檢出率分別為80%和90%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難臨床解釋。在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。兩個例外：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。共六十五頁血培養(yǎng)(péiyǎng)采血量成年(chéngnián)患者：推薦采血量每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者：兒童3-5ml，嬰兒為1-2ml，推薦采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1%）共六十五頁注意事項(xiàng)1、嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭處抽取標(biāo)本，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。（最好在對側(cè)采集）2、若同時(tóngshí)抽取幾個項(xiàng)目的血標(biāo)本，一般注入容器的順序?yàn)椋貉囵B(yǎng)瓶→抗凝管→干燥試管.動作要迅速準(zhǔn)確，避免溶血。注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶務(wù)必立即送至檢驗(yàn)科細(xì)菌室3、每次領(lǐng)培養(yǎng)瓶不宜過多，以防過期，未使用的培養(yǎng)瓶亦應(yīng)室溫保存（15-30℃），切勿放冰箱保存。共六十五頁骨髓標(biāo)本的微生物學(xué)(wēishēnɡwùxué)檢查

采集(cǎijí)部位：骨髓穿刺法從髂骨采集(cǎijí)標(biāo)本。

采集時間：在用藥前、發(fā)熱初期或高熱期

當(dāng)骨髓炎時或長期使用抗菌藥物患者，抽取骨髓培養(yǎng)陽性率遠(yuǎn)高于血液培養(yǎng)

共六十五頁

二、尿液標(biāo)本(biāoběn)的采集

共六十五頁尿液標(biāo)本(biāoběn)的送檢指征1有典型的尿路感染癥狀；2肉眼膿尿或血尿；3尿常規(guī)檢查表現(xiàn)為白細(xì)胞和/或亞硝酸鹽陽性；4不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5留置導(dǎo)尿管的病人出現(xiàn)發(fā)熱；6膀胱排空功能受損；7泌尿系統(tǒng)(mìniàoxìtǒnɡ)疾病手術(shù)前。共六十五頁尿液標(biāo)本采集(cǎijí)容器無菌試管或無菌尿液標(biāo)本留取(liúqǔ)容器共六十五頁尿液標(biāo)本(biāoběn)采集方法1、清潔中段尿標(biāo)本，囑咐患者睡前少飲水(yǐnshuǐ)，清晨起床后用肥皂水清洗會陰部，女性應(yīng)用手分開大陰唇，男性應(yīng)翻上包皮，仔細(xì)清洗，再用清水沖洗尿道口周圍，開始排尿，將前段尿排去，插入性接取中段尿約10ml于無菌容器中，立即送檢，于一小時內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿培養(yǎng)標(biāo)本收集方法，但很容易受到會陰部細(xì)菌污染，應(yīng)由醫(yī)護(hù)人員采集或在醫(yī)護(hù)人員指導(dǎo)下由患者正確留取。共六十五頁尿液標(biāo)本采集(cǎijí)方法2、恥骨上膀胱(pángguāng)穿刺：使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮穿入膀胱(pángguāng)吸取尿液，是評估膀胱(pángguāng)內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，但有一定的痛苦，病人難以接受。主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集

共六十五頁尿液標(biāo)本(biāoběn)采集方法3、直接導(dǎo)尿：按常規(guī)方法對會陰部進(jìn)行(jìnxíng)清洗消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液。可減少尿液標(biāo)本的污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能將下尿道的細(xì)菌引入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。

共六十五頁尿液標(biāo)本采集(cǎijí)方法4、小兒收集包：對于無控制能力的小兒可應(yīng)用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗(yàn)結(jié)果為陰性時才有意義(yìyì)。如果檢驗(yàn)結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行分析，必要時可使用恥骨上膀胱穿刺或?qū)蚍羧∧蛞哼M(jìn)行復(fù)查。

共六十五頁尿液標(biāo)本(biāoběn)采集方法5、留置(liúzhì)導(dǎo)尿管收集尿液：利用留置(liúzhì)導(dǎo)尿管采集標(biāo)本時，應(yīng)先消毒導(dǎo)尿管外部，按無菌操作方法用注射器穿刺導(dǎo)尿管吸取尿液，操作時應(yīng)防止混入消毒劑，不能從收集袋中采集尿液。長期留置(liúzhì)導(dǎo)尿患者，應(yīng)在更換新尿管時留取尿標(biāo)本。

共六十五頁注意事項(xiàng)

嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，因?yàn)槟蛞簶?biāo)本的采集(cǎijí)和培養(yǎng)中最大的問題是污染雜菌

通常應(yīng)取晨起第一次尿液送檢

多數(shù)藥物均通過尿液排泄，因此采集尿液應(yīng)在用藥前進(jìn)行

共六十五頁三、糞便(fènbiàn)標(biāo)本的采集

共六十五頁糞便標(biāo)本(biāoběn)的送檢指征1急性腹瀉：大便次數(shù)明顯增多，腹痛，里急后重，往往伴有發(fā)熱，大便性狀為粘液便或膿血便。2慢性腹瀉：大便次數(shù)多，多為稀便，伴有全身乏力等癥狀。3無痛性大量水樣便或米泔樣稀便。4先吐后瀉：惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉。有集體發(fā)病史，多為細(xì)菌性食物中毒所致。5抗生素治療后腹瀉：常發(fā)生于長期抗生素治療后，糊狀便，排便次數(shù)增加。6高熱驚厥：通常為中毒性痢疾(lìji)，多見于嬰幼兒和小兒。共六十五頁糞便(fènbiàn)標(biāo)本的采集容器一次性無菌便盒

共六十五頁糞便(fènbiàn)標(biāo)本采集時間1．采樣原則

腹瀉病人應(yīng)在急性期采集（3天以內(nèi)），以提高檢出率，亦最好(zuìhǎo)在用藥之前。2．沙門菌感染

腸熱癥在2周以后；胃腸炎病人在急性期，早期采集新鮮糞便

共六十五頁糞便標(biāo)本采集(cǎijí)方法

自然排便采集法

自然排便后，挑取其膿血、粘液部分2-3g，液狀糞便取絮狀物2-3ml，盛于滅菌容器內(nèi)或保存液中送檢

直腸拭子方法

如不易獲得糞便時，或排泄困難的患者及嬰兒，可用直腸拭子采取，即以無菌棉拭子用生理鹽水(shēnglǐyánshuǐ)濕潤后，插入肛門內(nèi)4-5cm（幼兒2-3cm）輕輕轉(zhuǎn)動取出，插入無菌試管內(nèi)送檢。共六十五頁注意事項(xiàng)

雖糞便(fènbiàn)含有多種雜菌，但應(yīng)盡量采用無菌容器（一次性無菌平皿）。

為提高檢出率，要采集新鮮糞便作培養(yǎng)，且應(yīng)挑取其膿血、粘液部分。

共六十五頁四、痰及上呼吸道標(biāo)本(biāoběn)的采集

共六十五頁痰標(biāo)本(biāoběn)送檢指征1咳嗽、咳痰：痰液可為膿性、血性、鐵銹色或紅棕色膠胨樣痰。

2咯血：肺結(jié)核病人常痰中帶血。

3呼吸困難4發(fā)熱5胸痛：當(dāng)炎癥(yánzhèng)病變累及壁層胸膜時，會發(fā)生胸痛。*肺部感染的患者有25～50％可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時作血培養(yǎng)。共六十五頁上呼吸道標(biāo)本(biāoběn)送檢指征1病毒性普通感冒伴有明顯(míngxiǎn)咽痛時，懷疑為咽部鏈球菌感染，應(yīng)做細(xì)菌培養(yǎng)。2細(xì)菌性咽－扁桃體炎：明顯咽痛、畏寒、發(fā)熱，體溫可達(dá)39℃以上。3上呼吸道感染易并發(fā)鼻竇炎、中耳炎、氣管－支氣管炎，需送相應(yīng)部位分泌物或痰液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。共六十五頁痰標(biāo)本(biāoběn)和上呼吸道標(biāo)本(biāoběn)采集容器一次性無菌留痰盒咽拭子或鼻咽拭子共六十五頁痰及上呼吸道(shànghūxīdào)標(biāo)本采集時間痰：一般以晨痰為好；支氣管擴(kuò)張癥患者，清晨起床后進(jìn)行體位引流，可采集大量痰標(biāo)本。咽拭標(biāo)本：時間(shíjiān)上雖無嚴(yán)格限制，但應(yīng)于抗菌藥物治療前為好。咽部又是呼吸和食物的通路，因此亦以晨起后采集為宜

共六十五頁痰標(biāo)本(biāoběn)采集方法：

自然咳痰法：患者清晨起床后，先用漱口(shùkǒu)水漱口(shùkǒu)，再以開水或生理鹽水漱口(shùkǒu)，以減少口腔常居菌群的污染，然后用力自氣管深部咳出第一口痰于無菌痰懷內(nèi)送檢

小兒取痰法：用壓舌板向后壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上，送檢

共六十五頁上呼吸道(shànghūxīdào)標(biāo)本（咽拭子）采集方法：

采集上呼吸道標(biāo)本通常采用無菌棉拭子。采集前患者應(yīng)用開水或生理鹽水反復(fù)漱口，由檢查者將舌向外拉，使腭垂盡可能向外牽引，將棉拭子通過舌根到咽后壁或腭垂的后側(cè)，涂抹(túmǒ)數(shù)次，但拭子要避免接觸口腔和舌粘膜

共六十五頁注意事項(xiàng)1．

采集標(biāo)本以清晨為佳，以減少口腔正常菌群的污染，采集前先用漱口液充分漱口。2．

做結(jié)核分枝桿菌和真菌培養(yǎng)的標(biāo)本若不能及時送檢(sònɡjiǎn)，應(yīng)放4℃冰箱保存，以免雜菌生長。3．

作結(jié)核分枝桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，以提高陽性檢出率。共六十五頁五、穿刺(chuāncì)液標(biāo)本共六十五頁穿刺(chuāncì)液標(biāo)本

采集時間：當(dāng)懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前(zhīqián)或停止用藥后1-2日采集

采集容器：無菌容器采集方法：采用無菌方法用注射器抽取體內(nèi)可疑感染部位的液體，注入無菌試管立即送檢

共六十五頁注意事項(xiàng)：

如果用于檢測細(xì)菌，收集腦脊液后，最好能在常溫下15-30分鐘內(nèi)接種培養(yǎng)皿。腦脊液標(biāo)本不可置冰箱保存，否則會使病原菌死亡，尤其是腦膜炎奈瑟菌（能產(chǎn)生自溶素迅速(xùnsù)自溶）、肺炎鏈球菌和嗜血桿菌。共六十五頁注意事項(xiàng)：如果只采集了一管腦脊液，應(yīng)先送細(xì)菌室做細(xì)菌培養(yǎng)，再做腦脊液生化、常規(guī)等檢查穿刺時應(yīng)嚴(yán)格無菌操作

作腦脊液培養(yǎng)時，建議(jiànyì)同時作血培養(yǎng)

共六十五頁注意事項(xiàng)：為了防止穿刺(chuāncì)液的凝固，最好在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液盡可能采集更多的液體，至少1ml共六十五頁六、膿液及創(chuàng)傷感染(gǎnrǎn)分泌物標(biāo)本

共六十五頁膿液及創(chuàng)傷(chuāngshāng)感染分泌物標(biāo)本采集開放性膿腫和膿性分泌物

先以無菌鹽水沖洗潰瘍表面，用2支無菌棉拭子拭取潰瘍深處(shēnchǔ)的分泌物后插入無菌試管送檢。一支為涂片檢查用，另一支作培養(yǎng)用

大面積燒傷的創(chuàng)面分泌物

用無菌棉拭子取多部位創(chuàng)面的膿液或分泌物，置無菌試管內(nèi)送檢

封閉性膿腫

消毒局部皮膚或粘膜表面后，用注射器抽取，將膿液注入無菌試管內(nèi)送檢

共六十五頁注意事項(xiàng)：

不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4℃保存；培養(yǎng)淋球菌、腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外

用藥前采集(cǎijí)標(biāo)本，嚴(yán)格無菌采樣

共六十五頁七、生殖道標(biāo)本(biāoběn)共六十五頁生殖道標(biāo)本(biāoběn)檢驗(yàn)生殖道標(biāo)本的細(xì)菌培養(yǎng)、真菌(zhēnjūn)培養(yǎng)、結(jié)核菌培養(yǎng)；解脲支原體、沙眼衣原體、淋菌的培養(yǎng)；淋菌涂片；細(xì)菌性陰道病相關(guān)檢測、真菌(zhēnjūn)涂片

共六十五頁生殖道標(biāo)本(biāoběn)送檢指征1皮膚黏膜損害：原發(fā)損害可有斑疹、丘疹、結(jié)節(jié)、水皰、囊腫、糜爛、潰瘍等。繼發(fā)損害由原發(fā)損害演變而來，有萎縮或斑痕(bānhén)等，患者可出現(xiàn)疼痛或瘙癢癥狀。2全身癥狀：多數(shù)無全身癥狀。偶有發(fā)熱、乏力、食欲不振等。3男性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)4女性生殖系統(tǒng)表現(xiàn)5疑為下列疾病時需送檢標(biāo)本：前庭大腺膿腫、外陰陰道念珠菌病、細(xì)菌性陰道病、急性子宮頸炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、產(chǎn)褥期感染。共六十五頁生殖道標(biāo)本采集(cǎijí)容器無菌試管、男性(nánxìng)拭子、女性拭子

共六十五頁生殖道標(biāo)本(biāoběn)采集方法1尿道分泌物①男性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，采取從尿道口溢出的膿性分泌物或用無菌男性拭子插入尿道內(nèi)2～4厘米取出分泌物。如無膿液溢出，可從陰莖的腹面向龜頭方向按摩，促使分泌物溢出。②女性：清洗尿道口，用滅菌紗布或棉球擦拭，然后從陰道內(nèi)診壓迫尿道，或從尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出。無肉眼可見(kějiàn)的膿液，可用滅菌拭子輕輕深入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子，采集標(biāo)本。共六十五頁生殖道標(biāo)本(biāoběn)采集方法2巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后壓迫腺體，使分泌物溢出。3陰道分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，用滅菌女性拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹隆處分泌物培養(yǎng)或涂片鏡檢。4宮頸分泌物：用窺器擴(kuò)張陰道，先用無菌棉球擦取宮頸口分泌物；用女性拭子插入(chārù)宮頸管2厘米采取分泌物，轉(zhuǎn)動并停留10～20秒鐘，讓拭子充分吸附分泌物，或用去針頭的注射器吸取分泌物，置入滅菌試管內(nèi)送檢。共六十五頁生殖道標(biāo)本(biāoběn)采集方法5宮頸內(nèi)容物：羊膜腔感染時可經(jīng)腹壁羊膜腔穿刺抽取羊水(yángshuǐ)或經(jīng)子宮頸插管抽取羊水(yángshuǐ)進(jìn)行病原體檢測。6前列腺按摩液：用前列腺按摩法采集前列腺液。7精液：受檢者應(yīng)在5天以上未排精，清洗尿道口，采用手淫法或體外排精法，射精于滅菌容器內(nèi)送檢。共六十五頁生殖道標(biāo)本采集(cǎijí)方法8潰瘍分泌物：先用生理鹽水清洗患處，用滅菌棉拭子取其邊緣或其基底部的分