DB41T 1376-2017 泡桐叢枝病植原體保存體系建立規(guī)范_第1頁
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文檔簡介

DB41河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I 1 1 1 2 3 3 4本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：范國強(qiáng)、翟曉巧、趙振利、鄧敏捷、董1泡桐叢枝病植原體保存體系建立規(guī)范NY/T2306-2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程2人工合成的對植物的生長發(fā)育有調(diào)節(jié)作用的化學(xué)物質(zhì)，與植物激素具有相似生理和生物學(xué)效將培養(yǎng)材料在一定的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)材料分把不定芽轉(zhuǎn)移到生根誘導(dǎo)培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，形），第二對引物的功能是特異性的擴(kuò)增位于首輪PCR產(chǎn)物內(nèi)的一段DNA片斷，巢式PCR的擴(kuò)增具有4泡桐叢枝病植原體培養(yǎng)4.1泡桐叢枝病無菌苗培養(yǎng)取患有叢枝病泡桐的當(dāng)年生幼嫩叢枝，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的Hg培養(yǎng)溫度25℃±2℃,光照強(qiáng)度130μmoL·m-2·s-1，光照時(shí)間16h·d-1。40d可獲得2～3對葉片的4.3根誘導(dǎo)-1。按照4.1規(guī)定的培養(yǎng)條件下生根培養(yǎng)。培養(yǎng)2035泡桐叢枝病苗植原體鑒定泡桐基因組DNA的提取采用離心柱型植物基因組DNA提取試劑盒，提取步驟參照植物基因提取說明書，并將提取泡桐基因組DNA溶于100μLT泡桐叢枝病植原體的鑒定采用巢式PCR檢測。PCR擴(kuò)），），-1）；擴(kuò)增程序?yàn)?4℃預(yù)變性3min；再94℃變性1min，52℃退火1.5min，72℃延伸2min，共30），），），），μmol·L-1其他成分同第一輪，反應(yīng)程序如下：94℃預(yù)變性3min；再94℃變性1min；52℃擴(kuò)增25次循環(huán)；最后72℃再延伸10min；4℃保存。待第二輪PCR程序結(jié)束后，取第二輪擴(kuò)增產(chǎn)當(dāng)初代培養(yǎng)苗的芽生長至3cm時(shí)，從莖基部剪

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