紫外分光光度法檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程

第2頁共3頁第3頁共3頁第1頁共3頁SOP-QM-420-00執(zhí)行日期年月日題目紫外分光光度法檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程起草：年月日部門審核：年月日質(zhì)量部審查：年月日批準(zhǔn)：年月日發(fā)放部門質(zhì)量部目的：規(guī)范紫外分光光度法檢查操作法范圍：原輔料、成品職員：檢驗(yàn)室對規(guī)程的實(shí)施負(fù)責(zé)正文：1.原理——紫外分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)的吸光度，對該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。本法在藥品檢驗(yàn)中主要用于藥品的鑒別、檢查和含量測定。——當(dāng)單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，即朗伯-比爾（Lambert-Beer）定律，它是紫外分光光度定量分析的依據(jù)，其數(shù)學(xué)表達(dá)式為：A=㏒1/T=ECL式中A吸光度；T為透光率；E為吸收系數(shù)，采用的表示方法是（Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))），其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1%（g/ml）、液層厚度為1㎝時的吸收度數(shù)值；Ｃ為100ml溶液中所含被測物質(zhì)的重量（按干燥品或無水物計算），g；Ｌ為液層厚度，㎝。2.儀器——紫外分光光度計主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、記錄儀、顯示系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成?！獮榱藵M足紫外—可見光區(qū)全波長范圍的測定，儀器備有二種光源、即氘燈和碘鎢燈，前者用于紫外區(qū)，后者用于可見光區(qū)?！獑紊魍ǔＳ蛇M(jìn)光狹縫、出光狹縫、平行光裝置、色散元件、聚焦透鏡或反射鏡等組成，色散元件有棱鏡和光柵二種，棱鏡多用天然石英或熔融硅石組成，對200-400nm波長光的色散能很強(qiáng)，對600nm以上波長的色散能力較差、棱鏡色散所得的光譜為非勻排光譜。光柵系將反射或透射光經(jīng)衍射而達(dá)到色散作用，故常稱作為衍射光柵，光柵光譜是按波長作線性排列，故為勻排光譜，雙光束儀器多用光柵為色散光件。3.儀器的校正和檢定——由于溫度變化對機(jī)械部分的影響，儀器的波長經(jīng)常會略有變動，因此除應(yīng)定期對所用的儀器進(jìn)行全面校正檢定外，還應(yīng)于測定前校正測定波長。常用汞燈中的較強(qiáng)譜線237.83nm、253.65nm、275.28nm、296.73nm、313.16nm、334.15nm、365.02nm、404.66nm、435.83nm、546.07nm與576.96nm,或用用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進(jìn)行校正，鈥玻璃在279.4nm、287.5nm、333.7nm、360.9nm、418.5nm、460.0nm、484.5nm、536.2nm與637.5nm波長處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用。SOP-QM-420-00紫外分光光度法檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-QM-420-00紫外分光光度法檢查標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程235（最?。?57（最大）313（最?。?50（最大）吸收系數(shù)E124.5144.048.62106.6——吸收度的準(zhǔn)確度可用重鉻酸鉀的硫酸溶液檢定。取在120℃干燥至恒重的基準(zhǔn)重鉻酸鉀60㎎，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀釋1000ml,在規(guī)定的波長處測定計算其吸收系數(shù)，并與規(guī)定的吸收系數(shù)比較，如上表，相對偏差應(yīng)在±1%以內(nèi)?！s散光的檢查可按下頁表的試劑和濃度，配制成水溶液，置1㎝石英吸收池中，在規(guī)定的波長處測定透光率，應(yīng)符合表中的規(guī)定。4.對溶劑的要求——測定供試品前，應(yīng)先檢查所用的溶劑在供試品所用的波長附近是否符合要求，即用1㎝石英吸收池盛溶劑，以空氣為空白（即空試劑濃度%（g/ml）測定用波長nm透光率%碘化鈉1.00220<0.8亞硝酸鈉5.00340<0.8白光路中不置任何物質(zhì)）測定其吸收度。溶劑和吸收池的吸收度，在220～240nm范圍內(nèi)不得超過0.40,在241～250nm范圍內(nèi)不得超過0.20，在251～300nm范圍內(nèi)不得超過0.10，在300nm以上時不得超過0.05。5.測定法——測定時，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1㎝的石英吸收池，在規(guī)定的吸收峰波長±2nm以內(nèi)測試幾個點(diǎn)的吸收度，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確，除另有規(guī)定外，吸收峰波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長。一般供試品溶液的吸收度讀數(shù)，以在0.3～0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度會偏低；狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減小狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)，由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白吸收，因此測定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計算含量。——用作鑒別和檢查項(xiàng)目的方法，分別按各品種項(xiàng)下的方法進(jìn)行。鑒別項(xiàng)下吸收度讀數(shù)的范圍可根據(jù)制劑的實(shí)際含量和供試液的稀釋倍數(shù)估算?！糜诤繙y定的方法一般有以下幾種。5.1對照品比較法按各品種項(xiàng)下的方法，分別配制供試品溶液和對照溶液，對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測成分標(biāo)示量的100%±10%，所用溶劑也應(yīng)完全一致，在規(guī)定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸收度后，按下式計算供度試品中被測溶液的濃度：Cx=(Ax/AR)CR式中Cx為供試品溶液的濃度；Ax為供試品溶液的吸收度；CR為對照品溶液的濃度；AR為對照品溶液的吸收度。5.2吸收系數(shù)法按各品種項(xiàng)下的方法配制供試品溶液，在規(guī)定的波長處測定其吸收度，再以該品種在