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B61DB51四川省市場監(jiān)督管理局發(fā)布 1 1 1 2 2 3 4 5 6 7赤楓組培繁育技術(shù)規(guī)程本標準規(guī)定了赤楓(Acerpalmatum‘Sangokaku’)組培快繁技術(shù)的場地要求、培養(yǎng)基配制、組織操作間主要進行培養(yǎng)基和培養(yǎng)母液的配制及培養(yǎng)基滅菌工作。配制培養(yǎng)基所需化學試劑為附表A.1所列及NaOH、HCl、蔗糖和瓊脂等。操作間的配備標準參照DB51/T1899-2014是從外部環(huán)境到內(nèi)部潔凈環(huán)境的過度空間。緩沖間的配備標準參照拱棚,保持溫度25℃~30℃,濕度85%以上。4培養(yǎng)基配制4.1培養(yǎng)容器和接種器械的清洗4.2培養(yǎng)基配制4.2.1培養(yǎng)基母液的配制培養(yǎng)基采用MS基本培養(yǎng)基,所需各元素見附錄A。先按照標準配制大量元素、微量4.2.2激素母液配制激素采用6-BA、IAA和NAA。6-BA用1mol/LNaOH預溶,IAA和NAA用95%乙醇預溶然后配制成14.2.3初代培養(yǎng)基的配制初代培養(yǎng)基配方為MS+0.5mg/LIAA。配制方法依照LY/T1882-2014.2.4繼代培養(yǎng)基的配制繼代培養(yǎng)基配方為MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIAA。用1mol/LNaOH調(diào)節(jié)pH值為6.5。分裝至240ml配制方法依照LY/T1882-2014.2.5生根培養(yǎng)基的配制生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+0.3mg/配制方法依照LY/T1882-2014.3培養(yǎng)基滅菌5.1外植體來源5.2外植體準備5.2.1采集5.2.2預處理將處理好的外植體在超凈工作臺上,用50%可濕性多菌靈粉劑400倍液浸泡1h后,75%乙醇滅菌305.3初代培養(yǎng)2000Lux,光培養(yǎng)/暗培養(yǎng)為16h/8h,溫度24℃,濕度70%的培養(yǎng)室中培養(yǎng)30d~40d。5.4繼代培養(yǎng)待萌發(fā)的腋芽長至2cm~3cm,在超凈工作臺上將萌發(fā)的腋芽從原外植體上切下,然后轉(zhuǎn)接至繼代5.5生根培養(yǎng)見附錄B。在煉苗區(qū)放置6d后,擰松組培瓶蓋,再放置3d后,完全打開瓶蓋,放置7d左右。期間保持適取出組培苗,用清水洗去基部培養(yǎng)基,用1000ppm可濕性多菌靈粉劑浸泡3min~5min后移栽至混合靈粉劑或1000ppm代森銨或600ppm百菌清移栽前期保持土壤濕潤,不可偏干。夏季應(yīng)在早晚澆水7.1.2要求小苗長勢健康良好,株型勻稱,莖稈健壯、葉色正常,無徒長、衰老和受抑制現(xiàn)發(fā)達,顏色正常,無衰老、病害、生長異?,F(xiàn)NH4NO3MgSO42OCaCl22OMnSO42O2ONa2MoO42O2O2O2O2O2MS培
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