DB51T 2631-2019 赤楓組培繁育技術(shù)規(guī)程

B61DB51四川省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布 1 1 1 2 2 3 4 5 6 7赤楓組培繁育技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了赤楓（Acerpalmatum‘Sangokaku’）組培快繁技術(shù)的場(chǎng)地要求、培養(yǎng)基配制、組織操作間主要進(jìn)行培養(yǎng)基和培養(yǎng)母液的配制及培養(yǎng)基滅菌工作。配制培養(yǎng)基所需化學(xué)試劑為附表A.1所列及NaOH、HCl、蔗糖和瓊脂等。操作間的配備標(biāo)準(zhǔn)參照DB51/T1899-2014是從外部環(huán)境到內(nèi)部潔凈環(huán)境的過(guò)度空間。緩沖間的配備標(biāo)準(zhǔn)參照拱棚，保持溫度25℃~30℃,濕度85%以上。4培養(yǎng)基配制4.1培養(yǎng)容器和接種器械的清洗4.2培養(yǎng)基配制4.2.1培養(yǎng)基母液的配制培養(yǎng)基采用MS基本培養(yǎng)基，所需各元素見(jiàn)附錄A。先按照標(biāo)準(zhǔn)配制大量元素、微量4.2.2激素母液配制激素采用6-BA、IAA和NAA。6-BA用1mol/LNaOH預(yù)溶，IAA和NAA用95%乙醇預(yù)溶然后配制成14.2.3初代培養(yǎng)基的配制初代培養(yǎng)基配方為MS+0.5mg/LIAA。配制方法依照LY/T1882-2014.2.4繼代培養(yǎng)基的配制繼代培養(yǎng)基配方為MS+2.0mg/L6-BA+0.5mg/LIAA。用1mol/LNaOH調(diào)節(jié)pH值為6.5。分裝至240ml配制方法依照LY/T1882-2014.2.5生根培養(yǎng)基的配制生根培養(yǎng)基配方為1/2MS+0.3mg/配制方法依照LY/T1882-2014.3培養(yǎng)基滅菌5.1外植體來(lái)源5.2外植體準(zhǔn)備5.2.1采集5.2.2預(yù)處理將處理好的外植體在超凈工作臺(tái)上，用50%可濕性多菌靈粉劑400倍液浸泡1h后，75％乙醇滅菌305.3初代培養(yǎng)2000Lux，光培養(yǎng)/暗培養(yǎng)為16h/8h,溫度24℃,濕度70%的培養(yǎng)室中培養(yǎng)30d～40d。5.4繼代培養(yǎng)待萌發(fā)的腋芽長(zhǎng)至2cm～3cm,在超凈工作臺(tái)上將萌發(fā)的腋芽從原外植體上切下，然后轉(zhuǎn)接至繼代5.5生根培養(yǎng)見(jiàn)附錄B。在煉苗區(qū)放置6d后，擰松組培瓶蓋，再放置3d后，完全打開(kāi)瓶蓋，放置7d左右。期間保持適取出組培苗，用清水洗去基部培養(yǎng)基，用1000ppm可濕性多菌靈粉劑浸泡3min～5min后移栽至混合靈粉劑或1000ppm代森銨或600ppm百菌清移栽前期保持土壤濕潤(rùn)，不可偏干。夏季應(yīng)在早晚澆水7.1.2要求小苗長(zhǎng)勢(shì)健康良好，株型勻稱，莖稈健壯、葉色正常，無(wú)徒長(zhǎng)、衰老和受抑制現(xiàn)發(fā)達(dá)，顏色正常，無(wú)衰老、病害、生長(zhǎng)異?，F(xiàn)NH4NO3MgSO42OCaCl22OMnSO42O2ONa2MoO42O2O2O2O2O2MS培