2025年北師大新版選擇性必修3生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年北師大新版選擇性必修3生物下冊月考試卷403考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關(guān)植物細(xì)胞工程應(yīng)用的敘述，錯誤的是（）A.以根尖、莖尖為材料利用組織培養(yǎng)技術(shù)可獲得具有抗病毒的新品種B.單倍體育種過程中的某個階段用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)C.利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得人參皂甙，實現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得“白菜-甘藍(lán)”，打破了生殖隔離，實現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交2、《詩經(jīng)》有云：“十月獲稻，為此春酒，以介眉壽?！庇涗浟斯湃擞眯迈r稻米釀酒，以求延年益壽的習(xí)俗。米酒釀造主要包括蒸米、拌酒曲、發(fā)酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用（把米中的淀粉轉(zhuǎn)化成葡萄糖）。下列說法錯誤的是（）A.釀造米酒的過程中，酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸的類型是有氧呼吸和無氧呼吸B.蒸米后通常需要進(jìn)行冷卻，其目的是防止溫度過高殺死酒曲中的微生物C.米酒發(fā)酵初期，霉菌可以通過糖化作用，為酵母菌的呼吸作用提供底物D.腐乳發(fā)酵過程中，也是利用了毛霉等微生物的糖化作用3、下列關(guān)于乳腺生物反應(yīng)器的敘述，錯誤的是（）A.乳腺生物反應(yīng)器是一種轉(zhuǎn)基因動物B.乳腺生物反應(yīng)器的乳腺細(xì)胞中有特異性啟動子C.乳腺生物反應(yīng)器的體內(nèi)不只有乳腺細(xì)胞中含有目的基因D.利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)產(chǎn)品不受動物年齡、性別的影響4、PCR引物的3'端為結(jié)合模板DNA的關(guān)鍵堿基，5'端無嚴(yán)格限制，可用于添加限制酶切點等序列。下列敘述正確的是（）

A.該圖表示PCR循環(huán)中的變性環(huán)節(jié)B.PCR第四次循環(huán)要消耗15對引物C.Taq酶催化相鄰的兩個游離dNTP之間形成磷酸二酯鍵D.用圖中引物擴(kuò)增兩個循環(huán)后即可獲得添加限制酶切點的產(chǎn)物5、谷氨酸棒狀桿菌可用于微生物發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸來制取谷谷氨酸鈉（味精），該細(xì)菌在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣，并通過攪拌使空氣形成細(xì)小的氣泡，迅速溶解在培養(yǎng)液中（溶氧）；在溫度為30～37℃，pH為7～8的情況下，經(jīng)28～32小時，培養(yǎng)液中會生成大量的谷氨酸。如圖表示利用玉米淀粉為材料制備谷氨酸的流程圖。下列敘述錯誤的是（）

A.尿素能為谷氨酸棒狀桿菌提供氮源和碳源B.利用玉米淀粉制備糖液時，可采用酶解法C.谷氨酸棒狀桿菌通過有氧發(fā)酵產(chǎn)生谷氨酸D.維生素B能為發(fā)酵菌提供特殊的營養(yǎng)物質(zhì)6、廣式高鹽稀態(tài)醬油發(fā)酵工藝中鹽分含量對于發(fā)酵過程和產(chǎn)品風(fēng)味至關(guān)重要，其作用之一是防腐抑菌，淘汰非耐鹽野生雜菌或有害微生物。隨著健康中國建設(shè)的推進(jìn)，醬油的減鹽成為一種趨勢。科研人員研究了不同鹽分條件下不同發(fā)酵階段微生物群落結(jié)構(gòu)的變化，結(jié)果如下表所示。下列說法錯誤的是（）

不同鹽分雜件下不同發(fā)酵階段各類微生物菌落總數(shù)。樣品菌落總數(shù)/（1gCFU/mL）細(xì)菌真菌乳酸菌乳酸菌LI6.954.876.18LⅡ6、656.466.37LⅢ5.874.724.60MI6.934.034.70MⅡ6.416.325.52MⅢ5.574.075.11HI6.823.484.60HⅡ6.155.785.84HⅢ5.392.434.93

注，L、M、H分別表示低鹽組（120g/L）、中鹽組（150g/L）、高鹽組（170g/L），I、Ⅱ、Ⅲ分別表示發(fā)酵第5天、發(fā)酵第25天、發(fā)酵第55天A.高濃度鹽分能通過提高培養(yǎng)液的滲透壓來實現(xiàn)防腐抑菌B.在發(fā)酵初期，鹽濃度的提高對真菌及乳酸菌形成有效抑C.在發(fā)酵過程中，細(xì)菌、真菌、乳酸菌的數(shù)量的顯現(xiàn)降低趨勢D.隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可以更好地了解發(fā)酵進(jìn)程評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的β－淀粉樣蛋白體，它的逐漸積累可能導(dǎo)致神經(jīng)元損傷和免疫功能下降，某些基因的突變會導(dǎo)致β－淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術(shù)能用于老年癡呆癥治療的是（）A.胚胎移植技術(shù)B.胚胎干細(xì)胞技術(shù)C.單克隆抗體技術(shù)D.核移植技術(shù)8、下圖表示形成cDNA并進(jìn)行PCR擴(kuò)增的過程。據(jù)圖分析；下列敘述錯誤的是（）

A.①過程所需的原料是脫氧核苷酸B.②過程所需的酶必須耐高溫C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的引物對之間不能互補配對9、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，這是因為他們能夠產(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤胃中篩選產(chǎn)生纖維酶的纖維素分解菌，其篩選過程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉(zhuǎn)接于含有稻草作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用剛果紅處理，看到如圖2所示情況，下列有關(guān)敘述，錯誤的是（）

A.②過程是涂布器取乙中的菌液均勻的涂布在Ⅰ號培養(yǎng)表面B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基，主要作用是稀釋菌種C.Ⅰ號、Ⅱ號培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基，配置時先滅菌后調(diào)節(jié)pHD.可挑取圖2中周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，用平板劃線法繼續(xù)純化10、將蘇云金桿菌的Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如圖所示(KanR為卡那霉素抗性基因)。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌B.過程①必須用同種限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒C.過程③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合培養(yǎng)能使T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞D.過程④和過程⑤的培養(yǎng)基中添加的激素的濃度不同11、基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴(kuò)增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進(jìn)行子鏈合成C.導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞D.利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上12、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________14、回答下列問題。

（1）目前人類對基因________及基因間的________________尚缺乏足夠的認(rèn)識，要想通過基因檢測達(dá)到預(yù)防疾病的目的是困難的；況且人類的____________病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和________________有關(guān)。

（2）生物武器種類包括__________、________、__________，以及經(jīng)過___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下_____________、_____________、______________生物武器，并反對生物武器及其技術(shù)和設(shè)備的擴(kuò)散。15、酶是細(xì)胞合成的生物催化劑。隨著生物科學(xué)技術(shù)的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實驗室，走進(jìn)人們的生產(chǎn)和生活。請回答下面有關(guān)酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進(jìn)行純度鑒定。16、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細(xì)菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括化學(xué)結(jié)合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細(xì)胞多采用___________固定化。17、第一步：______18、動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。19、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復(fù)后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。評卷人得分四、判斷題(共1題，共8分)20、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共8分)21、餐廚垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點，極易對環(huán)境造成污染。為探究用圓褐固氮菌、巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液時，單獨接種和混合接種的效果差異及最佳接種量比，以制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

（1）將兩種菌液進(jìn)行不同配比分組處理如下表所示：。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌1：00：11：12：1

將上表菌液分別接種于l00mL________________中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)。本實驗還需設(shè)置空白對照，對照組接種________________。

（2）培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)，取一定量菌液用_____________法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該方法包括_____________和____________兩個操作。進(jìn)行計數(shù)時，可依據(jù)______________對兩種菌進(jìn)行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________內(nèi)的平板。實驗結(jié)果如下圖所示，由實驗結(jié)果可知___________________。

22、Hela細(xì)胞系是人工培養(yǎng)具有無限增殖能力的水生瘤細(xì)胞系；在世界各地的相關(guān)實驗室中為研究者提供了相同的研究對象?；卮鹣铝袉栴}：

（1）Hela細(xì)胞源自一位美國婦女的宮頸癌細(xì)胞，目前實驗室中為了進(jìn)步研究Hela細(xì)胞，需進(jìn)行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對Hela細(xì)胞生長的抑制情況，其他營養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細(xì)胞24h，實驗結(jié)果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細(xì)胞生長抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實驗_____________(填“需要”或“不需要”)另設(shè)對照組。實驗結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細(xì)胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，例如，它幫助科學(xué)家首次實現(xiàn)了人源細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合。細(xì)胞融合技術(shù)的意義是__________________________________________。23、人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大；通常從人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重，如果應(yīng)用基因工程等技術(shù)，將人的血消白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。其大致過程如下：

I．采用良種供體奶牛的卵母細(xì)胞和精子；通過體外受精，形成受精卵；

II．將人血消白蛋白基因?qū)肽膛Ｊ芫?；形成重組細(xì)胞；

III．電脈沖刺激重組細(xì)胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中；最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛。

請回答下列問題：

（1）實驗步驟Ⅰ中，受精時，防止多精入卵的生理反應(yīng)包括____________________。

（2）實驗步驟Ⅱ中，需先構(gòu)建基因表達(dá)載體，將HSA基因與__________等調(diào)控組件重組在一起；再導(dǎo)入奶牛受精卵。

（3）實驗步驟Ⅲ中，進(jìn)行動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中除了含有各種無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加__________。培養(yǎng)過程需要定期更換培養(yǎng)液，目的是__________。

（4）實驗步驟Ⅳ中，應(yīng)選擇性別為__________的奶牛胚胎進(jìn)行移植；對早期胚胎（如囊胚）進(jìn)行性別鑒定的常用方法是____________________。移植前還需要檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受精卵，檢測方法是采用__________技術(shù)。24、三氯生是一種抑菌物質(zhì)，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細(xì)胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過PCR方法擴(kuò)增fabV基因時，先要根據(jù)_____設(shè)計兩種特異性引物序列，以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈，至少需要經(jīng)過_____次擴(kuò)增才能獲得8個雙鏈等長的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____；某科研團(tuán)隊將可以受溫度調(diào)控的基因插入上述選出的重組質(zhì)粒中，構(gòu)建了溫度調(diào)控表達(dá)質(zhì)粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會抑制P2，R基因在高溫下會抑制P1，如果將lacZ基因和GFP（綠色熒蛋白）基因插入圖2質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達(dá)GFP蛋白，而高溫下只表達(dá)lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間，GFP基因的插入位置及注意點是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細(xì)胞，篩選上述插入了GFP基因的受體細(xì)胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長，且_____。評卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)25、為了增加菊花花色類型；研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具；應(yīng)具備的基本條件有____________________（答出兩點即可）；構(gòu)建重組質(zhì)粒需要的工具酶有_____________和_______________。

（2）在培育轉(zhuǎn)基因植物時；常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，除此之外還有基因槍法和__________法。農(nóng)桿菌上Ti質(zhì)粒上的T-DNA的作用是____________________。

（3）在培養(yǎng)基中添加________________，可篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞；要檢測C基因是否整合到菊花染色體上，可采用______________________。26、（1）為擴(kuò)大可耕地面積；增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。

①獲得耐鹽基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性核酸內(nèi)切酶作用于上圖中的____(填“a”或“b”)處，DNA連接酶作用于____(填“a”或“b”)處。

②將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、_____法和花粉管通道法。

③為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的_____作探針進(jìn)行分子雜交檢測；又要用一定濃度鹽水澆灌的方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。

（2）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點；圖1；圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

④一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后，質(zhì)粒分子含有_____個游離的磷酸基團(tuán)。

⑤若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越____。

⑥重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是____。

⑦與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于___。27、由新型冠狀病毒引起的新型冠狀病毒肺炎正在世界蔓延。人們期盼通過安全有效的新冠疫苗來遏制這場大流行。下表為三種新冠病毒疫苗的研發(fā)方法及技術(shù)路線：

。方法技術(shù)路線基因工程疫苗S蛋白基因→基因表達(dá)載體→大腸桿菌→S蛋白→人體腺病毒載體重組疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表達(dá)載體→人體mRNA疫苗S蛋白基因→基因表達(dá)載體→大腸桿菌→mRNA→人體回答下列問題：

（1）在制備疫苗的過程中，常采用___________________技術(shù)獲取和擴(kuò)增新冠病毒的S蛋白基因，擴(kuò)增時，除了模板、四種脫氧核苷酸，還需要加入__________________和引物。當(dāng)該過程消耗了62個引物時，則進(jìn)行了___________________輪DNA復(fù)制。

（2）基因工程疫苗研制過程中，常用大腸桿菌作為受體細(xì)胞的原因是_________________。若目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞穩(wěn)定存在并表達(dá)_________________，則說明目的基因完成了轉(zhuǎn)化，從分子水平的角度可用_________________進(jìn)行檢測。

（3）腺病毒載體疫苗是將S蛋白基因重組到改造后的腺病毒內(nèi)，改造后的腺病毒載體應(yīng)具備的條件是________________。（寫出兩點）

（4）以S蛋白作為抗原制備單克隆抗體用于治療，單克隆抗體制備過程中需要對培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行篩選，第一次篩選的目的是得到雜交瘤細(xì)胞，該細(xì)胞的特點是________________。

（5）有人說“新冠病毒是RNA病毒，易發(fā)生變異，病毒變異后現(xiàn)用新冠疫苗便失去其功能”，請依據(jù)免疫學(xué)原理進(jìn)行評價：_________________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、A【分析】【分析】

植物細(xì)胞工程：

（1）定義：細(xì)胞經(jīng)分裂和分化后；仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能。

（2）理論基礎(chǔ)：植物細(xì)胞的全能性。

（3）在生物的生長發(fā)育過程中；并不是所有的細(xì)胞都表現(xiàn)出全能性，原因是在特定的時間和空間條件下，細(xì)胞中的基因會選擇性地表達(dá)。

（4）已分化細(xì)胞全能表達(dá)的條件：離體；一定的激素和營養(yǎng)等。

【詳解】

A；植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖、根尖）的病毒極少；甚至無病毒，所以切取一定大小的莖尖或根尖進(jìn)行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，而不是抗病毒的品種，A錯誤；

B；單倍體育種過程包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理兩個階段；其中在花藥離體培養(yǎng)中用到了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，B正確；

C；利用人參細(xì)胞培養(yǎng)來生產(chǎn)人參中重要的活性成分；利用的技術(shù)是植物細(xì)胞培養(yǎng)，實現(xiàn)了細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，C正確；

D；由于不同物種之間存在生殖隔離；傳統(tǒng)的有性雜交只能在同種生物之間進(jìn)行，可利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可將不同來源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，培育成新植物體，例如“白菜-甘藍(lán)”，這樣打破了不同物種之間存在的生殖隔離，實現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交育種，D正確；

故選A。2、D【分析】【分析】

葡萄酒制作過程中；將裝配好的發(fā)酵瓶放在25℃～30℃環(huán)境條件下發(fā)酵，當(dāng)發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡，表示發(fā)酵完畢。若發(fā)酵過程溫度高于30℃，則需及時采取降溫措施，主要為了防止影響酒的風(fēng)味。

【詳解】

A；參與果酒制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，所以米酒發(fā)酵過程中，酵母菌進(jìn)行細(xì)胞呼吸的類型是有氧呼吸和無氧呼吸，A正確；

B；蒸米后；溫度較高，通常需要進(jìn)行冷卻，再加入酒曲，其目的是防止溫度過高殺死酒曲中的微生物，B正確；

C；酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌；霉菌主要起到糖化的作用，能把米中的淀粉轉(zhuǎn)化成葡萄糖，葡萄糖能為醇母菌的呼吸作用提供底物，C正確；

D；腐乳發(fā)酵過程中；起到主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸，毛霉不能起糖化作用，D錯誤。

故選D。3、D【分析】【分析】

動物乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺；使外源基因?qū)雱游锘蚪M中并定位表達(dá)于動物乳腺，利用動物乳腺天然；高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動物的總稱。

【詳解】

A；動物乳腺生物反應(yīng)器是一項利用轉(zhuǎn)基因動物的乳腺代替?zhèn)鹘y(tǒng)的生物發(fā)酵；進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)可供治療人類疾病或用于保健的活性蛋白質(zhì)的現(xiàn)代生物技術(shù)，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因動物乳腺生物反應(yīng)器是利用動物乳腺特異性啟動子調(diào)控元件指導(dǎo)外源基因在乳腺中特異性表達(dá)；并從轉(zhuǎn)基因動物奶中獲取重組蛋白，B正確；

C；乳腺生物反應(yīng)器（轉(zhuǎn)基因動物)的所有體細(xì)胞中都含有目的基因；只是在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，C正確；

D；動物乳腺生物反應(yīng)器利用動物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力；因此受動物年齡、性別的影響，D錯誤。

故選D。4、D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。PCR需要模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

【詳解】

A；圖中引物與模板鏈堿基互補配對；該圖表示PCR循環(huán)中的復(fù)性環(huán)節(jié)，A錯誤；

B、PCR三次循環(huán)共消耗7（23-1）對引物，PCR四次循環(huán)共消耗15（24-1）對引物；第四次循環(huán)要消耗8對引物，B錯誤；

C；dNMP只有一個磷酸基團(tuán)；為脫氧核苷酸，dNTP有三個磷酸基團(tuán)，延伸時，在Taq酶催化下，dNMP作為擴(kuò)增的原料會依次連接到3'端，相鄰的dNMP間形成磷酸二酯鍵，C錯誤；

D；由于一個引物不在該片段的端點；因此第一輪循環(huán)后，得到的一個DNA片段中兩條脫氧核苷酸鏈都不等長，通過繪圖可推知，再經(jīng)過一次循環(huán)，產(chǎn)物中開始出現(xiàn)脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，所以擴(kuò)增兩個循環(huán)后即可獲得添加限制酶切點的產(chǎn)物，D正確。

故選D。5、A【分析】【分析】

發(fā)酵工程一般包括菌種的選育；擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制；滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等方面。在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程。還要及時添加必需的營養(yǎng)成分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。

【詳解】

A；谷氨酸棒狀桿菌為異養(yǎng)型生物；糖液中的糖為谷氨酸棒狀桿菌提供碳源，而尿素為谷氨酸棒狀桿菌提供氮源，A錯誤；

B；玉米淀粉在淀粉酶的作用下；可以制備成糖液，因此利用玉米淀粉制備糖液時，可采用酶解法，B正確；

C；谷氨酸棒狀桿菌在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣；因此谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸，進(jìn)行的是有氧發(fā)酵，C正確；

D；糖液中的糖為發(fā)酵菌提供碳源；尿素提供氮源，另外，還有水和無機(jī)鹽，因此，維生素B為發(fā)酵菌的生長提供特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，D正確。

故選A。6、C【分析】【分析】

1；鹽分能通過提高培養(yǎng)液的滲透壓使微生物失水死亡；從而實現(xiàn)防腐抑菌；

2；在發(fā)酵初期；鹽濃度的提高對真菌及乳酸菌形成有效抑制；

3；發(fā)酵過程中；隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可以更好地了解發(fā)酵進(jìn)程。

【詳解】

A；高濃度鹽分能通過提高培養(yǎng)液的滲透壓使微生物失水死亡；從而實現(xiàn)防腐抑菌，A正確；

B；由表格內(nèi)容可知；在發(fā)酵初期提高鹽濃度，對真菌及乳酸菌形成有效抑制，B正確；

C；由表中數(shù)據(jù)可知；低鹽組、中鹽組和高鹽組的細(xì)菌數(shù)量隨發(fā)酵時間推移數(shù)量減少；而真菌和乳酸菌數(shù)量隨著發(fā)酵時間的推移呈現(xiàn)先增后減的趨勢，C錯誤；

D；發(fā)酵過程中；隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可以更好地了解發(fā)酵進(jìn)程，D正確。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)7、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意；治療老年癡呆癥的思路有，通過生產(chǎn)抗體對抗患者體內(nèi)的β－淀粉樣蛋白體積累，通過增殖補充損傷死亡的神經(jīng)元改善患者的情況。

【詳解】

A；胚胎移植技術(shù)只可用于培養(yǎng)新的個體；對該疾病無應(yīng)用意義，A錯誤；

B；胚胎干細(xì)胞技術(shù)可以培養(yǎng)誘導(dǎo)增殖新的神經(jīng)元；有可能用于治療該疾病，B正確；

C；單克隆抗體技術(shù)可以用于生產(chǎn)抗體對抗患者體內(nèi)的β－淀粉樣蛋白體；有助于治療該疾病，C正確；

D；核移植技術(shù)主要運用于克隆動物等；對該病沒有實際應(yīng)用意義，D錯誤。

故選BC。8、B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后；使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；

②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后；溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。

【詳解】

A；①過程為逆轉(zhuǎn)錄；所需的原料是脫氧核苷酸，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程所需要的DNA聚合酶不需要耐高溫；B錯誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要DNA解旋酶破壞氫鍵，C錯誤；

D；④過程為復(fù)性；溫度降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結(jié)合，但引物對之間不能互補配對，D正確。

故選BC。9、A:B:C【分析】分解纖維素的微生物的分離實驗的原理：①土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；根據(jù)Ⅰ號培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知；②過程是用涂布器取乙中的樣品稀釋液均勻的涂布在Ⅰ號培養(yǎng)表面，即乙中是分解纖維素菌的樣品稀釋液，不是菌液，A錯誤；

B；液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖；而不是稀釋菌種，甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液，捕食液體培養(yǎng)基，B錯誤；

C；配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；故需要先調(diào)pH，再滅菌，C錯誤；

D；剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物；若菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明纖維素分解菌將纖維素進(jìn)行了分解，可挑取該菌落用平板劃線法繼續(xù)純化該菌體，D正確。

故選ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析，過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運載體（質(zhì)粒）連接形成重組Ti質(zhì)粒。過程②表示將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞（農(nóng)桿菌），需要用Ca2+處理；使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。農(nóng)桿菌侵染棉花后，將自身的Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細(xì)胞的DNA上，然后利用棉花細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，獲得抗蟲棉。

【詳解】

A、KanR為卡那霉素抗性基因；成功導(dǎo)入質(zhì)粒的農(nóng)桿菌具有卡那霉素抗性而普通農(nóng)桿菌沒有，因此可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，A正確；

B；為使目的基因DNA片段和質(zhì)粒DNA片段在切口處的黏性末端匹配；需要選擇能切出相同黏性末端的限制酶來進(jìn)行切割，可以是同種限制酶，也可以是不同限制酶，但是必須要能產(chǎn)生相同黏性末端，B錯誤；

C；棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后；農(nóng)桿菌在侵染棉花細(xì)胞時，可將自身的Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細(xì)胞的DNA上，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)時；培養(yǎng)基中生長素濃度高于細(xì)胞分裂素，可以誘導(dǎo)根的分化；若是細(xì)胞分裂素高于生長素濃度，則誘導(dǎo)芽的分化，從圖上可知，④過程分化出芽，⑤過程分化形成根，繼而形成試管苗，因此④和⑤中的培養(yǎng)基用到的激素的濃度不同，D正確。

故選ACD。11、C:D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上?；虮磉_(dá)載體常包括目的基因；啟動子、終止子、標(biāo)記基因。標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。

【詳解】

A；啟動子是位于DNA上RNA聚合酶的結(jié)合部位；mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；

B、引物的延伸方向為3'端，擴(kuò)增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進(jìn)行子鏈合成；B正確；

C；導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞不是乳腺細(xì)胞；而是受精卵或早期胚胎細(xì)胞，C錯誤；

D；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞；并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上，D錯誤。

故選CD。12、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應(yīng)為無菌水，B錯誤；

C；由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。三、填空題(共7題，共14分)13、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種14、略

【分析】【分析】

【詳解】

（1）人類對基因的結(jié)構(gòu)；基因間的相互作用尚缺乏足夠的認(rèn)識；人類的多基因病，既與基因有關(guān)，又與環(huán)境和生活習(xí)慣有關(guān)。

（2）生物武器種類包括致病菌；病毒、生化毒劑、以及經(jīng)過基因重組的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關(guān)于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器。【解析】①.結(jié)構(gòu)②.相互作用③.多基因④.生活習(xí)慣⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒劑⑧.基因重組⑨.不發(fā)展⑩.不生產(chǎn)?.不儲存15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉(zhuǎn)化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應(yīng)用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學(xué)結(jié)合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進(jìn)行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細(xì)節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學(xué)習(xí)過程中注意積累。【解析】小分子肽和氨基酸脂肪酶堿性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學(xué)結(jié)合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳16、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細(xì)菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術(shù)一般包括化學(xué)結(jié)合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化；而細(xì)胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學(xué)生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，屬識記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍(lán)黑色包埋法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法包埋法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細(xì)胞細(xì)胞懸液原代傳代19、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶四、判斷題(共1題，共8分)20、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。五、實驗題(共4題，共8分)21、略

【分析】微生物實驗室培養(yǎng)的實驗操作：1；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程為：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。2、純化大腸桿菌：（1）原理：在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個細(xì)胞；使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細(xì)菌菌落。（2）微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在-起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）將上表菌液分別接種于100mL餐廚垃圾廢液中進(jìn)行振蕩培養(yǎng)；振蕩處理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌與溶液充分接觸；本實驗還需設(shè)置對照組為接種等量無菌水。

（2）測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進(jìn)行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進(jìn)行計數(shù)時，可依據(jù)菌落的特征對兩種菌進(jìn)行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在30-300內(nèi)的平板。由實驗結(jié)果可知：兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1:1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

【點睛】

本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記制備培養(yǎng)基的過程;識記接種微生物常用的兩種方法及微生物的計數(shù)方法，能結(jié)合柱形圖中信息準(zhǔn)確答題。【解析】某餐廚垃圾廢液等量無菌水稀釋涂布平板系列（梯度）稀釋涂布平板菌落特征30~300兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化22、略

【分析】【分析】

1；動物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。

（2）營養(yǎng)：

成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實驗室中為了進(jìn)一步研究Hela細(xì)胞；需進(jìn)行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強(qiáng)酸性）已失去活性，所以在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實驗需要另設(shè)對照組，觀察在正常條件下細(xì)胞生長情況。實驗結(jié)果表明：葡萄糖濃度與Hela細(xì)胞生長抑制率的關(guān)系是葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細(xì)胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個或多個細(xì)胞融合形成的單核細(xì)胞叫做雜交細(xì)胞，細(xì)胞融合技術(shù)的意義是突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

【點睛】

本題考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，重點考查動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程和條件，相關(guān)知識點只需考生識記即可正確作答，屬于考綱識記層次的考查。對于此類試題，考生在平時的學(xué)習(xí)過程中，應(yīng)該注意構(gòu)建知識網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。【解析】傳代在多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細(xì)胞生長抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能23、略

【分析】1；體外受精過程包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精；其中卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精。

（2）第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞。

（3）第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞；叫活體采卵。

2；受精過程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

【詳解】

（1）受精時；往往一個卵母細(xì)胞只能和一個精子結(jié)合，透明帶反應(yīng)是阻止多精入卵的第一道屏障，卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）該實驗是利用牛的乳腺細(xì)胞生產(chǎn)血清白蛋白；因此實驗步驟Ⅱ中構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需要先將HSA基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，再導(dǎo)入奶牛受精卵。

（3）動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時；培養(yǎng)液中除了含有各種無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類；維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加激素和動物血清。培養(yǎng)過程需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要從乳汁中提??；只有雌性奶牛才能產(chǎn)生乳汁，因此胚胎移植時，必須選取雌性奶牛的胚胎進(jìn)行移植；對早期胚胎（如囊胚）進(jìn)行性別鑒定的常用方法是取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行染色體檢查或DNA分析；移植前還需要檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受精卵，通常采用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。

【點睛】

解答本題的關(guān)鍵是掌握體外受精、受精過程、基因工程等知識，要求考生識記體外受精技術(shù)的過程及方法、受精作用的過程、基因工程的操作步驟及應(yīng)用，并能夠聯(lián)系實際答題。【解析】透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)乳腺蛋白基因的啟動子激素和動物血清清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害雌性取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行染色體檢查或DNA分析DNA分子雜交24、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：

①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術(shù)；

②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原一抗體雜交技術(shù)。

④個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；圖1中①-④依次為目的基因的獲取、表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測。

（1）

PCR是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，需要Taq酶，但Taq酶不能從頭開始合成DNA，前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物，因此需要根據(jù)目的基因fabV基因的兩端按堿基互補配對原則設(shè)計引物。至少需要經(jīng)過4次擴(kuò)增才能獲的8個雙鏈等長的目的基因。

（2）

基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，題干信息顯示C基因在低溫下會抑制P2，R基因在高溫下會抑制P1，說明P2啟動子在高溫下可以啟動轉(zhuǎn)錄；P1啟動子在低溫下可以啟動轉(zhuǎn)錄。題目顯示高溫下只表達(dá)lacz蛋白，則lacZ基因要插在“高溫下不被抑制”的啟動子的后面，即P2→T2之間；GFP基因要低溫下表達(dá)，則插入位置要在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

（3）

因為fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生；大腸桿菌能在含三氯生的培養(yǎng)基上生長，說明大腸桿菌插入重組質(zhì)粒，且依據(jù)是低溫下有綠色熒光高溫下無綠色熒光。

【點睛】

本題考查基因工程相關(guān)知識點，要求學(xué)生熟練掌握基因工程的原理、步驟及相關(guān)的目的，形成知識網(wǎng)絡(luò)，結(jié)合題目要求解決相關(guān)問題?！窘馕觥?1)目的基因（fabV基因）兩端堿基序列4

(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建P2→T2插在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

(3)三氯生低溫下有綠色熒光，高溫下無綠色熒光六、綜合題(共3題，共6分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入，③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；構(gòu)建重組質(zhì)粒需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶。

（2）在培育轉(zhuǎn)基因植物時常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；Ti質(zhì)粒存在T-DNA片段；它具有可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上的特點。

（3）圖2中顯示標(biāo)記基因是潮霉素抗性基因；因此可在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞；要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)，若出現(xiàn)雜交帶，即可證明整合成功。

【點睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能正確分析題圖，再結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題?！窘馕觥磕茉谒拗骷?xì)胞內(nèi)復(fù)制并穩(wěn)定保存、具有標(biāo)記基因、具有多個限制酶切位點限制酶DNA連接酶花粉管通道使目