2025年北師大新版選擇性必修3生物下冊月考試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年北師大新版選擇性必修3生物下冊月考試卷403考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共6題，共12分)1、下列有關植物細胞工程應用的敘述，錯誤的是（）A.以根尖、莖尖為材料利用組織培養(yǎng)技術可獲得具有抗病毒的新品種B.單倍體育種過程中的某個階段用到了植物組織培養(yǎng)技術C.利用植物細胞培養(yǎng)技術獲得人參皂甙，實現(xiàn)了細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)D.利用植物體細胞雜交技術獲得“白菜-甘藍”，打破了生殖隔離，實現(xiàn)了遠緣雜交2、《詩經(jīng)》有云：“十月獲稻，為此春酒，以介眉壽?！庇涗浟斯湃擞眯迈r稻米釀酒，以求延年益壽的習俗。米酒釀造主要包括蒸米、拌酒曲、發(fā)酵三步，酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌，霉菌主要起到糖化的作用（把米中的淀粉轉化成葡萄糖）。下列說法錯誤的是（）A.釀造米酒的過程中，酵母菌進行細胞呼吸的類型是有氧呼吸和無氧呼吸B.蒸米后通常需要進行冷卻，其目的是防止溫度過高殺死酒曲中的微生物C.米酒發(fā)酵初期，霉菌可以通過糖化作用，為酵母菌的呼吸作用提供底物D.腐乳發(fā)酵過程中，也是利用了毛霉等微生物的糖化作用3、下列關于乳腺生物反應器的敘述，錯誤的是（）A.乳腺生物反應器是一種轉基因動物B.乳腺生物反應器的乳腺細胞中有特異性啟動子C.乳腺生物反應器的體內(nèi)不只有乳腺細胞中含有目的基因D.利用乳腺生物反應器生產(chǎn)產(chǎn)品不受動物年齡、性別的影響4、PCR引物的3'端為結合模板DNA的關鍵堿基，5'端無嚴格限制，可用于添加限制酶切點等序列。下列敘述正確的是（）

A.該圖表示PCR循環(huán)中的變性環(huán)節(jié)B.PCR第四次循環(huán)要消耗15對引物C.Taq酶催化相鄰的兩個游離dNTP之間形成磷酸二酯鍵D.用圖中引物擴增兩個循環(huán)后即可獲得添加限制酶切點的產(chǎn)物5、谷氨酸棒狀桿菌可用于微生物發(fā)酵工程生產(chǎn)谷氨酸來制取谷谷氨酸鈉（味精），該細菌在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣，并通過攪拌使空氣形成細小的氣泡，迅速溶解在培養(yǎng)液中（溶氧）；在溫度為30～37℃，pH為7～8的情況下，經(jīng)28～32小時，培養(yǎng)液中會生成大量的谷氨酸。如圖表示利用玉米淀粉為材料制備谷氨酸的流程圖。下列敘述錯誤的是（）

A.尿素能為谷氨酸棒狀桿菌提供氮源和碳源B.利用玉米淀粉制備糖液時，可采用酶解法C.谷氨酸棒狀桿菌通過有氧發(fā)酵產(chǎn)生谷氨酸D.維生素B能為發(fā)酵菌提供特殊的營養(yǎng)物質(zhì)6、廣式高鹽稀態(tài)醬油發(fā)酵工藝中鹽分含量對于發(fā)酵過程和產(chǎn)品風味至關重要，其作用之一是防腐抑菌，淘汰非耐鹽野生雜菌或有害微生物。隨著健康中國建設的推進，醬油的減鹽成為一種趨勢。科研人員研究了不同鹽分條件下不同發(fā)酵階段微生物群落結構的變化，結果如下表所示。下列說法錯誤的是（）

不同鹽分雜件下不同發(fā)酵階段各類微生物菌落總數(shù)。樣品菌落總數(shù)/（1gCFU/mL）細菌真菌乳酸菌乳酸菌LI6.954.876.18LⅡ6、656.466.37LⅢ5.874.724.60MI6.934.034.70MⅡ6.416.325.52MⅢ5.574.075.11HI6.823.484.60HⅡ6.155.785.84HⅢ5.392.434.93

注，L、M、H分別表示低鹽組（120g/L）、中鹽組（150g/L）、高鹽組（170g/L），I、Ⅱ、Ⅲ分別表示發(fā)酵第5天、發(fā)酵第25天、發(fā)酵第55天A.高濃度鹽分能通過提高培養(yǎng)液的滲透壓來實現(xiàn)防腐抑菌B.在發(fā)酵初期，鹽濃度的提高對真菌及乳酸菌形成有效抑C.在發(fā)酵過程中，細菌、真菌、乳酸菌的數(shù)量的顯現(xiàn)降低趨勢D.隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可以更好地了解發(fā)酵進程評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)7、老年癡呆癥患者的腦血管中有一種特殊的β－淀粉樣蛋白體，它的逐漸積累可能導致神經(jīng)元損傷和免疫功能下降，某些基因的突變會導致β－淀粉樣蛋白體的產(chǎn)生和積累。下列技術能用于老年癡呆癥治療的是（）A.胚胎移植技術B.胚胎干細胞技術C.單克隆抗體技術D.核移植技術8、下圖表示形成cDNA并進行PCR擴增的過程。據(jù)圖分析；下列敘述錯誤的是（）

A.①過程所需的原料是脫氧核苷酸B.②過程所需的酶必須耐高溫C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的引物對之間不能互補配對9、地球上的植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸，其中40%~60%能被土壤中的某些微生物分解利用，這是因為他們能夠產(chǎn)生纖維素酶。研究者從牛的瘤胃中篩選產(chǎn)生纖維酶的纖維素分解菌，其篩選過程如圖1所示。將丙中的菌懸液轉接于含有稻草作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用剛果紅處理，看到如圖2所示情況，下列有關敘述，錯誤的是（）

A.②過程是涂布器取乙中的菌液均勻的涂布在Ⅰ號培養(yǎng)表面B.甲、乙試管中的液體都屬于液體培養(yǎng)基，主要作用是稀釋菌種C.Ⅰ號、Ⅱ號培養(yǎng)基都屬于固體培養(yǎng)基，配置時先滅菌后調(diào)節(jié)pHD.可挑取圖2中周圍出現(xiàn)透明圈的菌落，用平板劃線法繼續(xù)純化10、將蘇云金桿菌的Bt基因?qū)朊藁毎?，可獲得抗棉鈴蟲的轉基因棉，其過程如圖所示(KanR為卡那霉素抗性基因)。下列相關敘述正確的是（）

A.可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌B.過程①必須用同種限制酶切割含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒C.過程③將棉花細胞與農(nóng)桿菌混合培養(yǎng)能使T-DNA進入棉花細胞D.過程④和過程⑤的培養(yǎng)基中添加的激素的濃度不同11、基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（）

A.若某基因是從人的細胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列B.擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成C.導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞D.利用農(nóng)桿菌轉化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上12、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)13、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？____________________________14、回答下列問題。

（1）目前人類對基因________及基因間的________________尚缺乏足夠的認識，要想通過基因檢測達到預防疾病的目的是困難的；況且人類的____________病，既與基因有關，又與環(huán)境和________________有關。

（2）生物武器種類包括__________、________、__________，以及經(jīng)過___________的致病菌等。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下_____________、_____________、______________生物武器，并反對生物武器及其技術和設備的擴散。15、酶是細胞合成的生物催化劑。隨著生物科學技術的發(fā)展；酶已經(jīng)走出實驗室，走進人們的生產(chǎn)和生活。請回答下面有關酶的問題：

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成________，____________將脂肪水解為甘油和脂肪酸。加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是____________。

（2）果膠酶包括_____________________________；生產(chǎn)中如果要固定果膠酶；最好采用______________________________________法固定化。

（3）酶提取和分離原理：需要用__________法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白，以純化酶；利用_________________________法對酶進行純度鑒定。16、回答下列問題。

（1）果酒的制作離不開酵母菌，溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在_________，醋酸菌是一種________細菌，它的最適生長溫度為_______________，乳酸菌是________細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成___________。

（2）微生物的接種方法很多，最常用的是_____________和__________________，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目___________，這是因為______________________________。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定，將濾膜放在____________培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)___________；從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化酶和固定化細胞技術是利用物理或化學方法將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術，包括化學結合法、____________和物理吸附法。酶更適合采用__________和___________固定化，而細胞多采用___________固定化。17、第一步：______18、動物細胞培養(yǎng)的流程：

取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用______處理分散成______→制成______→轉入培養(yǎng)瓶中進行______培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)_____培養(yǎng)。19、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過其表面的S-蛋白與人細胞膜上的ACE2相互識別，感染人的呼吸道上皮細胞。請分析回答問題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_________剌激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生_________性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎，此時可通過適度使用_________對病人進行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）科學家采集了感染新型冠狀病毒并已康復的甲、乙兩人的血液，檢測相關抗體的水平，結果如圖1。據(jù)此分析，應選取_________的B淋巴細胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測病毒對宿主細胞的感染率，結果如圖2。據(jù)此分析，對病毒抑制效果最好的單抗是__________號。

（5）患者康復后一段時間，若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應的__________細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。評卷人得分四、判斷題(共1題，共8分)20、雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共4題，共8分)21、餐廚垃圾廢液中的淀粉；蛋白質(zhì)、脂肪等微溶性物質(zhì)可以被微生物分解并利用；但由于初期有益微生物數(shù)量相對較少，存在發(fā)酵周期長、效率低等缺點，極易對環(huán)境造成污染。為探究用圓褐固氮菌、巨大芽孢桿菌處理某餐廚垃圾廢液時，單獨接種和混合接種的效果差異及最佳接種量比，以制備微生物菌劑，研究者做了如下實驗：

（1）將兩種菌液進行不同配比分組處理如下表所示：。編號R0R1R2R3圓褐固氮菌：巨大芽孢桿菌1：00：11：12：1

將上表菌液分別接種于l00mL________________中進行振蕩培養(yǎng)。本實驗還需設置空白對照，對照組接種________________。

（2）培養(yǎng)3天后測定活菌數(shù)，取一定量菌液用_____________法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)，該方法包括_____________和____________兩個操作。進行計數(shù)時，可依據(jù)______________對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在__________內(nèi)的平板。實驗結果如下圖所示，由實驗結果可知___________________。

22、Hela細胞系是人工培養(yǎng)具有無限增殖能力的水生瘤細胞系；在世界各地的相關實驗室中為研究者提供了相同的研究對象。回答下列問題：

（1）Hela細胞源自一位美國婦女的宮頸癌細胞，目前實驗室中為了進步研究Hela細胞，需進行___________(填“原代”或“傳代”)培養(yǎng)。在動物細胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是________________________________________________。

（2）某小組為研究葡萄糖饑餓對Hela細胞生長的抑制情況，其他營養(yǎng)條件適宜，用不同葡萄糖濃度的培養(yǎng)基，培養(yǎng)Hela細胞24h，實驗結果如下表所示：。葡萄糖濃度（mmol:L-1）Hela細胞生長抑制率%056．161．036．301．525．002．016．44

該實驗_____________(填“需要”或“不需要”)另設對照組。實驗結果表明：葡萄糖濃度與Hela細胞生長抑制率的關系是____________________。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可_________________癌細胞的增殖，為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。Hela細胞在生物醫(yī)學領域應用廣泛，例如，它幫助科學家首次實現(xiàn)了人源細胞與小鼠細胞融合。細胞融合技術的意義是__________________________________________。23、人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大；通常從人血中提取，但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對血液制品顧慮重重，如果應用基因工程等技術，將人的血消白蛋白基因轉入奶牛細胞中，那么利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能。其大致過程如下：

I．采用良種供體奶牛的卵母細胞和精子；通過體外受精，形成受精卵；

II．將人血消白蛋白基因?qū)肽膛Ｊ芫?；形成重組細胞；

III．電脈沖刺激重組細胞；促使其形成早期胚胎；

Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中；最終發(fā)育成轉基因小牛。

請回答下列問題：

（1）實驗步驟Ⅰ中，受精時，防止多精入卵的生理反應包括____________________。

（2）實驗步驟Ⅱ中，需先構建基因表達載體，將HSA基因與__________等調(diào)控組件重組在一起；再導入奶牛受精卵。

（3）實驗步驟Ⅲ中，進行動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽和有機鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加__________。培養(yǎng)過程需要定期更換培養(yǎng)液，目的是__________。

（4）實驗步驟Ⅳ中，應選擇性別為__________的奶牛胚胎進行移植；對早期胚胎（如囊胚）進行性別鑒定的常用方法是____________________。移植前還需要檢測目的基因是否成功導入受精卵，檢測方法是采用__________技術。24、三氯生是一種抑菌物質(zhì)，具有優(yōu)異的貯存穩(wěn)定性，可以替代抗生素用于基因工程中篩選含目的基因的受體細胞。已知fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生。

(1)通過PCR方法擴增fabV基因時，先要根據(jù)_____設計兩種特異性引物序列，以確保Taq酶從引物的3′端延伸DNA鏈，至少需要經(jīng)過_____次擴增才能獲得8個雙鏈等長的目的基因。

(2)基因工程的核心步驟是_____；某科研團隊將可以受溫度調(diào)控的基因插入上述選出的重組質(zhì)粒中，構建了溫度調(diào)控表達質(zhì)粒（如圖2）。其中C基因在低溫下會抑制P2，R基因在高溫下會抑制P1，如果將lacZ基因和GFP（綠色熒蛋白）基因插入圖2質(zhì)粒中，使得最后表現(xiàn)為低溫下只表達GFP蛋白，而高溫下只表達lacZ蛋白。則lacZ基因插在_____之間，GFP基因的插入位置及注意點是_____。

(3)若以大腸桿菌為受體細胞，篩選上述插入了GFP基因的受體細胞的依據(jù)是：大腸桿菌能在含_____的培養(yǎng)基上生長，且_____。評卷人得分六、綜合題(共3題，共6分)25、為了增加菊花花色類型；研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導入菊花中。

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具；應具備的基本條件有____________________（答出兩點即可）；構建重組質(zhì)粒需要的工具酶有_____________和_______________。

（2）在培育轉基因植物時；常用農(nóng)桿菌轉化法，除此之外還有基因槍法和__________法。農(nóng)桿菌上Ti質(zhì)粒上的T-DNA的作用是____________________。

（3）在培養(yǎng)基中添加________________，可篩選被轉化的菊花細胞；要檢測C基因是否整合到菊花染色體上，可采用______________________。26、（1）為擴大可耕地面積；增加糧食產(chǎn)量，黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關注。我國科學家應用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。

①獲得耐鹽基因后，構建重組DNA分子所用的限制性核酸內(nèi)切酶作用于上圖中的____(填“a”或“b”)處，DNA連接酶作用于____(填“a”或“b”)處。

②將重組DNA分子導入水稻受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉化法、_____法和花粉管通道法。

③為了確定耐鹽轉基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的_____作探針進行分子雜交檢測；又要用一定濃度鹽水澆灌的方法從個體水平鑒定水稻植株的耐鹽性。

（2）下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點；圖1；圖2中箭頭表示相關限制酶的酶切位點。請回答下列問題：

④一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后，質(zhì)粒分子含有_____個游離的磷酸基團。

⑤若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越____。

⑥重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是____。

⑦與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于___。27、由新型冠狀病毒引起的新型冠狀病毒肺炎正在世界蔓延。人們期盼通過安全有效的新冠疫苗來遏制這場大流行。下表為三種新冠病毒疫苗的研發(fā)方法及技術路線：

。方法技術路線基因工程疫苗S蛋白基因→基因表達載體→大腸桿菌→S蛋白→人體腺病毒載體重組疫苗S蛋白基因→腺病毒基因表達載體→人體mRNA疫苗S蛋白基因→基因表達載體→大腸桿菌→mRNA→人體回答下列問題：

（1）在制備疫苗的過程中，常采用___________________技術獲取和擴增新冠病毒的S蛋白基因，擴增時，除了模板、四種脫氧核苷酸，還需要加入__________________和引物。當該過程消耗了62個引物時，則進行了___________________輪DNA復制。

（2）基因工程疫苗研制過程中，常用大腸桿菌作為受體細胞的原因是_________________。若目的基因進入受體細胞穩(wěn)定存在并表達_________________，則說明目的基因完成了轉化，從分子水平的角度可用_________________進行檢測。

（3）腺病毒載體疫苗是將S蛋白基因重組到改造后的腺病毒內(nèi)，改造后的腺病毒載體應具備的條件是________________。（寫出兩點）

（4）以S蛋白作為抗原制備單克隆抗體用于治療，單克隆抗體制備過程中需要對培養(yǎng)細胞進行篩選，第一次篩選的目的是得到雜交瘤細胞，該細胞的特點是________________。

（5）有人說“新冠病毒是RNA病毒，易發(fā)生變異，病毒變異后現(xiàn)用新冠疫苗便失去其功能”，請依據(jù)免疫學原理進行評價：_________________。參考答案一、選擇題(共6題，共12分)1、A【分析】【分析】

植物細胞工程：

（1）定義：細胞經(jīng)分裂和分化后；仍然具有產(chǎn)生完整生物體或分化成其他各種細胞的潛能。

（2）理論基礎：植物細胞的全能性。

（3）在生物的生長發(fā)育過程中；并不是所有的細胞都表現(xiàn)出全能性，原因是在特定的時間和空間條件下，細胞中的基因會選擇性地表達。

（4）已分化細胞全能表達的條件：離體；一定的激素和營養(yǎng)等。

【詳解】

A；植物頂端分生區(qū)附近（如莖尖、根尖）的病毒極少；甚至無病毒，所以切取一定大小的莖尖或根尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，而不是抗病毒的品種，A錯誤；

B；單倍體育種過程包括花藥離體培養(yǎng)和秋水仙素處理兩個階段；其中在花藥離體培養(yǎng)中用到了植物組織培養(yǎng)技術，B正確；

C；利用人參細胞培養(yǎng)來生產(chǎn)人參中重要的活性成分；利用的技術是植物細胞培養(yǎng)，實現(xiàn)了細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，C正確；

D；由于不同物種之間存在生殖隔離；傳統(tǒng)的有性雜交只能在同種生物之間進行，可利用植物體細胞雜交技術可將不同來源的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，培育成新植物體，例如“白菜-甘藍”，這樣打破了不同物種之間存在的生殖隔離，實現(xiàn)了遠緣雜交育種，D正確；

故選A。2、D【分析】【分析】

葡萄酒制作過程中；將裝配好的發(fā)酵瓶放在25℃～30℃環(huán)境條件下發(fā)酵，當發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡，表示發(fā)酵完畢。若發(fā)酵過程溫度高于30℃，則需及時采取降溫措施，主要為了防止影響酒的風味。

【詳解】

A；參與果酒制作的微生物主要是酵母菌；其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，所以米酒發(fā)酵過程中，酵母菌進行細胞呼吸的類型是有氧呼吸和無氧呼吸，A正確；

B；蒸米后；溫度較高，通常需要進行冷卻，再加入酒曲，其目的是防止溫度過高殺死酒曲中的微生物，B正確；

C；酒曲中的微生物主要是霉菌和酵母菌；霉菌主要起到糖化的作用，能把米中的淀粉轉化成葡萄糖，葡萄糖能為醇母菌的呼吸作用提供底物，C正確；

D；腐乳發(fā)酵過程中；起到主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶可以將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可以將脂肪水解成甘油和脂肪酸，毛霉不能起糖化作用，D錯誤。

故選D。3、D【分析】【分析】

動物乳腺生物反應器是基于轉基因技術平臺；使外源基因?qū)雱游锘蚪M中并定位表達于動物乳腺，利用動物乳腺天然；高效合成并分泌蛋白的能力，在動物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價值產(chǎn)品的轉基因動物的總稱。

【詳解】

A；動物乳腺生物反應器是一項利用轉基因動物的乳腺代替?zhèn)鹘y(tǒng)的生物發(fā)酵；進行大規(guī)模生產(chǎn)可供治療人類疾病或用于保健的活性蛋白質(zhì)的現(xiàn)代生物技術，A正確；

B；轉基因動物乳腺生物反應器是利用動物乳腺特異性啟動子調(diào)控元件指導外源基因在乳腺中特異性表達；并從轉基因動物奶中獲取重組蛋白，B正確；

C；乳腺生物反應器（轉基因動物)的所有體細胞中都含有目的基因；只是在乳腺細胞中表達，C正確；

D；動物乳腺生物反應器利用動物乳腺天然、高效合成并分泌蛋白的能力；因此受動物年齡、性別的影響，D錯誤。

故選D。4、D【分析】【分析】

PCR全稱為聚合酶鏈式反應；是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術。PCR需要模板DNA；四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

【詳解】

A；圖中引物與模板鏈堿基互補配對；該圖表示PCR循環(huán)中的復性環(huán)節(jié)，A錯誤；

B、PCR三次循環(huán)共消耗7（23-1）對引物，PCR四次循環(huán)共消耗15（24-1）對引物；第四次循環(huán)要消耗8對引物，B錯誤；

C；dNMP只有一個磷酸基團；為脫氧核苷酸，dNTP有三個磷酸基團，延伸時，在Taq酶催化下，dNMP作為擴增的原料會依次連接到3'端，相鄰的dNMP間形成磷酸二酯鍵，C錯誤；

D；由于一個引物不在該片段的端點；因此第一輪循環(huán)后，得到的一個DNA片段中兩條脫氧核苷酸鏈都不等長，通過繪圖可推知，再經(jīng)過一次循環(huán)，產(chǎn)物中開始出現(xiàn)脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，所以擴增兩個循環(huán)后即可獲得添加限制酶切點的產(chǎn)物，D正確。

故選D。5、A【分析】【分析】

發(fā)酵工程一般包括菌種的選育；擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制；滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等方面。在發(fā)酵過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進程。還要及時添加必需的營養(yǎng)成分，要嚴格控制溫度、pH和溶解氧等發(fā)酵條件。

【詳解】

A；谷氨酸棒狀桿菌為異養(yǎng)型生物；糖液中的糖為谷氨酸棒狀桿菌提供碳源，而尿素為谷氨酸棒狀桿菌提供氮源，A錯誤；

B；玉米淀粉在淀粉酶的作用下；可以制備成糖液，因此利用玉米淀粉制備糖液時，可采用酶解法，B正確；

C；谷氨酸棒狀桿菌在發(fā)酵過程中要不斷地通入無菌空氣；因此谷氨酸棒狀桿菌生產(chǎn)谷氨酸，進行的是有氧發(fā)酵，C正確；

D；糖液中的糖為發(fā)酵菌提供碳源；尿素提供氮源，另外，還有水和無機鹽，因此，維生素B為發(fā)酵菌的生長提供特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，D正確。

故選A。6、C【分析】【分析】

1；鹽分能通過提高培養(yǎng)液的滲透壓使微生物失水死亡；從而實現(xiàn)防腐抑菌；

2；在發(fā)酵初期；鹽濃度的提高對真菌及乳酸菌形成有效抑制；

3；發(fā)酵過程中；隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可以更好地了解發(fā)酵進程。

【詳解】

A；高濃度鹽分能通過提高培養(yǎng)液的滲透壓使微生物失水死亡；從而實現(xiàn)防腐抑菌，A正確；

B；由表格內(nèi)容可知；在發(fā)酵初期提高鹽濃度，對真菌及乳酸菌形成有效抑制，B正確；

C；由表中數(shù)據(jù)可知；低鹽組、中鹽組和高鹽組的細菌數(shù)量隨發(fā)酵時間推移數(shù)量減少；而真菌和乳酸菌數(shù)量隨著發(fā)酵時間的推移呈現(xiàn)先增后減的趨勢，C錯誤；

D；發(fā)酵過程中；隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可以更好地了解發(fā)酵進程，D正確。

故選C。二、多選題(共6題，共12分)7、B:C【分析】【分析】

根據(jù)題意；治療老年癡呆癥的思路有，通過生產(chǎn)抗體對抗患者體內(nèi)的β－淀粉樣蛋白體積累，通過增殖補充損傷死亡的神經(jīng)元改善患者的情況。

【詳解】

A；胚胎移植技術只可用于培養(yǎng)新的個體；對該疾病無應用意義，A錯誤；

B；胚胎干細胞技術可以培養(yǎng)誘導增殖新的神經(jīng)元；有可能用于治療該疾病，B正確；

C；單克隆抗體技術可以用于生產(chǎn)抗體對抗患者體內(nèi)的β－淀粉樣蛋白體；有助于治療該疾病，C正確；

D；核移植技術主要運用于克隆動物等；對該病沒有實際應用意義，D錯誤。

故選BC。8、B:C【分析】【分析】

PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程；其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。

PCR由變性--退火--延伸三個基本反應步驟構成：

①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時間后；使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結合，為下輪反應作準備；

②模板DNA與引物的退火（復性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后；溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP為反應原料，靶序列為模板，按堿基互補配對與半保留復制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補的半保留復制鏈，重復循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時就能將待擴目的基因擴增放大幾百萬倍。

【詳解】

A；①過程為逆轉錄；所需的原料是脫氧核苷酸，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程所需要的DNA聚合酶不需要耐高溫；B錯誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃以上時，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要DNA解旋酶破壞氫鍵，C錯誤；

D；④過程為復性；溫度降到50℃左右時，兩種引物通過堿基互補配對與兩條DNA單鏈結合，但引物對之間不能互補配對，D正確。

故選BC。9、A:B:C【分析】分解纖維素的微生物的分離實驗的原理：①土壤中存在著大量纖維素分解酶；包括真菌；細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

【詳解】

A；根據(jù)Ⅰ號培養(yǎng)基上菌落分布均勻可知；②過程是用涂布器取乙中的樣品稀釋液均勻的涂布在Ⅰ號培養(yǎng)表面，即乙中是分解纖維素菌的樣品稀釋液，不是菌液，A錯誤；

B；液體培養(yǎng)基的作用是讓菌體增殖；而不是稀釋菌種，甲、乙試管中的液體都是樣品稀釋液，捕食液體培養(yǎng)基，B錯誤；

C；配置固體培養(yǎng)基的基本步驟是計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板；故需要先調(diào)pH，再滅菌，C錯誤；

D；剛果紅能與纖維素形成紅色復合物；若菌落周圍出現(xiàn)透明圈，說明纖維素分解菌將纖維素進行了分解，可挑取該菌落用平板劃線法繼續(xù)純化該菌體，D正確。

故選ABC。10、A:C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析，過程①表示基因表達載體的構建過程，需用DNA連接酶將目的基因和運載體（質(zhì)粒）連接形成重組Ti質(zhì)粒。過程②表示將目的基因?qū)胛⑸锛毎ㄞr(nóng)桿菌），需要用Ca2+處理；使其成為感受態(tài)細胞，使其易吸收周圍環(huán)境中的DNA分子。農(nóng)桿菌侵染棉花后，將自身的Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細胞的DNA上，然后利用棉花細胞進行植物組織培養(yǎng)，獲得抗蟲棉。

【詳解】

A、KanR為卡那霉素抗性基因；成功導入質(zhì)粒的農(nóng)桿菌具有卡那霉素抗性而普通農(nóng)桿菌沒有，因此可使用含卡那霉素的培養(yǎng)基來篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，A正確；

B；為使目的基因DNA片段和質(zhì)粒DNA片段在切口處的黏性末端匹配；需要選擇能切出相同黏性末端的限制酶來進行切割，可以是同種限制酶，也可以是不同限制酶，但是必須要能產(chǎn)生相同黏性末端，B錯誤；

C；棉花細胞與農(nóng)桿菌混合后；農(nóng)桿菌在侵染棉花細胞時，可將自身的Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細胞的DNA上，C正確；

D；植物組織培養(yǎng)時；培養(yǎng)基中生長素濃度高于細胞分裂素，可以誘導根的分化；若是細胞分裂素高于生長素濃度，則誘導芽的分化，從圖上可知，④過程分化出芽，⑤過程分化形成根，繼而形成試管苗，因此④和⑤中的培養(yǎng)基用到的激素的濃度不同，D正確。

故選ACD。11、C:D【分析】【分析】

將目的基因?qū)胫参锛毎Ｓ棉r(nóng)桿菌轉化法；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可整合到受體細胞的染色體DNA上?；虮磉_載體常包括目的基因；啟動子、終止子、標記基因。標記基因是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

【詳解】

A；啟動子是位于DNA上RNA聚合酶的結合部位；mRNA是由基因啟動子后面的序列編碼而來的，若某基因是從人的細胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列，A正確；

B、引物的延伸方向為3'端，擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA聚合酶從引物a、b的3'－端進行子鏈合成；B正確；

C；導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞不是乳腺細胞；而是受精卵或早期胚胎細胞，C錯誤；

D；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉移至受體細胞；并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉化作用，就可以把目的基因的T-DNA整合到植物細胞中染色體的DNA上，D錯誤。

故選CD。12、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應為無菌水，B錯誤；

C；由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應呈藍色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，因此周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。三、填空題(共7題，共14分)13、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種14、略

【分析】【分析】

【詳解】

（1）人類對基因的結構；基因間的相互作用尚缺乏足夠的認識；人類的多基因病，既與基因有關，又與環(huán)境和生活習慣有關。

（2）生物武器種類包括致病菌；病毒、生化毒劑、以及經(jīng)過基因重組的致病菌。

（3）1998年6月27日，中美兩國元首在關于《禁止生物武器公約》議定書的聯(lián)合聲明中，重申了在任何情況下不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器。【解析】①.結構②.相互作用③.多基因④.生活習慣⑤.致病菌⑥.病毒⑦.生化毒劑⑧.基因重組⑨.不發(fā)展⑩.不生產(chǎn)?.不儲存15、略

【分析】【分析】

1；腐乳制作過程中多種微生物參與了發(fā)酵；其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)轉化成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪轉化成甘油和脂肪酸。

2；果膠酶能夠分解果膠；瓦解植物的細胞壁及胞間層，使榨取果汁變得容易，而果膠分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得渾濁的果汁變得澄清。果膠酶并不特指某一種酶，而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶。

【詳解】

（1）在腐乳制作的過程中；利用毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸；加酶洗衣粉里添加的酶制劑中，應用最廣泛；效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

（2）果膠酶并不特指某一種酶；而是分解果膠的一類酶的總稱，包括多聚半乳糖醛酸酶；果膠分解酶和果膠酯酶；在果汁生產(chǎn)過程中如果要固定果膠酶，最好采用化學結合和物理吸附法固定化，這是因為酶分子小，體積小的酶容易從包埋材料中漏出。

（3）酶提取和分離原理：需要用凝膠色譜法去除相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白；以純化酶；利用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法對酶進行純度鑒定。

【點睛】

本題考查腐乳制作和酶提取等知識，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗步驟、實驗采用的試劑及試劑的作用等，需要考生在平時的學習過程中注意積累?！窘馕觥啃》肿与暮桶被嶂久笁A性蛋白酶和堿性脂肪酶半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶化學結合法和物理吸附凝膠色譜（分配色譜）聚丙烯酰胺凝膠電泳16、略

【分析】【分析】

果酒制作菌種是酵母菌；來源于葡萄皮上野生型酵母菌或者菌種保藏中心，條件是無氧；溫度是18～25℃，pH值呈酸性．果醋制備的菌種是醋酸菌，條件是發(fā)酵過程中充入無菌氧氣，溫度為30～35℃。

【詳解】

（1）酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18～25℃；醋酸菌是一種好氧細菌，它的最適生長溫度為30～35℃。乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下，將葡萄糖分解成乳酸。

（2）微生物的接種方法很多；最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，稀釋涂布平板法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落。

（3）飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定；將濾膜放在伊紅美藍培養(yǎng)基上培養(yǎng)，大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色，從而計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)目。

（4）固定化技術一般包括化學結合法；包埋法和物理吸附法。酶更適合采用化學結合法和物理吸附法固定化；而細胞多采用包埋法固定化。

【點睛】

本題考查果酒和果醋制備原理，意在考查學生理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡結構，屬識記內(nèi)容?！窘馕觥?8－25℃好氧30－35℃厭氧乳酸平板劃線法稀釋涂布平板法低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落伊紅美藍黑色包埋法化學結合法物理吸附法包埋法17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因的獲取18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】胰蛋白酶單個細胞細胞懸液原代傳代19、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線圖可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對宿主細胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對宿主細胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細胞，使機體產(chǎn)生特異性免疫反應，人細胞膜上的ACE2的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對被新冠病毒感染后肺細胞強烈攻擊引發(fā)肺炎；此時可通過適度使用免疫抑制劑對病人進行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對照組，故應選取甲的B細胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對宿主細胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復后一段時間；若再次受到該病毒的攻擊，機體內(nèi)相應的記憶細胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細胞和細胞毒性T細胞。

【點睛】

本題結合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識記病毒的結構，明確病毒沒有細胞結構；識記單克隆抗體的制備過程，掌握其優(yōu)點及相關應用，能結合圖中信息準確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶四、判斷題(共1題，共8分)20、A【分析】【詳解】

雄性動物剛剛排出的精子并不具有受精能力，必須獲能后才具備受精能力，精子獲能的過程不是獲得能量的過程，是獲得受精能力的過程，可在獲能液或受精液中完成，故正確。五、實驗題(共4題，共8分)21、略

【分析】微生物實驗室培養(yǎng)的實驗操作：1；制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的過程為：計算、稱量、溶化、調(diào)pH、滅菌、倒平板。2、純化大腸桿菌：（1）原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成單個細胞；使其長成單個的菌落，這個單個菌落就是一個純化的細菌菌落。（2）微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在-起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法:將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

（1）將上表菌液分別接種于100mL餐廚垃圾廢液中進行振蕩培養(yǎng)；振蕩處理的目的是增加溶液中的溶氧量；有利于目的菌與溶液充分接觸；本實驗還需設置對照組為接種等量無菌水。

（2）測定活菌數(shù)；需要利用稀釋涂布平板法，接種時故需要取一定量菌液進行梯度稀釋，然后分別取0.1mL的菌液采用涂布法接種于基本培養(yǎng)基中培養(yǎng)。進行計數(shù)時，可依據(jù)菌落的特征對兩種菌進行區(qū)分，并選取菌落數(shù)在30-300內(nèi)的平板。由實驗結果可知：兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1:1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化。

【點睛】

本題結合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記制備培養(yǎng)基的過程;識記接種微生物常用的兩種方法及微生物的計數(shù)方法，能結合柱形圖中信息準確答題?！窘馕觥磕巢蛷N垃圾廢液等量無菌水稀釋涂布平板系列（梯度）稀釋涂布平板菌落特征30~300兩種菌混合接種時有效菌落數(shù)均大于單獨接種；兩菌種接種量比例為1：1時，廢液中兩種菌種的有效活菌數(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)同步最大化22、略

【分析】【分析】

1；動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；培養(yǎng)條件：

（1）無菌無毒環(huán)境：無菌--對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行無菌處理；在細胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒--定期更換培養(yǎng)液；防止細胞代謝產(chǎn)物積累對自身造成危害。

（2）營養(yǎng)：

成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。

培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴格配制而成的培養(yǎng)基）

（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜；多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。O2是細胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】

（1）目前實驗室中為了進一步研究Hela細胞；需進行傳代培養(yǎng)；由于是在多數(shù)動物細胞培養(yǎng)液適宜的pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶（最適pH是強酸性）已失去活性，所以在動物細胞培養(yǎng)過程中，需要用胰蛋白酶處理制備細胞懸液。

（2）分析表格數(shù)據(jù)；該實驗需要另設對照組，觀察在正常條件下細胞生長情況。實驗結果表明：葡萄糖濃度與Hela細胞生長抑制率的關系是葡萄糖濃度越低，Hela細胞生長抑制率越高。

（3）體內(nèi)低濃度葡萄糖可抑制癌細胞的增殖；為腫瘤的限食療法提供理論依據(jù)。兩個或多個細胞融合形成的單核細胞叫做雜交細胞，細胞融合技術的意義是突破了有性雜交局限，使遠緣雜交成為可能。

【點睛】

本題考查動物細胞培養(yǎng)的相關內(nèi)容，重點考查動物細胞培養(yǎng)的過程和條件，相關知識點只需考生識記即可正確作答，屬于考綱識記層次的考查。對于此類試題，考生在平時的學習過程中，應該注意構建知識網(wǎng)絡結構。【解析】傳代在多數(shù)動物細胞培養(yǎng)的適宜pH范圍內(nèi)，胃蛋白酶已失去活性需要葡萄糖濃度越低，Hela細胞生長抑制率越高抑制突破了有性雜交局限，使遠緣雜交成為可能23、略

【分析】1；體外受精過程包括卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、體外受精；其中卵母細胞的采集和培養(yǎng)的方法：

（1）主要方法是：用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子體外受精。

（2）第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞。

（3）第三種方法：是直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞；叫活體采卵。

2；受精過程為：頂體反應→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應）→卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成、核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開始。

【詳解】

（1）受精時；往往一個卵母細胞只能和一個精子結合，透明帶反應是阻止多精入卵的第一道屏障，卵細胞膜反應是阻止多精入卵的第二道屏障。

（2）該實驗是利用牛的乳腺細胞生產(chǎn)血清白蛋白；因此實驗步驟Ⅱ中構建基因表達載體時，需要先將HSA基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件重組在一起，再導入奶牛受精卵。

（3）動物早期胚胎的體外培養(yǎng)時；培養(yǎng)液中除了含有各種無機鹽和有機鹽類；維生素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分外，還要添加激素和動物血清。培養(yǎng)過程需要定期更換培養(yǎng)液，清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

（4）血清白蛋白要從乳汁中提??；只有雌性奶牛才能產(chǎn)生乳汁，因此胚胎移植時，必須選取雌性奶牛的胚胎進行移植；對早期胚胎（如囊胚）進行性別鑒定的常用方法是取滋養(yǎng)層細胞進行染色體檢查或DNA分析；移植前還需要檢測目的基因是否成功導入受精卵，通常采用DNA分子雜交技術進行檢測。

【點睛】

解答本題的關鍵是掌握體外受精、受精過程、基因工程等知識，要求考生識記體外受精技術的過程及方法、受精作用的過程、基因工程的操作步驟及應用，并能夠聯(lián)系實際答題?！窘馕觥客该鲙Х磻吐鸭毎し磻橄俚鞍谆虻膯幼蛹に睾蛣游镅迩宄x產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害雌性取滋養(yǎng)層細胞進行染色體檢查或DNA分析DNA分子雜交24、略

【分析】【分析】

1；基因工程技術的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術擴增和人工合成。

（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因；啟動子、終止子和標記基因等；

（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同；導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：

①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因DNA分子雜交技術；

②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA-分子雜交技術；

③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原一抗體雜交技術。

④個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；圖1中①-④依次為目的基因的獲取、表達載體的構建、目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測。

（1）

PCR是一項在生物體外復制特定DNA的核酸合成技術，需要Taq酶，但Taq酶不能從頭開始合成DNA，前提條件是要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物，因此需要根據(jù)目的基因fabV基因的兩端按堿基互補配對原則設計引物。至少需要經(jīng)過4次擴增才能獲的8個雙鏈等長的目的基因。

（2）

基因工程的核心步驟是基因表達載體的構建，題干信息顯示C基因在低溫下會抑制P2，R基因在高溫下會抑制P1，說明P2啟動子在高溫下可以啟動轉錄；P1啟動子在低溫下可以啟動轉錄。題目顯示高溫下只表達lacz蛋白，則lacZ基因要插在“高溫下不被抑制”的啟動子的后面，即P2→T2之間；GFP基因要低溫下表達，則插入位置要在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

（3）

因為fabV（從霍亂弧菌中發(fā)現(xiàn)的烯脂酰ACP還原酶）基因可以使大腸桿菌抵抗三氯生；大腸桿菌能在含三氯生的培養(yǎng)基上生長，說明大腸桿菌插入重組質(zhì)粒，且依據(jù)是低溫下有綠色熒光高溫下無綠色熒光。

【點睛】

本題考查基因工程相關知識點，要求學生熟練掌握基因工程的原理、步驟及相關的目的，形成知識網(wǎng)絡，結合題目要求解決相關問題。【解析】(1)目的基因（fabV基因）兩端堿基序列4

(2)基因表達載體的構建P2→T2插在P1→T1之間；且不破壞C基因和R基因。

(3)三氯生低溫下有綠色熒光，高溫下無綠色熒光六、綜合題(共3題，共6分)25、略

【分析】【分析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟；基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入，③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇；構建重組質(zhì)粒需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶。

（2）在培育轉基因植物時常用農(nóng)桿菌轉化法；基因槍法和花粉管通道法；Ti質(zhì)粒存在T-DNA片段；它具有可轉移到受體細胞并整合到受體細胞的染色體DNA上的特點。

（3）圖2中顯示標記基因是潮霉素抗性基因；因此可在培養(yǎng)基中添加潮霉素，篩選被轉化的菊花細胞；要檢測轉基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術，若出現(xiàn)雜交帶，即可證明整合成功。

【點睛】

本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能正確分析題圖，再結合圖中信息準確答題?！窘馕觥磕茉谒拗骷毎麅?nèi)復制并穩(wěn)定保存、具有標記基因、具有多個限制酶切位點限制酶DNA連接酶花粉管通道使目