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1、藥物半數(shù)有效量的測(cè)定,實(shí)驗(yàn)人員:吳海韜 傅倩云 袁靜 秦銘銘 顧曉婷 王古平 指導(dǎo)老師:杜斌,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮?學(xué)習(xí)整體動(dòng)物質(zhì)反映的實(shí)驗(yàn)方法 學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物常用的分組和編號(hào)方法 掌握ED50實(shí)驗(yàn)和計(jì)算方法,原理 戊巴比妥鈉為巴比妥類鎮(zhèn)靜麻醉藥,用適當(dāng)劑量給小鼠腹腔注射后產(chǎn)生的催眠效應(yīng),常用翻正反射的消失來判斷。該指標(biāo)僅有陽性(催眠)和陰性(不催眠)兩種現(xiàn)象,屬于質(zhì)反應(yīng)。 質(zhì)反應(yīng)量曲線的橫坐標(biāo)為對(duì)數(shù)劑量,縱坐標(biāo)為累加陽性頻數(shù),可得標(biāo)準(zhǔn)的S型曲線。在一定的劑量范圍內(nèi)各組的反應(yīng)率將隨著劑量加大而遞增。而在該曲線的中央部分(50%反應(yīng)處)接近一條直線,斜度最大,其劑量測(cè)定也最為準(zhǔn)確,誤差最小。,二、實(shí)
2、驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)對(duì)象 小鼠 實(shí)驗(yàn)儀器 燒杯,注射器,電子天平 實(shí)驗(yàn)試劑及藥品 不同濃度的戊巴比妥鈉,三、實(shí)驗(yàn)步驟,本實(shí)驗(yàn)分5個(gè)組,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組取體重20克左右小白鼠6只,稱重,編號(hào),分為5組。,每個(gè)實(shí)驗(yàn)分別給小白鼠腹腔注射不同劑量(49、39、31、25、20mg/kg)的戊巴比妥鈉,每個(gè)劑量注射6只小白鼠(給藥順序按劑量從低到高),記錄給藥時(shí)間,以翻正反射消失作為入睡指標(biāo),給藥15分鐘后,記錄實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)催眠的鼠數(shù),匯集全班結(jié)果。 采用公式ED50=log-1 X m i( P - 0.5)計(jì)算結(jié)果,四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì),注:ED50=log-1X m i( P - 0.5)。其中ED50為藥物半數(shù)有效
3、量; X m=log49=1.6900,為最大劑量對(duì)數(shù)值; i=log(49/39)=0.09913,為相鄰兩組劑量比值的對(duì)數(shù); P為動(dòng)物反應(yīng)率;P為各組反應(yīng)率的總和,五、注意事項(xiàng),一定以翻正反射消失作為入睡指標(biāo),如果小白鼠臥著貌似入睡,但翻轉(zhuǎn)使其腹部向上,松手后不能保持腹部向上體位則不算入睡。 本實(shí)驗(yàn)為定量實(shí)驗(yàn),注射藥量必須準(zhǔn)確。給藥后要仔細(xì)觀察藥物反應(yīng),但不可過多地翻動(dòng)小鼠,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 室溫以20為宜,六、思考題,半數(shù)有效量(ED50)測(cè)定的目的意義如何? 答:半數(shù)有效量 (ED50)在量反應(yīng)中是指能引起50%最大反應(yīng)強(qiáng)度的藥物劑量;在質(zhì)反應(yīng)中只引起50%實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)陽性反應(yīng)的藥物劑量。半數(shù)致死量越大,半數(shù)有效量越小,則表明藥物的安全度越高。因而常用治療指數(shù)(LD50/ED50)作為藥物安全度的指標(biāo)。其比值越大,則安全度越高;其比值越小,則安全度也就越小。,小白鼠如何分組,同學(xué)分成幾組較為合適?怎樣把30只小鼠分給同學(xué)們? 答:先以少量動(dòng)物做預(yù)實(shí)驗(yàn),以獲得小鼠對(duì)戊巴比妥鈉催眠反應(yīng)率為100%的最小劑量和反應(yīng)率為0%的最大劑量,然后在此范圍內(nèi),一般分成48個(gè)劑量組(本實(shí)驗(yàn)取5組)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對(duì)小鼠進(jìn)行隨機(jī)分組前,可先稱各小鼠體重,將體重相同小鼠放一籠,分別做好
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