燒傷患者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)與炎性標(biāo)志的分析.doc

燒傷患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)與炎性標(biāo)志的分析楊勇袁梅陳琪摘要：目的探討患者燒傷后外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)以及與炎癥標(biāo)志指標(biāo)的相關(guān)變化。方法根據(jù)燒傷面積程度分為重度燒傷組和輕度灼傷組（包括電擊傷、燙傷），對(duì)照組使用常規(guī)的體檢健康對(duì)象；采用流式細(xì)胞儀的單克隆抗體分析細(xì)胞免疫指標(biāo)（CD3，CD4，CD8，CD19，NK）和散射比濁法分析炎癥因子指標(biāo)（CRP，AAG，HP，CER），觀察細(xì)胞免疫指標(biāo)（CD3，CD4，CD8，CD19，NK）和炎癥因子指標(biāo)（CRP，AAG，HP，CER）的變化。結(jié)果重度燒傷燒傷患者的各項(xiàng)免疫指標(biāo)出現(xiàn)明顯異常，其中CD3，CD4，CD4/CD8統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)，CD8，NK統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）；而輕度燒傷患者的各項(xiàng)免疫指標(biāo)無明顯異常；重度燒傷組的CRP，AAG，HP和輕度燒傷組的HP指標(biāo)與正常對(duì)照組間存在非常顯著差異（P0.01）；重度燒傷組的CER和輕度燒傷組的CER，HP與正常對(duì)照組間存在顯著差異（P0.05）。結(jié)論外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)以及與炎癥標(biāo)志指標(biāo)檢測對(duì)臨床的診斷、治療和病情監(jiān)測是至關(guān)重要。關(guān)鍵詞：燒傷T淋巴細(xì)胞亞群炎癥標(biāo)志全身炎癥反應(yīng)綜合征（Systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS）為各種感染和非感染損傷引發(fā)機(jī)體全身炎癥反應(yīng)1，是大面積燒傷常見的并發(fā)癥，在危重?zé)齻颊咧邪l(fā)病率很高。因外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)的CD4/CD8明顯下降5，可導(dǎo)致SIRS發(fā)生，最終引發(fā)多器官功能受損乃至死亡。目前尚無關(guān)于燒傷后患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)以及與SIRS炎性標(biāo)志諸如C-反應(yīng)蛋白（CRP），-酸性糖蛋白（AAG），結(jié)合珠蛋白（HP），銅蘭蛋白（CER）相關(guān)變化的臨床報(bào)道。為探討患者燒傷后外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)以及與炎癥標(biāo)志指標(biāo)的相關(guān)變化，積極有效的掌握燒傷患者病情發(fā)展，進(jìn)行有效治療，本文采用流式細(xì)胞術(shù)及免疫比濁法分析40例我院不同程度燒傷患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群以及和幾種主要炎癥因子的關(guān)系，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。1、臨床資料與方法1.1研究對(duì)象選擇2009年1月至2011年12月入住我院燒傷整形科患者，燒傷組40例，其中男性27例，女性13例，年齡在668歲；所選患者均為燒傷前健康，無肝炎、自身免疫性疾病或慢性炎癥病史等；選自我院門診健康體檢者對(duì)照組30例(均為血液，B超，放射檢驗(yàn)結(jié)果正常者)；所有檢測血清標(biāo)本均保存于零下20，并每季度檢測炎性指標(biāo)一次，全血標(biāo)本當(dāng)日檢測；本文根據(jù)燒傷面積程度分為重度燒傷組和輕度灼傷組（包括電擊傷、燙傷），其中重度燒傷組90%（1例燒傷面積為23%的輕度燒傷患者，后文忽略）以上為燒傷面積大于80%且為燒傷-度的重度燒傷患者（這種患者一直是燒傷外科救治的難點(diǎn)，其病程長，并發(fā)癥多且兇險(xiǎn)，死亡率高3），輕度灼傷組損傷面積為2-10%。1.2試劑儀器流式細(xì)胞試劑由美國INVITROGEN公司生產(chǎn)，杭州聯(lián)科生物技術(shù)有限公司提供，儀器為德國制造的PARTEC流式細(xì)胞儀，型號(hào)為PAS；炎癥因子試劑由美國BECKMANCOULTER公司生產(chǎn)，上海華美倫生物技術(shù)有限公司提供，儀器為美國BECKMANCOULTER公司制造的IMMAGE800特定蛋白分析儀。1.3方法流式細(xì)胞儀的單克隆抗體分析細(xì)胞免疫指標(biāo)，包括白細(xì)胞分化抗原CD3，CD4，CD8，CD19，自然殺傷細(xì)胞NK；散射比濁法分析炎癥因子指標(biāo)，包括C-反應(yīng)蛋白（CRP），-酸性糖蛋白（AAG），結(jié)合珠蛋白（HP），銅蘭蛋白（CER）。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析數(shù)據(jù)XS表示，組間均值采用t檢驗(yàn)，P0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2、結(jié)果2.1表1結(jié)果顯示，在重度燒傷組、輕度燒傷組與正常對(duì)照組比較可以看出，重度燒傷燒傷患者的各項(xiàng)免疫指標(biāo)出現(xiàn)明顯異常，其中CD3，CD4，CD4/CD8統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)，CD8，NK統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05），而輕度燒傷患者的各項(xiàng)免疫指標(biāo)無明顯異常。2.2表2結(jié)果顯示，在各項(xiàng)炎癥指標(biāo)中，重度燒傷組的CRP，AAG，HP和輕度燒傷組的HP指標(biāo)與正常對(duì)照組間存在非常顯著差異（P0.01）；重度燒傷組的CER和輕度燒傷組的CER，HP與正常對(duì)照組間存在顯著差異（P0.05）。3、討論燒傷患者免疫功能紊亂這一事實(shí)已被大量的資料所證實(shí)，其中細(xì)胞免疫功能下降4，是嚴(yán)重?zé)齻蟛l(fā)全身性感染，多器官功能受損，乃至死亡的重要原因之一。全面觀察燒傷后患者細(xì)胞免疫功能的變化，特別是重度燒傷患者，對(duì)了解燒傷后機(jī)體免疫狀況，探索免疫功能紊亂的發(fā)生機(jī)制及其免疫功能紊亂的治療及病情監(jiān)測有一定的臨床價(jià)值。T淋巴細(xì)胞主要執(zhí)行細(xì)胞免疫的效應(yīng)功能及免疫調(diào)節(jié)功能。本文表1顯示：重度燒傷組外周血CD3細(xì)胞比例明顯較正常組下降，說明重度燒傷患者細(xì)胞免疫功能處于抑制狀態(tài)。CD4細(xì)胞和CD8細(xì)胞是參與細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)的一對(duì)相互制約的T淋巴細(xì)胞亞群；CD4細(xì)胞為輔助/誘導(dǎo)T細(xì)胞亞群，主要是協(xié)調(diào)B細(xì)胞分化抗體，CD8細(xì)胞為抑制/細(xì)胞毒T細(xì)胞亞群，它抑制抗體的合成、分泌及T細(xì)胞的增殖，兩者的穩(wěn)態(tài)維持著機(jī)體的免疫應(yīng)答。在重度燒傷組中，外周血CD4細(xì)胞比例明顯低于正常組，CD8細(xì)胞比例則高于正常組，CD4/CD8細(xì)胞比值明顯低于正常組，說明重度燒傷機(jī)體的免疫穩(wěn)態(tài)遭到破壞，正是這種穩(wěn)態(tài)的破壞，導(dǎo)致燒傷機(jī)體發(fā)生免疫功能紊亂，并發(fā)全身感染，器官損傷的重要原因之一。在輕度燒傷患者中，各項(xiàng)免疫指標(biāo)無顯著變化，根據(jù)免疫指標(biāo)的變化同時(shí)可以了解病情的嚴(yán)重程度。由此，檢測燒傷患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)，對(duì)燒傷患者，特別是重度燒傷患者機(jī)體免疫功能了解控制以及病情發(fā)展起到至關(guān)重要的意義。另一方面，燒傷后患者機(jī)體的炎癥反應(yīng)本質(zhì)上是對(duì)燒傷所致組織損傷的一種防御反應(yīng)有助于清除創(chuàng)面壞死組織，限制組織損傷的擴(kuò)大和加速組織的修復(fù)。本文表2顯示：重度燒傷組的CRP，AAG，HP較正常對(duì)照組明顯升高（P0.01），而CER較正常對(duì)照組降低；輕度灼傷組CRP，HP較正常對(duì)照組升高（P0.05），而CER較正常對(duì)照組降低，AAG則無明顯變化。同時(shí)可以看出重度燒傷組的CRP，AAG較輕度灼傷組明顯升高（P0.05），從而說明炎癥因子指標(biāo)CRP，AAG可以反映燒傷患者機(jī)體的炎癥損傷及其嚴(yán)重程度。由于燒傷越重，病程越長，全身性感染發(fā)病率越高2，而且過激的炎癥應(yīng)激性反應(yīng)，往往導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征（Systemicinflammatoryresponsesyndrome,SIRS）的發(fā)生以及對(duì)組織器官的直接損傷，積極有效扶持機(jī)體抵抗力，成為治愈重度燒傷的關(guān)鍵，對(duì)燒傷患者盡早行炎癥因子指標(biāo)檢測非常必要。綜上所述，燒傷患者機(jī)體不僅存在細(xì)胞免疫功能的低下，而且也呈現(xiàn)炎癥反應(yīng)的增強(qiáng)；如何調(diào)節(jié)提高燒傷患者，尤其是重癥燒傷患者機(jī)體的細(xì)胞免疫功能和控制過激的炎癥應(yīng)激性反應(yīng)，防止燒傷患者的全身性感染以及器官損傷，對(duì)燒傷患者行外周血淋巴細(xì)胞亞群和炎癥因子指標(biāo)檢測，對(duì)協(xié)助臨床燒傷患者的診斷、治療和病情監(jiān)測是至關(guān)重要的。參考文獻(xiàn)1、孫東明，程亞潁，井麗娟，等。全身炎癥反應(yīng)綜合征患兒血內(nèi)毒素、脂多糖結(jié)合蛋白/脂多糖受體水平變化的意義J，實(shí)用兒科臨床雜志，2007，22（6）：426-427。2、黎鰲主編，燒傷治療學(xué)M，第2版，北京：人民衛(wèi)生出版社，1995；80。3、BakZ,BergF,ErikssonO,et.al,HemodynamicchangesduringresuscitarionafterburnsusingtheParklandformulaJ,JTrauma；2009,66(2):329-336。4、HousbroughJF,ZopatelSirveeilRL,PatersonVM,ImmmunomulutionfollowingburninJuryJ,SurgclinNorAm,198767:69-72。5、EdwardRS,Toliverk,etal,MechanismsoftheinflammatoryresponseJ.BestPractResClinAuaesthesiol,2004,18(3):385-405。表1不同燒傷組與正常組之間細(xì)胞免疫功能結(jié)果比較組別項(xiàng)目正常對(duì)照組輕度燒傷組重度燒傷組CD370.38.967.610.048.211.6（p0.01）CD440.89.438.77.225.912.8（p0.01）CD826.85.526.46.937.615.9（p0.05）NK16.94.815.95.113.69.5（p0.05）CD4/CD81.50.51.40.50.90.5（p0.01）注：P值均為上標(biāo)提示表2不同燒傷組與正常組之間炎癥指標(biāo)結(jié)果比較組別項(xiàng)目正常對(duì)照組輕度燒傷組重度燒傷組CRP0.450.382.451.38（p0.05）13.64.8（p0.01）AAG103.948.6113.746.4