植物除脂脫色處理.doc

植物除脂脫色處理基本原則：1 植物和蔬菜種類繁多，色素含量、含水量、含糖量和脂肪含量均不盡相同，前處理方法也有差別。2 含水量75%，脂肪含量2%；含糖量5%，用乙腈提取。比如黃瓜。3 含水量75%，脂肪含量15%，用乙腈+水加熱共同提取。5 去色素，florisil+silica gel 共同凈化，根據(jù)植物所含色素不同，使用florisil+silica gel 不同配比。準備儀器（以三個樣為例）：耗材類：標簽紙（7套，以后改進方法時可以考慮減少一套）、脫脂棉、濾膜（雙層，6片）。儀器類：剪刀、榨汁機（雙刀片比較快）、藥匙、250ml抽濾瓶（小的那種，3個）、布氏漏斗（大小均可，3個）、150ml（或250ml）具塞錐形瓶（可以考慮換為平底瓶）（3個）、500ml分液漏斗（6個）、茄形瓶（6個，可以考慮其中三個換為平底瓶作為第一次裝樣瓶）、試劑瓶（1個）、玻璃棒（2根，一根攪拌硫酸鈉溶液，一根戳棉花）、大瓶子（？）、柱子（3根）、小燒杯（裝土），量筒（100ml/12個，500ml/1個）、小瓶子（3個，茶色為佳）。試劑類：乙腈、正己烷、二氯甲烷、florisil土、silica gel、無水硫酸鈉、超純水。前期處理：1 燒florisil土650 10h，再在140活化16h+。用的時候需要去活。2 燒硅膠450 4h，再在130活化16h+。3 燒Na2SO4 450 4h。4 燒濾紙、小瓶子,4504h。5 蒸溶劑正己烷、二氯甲烷?；静僮鞑襟E（含注意事項和少量原理）：1 首先將植物、蔬菜切碎，再用榨汁機打碎。使用二葉刀片比較快，裝滿了大概可以弄56個樣。打碎以后混勻，否則色素不均勻。植物、蔬菜用水洗，不削皮。攪拌器也用水洗。、2 稱取40g蔬菜漿于150ml（大一點的也可以）具塞錐形瓶（考慮換為平底瓶），用藥匙直接裝入即可。加入80ml乙腈（如果需要，加水？加多少？），加入乙腈的時候?qū)⑵款i上的蔬菜漿沖下去。立即加立即沖比較容易，否則易附著在瓶口，則用塞子弄下。最大速度振搖10分鐘。乙腈是用來脫脂的。這時所測成分溶于乙腈中。脂肪則在另外一相。3 250ml抽濾瓶抽濾最好用乙腈洗布氏漏斗和濾膜。因為其他儀器可以燒（燒了嗎？），布氏漏斗不能燒。（這里的燒貌似指的是在烘箱里烘干） 如果需要節(jié)省，用正己烷洗也可以。每抽一個樣，換一套布氏漏斗和濾紙（濾紙要雙層）。注意先關泵再拔管，否則容易由側(cè)管沖出來。（考慮安一個安全瓶之類的）考慮用微波4 轉(zhuǎn)移到500ml分液漏斗（裝好以后用正己烷檢漏），先加240ml2%的硫酸鈉（先加水再加硫酸鈉），振搖2分鐘，再加40ml正己烷（分兩次加，涮洗瓶子，保證全量轉(zhuǎn)移），振搖5分鐘。（時間還可以略微調(diào)整）Na2SO4水溶液加入后，乙腈和水無限混溶，所以所測成分在這一相中溶解度減小進入正己烷相中（本來不加水的話，正己烷相溶解度還不如乙腈相，加水以后就反過來了）。硫酸鈉有防止乳化的作用。分液漏斗塞子擺放位置要注意，不要弄混。5 靜沉（注意等液面清晰后才開始下一步），分液（先快后慢，慢的時候沒有成流），轉(zhuǎn)移上清液到100ml茄形瓶（保證進入100ml茄形瓶的是干凈的；茄形瓶可以考慮換為平底瓶，李莉師姐用得就是平底瓶），再萃取一遍。（用40ml正己烷再潤一遍瓶子，然后倒入分液漏斗。振搖5min，然后再靜沉分液。將上清液轉(zhuǎn)移到原瓶子。）6 旋蒸到1ml。（在38下旋蒸）因為是正己烷所以溫度可以比較高。7 凈化12g 5%去活florisil（加高純水在小燒杯里去活，加水以后立即用藥匙攪拌）和10g硅膠，再加1cm的無水硫酸鈉，干法裝柱（比較方便，但是容易出氣泡，濕法前期慢，但是不容易出氣泡，走柱子也比較快）。（注意先加硅膠再加土，因為florisil土是去色素的，在上層就將其除去，硅膠層除去其他雜質(zhì)。）具體操作按照已經(jīng)掌握的就好了。8 淋洗，20ml正己烷，棄掉，再用80ml3：7正己烷：二氯甲烷。最后旋蒸（35）裝瓶即可準備上樣測定。附錄：一 標簽一覽： 錐形瓶 抽濾瓶 分液漏斗（上/下）（可以考慮只用一個，這樣需要多加一個平底瓶，貼近了李莉師姐的做法） 茄形瓶（1（考慮換）/2/考慮加第三個 注意貼標簽的位置，參照李莉師姐）小瓶子 柱子和茄