3P5制劑的質量控制

1、目錄3.2. .P.5制劑的質量控制 .33.2.P.5.1質量標準.33.2.P.5.2分析方法.43.2.P.5.2.1 性狀 .43.2.P.5.2.2 鑒另U .43.2.P.5.2.3 檢查 .43.2.P.5.2.4 含量測定 .103.2.P.5.3分析方法的驗證.113.2.P.5.3.1分析方法學驗證用樣品 .113.2.P.5.3.2有關物質方法學驗證 .113.2.P.5.3.3吡啶-3-磺酸方法學驗證 .213.2.P.5.3.4含量測定方法學驗證 .283.2.P.5.3.5溶出度測定方法學驗證 .333.2.P.5.3.6微生物限度檢查方法學驗證 .463.2.P.

2、5.4批檢驗報告.463.2.P.5.5 雜質.463.2.P.5.5.1雜質情況分析 .463.2.P.5.5.2雜質制定依據 .473.2 .P .5.6質量標準制定依據 .483.2.P.5.6.1 質量標準 .483.2.P.5.6.2質量標準制定依據及產品檢測結果 .523.2.P.5制劑的質量控制3.2.P.5.1質量標準檢驗項目方法放行標準限度貨架期標準限度性狀感觀本品為溥膜衣片，除去包衣 后顯白色或類白色本品為溥膜衣片，除去包衣 后顯白色或類白色鑒別HPLC法（中國藥典 2010 年版二部附錄V D）供試品溶液中沃諾拉贊峰 保留時間應與對照品溶液 中沃諾拉贊峰保留時間一 致供試

3、品溶液中沃諾拉贊峰 保留時間應與對照品溶液 中沃諾拉贊峰保留時間一 致有關物質HPLC法（中國藥典 2010 年版二部附錄V D）雜質I :不得過0.4%、 雜質n :不得過0.4%、 雜質川：不得過0.4%、 雜質IV :不得過0.4%、 雜質V :不得過0.4%、 雜質W :不得過0.4%、 其他單雜：不得過 0.4%、 其他總雜：不得過1.5%雜質I :不得過0.5%、 雜質n :不得過0.5%、 雜質川：不得過0.5%、 雜質V :不得過0.5%、 雜質V :不得過0.5%、 雜質W :不得過0.5%、 其他單雜：不得過 0.5%、 其他總雜：不得過 2.0%吡啶-3-磺酸HPLC法（

4、中國藥典 2010 年版二部附錄V D）不得過0.4%不得過0.5%含量均勻度含量均勻度檢查法（中國藥 典2010年版二部附錄X E）應符合規(guī)定應符合規(guī)定溶出度溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄X C第 二法）為0%初5%微生物限度微生物限度檢查法（中國藥 典2010年版二部附錄幻 J）細菌數(shù)不得過1000cfu/g ; 霉菌和酵母菌數(shù)不得過 100cfu/g ;大腸埃希菌不得 檢出/g細菌數(shù)不得過 1000cfu/g ; 霉菌和酵母菌數(shù)不得過 100cfu/g ;大腸埃希菌不得 檢出/g含量HPLC法（中國藥典 2010 年版二部附錄V D）含(C17H16FN3SO2)應為標示量的

5、 93.0%107.0%含(C17H16FN3SO2)應為標示量的 90.0%110.0%3.2.P.5.2分析方法3.2.P.5.2.1 性狀檢查方法：感觀具體試驗操作：取本品，觀察其外觀性狀。限度：本品應為薄膜衣片，除去包衣后顯白色或類白色。3.2.P.5.2.2 鑒別檢查方法：高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V D）儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250m/ 4.6mm）、電子 分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計。試藥與試劑：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。色譜條件：流動相：0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液（三乙胺調 pH值至7.2）-甲醇（52:4

6、8）流速：1.0ml/min溶劑：流動相檢測器：紫外檢測器波長：230nm色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250mrX 4.6mm）具體試驗操作：在含量測定項下記錄的色譜圖中，比較供試品溶液中沃諾拉贊峰與 對照品溶液中沃諾拉贊峰的保留時間。限度：供試品溶液中沃諾拉贊峰與對照品溶液中沃諾拉贊峰保留時間應一致。3.2.P.5.2.3 檢查3.2.P.5.2.3.1 有關物質檢查方法：高效液相色譜法（中國藥典 2010年版二部附錄V D）儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250m/ 4.6mm）、電子 分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計。試液與試藥：磷酸二氫鉀、三乙胺、

7、甲醇、水。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250m/ 4.6mm）;紫外檢測器（檢測波長為230nm）;流動相：0.05mol/L的磷酸二氫鉀緩沖液（用三乙胺調節(jié) pH值至7.2 ）-甲醇（52： 48）為流動相A，甲醇為流動相B，按下表梯度進行洗脫；已知雜質%100 %溶劑：流動相A ；流速：1.0ml/min。梯度如下表：時間（分鐘）流動相A （ %）流動相B （ %）01000231000452080501000601000具體試驗操作：取本品細粉適量（約相當于沃諾拉贊25mg）,精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A適量，振搖，使充分溶解，加流動相 A稀釋至刻度，搖勻，濾過， 取

8、續(xù)濾液作為供試品溶液；精密量取適量，加流動相A定量稀釋制成每1ml中約含沃諾 拉贊2.5 的溶液，作為對照溶液。分別取雜質I、U、M、W、V、切工作對照品各 適量，精密稱定，加流動相 A溶解并稀釋制成每1ml中含各雜質均約為2.5 g的溶液， 作為雜質對照品溶液。取富馬酸沃諾拉贊工作對照品及雜質工作對照品各適量，加流動 相A溶解并稀釋制成每1ml中約含沃諾拉贊0.5mg及各雜質均為2.5測的混合溶液，作 為系統(tǒng)適用性溶液。照高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V D）試驗，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以 0.05mol/L的磷酸二氫鉀緩沖液（用三乙胺調節(jié) pH值 至7.2）-甲醇（52

9、： 48）為流動相A，甲醇為流動相B,按上表梯度進行洗脫，檢測波 長為230nm。取系統(tǒng)適用性溶液201注入液相色譜儀，記錄色譜圖，雜質川、I、沃 諾拉贊、U、W、V、W依次出峰，理論板數(shù)按沃諾拉贊峰計算應不低于5000,且沃諾拉贊峰與相鄰雜質峰的分離度應符合要求。精密量取供試品溶液、對照溶液與雜質對照 品溶液各20卩，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖計算公式：已知雜質I、U、M、W、V、WAx Wx Px V平均片重As W Vx 標示量（Ax為供試品溶液中已知雜質的峰面積， AS為對照品溶液中已知雜質的峰面積，Wx為已知雜質工作對照品的稱樣量，Px為已知雜質工作對照品含量，Vx為已知雜質對照

10、品溶液的稀釋體積，V為供試品溶液的稀釋體積， W為供試品的稱樣量）其他單雜% 厶 0.5%At其他總雜%A總A主A；0.5%（Ai為供試品溶液中其他單個未知雜質的峰面積， At為對照溶液主峰面積）（A總為供試品溶液中所有峰的峰面積和， A主為供試品溶液中沃諾拉贊的峰面積,AX為供試品溶液中已知雜質的峰面積之和， At為對照溶液中沃諾拉贊的峰面積）限度：供試品溶液色譜圖中如顯雜質峰（溶劑峰及富馬酸峰除外），雜質I、u、按外標法以峰面積計算，不得大于標示量的0.5%;其他單個未知雜質峰面積不得大于對照溶液的主峰面積（0.5%）;其他雜質峰面積的和不得大于對照溶液 的主峰面積的4倍（2.0%）。3.

11、2.P.5.2.3.2 吡啶-3-磺酸檢查方法：高效液相色譜法（中國藥典 2010年版二部附錄V D）儀器與用具：高效液相色譜儀、十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250mr 4.6mm）、電子 分析天平、容量瓶、移液管、燒杯，PH計。試液與試藥：磷酸二氫鉀、磷酸、甲醇、水。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250mrH 4.6mm）;紫外檢測器（檢測波長為261 nm）;流動相：0.01mol/L的磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調節(jié)pH值至3.0）為流動 相A，甲醇為流動相B，按下表梯度進行洗脫；溶劑：流動相A;流速：1.0ml/min。梯度如下表:時間（分鐘）流動相A （ %）流動相B （ %）01

12、000710007.11090910909.11000201000具體試驗操作：取本品細粉適量（約相當于沃諾拉贊25mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加流動相A適量，振搖，使充分溶解，加流動相 A稀釋至刻度，搖勻，濾過， 吡啶-3-磺酸%100 %取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取雜質工作對照品適量，精密稱定，加流動相A溶解并 稀釋制成每1ml中約含吡啶-3-磺酸2.5 的溶液，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V D）試驗，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以0.05mol/L 的磷酸二氫鉀溶液（用磷酸調節(jié) pH值至3.0）為流動相A，甲醇為流動相B,按上表梯 度進行洗脫，

13、檢測波長為261 nm。取對照品溶液、供試品溶液各 20注入液相色譜儀， 記錄色譜圖，計算公式:Ax Wx Px V平均片重As W V x 標示量（Ax為供試品溶液中吡啶-3-磺酸的峰面積，AS為對照品溶液中吡啶-3-磺酸的峰面積,Wx為雜質工作對照品的稱樣量，Px為雜質工作對照品含量，Vx為吡啶-3-磺酸對照 品溶液的稀釋體積，V為供試品溶液的稀釋體積， W為供試品的稱樣量）限度：供試品溶液色譜圖中如顯與對照品溶液相對應的雜質峰，按外標法以峰面積 計算不得大于標示量的0.5%。3.2.P.5.2.3.3 溶出度檢查方法：溶出度測定法（中國藥典 2010年版二部附錄X C第二法）高效液相色譜

14、法（中國藥典2010年版二部附錄V D）儀器與用具：溶出儀、溫度計、高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5 m 250mrH 4.6mm）、容量瓶、移液管、燒杯， PH計。試液與試藥：鹽酸、磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5 m 250mrH4.6mm）;紫外檢測器（檢測波長為230nm）;流動相：0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液（三乙胺調pH值至7.2）-甲醇（52:48）;溶劑：pH1.0鹽酸溶液;流速：1.0ml/min。具體試驗操作：取本品，照溶出度測定法（中國藥典 2010年版二部附錄X C第二 法），以pH1.0鹽酸溶液900ml為溶出介質

15、，轉速為每分鐘50轉，依法操作，經30分 鐘時，取溶液適量濾過，精密量取續(xù)濾液適量，用溶出介質定量稀釋成每 1ml中約含沃諾拉贊11的溶液，作為供試品溶液；另取富馬酸沃諾拉贊工作對照品適量，用溶出 介質溶解并定量稀釋制成每1ml中約含沃諾拉贊11舊的溶液，作為對照品溶液，精密 量取供試品溶液與對照品溶液各 20卩，照含量測定項下的色譜條件測定，計算每片的溶出量。A供M對T對0.7485 V供計算公式：溶出量% 對對供100%A寸V對X（A供為供試品溶液的主峰面積；A對為對照品溶液主峰面積；M對為對照品的稱樣 量，mg； T對為對照品的含量；V對為對照品溶液的稀釋體積；V供為供試品溶液的稀釋 體

16、積；X為標示量，10mg或20mg）限度：不得低于標示量的85%。3.2.P.5.2.3.4含量均勻度檢查方法：含量均勻度檢查法（中國藥典 2010年版二部附錄X E）高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V D）儀器與用具：高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m250mm 4.6mm）、容量瓶、移液管、燒杯， PH計。試液與試藥：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。試驗條件：十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250m 4.6mm）；紫外檢測器（檢測波長為230nm）;流動相：0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液（三乙胺調pH值至7.2）-甲醇（52:48）；溶劑：流動相；流速：1.0

17、ml/min。具體試驗操作:供試品溶液：取本品1片，置100ml量瓶（10mg規(guī)格）或200ml量瓶（20mg規(guī)格）中, 加流動相適量，振搖，使充分溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾 液5ml，置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。對照品溶液：取富馬酸沃諾拉贊工作對照品適量（約相當于沃諾拉贊 10mg），精密 稱定，置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 5ml，置50ml量瓶 中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即得。精密量取供試品溶液和對照品溶液各 20卩，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按10片中沃諾拉贊的含量W對計算公式：含量（%）=P寸 0

18、.7485 A樣A對V對標示量100%外標法以峰面積分別計算每片中沃諾拉贊的含量。依法測定（W對分別為對照品的稱樣量，mg； P對為對照品的含量；A樣、A對分別為供試品、 對照品溶液中沃諾拉贊的峰面積；V樣、V對分別為供試品溶液、對照品溶液的稀釋體積）分別測定每片以標示量為100的相對含量X，求其均值X和標準差S以及標示量與均 值之差的絕對值A :如A 1.80S 15.0，則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若A S 15.0， 則不符合規(guī)定；若A 1.80S 15.0，且A S 15.0，則應另取20支復試，根據初、復試 結果，計算30支的均值X、標準差S和標示量與均值之差的絕對值 A :如A

19、1.45S 15.0， 則供試品的含量均勻度符合規(guī)定；若 A 1.45S 15.0，則不符合規(guī)定。2其中：S：X ，A 100 Xt n-11限度：應符合規(guī)定。3.2.P.5.2.3.5微生物限度1. 試液及培養(yǎng)基：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基、膽鹽 乳糖培養(yǎng)基、MUG培養(yǎng)基、pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液、0.9%氯化鈉溶液。2. 儀器與用具：智能生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、電動吸引器、薄膜過濾器等。3. 具體試驗操作：用平皿法，依法檢查（中國藥典2010年版二部附錄幻J）o（1）細菌、霉菌及酵母菌：供試品配制：按中國藥典（2010年版二部）微生物限度檢查法（附錄XI J）

20、的規(guī)定， 稱取供試品10g，加pH 7.0的無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，混勻，靜置10min， 取上部澄清液體作為1： 10供試液，備用。直接接種法：取1:10供試品每皿1.0ml，分別加入1ml約含50100cfu/m15株試驗 菌。立即傾注瓊脂培養(yǎng)基1520ml，每株菌平行制備2個平皿，待凝固后置規(guī)定溫度 培養(yǎng)35天觀察結果，測定其菌數(shù)。菌液組測定試驗所加入試驗菌的菌數(shù)。供試品對照組：取1:10供試液1ml，按試驗組供試液制備方法和菌落計數(shù)方法測定其菌數(shù)。（2）控制菌的檢查法大腸埃希菌：試驗組取1： 10供試液10ml，分別加入100ml、200ml的膽鹽乳糖培 養(yǎng)基中，加入10

21、100cfu/ml試驗菌，35-37E培養(yǎng)18-24h;取培養(yǎng)液0.2ml，接種至 5mlMUG培養(yǎng)管內，培養(yǎng)5h與24h時，置紫外燈366nm處觀察，然后沿培養(yǎng)基管壁加 入數(shù)滴靛基質試液。陰性菌對照組：取1: 10供試液10ml，分別加入100ml、200ml的膽鹽乳糖培養(yǎng)基 中，加入10100cfu/ml的金黃色葡萄球菌，同試驗組方法進行試驗。于5、24h在366nm紫外光下觀察，同時用未接種的 MUG培養(yǎng)基作本底對照。在 紫外光下若管內培養(yǎng)物呈現(xiàn)藍白色熒光，為MUG陽性；不呈現(xiàn)熒光，為MUG陰性。觀察后，沿培養(yǎng)管的管壁加人數(shù)滴靛基質試液，液面呈玫瑰紅色，為靛基質陽性；呈 試劑本色，為靛基

22、質陰性。本底對照的 MUG和靛基質試驗應為陰性。如 MUG陽性、 靛基質陽性，判檢出大腸埃希菌；如 MUG陰性、靛基質陰性，判未檢出大腸埃希菌。限度：細菌數(shù)不得過1000cfu/g ;霉菌和酵母菌數(shù)不得過100cfu/g;大腸埃希菌不 得檢出/g3.2.P.5.2.4含量測定檢查方法：高效液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V D）儀器與用具：高效液相色譜儀、電子分析天平、十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m250mm 4.6mm）、容量瓶、移液管、燒杯、 PH計。試藥與試劑：磷酸二氫鉀、三乙胺、甲醇、水。色譜條件：流動相：0.05mol/l磷酸二氫鉀溶液（三乙胺調 pH值至7.2）-甲醇（52:4

23、8）流速：1.0ml/min檢測器：紫外檢測器波長：230nm 溶劑：流動相色譜柱：十八烷基鍵合硅膠柱（5卩m 250m50），且批間一致性良好。3.2.P.5.3.5.2溶出方法的選擇參照片劑溶出度測定的一般方法，本品選用漿法操作（中國藥典2010年版附錄X C 第二法）。以pHI.O鹽酸溶液900ml為溶劑，轉速為每分鐘50轉，經30分鐘時，照高 效液相色譜法測定。3.2.P.5.3.5.3溶出度測定方法學驗證內容1、 專屬性按處方比例配制空白輔料，制成片劑。取本品與空白輔料片劑，照溶出度測定法（中 國藥典2010年版二部附錄X C第二法），以pHI.O鹽酸溶液900ml為溶出介質，溫度

24、為37C ）.5C,轉速為每分鐘50轉，溶出介質均需經脫氣處理，經30min時，取出10ml， 濾過。精密量取供試品溶液、溶出介質、輔料溶液各20卩，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。（圖3.2.P.5.3.5-13制劑的質量控制二第 197199頁）結論：溶出介質、空白輔料均不干擾本品溶出度的測定。2、 濾膜吸附試驗取專屬性項下本品經30min時的溶出液，分別經離心取上清液、用濾膜濾過棄去前35滴，分別精密量取濾過20卩）注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果見表3.2.P.5.3.5-1。（圖3.2.P.5.3.5-47制劑的質量控制二第 200203頁）表3.2.P.5.3.5-1富馬酸沃諾拉贊片溶

25、出度檢查濾膜吸附試驗結果序號濾刖1濾刖2濾后1濾后2平均RSD%峰面積923868916187921843918160920014.50.383、線性關系試驗稱取富馬酸沃諾拉贊工作對照品約（含量為99.43%） 15mg,置100ml量瓶中，加溶出介質溶解并稀釋至刻度，搖勻，依次稀釋制成不同濃度的溶液（0.5-100、1-100、1-50、1-20、2-25、1-10、3-25），作為線性溶液，精密量取上述各線性溶液各 20,1注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以濃度 （C）為橫坐標，以峰面積（A）為縱坐標, 進行線性回歸，計算線性相關系數(shù)。結果見表3.2.P.5.3.5-2 （圖3.2.P.5.3

26、.5-814制劑的質量控制二第204210頁）表3.2.P.5.3.5-2富馬酸沃諾拉贊片溶出度檢查線性關系試驗結果編號r等級濃度C （卩g/m）峰面積（A）線性方程相關系數(shù)15%0.5540791210%1.1075019320%2.19160936450%5.48445121580%8.767309986100%10.969116747120%13.151118049A=85648C-187020.9996藩出度線性結論：濃度在0.55卩g/m13.15卩g/ml內線性關系良好。4、回收率試驗稱取富馬酸沃諾拉贊工作對照品（含量為99.43%） 9份（稱樣量見表3.2.P.5.3.3-4 ,

27、 按處方比例分別加入輔料，分別置100ml容量瓶中，加溶出介質充分溶解并稀釋至刻度， 搖勻，濾過，取續(xù)濾液5ml，置50ml容量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為 回收率供試品溶液；另取富馬酸沃諾拉贊工作對照品約15mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取上述溶液各20卩，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計算回收率，結果見表 3.2.P.5.3.5-3 （圖3.2.P.5.3.5-1536制劑的質量控制 二第 211232 頁）計算公式：回收率（%） =_噸100%M稱P對式中M測為沃

28、諾拉贊的測得量，mg； M稱為加入對照品中沃諾拉贊的量，mg；P對為對照品富馬酸沃諾拉贊的含量。表3.2.P.5.3.5-3富馬酸沃諾拉贊片溶出度檢查回收率試驗結果編號對照品的 加入量（mg）對照品中諾拉贊量（mg）沃諾拉贊 測得量（mg）回收率%平均 回收率%RSD%17.255.405.3298.5227.195.355.2898.6937.375.495.4499.09412.479.289.32100.43512.339.189.0298.26612.799.529.4399.05714.4310.7410.5698.32814.6410.9010.7998.99914.6210.88

29、10.6798.0798.800.72結論：回收率為98.07%100.43%，此法準確度良好。5、精密度試驗取本品（規(guī)格：10mg） 1片，照溶出度測定法（中國藥典 2010年版二部附錄X C 第二法）測定，以pH1.0鹽酸溶液900ml為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作, 經30分鐘時，取溶液6份，每份約10ml，濾過，作為供試品溶液，另取富馬酸沃諾拉 贊工作對照品約15mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻， 精密量取5ml，置50ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精 密量取上述溶液各20卩，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計算回收率，結果

30、見表3.2.P.5.3.5-4 （圖 3.2.P.5.3.5-3752 制劑的質量控制二第 233248頁）表3.2.P.5.3.5-4富馬酸沃諾拉贊片溶出度檢查精密度試驗結果序號123456平均RSD%峰面積99.1199.1698.8698.4599.0998.7298.900.28結論：此法測定本品溶出度精密度良好。6、溶液穩(wěn)定性試驗取本品（規(guī)格：10mg） 1片，照溶出度測定法（中國藥典 2010年版二部附錄X C 第二法）測定，以pH1.0鹽酸溶液900ml為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作, 經30分鐘時，取溶液適量，濾過，作為供試品溶液，將供試品溶液室溫放置10小時，分別于

31、第0、2、4、6、& 10小時，精密量取上述溶液各20卩，注入液相色譜儀，記錄 色譜圖。結果見表 3.2.P.5.3.5-5 （圖3.2.P.5.3.5-5358制劑的質量控制二第 249254 頁）表3.2.P.5.3.5-5富馬酸沃諾拉贊片溶出度檢查穩(wěn)定性試驗結果時間（h）0246810平均RSD%峰面積9420229382759521099545169529109565629493990.78結論：供試品溶液穩(wěn)定性良好。7、溶出方法靈敏度試驗為考察溶出方法的靈敏度，取不同處方工藝（與最終確定處方工藝相似）生產的樣 品進行溶出試驗，并繪制溶出曲線，比較差異，結果見表3.2.P.5.3.5-

32、6 （圖3.2.P.5.3.5-59126制劑的質量控制二第 255288頁、三第942頁）表3.2.P.5.3.5-6卡格列凈片溶出靈敏度試驗累積溶出度%批號編號2min3min5min10mi n30mi n135.6365.2690.3693.60100.14236.9961.15P 92.1296.2097.70342.0273.2188.3692.6198.14442.6569.7086.4992.6197.87532.0260.9392.2294.6197.06637.7861.6688.2495.0797.97XA008RSD%10.577.852.591.521.06122.6

33、349.3284.2691.98102.51225.5844.0581.2987.2499.48323.0847.2683.3188.0799.10418.4048.0172.2885.6898.82521.5848.3674.4094.9497.28617.2946.5173.9591.3192.32XA009 （確定處方工藝）RSD%14.423.896.763.853.43不同工藝的RSD%28.5725.8426.9927.7928.12結論：用該法測定不同處方工藝生產的樣品的不同時間點累積溶出度RSD%大，故該法測定本品溶出度靈敏度良好。苗一-KAJOOS-KAJOOSIII7、耐用

34、性 為考察沃諾拉贊片溶出度的溶出方法及測定方法的耐用性情況，通過 微調溶出過程的因素及測定過程的因素進行試驗，計算微調情況下每片的溶出度。結果 見表 3.2.P.5.3.4-7 8。（圖 3.2.P.5.3.5-127222 制劑的質量控制三第 43138頁）表3.2.P.5.3.5-7沃諾拉贊片溶出度的溶出方法耐用性試驗結果溶出度%耐用性 研究 項目試驗方 法及 條件確認的耐 用性范圍123456平均值 （%）RSD （%）原條件C18島津99.2995.3596.2594.2297.2596.3996.461.794897.8696.64100.1897.7695.3796.7597.43

35、1.67轉速 （轉 /min）505295.9795.7498.4697.4697.6397.8197.181.113697.4698.3197.36100.8299.9896.9198.471.61溶出溫度373898.8799.0297.6799.1597.9694.8397.921.66平均值（%）97.49/RSD（ %）0.78/表3.2.P.5.3.5-8沃諾拉贊片溶出度的測定方法耐用性試驗結果溶出度%耐用性 研究 項目試驗方 法及 條件確認的耐 用性范圍123456平均值（%）RSD （%）測定Q島津99.2995.3596.2594.2297.2596.3996.461.79色

36、譜柱C18月旭97.9195.4596.9996.2597.7498.6497.161.21平均值 （%）96.81/RSD（%）0.51/時間C min）溶擊靈度8、溶出均一性試驗取本品，照溶出度測定法（中國藥典2010年版二部附錄X C第二法）測定，以PH1.0 鹽酸溶液900ml為溶出介質，轉速為每分鐘50轉，依法操作，分別于第2、3、5、10、 30分鐘時，取溶液2ml （標示量：10mg）或取溶液8ml （及時補液，標示量：20mg）， 濾過，取續(xù)濾液適量，加溶出介質稀釋制成每1ml約含沃諾拉贊11的溶液，作為供試品溶液；另取富馬酸沃諾拉贊工作對照品約15mg，精密稱定，置100ml

37、量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。精密量取上述溶液各 20卩，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。計 算每片在不同時間點的累積溶出度， 結果見表3.2.P.5.3.4-9 10。（圖3.2.P.5.3.5-223494 制劑的質量控制三第139274頁、四第9144頁）表3.2.P.5.3.5-9富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）溶出均一性試驗結果累積溶出度%時間123456平均RSD%2min22.8520.7620.5018.8022.5119.4120.817.793min48.1246.3649.2949.7946

38、.3749.5548.253.255min79.3880.7480.1980.43 180.2079.47P 80.070.6710mi n84.1386.3790.0587.6589.3390.1487.952.702015030130mi n99.6199.74100.2198.41 199.9898.7699.450.712min22.7123.6124.4820.7219.9924.8022.728.733min51.3650.4251.9749.6650.7747.8950.352.865min81.7088.3880.3081.5083.2083.8883.163.4410mi n

39、89.1689.0085.2992.14：89.9490.33P 89.312.542015030230mi n98.60100.198.9298.6394.2099.6698.352.162min20.9818.6422.6124.3418.3220.8020.9510.993min50.2250.5451.8952.3250.7352.1251.301.775min80.0279.9878.1079.0178.9581.1179.531.3310mi n92.4687.3188.7290.5786.4790.0789.272.482015030330mi n99.7897.94102.05

40、100.4099.85100.40100.071.332min20.9025.4426.6126.4127.4326.8125.609.343min50.6551.6152.7150.7548.0551.0150.803.045min81.4581.9579.8287.5184.3981.3282.743.3510mi n91.3789.7387.8399.8891.8398.9893.275.34上市制劑30mi n98.8499.77101.76101.18101.00101.19100.621.09a a- -表3.2.P.5.3.5-10富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：20mg）溶出均一性試驗

41、結果累積溶出度%批號時間123456平均RSD%2min22.5718.1518.1625.6524.5120.3821.5714.813min46.3342.0640.4448.1344.3448.1344.917.125min84.6187.3984.5182.9088.9381.1584.923.362015030410mi n93.0991.3993.3898.3194.9595.5094.442.5330mi n100.2697.94*100.8399.0097.91101.04 P 99.501.42 :2min23.4318.4919.3326.7225.2320.2622.24

42、15.173min49.6242.39 43.0940.3444.3042.58P 43.727.24 :201505min81.4683.6880.5478.6183.5977.3680.873.1930510mi n88.6886.61r 90.1194.8190.9591.79P 90.493.09 :30mi n102.2399.2196.9898.3299.4497.0698.871.972min20.2125.7725.4618.1123.8522.28P 22.6113.38 :3min48.0643.6947.1647.9549.5145.5446.994.415min76.5

43、788.6178.3384.1482.6479.29r 81.605.432015030610mi n90.2794.6393.7888.3886.4886.8990.073.8630mi n100.38101.63 97.51100.4497.40100.39 P 99.631.752min24.2524.4831.4125.0625.6228.2626.5110.563min55.9050.2847.8052.5044.6455.7951.158.76上市5min80.0482.9780.3678.8184.6686.0682.153.49制劑10mi n88.1995.5689.3593

44、.8689.6590.6691.213.1530mi n100.2798.2996.5697.1597.8996.6797.811.42結論：各批樣品溶出均一性良好。1ZU潯出KlTf (1O-E)WWT(10-S)WWT(10-S)9、不同溶出介質中溶出曲線考察取本品及上市制劑（10mg），采用不同的溶出介質進行溶出度考察，比較溶出曲線 差異，并計算F2因子，結果見表3.2.P.5.3.4-11 （圖3.2.P.5.3.5-2231310制劑的質量 控制三第139274頁、四第9280頁、五第9280頁、六第9280頁、七第9145頁） 表3.2.P.5.3.5-11富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：

45、10mg）不同溶劑溶出度試驗結果表溶出度%溶出介質取樣點20150301 批20150302 批20150303 批市售2min20.8122.7220.9525.603min48.2550.3551.3050.805min80.0783.1679.5382.7410mi n87.9589.3189.2793.27pHI.O鹽酸溶液30mi n99.4598.35100.07100.622min24.7023.0622.7821.723min54.6054.7452.8346.295min84.1884.3382.1081.1510mi n93.7894.0693.7091.93水30mi n

46、96.2897.9097.2597.772min29.1332.0730.6337.583min56.4459.1459.0865.585min84.5284.0585.4792.6910mi n91.0189.8692.7195.08PH4.5醋酸鹽緩沖液30mi n95.7595.7597.3397.812min23.6022.2723.3120.453min57.1756.9857.4852.475min86.3386.0185.5885.80pH6.8磷酸鹽緩沖液10mi n97.7096.1996.8595.8330mi n98.4198.1898.2196.09PHLPHL 0 0

47、鹽舉溶液o o o o o o o o o o O O2 2 O O 8 8 6 6 4 4 2 21 1-*-20150301-*-20150301-加 150002150002 2016000320160003 市售品1D 152025HflSHflS (*in)(*in)3035PH4.PH4. 5E5E酸鞍沖枝*-20150301*-20150301-20150302-201503022015030320150303市昔晶101520 2S 3035時間Cndu)從四種溶出介質中的累積溶出曲線看，并根據四個點（2、3、5、10min）的累積溶出數(shù)據計算f2相似因子均大于50，因此我公司

48、研制的富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）與上市制劑（規(guī)格：10mg）的體外溶出行為基本相似，結果見表 3.2.P.5.3.4-12表3.2.P.5.3.5-12富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）四種不同介質中的相似因子與上市品f2相似因子批號pH1.0鹽酸溶液水pH4.5醋酸鹽緩沖液pH6.8磷酸鹽緩沖液201503016966557520150302796659792015030372726075取本品及上市制劑（20mg），采用不同的溶出介質進行溶出度考察，比較溶出曲線差異，并計算F2因子，結果見表3.2.P.5.3.4-13表3.2.P.5.3.5-13富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：20mg）

49、不同溶劑溶出度試驗結果表溶出介質取樣點溶出度%PH6- X囉鹽緩沖液o o o o Q Q Q Q o o O O0 0 8 8 6 6 4-2-4-2-亠2D2D 150301150301 - -20150302-20150302 2015030320150303 簾售島20150304 批20150305 批20150306 批市售2min21.5722.2422.6126.513min44.9143.7246.9951.155min84.9280.8781.6082.1510mi n94.4490.4990.0791.21pH1.0鹽酸溶液30mi n99.5098.8799.6397.

50、812min23.9423.3824.2822.053min53.0253.7553.8848.68水5min84.2685.7486.1281.232 20 01 10 00 01 18 80 06 60 04 40 02 20 010mi n93.5293.7392.1190.9430mi n98.5598.9397.9798.022min31.9631.6430.4334.513min60.3860.8657.9255.895min86.5685.2185.4290.9310mi n92.0094.7791.5693.98PH4.5醋酸鹽緩沖液30mi n97.8297.9096.859

51、7.892min22.7022.2823.5421.013min55.3656.4157.2650.035min86.3486.9388.2782.1010mi n96.7095.0496.0394.80pH6.8磷酸鹽緩沖液30mi n98.7298.9398.6198.705101520253035時間（min）T-2Q15Q3WT-2Q15Q3W - -B-201503C5B-201503C5 2015030620150306 市害品30351201200 00 01 18 80 06 60 04 40 02 20 0T-2Q15Q3WT-2Q15Q3W - -B-201503C5B-2

52、01503C5 2015030620150306 市害品毀鹽煖沖液時間（皿口20150301201503050）,因本品為胃溶型片劑，故最終選 擇以pH1.0鹽酸溶液為溶出介質，溶出限度定為30分鐘的溶出量不得低于標示量的85%,定入質量標準。中試三批樣品及上市制劑檢測結果見表 3.2.P.5.6-910 （圖3.2.P.5.6-29108制劑的質量控制七第 174253頁）表3.2.P.5.6-9富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）溶出度檢查結果批號201503012015030220150303H002溶出度（%）99.4598.35100.07100.62表3.2.P.5.6-10富馬酸沃

53、諾拉贊片（規(guī)格： 20mg）溶出度檢查結果批號201503042015030520150306H009溶出度（%）99.5098.8799.6397.813.4含量均勻度 根據藥典附錄要求，檢查本品的含量均勻度。將其定入質量標準 中試三批樣品檢測結果見表3.2.P.5.6-1112 （圖3.2.P.5.6-109252制劑的質量控制七 第254301頁、八第6101頁）3.5微生物限度此項為片劑常規(guī)檢查項目，照中國藥典2010年版二部附錄XI J微生物限度檢查法檢查，應符合規(guī)定。試制三批樣品檢查結果見表3.2.P.5.6-1112表3.2.P.5.6-11富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）含量

54、均勻度、微生物限度檢查結果批號201503012014050220140503含量均勻度符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定微生物限度符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定表3.2.P.5.6-12富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：20mg）含量均勻度、微生物限度檢查結果批號201503042014050520140506含量均勻度符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定微生物限度符合規(guī)定符合規(guī)定符合規(guī)定4、含量測定 此項為本制劑的核心檢查項目，參考原料藥含量測定方法采用高效 液相色譜法（中國藥典2010年版二部附錄V D）測定本品含量，并進行詳細的方法學 研究，根據影響因素試驗結果、中試三批樣品穩(wěn)定性試驗結果及上市制劑的檢測結果， 將含量限度

55、定為標示量的90.0%110.0%中試三批樣品及上市制劑檢測結果見表3.2.P.5.6-1314 （圖 3.2.P.5.6-253292 制劑的質量控制八第 102141 頁）表3.2.P.5.6-13富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：10mg）含量測定結果批號201503012015030220150303H002含量%99.8999.63100.82101.10表3.2.P.5.6-14富馬酸沃諾拉贊片（規(guī)格：20mg）含量測定結果批號201503042015030520150306H009含量%99.7299.5899.9299.47參考文獻：1.中國藥典2010版二部附錄附圖目錄：3.2.P.5

56、.3.2-13.2.P.5.3.2-23.2.P.5.3.2-33.2.P.5.3.2-43.2.P.5.3.2-53.2.P.5.3.2-63.2.P.5.3.2-73.2.P.5.3.2-83.2.P.5.3.2-93.2.P.5.3.2-103.2.P.5.3.2-113.2.P.5.3.2-123.2.P.5.3.2-133.2.P.5.3.2-143.2.P.5.3.2-153.2.P.5.3.2-163.2.P.5.3.2-173.2.P.5.3.2-183.2.P.5.3.2-193.2.P.5.3.2-203.2.P.5.3.2-213.2.P.5.3.2-223.2.P.5.

57、3.2-233.2.P.5.3.2-243.2.P.5.3.2-253.2.P.5.3.2-26富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（溶劑）65富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（空白輔料）66富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（未破壞）67富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（高溫破壞）68富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（高溫空白）69富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（氧化破壞）70富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（氧化空白）71富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（酸破壞）72富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗

58、HPLC圖譜（酸空白）73富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（堿破壞）74富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（堿空白）75富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（光照破壞）76富馬酸沃諾拉贊片有關物質破壞試驗HPLC圖譜（光照空白）77富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（雜質對照 1）78富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（供試品1）79富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（0.5%對照1）80富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（雜質對照 2）81富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（供試品2）82富馬酸沃諾拉贊

59、片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（0.5%對照2）83富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（雜質對照 3）84富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（供試品3）85富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（0.5%對照3）86富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（雜質對照 4）87富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（供試品4）88富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（0.5%對照4）89富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（雜質對照 5）903.2.P.5.3.2-27富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（供試品5）9

60、13.2.P.5.3.2-28富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（0.5%對照5）923.2.P.5.3.2-29富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（雜質對照 6）933.2.P.5.3.2-30富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（供試品6）943.2.P.5.3.2-31富馬酸沃諾拉贊片有關物質重復性試驗HPLC圖譜（0.5%對照6）953.2.P.5.3.2-32富馬酸沃諾拉贊片有關物質中間精密度試驗HPLC圖譜（雜質對照 1）963.2.P.5.3.2-33富馬酸沃諾拉贊片有關物質中間精密度試驗HPLC圖譜（供試品1）973.2.P.5.3.2-34富