實(shí)驗(yàn)六 環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響(溫度、紫外線、化學(xué)藥劑、生物因素 )

1、實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六 環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響環(huán)境因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響一一 溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響二二 紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響三三 化學(xué)藥劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響化學(xué)藥劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響四四 生物因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響生物因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響五五 實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告一一 溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響1 1 了解溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響與作用機(jī)制。了解溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響與作用機(jī)制。2 2 學(xué)習(xí)和掌握最適生長(zhǎng)溫度的測(cè)定。學(xué)習(xí)和掌握最適生長(zhǎng)溫度的測(cè)定。 （一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康模ㄒ唬?shí)驗(yàn)?zāi)康模ǘ┗驹恚ǘ┗驹?微生物的生命活動(dòng)，必須在微生物

2、的生命活動(dòng)，必須在一定溫度一定溫度范圍內(nèi)進(jìn)行，范圍內(nèi)進(jìn)行，溫度過(guò)高或過(guò)低，均會(huì)影響其代謝方式、生長(zhǎng)速度甚溫度過(guò)高或過(guò)低，均會(huì)影響其代謝方式、生長(zhǎng)速度甚至可能致死微生物。根據(jù)微生物至可能致死微生物。根據(jù)微生物生長(zhǎng)最快的溫度生長(zhǎng)最快的溫度可以可以測(cè)定微生物的測(cè)定微生物的最適生長(zhǎng)溫度最適生長(zhǎng)溫度。不同微生物最適生長(zhǎng)溫。不同微生物最適生長(zhǎng)溫度不同。度不同。 測(cè)定最適生長(zhǎng)溫度。測(cè)定最適生長(zhǎng)溫度。（三）實(shí)驗(yàn)材料（三）實(shí)驗(yàn)材料菌種：菌種：枯草桿菌枯草桿菌培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面牛肉膏蛋白胨瓊脂斜面1 1 接種接種：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面斜面分別接種分別接種枯草枯草 桿菌桿

3、菌四支四支。2 2 培養(yǎng)培養(yǎng)：已經(jīng)接種的斜面分別置于：已經(jīng)接種的斜面分別置于44、2020、3030、 50 50四種溫度條件下培養(yǎng)。四種溫度條件下培養(yǎng)。結(jié)果觀察：結(jié)果觀察：待培養(yǎng)待培養(yǎng)4848小時(shí)后觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況并記錄。小時(shí)后觀察細(xì)菌生長(zhǎng)情況并記錄。 （四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟（四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟二二 紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊螅ㄒ唬?shí)驗(yàn)?zāi)康囊?1 1 了解紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響與作用機(jī)制。了解紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響與作用機(jī)制。 2 2 學(xué)習(xí)檢測(cè)紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)影響的方法。學(xué)習(xí)檢測(cè)紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)影響的方法。 （二）基本原理（二）基本原理 紫外線對(duì)微

4、生物有誘發(fā)突變和致死作用，因紫紫外線對(duì)微生物有誘發(fā)突變和致死作用，因紫外線照射劑量不同而異，低劑量用于微生物誘變育外線照射劑量不同而異，低劑量用于微生物誘變育種，高劑量用于實(shí)驗(yàn)室或工作間消毒殺菌。紫外線種，高劑量用于實(shí)驗(yàn)室或工作間消毒殺菌。紫外線照射劑量與照射光強(qiáng)、距離以及照射時(shí)間相關(guān)。照射劑量與照射光強(qiáng)、距離以及照射時(shí)間相關(guān)。 （三）實(shí)驗(yàn)材料（三）實(shí)驗(yàn)材料菌種：八疊球菌菌種：八疊球菌培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板（四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟（四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟（1 1）制備菌懸液：）制備菌懸液：取無(wú)菌水（取無(wú)菌水（5 5mlml）一瓶，以接種環(huán)取一瓶，以接種環(huán)取八八

5、疊球菌疊球菌菌種菌種2 2環(huán)，混合均勻，制成懸液。環(huán)，混合均勻，制成懸液。（2 2）接種：）接種：以無(wú)菌吸管取菌懸液以無(wú)菌吸管取菌懸液2 2滴加于牛肉膏蛋白胨培滴加于牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上，立即用無(wú)菌刮鏟涂抹均勻，然后用無(wú)菌黑紙養(yǎng)基平板上，立即用無(wú)菌刮鏟涂抹均勻，然后用無(wú)菌黑紙遮蓋部分平板。遮蓋部分平板。（3 3）紫外線處理：）紫外線處理：紫外燈先預(yù)熱紫外燈先預(yù)熱1515minmin，將已經(jīng)接種的平將已經(jīng)接種的平板置于紫外燈下（平皿距紫外燈板置于紫外燈下（平皿距紫外燈1 1米），打開(kāi)皿蓋，紫外米），打開(kāi)皿蓋，紫外線照射線照射2020minmin，取出黑紙，蓋上皿蓋。取出黑紙，蓋上皿蓋。（4

6、4） 培養(yǎng)：培養(yǎng)：將平板置于將平板置于28-3028-30，培養(yǎng)，培養(yǎng)4848小時(shí)。小時(shí)。結(jié)果觀察：結(jié)果觀察：觀察平板上是否有紙形圖案的細(xì)菌生長(zhǎng)圖象。觀察平板上是否有紙形圖案的細(xì)菌生長(zhǎng)圖象。 紫外燈照射紫外燈照射20min后取出后取出黑紙。黑紙。30培養(yǎng)培養(yǎng)24-48小時(shí)小時(shí)黑紙黑紙三三 化學(xué)藥劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響化學(xué)藥劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊螅ㄒ唬?shí)驗(yàn)?zāi)康囊罅私饽承┗瘜W(xué)藥劑對(duì)微生物的抑制作用，學(xué)了解某些化學(xué)藥劑對(duì)微生物的抑制作用，學(xué)習(xí)其實(shí)驗(yàn)方法。習(xí)其實(shí)驗(yàn)方法。 某些化學(xué)藥劑（消毒劑）抑制或殺滅微生某些化學(xué)藥劑（消毒劑）抑制或殺滅微生物，其效應(yīng)強(qiáng)弱與試劑類型、濃度、作用時(shí)物，其

7、效應(yīng)強(qiáng)弱與試劑類型、濃度、作用時(shí)間以及作用對(duì)象有關(guān)間以及作用對(duì)象有關(guān) ，有些藥劑在濃度極低，有些藥劑在濃度極低的情況下仍然有較強(qiáng)的作用。的情況下仍然有較強(qiáng)的作用。（二）（二） 基本原理基本原理（三）實(shí)驗(yàn)材料（三）實(shí)驗(yàn)材料試劑：試劑：HgClHgCl2 2(0.1%) , CuSO(0.1%) , CuSO4 4(0.5%)(0.5%)。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板。 菌種：菌種：八疊球菌八疊球菌。 （四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟（四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟1 1 倒平板：倒平板：將融化的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（將融化的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（5050）傾注入無(wú)）傾注入無(wú)菌平皿，冷凝成平板。

8、菌平皿，冷凝成平板。2 2 制菌懸液：制菌懸液：同紫外線實(shí)驗(yàn)。同紫外線實(shí)驗(yàn)。八疊球菌。八疊球菌。3 3 接種：接種：用無(wú)菌吸管吸取少量菌懸液，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)用無(wú)菌吸管吸取少量菌懸液，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上接種基平板上接種1-21-2滴，用無(wú)菌刮鏟將菌液涂布均勻。滴，用無(wú)菌刮鏟將菌液涂布均勻。 4 4 加濾紙：加濾紙：取圓濾紙片取圓濾紙片3 3張，一張沾無(wú)菌水，其余兩張分別張，一張沾無(wú)菌水，其余兩張分別沾一種藥劑，風(fēng)干后在平板上分區(qū)放置，并在平皿皿底作標(biāo)沾一種藥劑，風(fēng)干后在平板上分區(qū)放置，并在平皿皿底作標(biāo)記記藥劑名、濃度、組號(hào)。藥劑名、濃度、組號(hào)。5 5 培養(yǎng)：培養(yǎng)：將平板倒置于將平板倒

9、置于28-3028-30培養(yǎng)培養(yǎng)2-32-3日。日。結(jié)果觀察：結(jié)果觀察：觀察平板是否有抑菌圈，并通過(guò)抑菌圈直徑大小觀察平板是否有抑菌圈，并通過(guò)抑菌圈直徑大小推斷藥劑的抑菌作用的強(qiáng)弱。推斷藥劑的抑菌作用的強(qiáng)弱。 4生物因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響生物因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響（一）實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊螅ㄒ唬?shí)驗(yàn)?zāi)康囊罅私馇嗝顾氐目咕秶?，學(xué)習(xí)抗菌譜試驗(yàn)基本方法。了解青霉素的抗菌范圍，學(xué)習(xí)抗菌譜試驗(yàn)基本方法。（二）實(shí)驗(yàn)原理（二）實(shí)驗(yàn)原理微生物之間存在拮抗。微生物產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)微生物之間存在拮抗。微生物產(chǎn)生的次生代謝產(chǎn)物如青霉素等抗生素可以選擇性抑制或殺死其他物如青霉素等抗生素可以選擇性抑制或殺死其他微生物。不同

10、微生物的抗菌譜不同。微生物。不同微生物的抗菌譜不同。（三）實(shí)驗(yàn)材料（三）實(shí)驗(yàn)材料試劑：試劑：青霉素溶液（青霉素溶液（8080萬(wàn)單位萬(wàn)單位/ml/ml）。）。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板。 菌種：菌種：大腸桿菌，枯草桿菌。大腸桿菌，枯草桿菌。 （四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟（四）實(shí)驗(yàn)內(nèi)容步驟1 制平板。制平板。2 用鑷子將無(wú)菌濾紙條浸入青霉素溶液中（取出時(shí)瀝用鑷子將無(wú)菌濾紙條浸入青霉素溶液中（取出時(shí)瀝去多余溶液），取出濾紙貼在平板上。去多余溶液），取出濾紙貼在平板上。3 用接種環(huán)從濾紙條邊緣垂直向外劃直線接種用接種環(huán)從濾紙條邊緣垂直向外劃直線接種大腸桿大腸桿菌菌和和枯草桿菌

11、?？莶輻U菌。4 培養(yǎng)觀察結(jié)果：培養(yǎng)觀察結(jié)果：37倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)1天后，記錄細(xì)菌生天后，記錄細(xì)菌生長(zhǎng)情況。長(zhǎng)情況。該試驗(yàn)注意事項(xiàng)見(jiàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書。該試驗(yàn)注意事項(xiàng)見(jiàn)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)書。四四 實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)報(bào)告1 溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響溫度對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響菌名菌名4203050枯草桿菌枯草桿菌注：記錄生長(zhǎng)情況用符號(hào)表示：注：記錄生長(zhǎng)情況用符號(hào)表示： - -：不生長(zhǎng)；：不生長(zhǎng)； + +：生長(zhǎng)差；：生長(zhǎng)差； + +：生長(zhǎng)一般；：生長(zhǎng)一般； + +：生長(zhǎng)良好。：生長(zhǎng)良好。 包括包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、結(jié)果分析實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、結(jié)果分析記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并對(duì)之分析記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并對(duì)之分析2 紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響紫外線對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響說(shuō)明平板上是否有紙形圖案的細(xì)菌生長(zhǎng)圖象。說(shuō)明平板上是否有紙形圖案的細(xì)菌生長(zhǎng)圖象。并繪圖表示。并繪圖表示。 3 化學(xué)藥劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響化學(xué)藥劑對(duì)微生物生長(zhǎng)的影響記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并對(duì)之分析：記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并對(duì)之分析： 菌名菌名HgCl