銀耳異聚多糖-增稠劑

1、添加劑的通用名稱：銀耳異聚多糖別名：銀耳雜多糖、銀耳提取物曾用商品名：wsk、wjf、wdt、trebeaut英文名：tremella fuciformis berk heteropolysaccharide功能分類：增稠劑（兼具乳化、穩(wěn)定功能）用量：可按生產(chǎn)需要適量使用使用范圍：應(yīng)用于各類食品技術(shù)上確有必要和使用效果的資料、文件銀耳異聚多糖是從銀耳子實(shí)體中提取、分離得到的一種真菌多糖類物質(zhì)，其物質(zhì)結(jié)構(gòu)是由不同的單糖糖基連接而形成的一種天然高分子物質(zhì)，經(jīng)試驗(yàn)表明該產(chǎn)品具有顯著的增稠、乳化、穩(wěn)定的作用，可作為一種新型、安全、天然的食品添加劑應(yīng)用于食品加工領(lǐng)域。在食品中添加少量的增稠劑，可以提高食

2、品的粘稠度或形成凝膠，從而改變食品的物理性狀、賦予食品粘稠、適宜的口感，并兼有乳化、穩(wěn)定或使呈懸浮狀態(tài)的作用，對(duì)流態(tài)食品或凍膠食品的色、香、味、結(jié)構(gòu)和食品的相對(duì)穩(wěn)定性起著十分重要的作用。但是，大多數(shù)增稠劑幾乎沒有營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，加入的主要目的就是為了改變產(chǎn)品的物理性狀。銀耳異聚多糖作為一種增稠劑應(yīng)用于食品，不僅可以起到改變產(chǎn)品粘稠程度、穩(wěn)定食品狀態(tài)的作用，而且還具有一定的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。銀耳異聚多糖的原料銀耳既是名貴的營(yíng)養(yǎng)滋補(bǔ)佳品，又是扶正強(qiáng)壯的補(bǔ)藥。歷代皇家貴族都將銀耳看做是“延年益壽之品”、“長(zhǎng)生不老良藥”。 現(xiàn)代研究也證明，銀耳中含有豐富的銀耳多糖（約占銀耳干重的60%70%），銀耳所含有的多糖具有

3、廣泛的生理活性，能提高機(jī)體免疫力，抗腫瘤，可清除自由基，誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗體及干擾素，可治療高血壓、高血脂、糖尿病等多種醫(yī)學(xué)中疑難病癥。因此，銀耳異聚多糖作為一種天然來源的添加劑加入食品，可以起到增稠、乳化、穩(wěn)定食品體系的功效，從而賦予產(chǎn)品良好的感官和口感，并且使產(chǎn)品具有一定的營(yíng)養(yǎng)滋補(bǔ)價(jià)值。關(guān)于該銀耳異聚多糖是否可以作為增稠劑應(yīng)用于食品，本公司對(duì)銀耳異聚多糖的粘度和流變學(xué)等物理性質(zhì)進(jìn)行了研究，驗(yàn)證其作為增稠劑的可行性，具體試驗(yàn)方法見本項(xiàng)資料的附件1的試驗(yàn)報(bào)告。，專利授權(quán)書見附件2 ），該專利中詳細(xì)描述了銀耳異聚多糖在乳制品中的應(yīng)用方法和使用效果：銀耳異聚多糖添加于液體乳制品中可以增加液體乳制品的粘

4、度，粘度的增加在一定程度上可以緩解粒子的重力下沉作用，從而起到穩(wěn)定體系的作用，另外，銀耳異聚多糖中含有的葡萄糖醛酸，可以起到保護(hù)乳蛋白的作用，保證乳制品不產(chǎn)生沉淀和絮凝現(xiàn)象，使乳制品的乳液均一，口感爽滑。具體試驗(yàn)方法見本項(xiàng)資料附件3的試驗(yàn)報(bào)告。另外，關(guān)于銀耳異聚多糖在食品中的應(yīng)用也有研究報(bào)道。崔蕊靜等1利用銀耳多糖浸提液代替羧甲基纖維素等人工合成穩(wěn)定劑制作調(diào)配型奶飲料, 結(jié)果表明, 銀耳多糖浸提液添加量為奶飲料總量的30%時(shí), 按原奶飲料的生產(chǎn)工藝, 可代替羧甲基纖維素等穩(wěn)定劑的穩(wěn)定與增稠作用。制品穩(wěn)定性好,并具有銀耳的保健功能。趙君峰2等，研究了在番茄乳酸菌飲料中添加30的銀耳多糖浸提液，可

5、以代替?zhèn)鹘y(tǒng)穩(wěn)定劑起到良好的穩(wěn)定效果。參考文獻(xiàn):1 崔蕊靜,李鳳英,李春華. 銀耳多糖的提取及其在飲料中的應(yīng)用j. 中國(guó)食用菌, 2004，23（2）,39402 趙君峰，馬麗萍. 銀耳多糖在蕃茄乳酸菌飲料中的應(yīng)用j. 中國(guó)食品科技, 2005，21（3）,106107附件1銀耳異聚多糖物理性質(zhì)的研究1 銀耳異聚多糖的溶解性研究1.1 試驗(yàn)方法將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：wsk-l 100703）分別溶于體積濃度小于30%的乙醇、丙二醇、丁二醇、甘油水溶液，觀察銀耳異聚多糖樣品溶解狀態(tài)，另將其分別離心（4000r/min，15min）觀察狀態(tài)。1.2 試驗(yàn)結(jié)果銀耳異聚多糖在室溫條件下在水溶液和體積

6、濃度小于30%的乙醇、丙二醇、丁二醇、甘油水溶液中具有很好的溶解性，且溶液離心后無沉淀產(chǎn)生。2 銀耳異聚多糖流變學(xué)特性、凝膠特性研究2.1 試驗(yàn)方法將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：wsk-h 100121）用純水配制成0.05%、0.1%、0.2%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的濃度，在25條件下，利用ndj-1動(dòng)力粘度計(jì)調(diào)節(jié)不同的轉(zhuǎn)速，分別測(cè)定其表觀粘度，觀察表觀粘度變化情況。將上述不同濃度的樣品分別加熱近沸，冷卻，觀察是否形成凝膠。2.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表2-1 銀耳異聚多糖流變特性研究試驗(yàn)結(jié)果轉(zhuǎn) 速樣品粘度/pa·s6(r/min)12(r/min)30(r/min)60(

7、r/min)0.05%銀耳異聚多糖0.1%銀耳異聚多糖0.2%銀耳異聚多糖0.5%銀耳異聚多糖1.0%銀耳異聚多糖23131.5%銀耳異聚多糖62322.0%銀耳異聚多糖樣品已經(jīng)基本不具有流動(dòng)性，呈半流體狀注：以上樣品測(cè)定粘度時(shí)0.05%、0.1%采用1號(hào)轉(zhuǎn)子，0.2%采用2號(hào)轉(zhuǎn)子，0.5%采用3號(hào)轉(zhuǎn)子，1.0%、1.5%采用4號(hào)轉(zhuǎn)子。 圖2-1 銀耳異聚多糖流變特性試驗(yàn)結(jié)果表明：銀耳異聚多糖在低濃度時(shí)表現(xiàn)出較高的表觀粘度，且其表觀粘度隨著切變速率增加逐漸降低，呈非牛頓的假塑性型流體，即具有攪稀作用。隨溶液濃度加大，其假塑性程度增加（如圖2-1所示）。銀耳異聚多糖在高切變速率下的低表觀粘度使加

8、工中易于混勻、泵送、傾注和噴霧；低切變速率下的高表觀粘度，可使泡沫、乳化懸浮更穩(wěn)定。將上述不同濃度的樣品分別加熱近沸后，冷卻至室溫后不形成凝膠。3 高速剪切對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響3.1 試驗(yàn)方法將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：wsk-h 100121）用純水配制成0.5%的水溶液，分別在240、800、2000、10000、16000、22000、28000r/min不同剪切速率下剪切2min，采用ndj-1旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min），室溫條件（25）下測(cè)定剪切前后樣品溶液的表觀粘度值。將剪切后的樣品放置12h后，再次測(cè)定其表觀粘度，觀察其表觀粘度的變化情況。如果剪切后樣品放置12h后

9、粘度恢復(fù)到剪切前，則將樣品繼續(xù)高速剪切20min，再次測(cè)定其表觀粘度，觀察粘度的變化情況。3.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表3-1剪切速率對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響剪切速率（r/min）銀耳異聚多糖粘度（pa·s）剪切前剪切后放置12h后2408002000100001.04160002200028000由結(jié)果可以看出，銀耳異聚多糖樣品呈現(xiàn)假塑性，即剪切降粘特性；放置12h，樣品溶液的粘度有一定的恢復(fù)，但是，當(dāng)剪切速率大于10000 r/min時(shí)，粘度恢復(fù)的較少；小于10000 r/min時(shí)粘度可基本恢復(fù)，因此，提示在食品加工過程中，應(yīng)考慮高剪切對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響。為進(jìn)一步研究剪切對(duì)銀耳異

10、聚多糖粘度的影響，分別對(duì)0.5%的銀耳異聚多糖溶液，分別在400、1600、2000、10000 r/min不同剪切速率下剪切20min，測(cè)定其表觀粘度（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min），將剪切后的樣品放置12h后，再次測(cè)定其表觀粘度，觀察粘度的變化情況。具體結(jié)果如表3-2，由結(jié)果可以看出，長(zhǎng)時(shí)間的剪切對(duì)樣品粘度有一定的影響，放置后粘度亦不能恢復(fù)。表3-2 長(zhǎng)時(shí)間剪切對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響剪切速率（r/min）銀耳異聚多糖粘度（pa·s）剪切前剪切后放置12h后40012002000100004 不同溫度對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響4.1 試驗(yàn)方法將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：100221）用純

11、水配制成0.5%的濃度，分別將樣品置于2、10、25、40、50、60、70、80、90、95環(huán)境條件下，使樣品溫度達(dá)到相應(yīng)的環(huán)境溫度，利用ndj-1動(dòng)力粘度計(jì)（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min）測(cè)定表觀粘度的變化；將不同溫度處理后的樣品放置至室溫（25），再次測(cè)定其相應(yīng)表觀粘度，結(jié)果見表4-1和圖4-1。將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：100221）用純水配制成0.5%的濃度，分別將樣品置于60、80水浴環(huán)境條件下，加熱30min，加熱結(jié)束，樣品放置至室溫（25），測(cè)定其相應(yīng)粘度（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min），以室溫（25）放置的樣品作為空白對(duì)照，結(jié)果見表4-2。4.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表4-1 溫度對(duì)樣品粘

12、度的影響溫度（）粘度（pa·s）不同溫度下樣品粘度放置至室溫（25）后樣品粘度21025405060708090956圖4-1 溫度對(duì)樣品粘度的影性表4-2 熱處理（30min）對(duì)樣品粘度的影響溫度（）粘度（pa·s）不同溫度下樣品粘度放置至室溫（25）后樣品粘度25（對(duì)照）60608080由試驗(yàn)結(jié)果可以看出，在不同的溫度下測(cè)定銀耳異聚多糖表觀粘度時(shí)，其粘度隨著溫度的升高而逐漸降低，放置至室溫后再次測(cè)定樣品粘度，60以上溫度處理過的樣品粘度已經(jīng)不能恢復(fù)到加熱前水平，但是與加熱前表觀粘度差異不是很大。為確定長(zhǎng)時(shí)間加熱對(duì)樣品粘度的影響，選擇60、80水浴，將樣品溶液加熱30mi

13、n，隨后放置至室溫，測(cè)定其表觀粘度，與冷卻前樣品相比，其表觀粘度有所恢復(fù)，但是與室溫對(duì)照樣品的表觀粘度相比有一定的降低，提示長(zhǎng)時(shí)間加熱對(duì)樣品的表觀粘度有一定的影響，其表觀粘度無法恢復(fù)至加熱前。5 高溫、高壓蒸煮對(duì)銀耳異聚多糖穩(wěn)定性影響5.1 試驗(yàn)方法：將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：090606、090514）分別配制成%、%兩種濃度的溶液，將上述溶液置于蒸煮袋中，置于滅菌鍋中滅菌（滅菌溫度：120，時(shí)間：40min）。蒸煮結(jié)束后，采用ndj-1旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min），室溫條件（25）下測(cè)定樣品溶液的表觀粘度值。然后將樣品冷藏放置至25，再次測(cè)定其表觀粘度，比較樣品蒸煮前后及冷藏后表

14、觀粘度的變化情況。5.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表5-1高溫、高壓蒸煮對(duì)銀耳異聚多糖穩(wěn)定性影響銀耳異聚多糖濃度粘度（pa·s）蒸煮前蒸煮后蒸煮后冷藏放置至室溫0.25%0.25%60.50%0%有以上結(jié)果可知：樣品經(jīng)高溫、高壓蒸煮后，溶液的粘度均發(fā)生顯著的降低，且這種降低不受溶液濃度的影響。提示該添加劑應(yīng)用食品加工時(shí)，應(yīng)避免對(duì)該添加劑進(jìn)行高溫高壓蒸煮。6不同ph條件對(duì)銀耳異聚多糖粘度影響6.1 試驗(yàn)方法分別以磷酸氫二鈉-檸檬酸和甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液體系配制ph211的緩沖溶液,將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：wsk-l101019）溶于上述緩沖溶液配制成濃度為0.5%的銀耳異聚多糖樣品, 采用n

15、dj-1旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min），室溫條件（25）下測(cè)定樣品溶液的表觀粘度值，以純水配制的溶液作為空白對(duì)照。6.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表6-1溶液ph值對(duì)銀耳異聚多糖穩(wěn)定性影響溶液ph值粘度（pa·s）0圖6-1不同ph緩沖溶液對(duì)樣品粘度的影響由以上結(jié)果可知：銀耳異聚多糖樣品溶液的粘度在ph37的范圍內(nèi)基本穩(wěn)定，其中在ph46之間粘度最高。分析原因可能是樣品在強(qiáng)堿性環(huán)境中和緩沖溶液中的na+結(jié)合呈鹽，使溶液粘度降低，在強(qiáng)酸性條件下，樣品被部分水解導(dǎo)致粘度降低。7 離子強(qiáng)度（na+）對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響7.1 試驗(yàn)方法：天然多糖鏈間的相互作用復(fù)雜多樣，除多糖鏈間的相互作用

16、外，還有多糖與陽離子間的絡(luò)合。許多帶有羧酸基團(tuán)（如糖醛酸、丙酮酸）的多糖能與陽離子絡(luò)合，某些多糖只能與具有特定離子半徑的陽離子進(jìn)行絡(luò)合，有些多糖還可通過與陽離子間相互作用而形成凝膠，但也有些多糖并沒有這種性質(zhì)，本實(shí)驗(yàn)主要考察銀耳異聚多糖樣品與陽離子是否能相互作用形成凝膠，若不能形成凝膠則研究陽離子如何影響銀耳異聚多糖。將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：100221）分別溶解于上述溶液中配制成%的濃度，分別稱取氯化鈉粉末，邊攪拌邊加入0.5%的銀耳異聚多糖溶液中，使其氯化鈉濃度分別為：0%、0.1%、0.5%、1.0%、5.0%、10.0%、20.0%，在室溫條件下，觀察樣品是否形成凝膠，采用ndj-1

17、旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min）測(cè)定其表觀粘度值變化。將上述樣品分別逐漸升溫至近沸，冷卻，觀察是否形成凝膠。7.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表7-1 一價(jià)陽離子（na+）對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響na+濃度（%）粘度（pa·s）0由上述結(jié)果可以看出，一價(jià)陽離子（na+）對(duì)銀耳異聚多糖粘度有一定的影響，分析原因可能是樣品和na+結(jié)合呈鹽，使溶液粘度降低。將上述樣品分別逐漸升溫至近沸，冷卻，觀察沒有形成凝膠。8 二價(jià)陽離子（ca2+）對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響8.1 試驗(yàn)方法將銀耳異聚多糖樣品（批號(hào)：100221）分別溶解于上述溶液中配制成%的濃度，分別稱取氯化鈣粉末，邊攪拌邊加入0.5%的銀耳

18、異聚多糖溶液中，使其氯化鈣濃度分別為：0%、0.1%、0.5%、1.0%、5.0%、10.0%、20.0%，在室溫條件下，觀察樣品是否形成凝膠，采用ndj-1旋轉(zhuǎn)粘度計(jì)（3號(hào)轉(zhuǎn)子，30r/min）測(cè)定其表觀粘度值變化。將上述樣品分別逐漸升溫至近沸，冷卻，觀察是否形成凝膠。8.2 試驗(yàn)結(jié)果及分析表8-1 二價(jià)陽離子（ca2+）對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響ca2+濃度（%）粘度（pa·s）0由上述結(jié)果可以看出，隨著ca2+的增加，粘度又較大的下降，分析原因可能是樣品和ca2+結(jié)合呈鹽，使溶液粘度降低。另外，二價(jià)陽離子（ca2+）對(duì)銀耳異聚多糖粘度的影響大于一價(jià)陽離子（na+），分析原因可能是

19、因?yàn)槁然}在溶解的過程中放熱，對(duì)樣品的粘度也有一定的影響。將上述樣品分別逐漸升溫至近沸，冷卻，觀察沒有形成凝膠。9 銀耳異聚多糖干粉的穩(wěn)定性研究9.1 試驗(yàn)方法以分子量、粘度、透光率、ph值和葡萄糖醛酸含量為指標(biāo)，考察銀耳異聚多糖固體粉末的穩(wěn)定性，確定產(chǎn)品的保質(zhì)期。9.2 試驗(yàn)結(jié)果 由檢測(cè)結(jié)果可知（見表9-1），銀耳異聚多糖在24個(gè)月內(nèi)，其分子量、粘度、透光率、ph值和葡萄糖醛酸含量均保持穩(wěn)定，樣品無變質(zhì)現(xiàn)象。因此將銀耳異聚多糖的保質(zhì)期確定為2年。表9-1 產(chǎn)品穩(wěn)定性試驗(yàn)報(bào)告產(chǎn)品批號(hào)檢測(cè)時(shí)間分子量 （道爾頓）粘度（pa·s）透光率 （%）葡萄糖醛酸含量（%）ph值071112出廠時(shí)1

20、23萬6個(gè)月120萬12個(gè)月118萬24個(gè)月118萬071221出廠時(shí)139萬6個(gè)月127萬12個(gè)月125萬6.8024個(gè)月125萬080112出廠時(shí)109萬6個(gè)月113萬12個(gè)月114萬24個(gè)月112萬附件2附件3銀耳異聚多糖在液體乳制品中的應(yīng)用1 試驗(yàn)?zāi)康目疾煦y耳異聚多糖在液體乳制品是否可以起到體系穩(wěn)定作用和保護(hù)乳蛋白的作用。2 試驗(yàn)設(shè)備、儀器：懸臂式攪拌機(jī) rw20n型 廣州儀科實(shí)驗(yàn)室技術(shù)有限公司高剪切乳化機(jī) fluko fa25型 費(fèi)魯克流體機(jī)械制造有限公司低速離心機(jī) 飛鴿牌 tdl80-2b型 上海安亭科學(xué)儀器制造廠數(shù)顯ph計(jì) phs-3c型 上?？祪x儀器有限公司 旋轉(zhuǎn)粘度計(jì) ndj

21、-1型 上海精密科學(xué)儀器有限公司紫外分光光度計(jì) 759型 上海奧普勒儀器有限公司3 試驗(yàn)原輔料 銀耳異聚多糖：本公司生產(chǎn)，批號(hào)：091212 全脂奶粉：伊利公司，批號(hào)68151241fb （水分：5.0%；脂肪：26.0%；蛋白質(zhì)：非脂乳固體的34%）白砂糖：上海市糖業(yè)煙酒（集團(tuán)）有限公司尼泊金乙酯：杭州金鶴來食品添加劑有限公司，批號(hào)：20100710 一水合檸檬酸： 國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司蘋果汁：自制藍(lán)莓香精：113p02a 上海白潤(rùn)福德香精香料有限公司蘋果香精：24003 上海華寶孔雀香精香料有限公司4 乳液體系穩(wěn)定性測(cè)試方法4.1 離心沉淀法在離心管中加入適量乳液樣品，利用低速離心機(jī)在

22、4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，棄去離心管中的乳液，離心管倒置在濾紙上30min，稱量底部沉淀物的重量，按式（a）計(jì)算沉淀率，沉淀率越小，說明乳液體系越穩(wěn)定。 式（a）4.2 體系穩(wěn)定常數(shù)法測(cè)試原理：本法是研究乳液穩(wěn)定性的定量方法，乳液離心前后光密度變化百分率稱為穩(wěn)定常數(shù)，用ke表示，其表達(dá)式見式（b）： 式（b） 式（b）中，ke穩(wěn)定常數(shù)ao未離心乳液的吸光度a離心后乳液的吸光度具體操作：取適量乳液于離心管中，用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，用紫外分光光度計(jì)在波長(zhǎng)780nm處測(cè)定其吸光度a，再與離心前乳液吸光度a0比較，帶入公式計(jì)算ke。ke 值愈小乳液愈穩(wěn)

23、定。同時(shí)，用式（c）所表達(dá)的h值也可作為乳液體系穩(wěn)定性的判斷指標(biāo)。h值為：98%100%說明體系穩(wěn)定。若低于該98%則表明乳液的穩(wěn)定性差。 h=a/ a0×100% 式（c）式（c）中，a和a0同式（b）4.3 顯微快速判斷法取適量乳液置于100倍光學(xué)顯微鏡下觀察，如果樣品乳糜顆粒大小均勻，分散性好，無聚結(jié)現(xiàn)象，說明乳液體系穩(wěn)定。5 試驗(yàn)方法對(duì)調(diào)味奶體系的穩(wěn)定性測(cè)試樣品的制備（1）含有銀耳雜多糖或其提取物的樣品：取濃度為0.025wt%的尼泊金乙酯水溶液，用其分別配制濃度為0.25wt%的銀耳雜多糖或其提取物溶液，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9。向銀耳雜多糖或其提取物溶液中分別加入10wt%的

24、白砂糖（百分比相對(duì)于銀耳雜多糖或其提取物溶液的重量），攪拌溶解后，向其中分別加入5wt%的全脂奶粉（百分比相對(duì)于銀耳雜多糖或其提取物溶液的重量），攪拌，全部溶解成乳液，向乳液中分別加入0.0015%(體積比)的香精（百分比相對(duì)于銀耳雜多糖或其提取物溶液的重量），剪切乳化（乳化條件：10000r/min；乳化溫度：20；乳化時(shí)間：20分鐘），乳化結(jié)束，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，分別得調(diào)味奶乳液1-1和1-2。（2）空白對(duì)照樣品：配制濃度為0.025wt%的尼泊金乙酯水溶液，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9。向其中加入10wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌溶解后，向其中加入5wt%的全脂奶

25、粉（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌，全部溶解成乳液，向乳液中加入0.0015%(體積比)的香精（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的體積），剪切乳化（乳化條件：10000r/min；乳化溫度：20；乳化時(shí)間：20分鐘），乳化結(jié)束，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，得調(diào)味奶乳液2。5.1.2穩(wěn)定性測(cè)試與結(jié)果（1）將上述調(diào)味奶乳液1-1、1-2和2放置一段時(shí)間，于第0、5、15天觀察調(diào)味奶乳液的穩(wěn)定性。調(diào)味奶乳液1-1和1-2在各時(shí)間點(diǎn)均無沉淀和絮凝現(xiàn)象，乳液均一。調(diào)味奶乳液2在第0天起產(chǎn)生明顯的分層，有沉淀和絮凝現(xiàn)象產(chǎn)生，乳液不穩(wěn)定。（2）采用離心沉淀法考察調(diào)味奶乳液的穩(wěn)定性：離心沉淀法：在離心管中分

26、別加入適量上述調(diào)味奶乳液1-1、1-2和2，利用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，棄去離心管中的乳液，將離心管倒置在濾紙上30min，稱量底部沉淀物的重量，按式（a）計(jì)算離心沉淀率，沉淀率越小，說明乳液越穩(wěn)定，具體結(jié)果見表1。表1 離心沉淀率時(shí)間調(diào)味奶乳液1-1和1-2離心沉淀率(%)調(diào)味奶乳液2（空白對(duì)照）離心沉淀率(%)0天5天15天由表1可見，含有銀耳雜多糖及其提取物的調(diào)味奶乳液1-1和1-2穩(wěn)定性明顯優(yōu)于普通調(diào)味奶乳液2，離心沉淀率是調(diào)味奶乳液2的約1/10。（3）采用體系穩(wěn)定常數(shù)法考察調(diào)味奶乳液的穩(wěn)定性：體系穩(wěn)定常數(shù)法：取適量上述調(diào)味奶乳液1-1、1-2和2于離心

27、管中，用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，用紫外分光光度計(jì)在波長(zhǎng)780nm處測(cè)定其吸光度a，再與離心前樣品吸光度a0比較，帶入式（b）和式（c）中，計(jì)算ke、h值。ke值越小，說明乳液體系愈穩(wěn)定，h值在98%100%之間，說明體系穩(wěn)定，具體結(jié)果見表2。表2 體系穩(wěn)定常數(shù)時(shí)間調(diào)味奶乳液1-1和1-2調(diào)味奶乳液2（空白對(duì)照）ke 值（%）h值（%）ke 值（%）h值（%）0天5天15天67.1由表2可見，含有銀耳雜多糖及其提取物的調(diào)味奶乳液1-1和1-2的穩(wěn)定性明顯優(yōu)于普通調(diào)味奶乳液2。（4）采用顯微快速判斷法考察調(diào)味奶乳液的穩(wěn)定性：取上述調(diào)味奶乳液1-1、1-2和2置于100

28、倍光學(xué)顯微鏡下觀察：調(diào)味奶乳液1-1和1-2：在第0、5和15天時(shí)顯微觀察，樣品均呈現(xiàn)為乳糜顆粒大小均勻，分散性好，無聚結(jié)的現(xiàn)象，說明該調(diào)味奶體系穩(wěn)定，具體結(jié)果見圖1、圖3和圖5。調(diào)味奶乳液2（空白對(duì)照）：在第0、5和15天時(shí)顯微觀察，樣品均呈現(xiàn)為乳糜結(jié)合形成塊狀大顆粒，大小不均勻，分散性差，說明該調(diào)味奶體系不穩(wěn)定，具體結(jié)果見圖2、圖4和圖6。 圖1 圖2 圖3 圖4 圖5 圖6圖1為調(diào)味奶乳液1-1在第0天時(shí)的顯微觀察圖。圖2為調(diào)味奶乳液2在第0天時(shí)的顯微觀察圖。圖3為調(diào)味奶乳液1-1在第5天時(shí)的顯微觀察圖。圖4為調(diào)味奶乳液2在第5天時(shí)的顯微觀察圖。圖5為調(diào)味奶乳液1-1在第15天時(shí)的顯微觀

29、察圖。圖6為調(diào)味奶乳液2在第15天時(shí)的顯微觀察圖。5.2對(duì)酸味果汁牛奶的穩(wěn)定性5.2.1測(cè)試樣品的制備（1）含有銀耳雜多糖或其提取物的樣品：取濃度為0.025wt%的尼泊金乙酯的蘋果原果汁溶液，加入8wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于蘋果原果汁溶液重量），攪拌溶解，向其中加入固體銀耳雜多糖或銀耳雜多糖提取物，快速攪拌使其全部溶解，分別配制成濃度為0.15wt%的銀耳雜多糖或其提取物的果汁溶液，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，備用。再取濃度為0.025wt%的尼泊金乙酯水溶液，用其分別配制濃度為0.15wt%的銀耳雜多糖或其提取物溶液，分別向其中加入5wt%的全脂奶粉（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌

30、，全部溶解成牛奶乳液，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9。將上述銀耳雜多糖或其提取物的果汁溶液分別加入該牛奶乳液中，攪拌均勻再分別加入0.0015%(體積比)的香精（百分比相對(duì)于果汁溶液和牛奶乳液總體積），剪切乳化（乳化條件：10000r/min；乳化溫度：20；乳化時(shí)間：20分鐘），乳化結(jié)束，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，分別得果汁牛奶乳液3-1和3-2。（2）空白對(duì)照樣品：取濃度為0.025wt%的尼泊金乙酯的蘋果原果汁溶液，加入8wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于蘋果原果汁溶液重量），攪拌溶解，快速攪拌使全部溶解，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，得蘋果原果汁溶液，備用。取濃度為0.025wt%的尼泊金乙酯水溶液，調(diào)節(jié)溶液ph

31、=3.9。向其中加入8wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液重量），攪拌溶解后，向其中加入5wt%的全脂奶粉（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液重量），攪拌，全部溶解成牛奶乳液，將上述蘋果原果汁溶液加入該牛奶乳液中，攪拌均勻再加入0.0015%(體積比)的香精（百分比相對(duì)于果汁溶液和牛奶乳液總體積），剪切乳化（乳化條件：10000r/min；乳化溫度：20；乳化時(shí)間：20分鐘），乳化結(jié)束，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，得果汁牛奶乳液4。穩(wěn)定性測(cè)試與結(jié)果（1）將上述果汁牛奶乳液3-1、3-2和4放置一段時(shí)間，于第0、5、15天觀察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性。果汁牛奶乳液3-1和3-2在各時(shí)間點(diǎn)均無沉淀和絮凝現(xiàn)

32、象，乳液均一。果汁牛奶乳液4在第0天起產(chǎn)生明顯的分層，有沉淀和絮凝現(xiàn)象產(chǎn)生，乳液不穩(wěn)定。（2）采用離心沉淀法考察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性：離心沉淀法：在離心管中分別加入適量上述果汁牛奶乳液3-1、3-2和4，利用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，棄去離心管中的乳液，將離心管倒置在濾紙上30min，稱量底部沉淀物的重量，按式（a）計(jì)算離心沉淀率，沉淀率越小，說明乳液越穩(wěn)定，具體結(jié)果見表3。 表3 離心沉淀率時(shí)間果汁牛奶乳液3-1和3-2離心沉淀率(%)果汁牛奶乳液4（空白對(duì)照）離心沉淀率(%)0天5天15天由表3可見，含有銀耳雜多糖及其提取物的果汁牛奶乳液3-1和3-2的穩(wěn)定性明

33、顯優(yōu)于普通果汁牛奶乳液4，離心沉淀率是普通果汁牛奶乳液4的約1/151/20。（3）采用體系穩(wěn)定常數(shù)法考察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性：體系穩(wěn)定常數(shù)法：取適量上述果汁牛奶乳液3-1、3-2和4于離心管中，用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，用紫外分光光度計(jì)在波長(zhǎng)780nm處測(cè)定其吸光度a，再與離心前樣品吸光度a0比較，帶入式（b）和式（c）中，計(jì)算ke、h值。ke值越小，說明乳液體系愈穩(wěn)定，h值在98%100%之間，說明體系穩(wěn)定，具體結(jié)果見表4。表4體系穩(wěn)定常數(shù)時(shí)間 果汁牛奶乳液3-1和3-2果汁牛奶乳液4（空白對(duì)照）ke 值（%）h值（%） ke 值（%）h值（%）0天5天15天

34、由表4可見，含有銀耳雜多糖及其提取物的果汁牛奶乳液3-1和3-2的穩(wěn)定性明顯優(yōu)于普通果汁牛奶乳液4。（4）采用顯微快速判斷法考察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性：取上述果汁牛奶乳液3-1、3-2和4置于100倍光學(xué)顯微鏡下觀察：果汁牛奶乳液3-1和3-2：在第0、5和15天時(shí)顯微觀察，樣品均呈現(xiàn)為乳糜顆粒大小均勻，分散性好，無聚結(jié)的現(xiàn)象，說明該果汁牛奶體系穩(wěn)定，具體結(jié)果見圖7、圖9和圖11。果汁牛奶乳液4（空白對(duì)照）：在第0、5和15天時(shí)顯微觀察，樣品均呈現(xiàn)為乳糜結(jié)合形成塊狀大顆粒，大小不均勻，分散性差，說明該果汁牛奶體系不穩(wěn)定，具體結(jié)果見圖8、圖10和圖12。 圖7 圖8 圖9 圖10 圖11 圖12圖

35、7為果汁牛奶乳液3-1在第0天時(shí)的顯微觀察圖。圖8為果汁牛奶乳液4在第0天時(shí)的顯微觀察圖。圖9為果汁牛奶乳液3-1在第5天時(shí)的顯微觀察圖。圖10為果汁牛奶乳液4在第5天時(shí)的顯微觀察圖。圖11為果汁牛奶乳液3-1在第15天時(shí)的顯微觀察圖。圖12為果汁牛奶乳液4在第15天時(shí)的顯微觀察圖。5.3 對(duì)酸味果汁牛奶的穩(wěn)定性 測(cè)試樣品的制備：（1）含有銀耳雜多糖或其提取物的樣品：取濃度為wt%的尼泊金乙酯的甜橙原果汁溶液，加入5wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于甜橙原果汁溶液的重量），攪拌溶解，向其中加入固體銀耳雜多糖或銀耳雜多糖提取物，快速攪拌使全部溶解，分別wt%的銀耳雜多糖或其提取物的果汁溶液，調(diào)節(jié)溶液p

36、h=3.9，備用。wt%的尼泊金乙酯水溶液，用其分別wt%的銀耳雜多糖或其提取物溶液，向其中分別加入5wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌溶解后，向其中分別加入15wt%的全脂奶粉（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌，全部溶解成牛奶乳液，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9。將上述銀耳雜多糖或其提取物的果汁溶液分別加入牛奶乳液中，攪拌均勻向乳液中分別加入0.002%(體積比)的香精（百分比相對(duì)于果汁溶液和牛奶乳液總體積），剪切乳化（乳化條件：10000r/min；乳化溫度：20；乳化時(shí)間：20分鐘），乳化結(jié)束，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，分別得到果汁牛奶乳液5-1和5-2。（2）空白對(duì)

37、照樣品：取濃度為0.02wt%的尼泊金乙酯的甜橙原果汁溶液，加入5wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于甜橙原果汁溶液的重量），攪拌溶解，快速攪拌使全部溶解，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，得甜橙原果汁溶液，備用。取質(zhì)量百分濃度為0.02%的尼泊金乙酯水溶液，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9。向其中分別加入5wt%的白砂糖（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌溶解后，向其中分別加入15wt%的全脂奶粉（百分比相對(duì)于尼泊金乙酯水溶液的重量），攪拌，全部溶解成牛奶乳液，將上述甜橙原果汁溶液加入牛奶乳液中，攪拌均勻，向乳液中分別加入0.002%(體積比)的香精（百分比相對(duì)于果汁溶液和牛奶乳液總體積），剪切乳化（乳化條件：10

38、000r/min；乳化溫度：20；乳化時(shí)間：20分鐘），乳化結(jié)束，調(diào)節(jié)溶液ph=3.9，得到果汁牛奶乳液6。 穩(wěn)定性測(cè)試與結(jié)果（1）將上述果汁牛奶乳液5-1、5-2和6放置一段時(shí)間，于第0、5、15天觀察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性。果汁牛奶乳液5-1和5-2在各時(shí)間點(diǎn)均無沉淀和絮凝現(xiàn)象，乳液均一。果汁牛奶乳液6在第0天起產(chǎn)生明顯的分層，有沉淀和絮凝現(xiàn)象產(chǎn)生，乳液不穩(wěn)定。（2）采用離心沉淀法考察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性：離心沉淀法：在離心管中分別加入適量上述果汁牛奶乳液5-1、5-2和6，利用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，棄去離心管中的乳液，將離心管倒置在濾紙上30min，稱量底部

39、沉淀物的重量，按式（a）計(jì)算離心沉淀率，沉淀率越小，說明乳液越穩(wěn)定，具體結(jié)果見表5。表5 離心沉淀率時(shí)間果汁牛奶乳液5-1和5-2離心沉淀率(%)果汁牛奶乳液6（空白對(duì)照）離心沉淀率(%)0天5天15天由表5可見，含有銀耳雜多糖及其提取物的果汁牛奶乳液5-1和5-2的穩(wěn)定性明顯優(yōu)于普通果汁牛奶乳液6，離心沉淀率是果汁牛奶乳液6的約1/15。（3）采用體系穩(wěn)定常數(shù)法考察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性：體系穩(wěn)定常數(shù)法：取適量上述果汁牛奶乳液5-1、5-2和6于離心管中，用低速離心機(jī)在4000r/min的轉(zhuǎn)速下離心30min，用紫外分光光度計(jì)在波長(zhǎng)780nm處測(cè)定其吸光度a，再與離心前樣品吸光度a0比較，帶入

40、式（b）和式（c）中，計(jì)算ke、h值。ke值越小，說明乳液體系愈穩(wěn)定，h值在98%100%之間，說明體系穩(wěn)定，具體結(jié)果見表6。表6 體系穩(wěn)定常數(shù)時(shí)間果汁牛奶乳液5-1和5-2果汁牛奶乳液6（空白對(duì)照）ke 值（%）h值（%）ke 值（%）h值（%）0天5天15天由表6可見，含有銀耳雜多糖及其提取物的果汁牛奶乳液5-1和5-2的穩(wěn)定性明顯優(yōu)于普通果汁牛奶乳液6。（4）采用顯微快速判斷法考察果汁牛奶乳液的穩(wěn)定性：取上述果汁牛奶乳液5-1、5-2和6置于100倍光學(xué)顯微鏡下觀察：果汁牛奶乳液5-1和5-2：在第0、5和15天時(shí)顯微觀察，樣品均呈現(xiàn)為乳糜顆粒大小均勻，分散性好，無聚結(jié)的現(xiàn)象，說明該果汁

41、牛奶體系穩(wěn)定，具體結(jié)果見圖13、圖15和圖17。果汁牛奶乳液6（空白對(duì)照）：在第0、5和15天時(shí)顯微觀察，樣品均呈現(xiàn)為乳糜結(jié)合形成塊狀大顆粒，大小不均勻，分散性差，說明該果汁牛奶體系不穩(wěn)定，具體結(jié)果見圖14、圖16和圖18。 圖13 圖14 圖15 圖16 圖17 圖18圖13為果汁牛奶乳液5-1在第0天時(shí)的顯微觀察圖。圖14為中果汁牛奶乳液6在第0天時(shí)的顯微觀察圖。圖15為果汁牛奶乳液5-1在第5天時(shí)的顯微觀察圖。圖16為果汁牛奶乳液6在第5天時(shí)的顯微觀察圖。圖17為果汁牛奶乳液5-1在第15天時(shí)的顯微觀察圖。 圖18為果汁牛奶乳液6在第15天時(shí)的顯微觀察圖。6 試驗(yàn)結(jié)論銀耳雜多糖添加于乳制

42、品中可以起到穩(wěn)定體系、保護(hù)乳蛋白的作用，保證乳制品不產(chǎn)生沉淀和絮凝現(xiàn)象，使乳制品的乳液均一，口感爽滑。銀耳異聚多糖（食品添加劑）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)1 產(chǎn)品名稱銀耳異聚多糖。2 原輔材料2.1 原料要求銀耳應(yīng)符合gb 11675銀耳衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的有關(guān)規(guī)定。2.2 輔料要求 生產(chǎn)用水應(yīng)符合gb 5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中的有關(guān)規(guī)定。 其他輔料應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的有關(guān)規(guī)定。3 主要成分銀耳異聚多糖。4 產(chǎn)品主要技術(shù)指標(biāo)4.1 感官要求感官要求符合表1的要求。表1 感官要求項(xiàng) 目要 求外 觀白色至微黃色粉末氣 味略有特征性氣味或無味粒 度應(yīng)能過80目標(biāo)準(zhǔn)篩（通過率95%以上）4.2 理化指標(biāo)理化指標(biāo)符合表2的要求。

43、表2 理化指標(biāo)項(xiàng) 目指 標(biāo)銀耳異聚多糖（%） 90葡萄糖醛酸含量（%） 18粘度（0.5%溶液，pa·s） 分子量（道爾頓） 1,000,000 透光率（0.5%溶液，%） 90%氮含量（%） 水分含量（%） 熾灼殘?jiān)?） ph值砷鹽（mg/kg） 重金屬（以pb計(jì)，mg/kg） 凈含量按定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法執(zhí)行 4.3 微生物指標(biāo)微生物指標(biāo)符合表3的要求。表3 微生物指標(biāo)項(xiàng) 目指 標(biāo)菌落總數(shù)(cfu/g) 500大腸菌群(mpn/100g) 陰性霉菌、酵母(cfu/g) 505 檢驗(yàn)方法5.1 感官檢驗(yàn) 取包裝完整的產(chǎn)品，檢查包裝是否清潔，封口是否嚴(yán)密，標(biāo)簽是否符合要求，

44、有無異物粘附。 將樣品倒入白瓷盤內(nèi)，在自然光線條件下，觀察色澤、組織形態(tài)及雜質(zhì)，嗅其氣味。 粒度按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法測(cè)定。5.2 理化指標(biāo)銀耳異聚多糖含量的測(cè)定按附錄a規(guī)定的方法測(cè)定。 葡萄糖醛酸含量的測(cè)定按附錄b規(guī)定的方法測(cè)定。 粘度將銀耳異聚多糖樣品配置成濃度為0.5%的溶液，25條件下，采用ndj-1動(dòng)力粘度計(jì)，3#轉(zhuǎn)子，30r/min，測(cè)定粘度值，單位以“pa·s”表示。 分子量按附錄c規(guī)定的方法測(cè)定。 透光率將銀耳異聚多糖樣品配置成濃度為0.5%的溶液，離心，使樣品溶液中無氣泡，25條件下，采用紫外分光光度計(jì)，在400nm處測(cè)樣品的透光率。 氮含量按附錄d規(guī)定的方法測(cè)定

45、。 水分含量按gb/t 5009.3規(guī)定的方法測(cè)定。 熾灼殘?jiān)粗袊?guó)藥典附錄規(guī)定的方法測(cè)定。 ph值按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法測(cè)定。 砷鹽按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法測(cè)定。 重金屬（以pb計(jì)）按中國(guó)藥典附錄規(guī)定的方法測(cè)定。 凈含量按定量包裝商品計(jì)量監(jiān)督管理辦法執(zhí)行。5.3 微生物指標(biāo) 菌落總數(shù)的測(cè)定按gb/t 4789.2食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)規(guī)定的方法測(cè)定。 大腸菌群的測(cè)定按gb/t 4789.3食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)規(guī)定的方法測(cè)定。 霉菌、酵母的測(cè)定按gb/t 4789.15食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù)規(guī)定的方法測(cè)定。附錄a銀耳異聚多糖中總多糖含量的測(cè)定苯酚硫酸法1 試驗(yàn)原理游離

46、的單糖或寡糖、多糖中的己糖、戊糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）可以在濃硫酸作用下，脫水生成糠醛或羥甲基糠醛，與苯酚縮合成一種橙黃色化合物，在一定范圍內(nèi)其顏色深淺（可見光區(qū)域內(nèi)的吸光度）與糖的濃度成正比，己糖在490 nm波長(zhǎng)下（戊糖及糖醛酸在480 nm）有最大吸收峰，故可用比色法在相應(yīng)波長(zhǎng)下測(cè)定，并以標(biāo)準(zhǔn)單糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中總糖的含量。2 試驗(yàn)儀器分析天平，紫外分光光度計(jì)，恒溫水浴鍋，迷你振蕩器。3試劑80%苯酚：取重蒸苯酚80g，加水20ml，置于棕色瓶中，4下儲(chǔ)存，可長(zhǎng)期使用。6%苯酚：臨用時(shí)以80%苯酚配置（以質(zhì)量百分比計(jì)）。甘露糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取預(yù)先烘干至恒重的 mg，置于500

47、ml容量瓶中，加蒸餾水定容，搖勻，4下貯存，可長(zhǎng)期使用。濃硫酸（優(yōu)級(jí)純）4 甘露糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別吸取甘露糖標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.置于10ml反應(yīng)管，各以蒸餾水補(bǔ)至2.0 ml，分別加入6%苯酚溶液1.0 ml，搖勻，室溫條件下，移液管懸空垂直加入6.0 ml濃硫酸，靜置10min，搖勻，沸水浴反應(yīng)30 min，反應(yīng)結(jié)束，在波長(zhǎng)490 nm處測(cè)定吸光度a值，以2.0 ml水按同樣顯色操作為空白對(duì)照。以吸光度值為縱坐標(biāo)，甘露糖的含量（g）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5 樣品中總糖含量的測(cè)定稱取樣品約 g，置于500 ml容量瓶中，加蒸餾水定容，搖勻，吸取 ml，置于10ml反應(yīng)管，以ml水按同樣顯色操作為

48、空白對(duì)照。同標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法，測(cè)定吸光度值。6 結(jié)果計(jì)算x=×f×100%式中：x銀耳異聚多糖含量，% y樣品測(cè)得吸光度a標(biāo)準(zhǔn)曲線之截距 b標(biāo)準(zhǔn)曲線之斜率 m樣品質(zhì)量，g v1溶解樣品的體積，ml v2吸取樣品的體積，ml f銀耳異聚多糖相當(dāng)于甘露糖的換算因子7 實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)（1）每次測(cè)定樣品時(shí)必須平行做3份試驗(yàn)，以提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確度。（2）樣品反應(yīng)結(jié)束后應(yīng)嚴(yán)格控制冰水浴時(shí)間，保證每次測(cè)定樣品的冰水浴時(shí)間和制定標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)冰水浴時(shí)間一致，為提高試驗(yàn)的準(zhǔn)確度，控制冰水浴時(shí)間為3min。（3）試驗(yàn)所用標(biāo)準(zhǔn)曲線要注意及時(shí)進(jìn)行更新，尤其是試驗(yàn)所用濃硫酸更換時(shí)應(yīng)重新制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。（4）

49、試驗(yàn)所用6%苯酚應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用。附錄b銀耳異聚多糖中葡萄糖醛酸含量的測(cè)定咔唑硫酸法1 試驗(yàn)原理樣品經(jīng)水解后，葡萄糖醛酸與咔唑試劑作用產(chǎn)生紅紫色，生成的顏色深淺與葡萄糖醛酸含量成正比。2 儀器分析天平，紫外分光光度計(jì)，恒溫水浴鍋，迷你振蕩器。3 試劑及配制0.1%的咔唑乙醇液：稱取g咔唑，加無水乙醇100ml溶解。移入深棕色瓶中，4下儲(chǔ)存，有效期為12個(gè)月。葡萄糖醛酸（ga）標(biāo)準(zhǔn)溶液：精確稱取10mg葡萄糖醛酸于100ml容量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，在4下儲(chǔ)存。0.025mol/l的四硼酸鈉硫酸溶液：稱取5g四硼酸鈉，加入500 ml濃硫酸中，加蓋。不定時(shí)地振搖，直至四硼酸鈉完全溶解。室溫下儲(chǔ)存，有

50、效期為12個(gè)月。注：試驗(yàn)所用試劑均為分析純。4 操作方法(1) 稱取樣品50 mg左右，精密稱定，加水溶解，定溶到500 ml。取該試劑1 ml，放入試管中，在水中邊冷卻邊加入四硼酸鈉硫酸溶液5 ml ml咔唑乙醇液，充分混合，在沸水浴中加熱15分鐘，自然冷卻后作為試驗(yàn)溶液。l、0.2ml、0.4ml、0.6mll葡萄糖醛酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，不夠1 ml的用水補(bǔ)至1 ml，對(duì)其進(jìn)行如上相同的操作。(3) 取水1 ml為空白對(duì)照進(jìn)行相同操作、10mm比色皿、波長(zhǎng)530nm的樣品液以及標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線。5 計(jì)算x=×100%式中：x葡萄糖醛酸含量，% y樣

51、品測(cè)得吸光度a標(biāo)準(zhǔn)曲線之截距 b標(biāo)準(zhǔn)曲線之斜率 m樣品質(zhì)量，g v1溶解樣品的體積，ml v2吸取樣品的體積，ml附錄c銀耳異聚多糖分子量的測(cè)定烏氏粘度法1 實(shí)驗(yàn)儀器烏式粘度計(jì)、運(yùn)動(dòng)粘度測(cè)定器syd-265c型2 實(shí)驗(yàn)試劑及配制0.85%氯化鈉溶液：稱取氯化鈉，用水溶解稀釋定容至1000ml。3 操作方法樣品制備：精密稱取樣品約20mg，用0.85%氯化鈉溶解定容至100ml，搖晃至完全溶解，待測(cè)；測(cè)定：將內(nèi)徑0.50.6mm的烏氏粘度計(jì)，垂直固定于運(yùn)動(dòng)粘度測(cè)定器的恒溫水浴中（水浴溫度應(yīng)為25±），吸取0.85%氯化鈉約20ml于烏氏粘度計(jì)，測(cè)定它的流出時(shí)間t0（空白），按同樣方法測(cè)定樣品液的流出時(shí)間t（樣品液），空白與樣品液的流出時(shí)間各測(cè)兩次，取平均值（兩次讀數(shù)相差不能超過0.1秒）。4 計(jì)算m=式中： m樣品的平均分子量t0空白液流出烏氏粘度計(jì)的時(shí)間，st樣品液流出烏氏粘度計(jì)的時(shí)間，sc樣品濃度，g/ml5 檢驗(yàn)依據(jù)醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（醫(yī)用透明質(zhì)酸鈉凝膠）附錄d銀耳異聚多糖中氮含量的測(cè)定凱氏定氮法1 試驗(yàn)原理把有機(jī)氮化物與硫酸共熱消化，經(jīng)分解、碳化和