降鈣素原PCT檢測(cè)及臨床意義

1、降鈣素原（PCT）檢測(cè)及臨床意義一、概述：PCT是無(wú)激素活性的降鈣素前肽物質(zhì)，由116個(gè)氨基酸組成，分子量為 13 KD的糖蛋白。PCT的半衰期為25-30小時(shí)，在體外穩(wěn)定性很好。健康人血漿PCT含量極低.PCT選擇性地對(duì)系統(tǒng)性細(xì)菌感染、真菌感染及寄生蟲(chóng)感染有反應(yīng)，而對(duì)無(wú)菌性炎癥和病毒感染無(wú)反應(yīng)或僅有輕度 反應(yīng)。許多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，全身性細(xì)菌、真菌和寄生蟲(chóng)感染時(shí)，PCT水平異常增高，增高的程度與感染的嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)，在全身性細(xì)菌感染和膿毒癥輔助鑒別診斷、預(yù)后判斷、療效觀察等方面有很高的臨床價(jià)值。PCT水平的監(jiān)測(cè)，對(duì)于嚴(yán)重威脅生命的感染性疾病過(guò)程和跟蹤治療方案是很有用的，PCT濃度的升高標(biāo)志著

2、炎癥反應(yīng)正在進(jìn)行中，使用足夠的抗生素、炎癥灶清除術(shù)治療等，PCT值下降，證明治療方案正確，預(yù)后良好，反之改變治療方案。PCT為所有不知病因的炎癥性疾病的鑒別診斷提供幫助與支持，如細(xì)菌性與毒素性的急性成人呼吸窘迫綜合癥（ARDS的鑒別；膽源性與毒素性胰腺炎的鑒別；細(xì)菌性與病毒性腦膜炎的鑒別；微生物誘導(dǎo)的發(fā)熱與非細(xì)菌性發(fā)熱 的鑒別，特別是發(fā)熱待查（FOU的診斷，病毒感染或自身免疫失調(diào)與免疫抑制條件下的急性細(xì)菌感染的鑒別，發(fā)熱 的病因的鑒別，如在腫瘤患者中被腫瘤溶解物或化療誘導(dǎo)與細(xì)菌、真菌或其他感染病因區(qū)別，早期診斷新生兒和嬰兒 全身性細(xì)菌感染與敗血癥引起的急性發(fā)熱；術(shù)后常規(guī)，包括術(shù)后感染預(yù)警及用藥

3、監(jiān)測(cè)，術(shù)后切除感染灶（如腹膜炎、 軟組織感染）后的治療指導(dǎo)，監(jiān)測(cè)腹膜炎、吻合口漏和無(wú)典型腹部癥狀的疾病過(guò)程；器官移植后的監(jiān)測(cè)，移植前排除 急性細(xì)菌或其他感染，鑒別急性器官排斥、急性病毒、細(xì)菌與真菌感染；長(zhǎng)期在ICU的患者及長(zhǎng)期機(jī)械通氣患者的監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)疾病過(guò)程及指導(dǎo)治療；監(jiān)測(cè)高危患者，早期獲得有關(guān)并發(fā)癥和內(nèi)環(huán)境衰退的信息。許多臨床研究證明，PCT在不同醫(yī)學(xué)領(lǐng)域?qū)υ\斷和指導(dǎo)治療有很高的價(jià)值，與目前所應(yīng)用的診斷指標(biāo)相比，PCT在鑒別診斷和控制感染及嚴(yán)重炎癥方面提供了額外的信息。隨著臨床實(shí)踐性研究的不斷深入，臨床數(shù)據(jù)的不斷積累， PCT作為一個(gè)全身性細(xì)菌感染和膿毒癥輔助和鑒別診斷的常規(guī)指標(biāo)將成為共識(shí)，

4、并將得到廣泛的應(yīng)用。二、PCT分子生物學(xué)結(jié)構(gòu)：PCT來(lái)自定位于第11號(hào)染色體上（11P15, 4）單拷貝基因（與降鈣素基因相關(guān)肽為同一基因）。該基因由2800個(gè)堿基對(duì)組成，含 6個(gè)外顯子和5個(gè)內(nèi)含子，基因全長(zhǎng)約 7.6Kb。轉(zhuǎn)錄后經(jīng)特定剪輯產(chǎn)生 PCTmRNA再翻譯成降鈣素原前體（Pre-PCT），在高爾基復(fù)合體及分泌囊中，經(jīng)一系列水解酶作用最終形成PCT氨基酸多肽（aminoPCT），降鈣素（CD及愈基端21個(gè)氨基多肽（CT： CCP-1）。三、 血清PCT來(lái)源及可能的生物學(xué)機(jī)制正常條件下人血清 PCT含量極低，約2.5pg/ml （運(yùn)用高效液相色譜分析），而成熟CT含量約6.3 pg/ml

5、。髓質(zhì)甲狀腺腫瘤或其他神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者血清PCT及其組分均增高，組分相對(duì)含量也發(fā)生變化。在一些非甲狀腺損傷如慢性腎衰、吸入性燒傷、急性細(xì)菌感染、中風(fēng)、敗血癥等患者血清PCT及其組分也均增高，有些甚至成倍的上升，而CT略微升高，說(shuō)明除甲狀腺髓質(zhì)細(xì)胞分泌貯存PCT外，仍有其他細(xì)胞具有這些功能。血清PCT升高的可能的生物學(xué)機(jī)制：靶細(xì)胞（PBMCs）在LPS各種敗血癥相關(guān)因子作用下應(yīng)急分泌PCT這種應(yīng)急分泌超過(guò)細(xì)胞后轉(zhuǎn)錄過(guò)程（由Pro-CT分解為aminoPCT、CT、CT： CCP-1）或后轉(zhuǎn)換過(guò)程缺少必需的水解酶，從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)所觀察到的 PCT成倍增長(zhǎng)，而 CT水平不變或稍增高。四、檢測(cè)方法及正

6、常參考值范圍目前除了費(fèi)時(shí)不易自動(dòng) 化的凝膠層析法及高效液相色譜分析法，檢測(cè)PCT$特異與敏感的分析方法有：雙抗夾心免疫化學(xué)發(fā)光法（雙抗夾心法）和放射免疫分析法（RIA）。雙抗夾心法運(yùn)用雙單克隆抗體，其一作為捕獲抗體直接結(jié)合PCT96-106氨基酸殘基即未成熟 CT: CCP-1部分，另一作為示蹤抗體直接結(jié)合PCT70-76氨基酸殘基，即未成熟 CT分子，人工合成的 PCT作為標(biāo)準(zhǔn)。該方法比較特異無(wú)交叉反應(yīng)，其檢測(cè)最低為 10pg - ml-1l，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍為 10-60pg - ml-1。批內(nèi)、批間變異系數(shù)分別為 7%和8%。該法已有商品試劑，所需時(shí)間較短，易自動(dòng)化，但該法不能檢測(cè)到正常

7、人血清中PCL RIA使用一種對(duì)人工合成的aminoPCT特異的多克隆抗體 RIB7。 RIB7直接作用PCT的aminoPCT部分，故RIA既能檢測(cè)游離的 PCT又能檢測(cè)結(jié)合 型的PCT,也可檢測(cè)降鈣素基因相關(guān)前體(Pro-CGRD，此法可信的敏感度為 4 pg - ml-1。線性范圍10-77pg - ml-1 ,50 %的結(jié)合游離比為140 pg - ml-1，該法能檢測(cè)正常人血清PCT,故較雙抗夾心法敏感，另一優(yōu)點(diǎn)是RIA與患者病程呈現(xiàn)正相關(guān)(r=0.47,p=0.071 )。RIA缺點(diǎn)是所需時(shí)間較長(zhǎng)。五、PCT檢測(cè)在不同臨床科系的應(yīng)用：1. 血液腫瘤科-對(duì)因接受化療或骨髓移植而引起的

8、免疫抑制和中性粒細(xì)胞減少的患者來(lái)說(shuō)，嚴(yán)重的感染是致命 的并發(fā)癥，化療期間有多種原因引起發(fā)熱。發(fā)熱通常是細(xì)菌、病毒或真菌感染的癥狀，但有時(shí)是治療過(guò)程中對(duì)藥物的 反應(yīng)。腫瘤細(xì)胞溶解引起的發(fā)熱較常見(jiàn)，大多數(shù)病例的發(fā)熱源仍不清楚。PCT有助于對(duì)細(xì)菌和真菌引起的系統(tǒng)性感染作出明確的診斷。即使是化療患者，PCT對(duì)是否有敗血癥感染也能作出可靠的檢測(cè)和評(píng)估。中性粒細(xì)胞減少癥患者常常缺乏炎癥的特異性癥狀。PCT在免疫抑制和中性粒細(xì)胞減少患者中的表現(xiàn)與無(wú)免疫抑制患者中觀察的結(jié)果相似。其診斷價(jià)值已明顯優(yōu)于CR閔日細(xì)胞因子。骨髓移植患者或造血干細(xì)胞移植患者很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)不論從數(shù)量上還是質(zhì)量上，均存在體液和細(xì)胞免疫缺陷

9、這將 掩蓋因細(xì)菌、真菌、病毒及原蟲(chóng)引起的嚴(yán)重的系統(tǒng)性感染。PCT濃度的升高對(duì)細(xì)菌性全身感染有很高的診斷率。如果同種異體移植后出現(xiàn)敗血癥休克，血漿PCT濃度極度升高，表明預(yù)后不良。2. 麻醉科-術(shù)后敗血癥感染和多器官功能衰竭仍然是現(xiàn)在重癥監(jiān)護(hù)病房中最常見(jiàn)的死亡原因。中小手術(shù)血漿PCT濃度通常在正常范圍內(nèi)，大手術(shù)如大的腹部手術(shù)或胸部手術(shù)，術(shù)后1-2天內(nèi)PCT濃度常有升高，通常為 0.5-2.0ng/ml ,偶爾超過(guò)5ng/ml，這種情況常以24小時(shí)的半衰期速度幾天內(nèi)降至正常水平。因此術(shù)后因感染造成的PCT高濃度或持續(xù)高水平很容易給予鑒別。復(fù)合創(chuàng)傷后12-24小時(shí)，PCT中度升高，可達(dá)2.0ng/m

10、l ,嚴(yán)重的肺或胸部創(chuàng)傷，PCT可達(dá)5ng/ml ,如沒(méi)有感染并發(fā)癥一般以半衰期速度降至正常范圍。3. 內(nèi)科內(nèi)科重癥監(jiān)護(hù)-醫(yī)療中的問(wèn)題常圍繞著感染的診斷及是否與感染有關(guān)的鑒別診斷而進(jìn)行。對(duì)炎癥嚴(yán)重程度及 其治療結(jié)果的評(píng)價(jià)是否有效，是有效治療方案的必要前提。PCT選擇性地對(duì)系統(tǒng)性細(xì)菌感染、相似菌感染及原蟲(chóng)感染有反應(yīng)，而對(duì)無(wú)菌性炎癥和病毒感染無(wú)反應(yīng)或僅有輕度 反應(yīng)。因此，PCT能很方便地運(yùn)用于內(nèi)科醫(yī)療中常見(jiàn)的疾病和綜合癥的鑒別診斷，如：成人呼吸窘迫癥感染性和非感 染性病因?qū)W的鑒別診斷；胰腺炎感染壞死和無(wú)菌性壞死的鑒別診斷；鑒定感染時(shí)發(fā)熱，如接受化療的腫瘤和血液病患 者；在接受免疫抑制劑的患者中，鑒

11、別診斷慢性自身免疫性疾病的急性惡化與風(fēng)濕性疾病伴系統(tǒng)性細(xì)菌感染；鑒別診 斷細(xì)菌性腦膜炎與病毒性腦膜炎；對(duì)接受化療的中性粒細(xì)胞低下癥患者，明確是否存在有生命危險(xiǎn)的細(xì)菌和真菌感染；對(duì)接受免疫抑制療法的器官移植患者，明確是否存在有嚴(yán)重的細(xì)菌和真菌感染，同時(shí)用于感染和移植排斥反應(yīng)的鑒別 診斷。4. 移植外科-成功的器官移植常受到像嚴(yán)重感染這樣的并發(fā)癥的挑戰(zhàn)。31%的患者器官移植后第一年內(nèi)發(fā)生感染，感染癥狀可被急、慢性排斥所掩蓋，因此對(duì)排斥反應(yīng)期出現(xiàn)的感染不能作出早期和可靠的診斷。器官移植患者使 用PCT檢測(cè)，可早期引入治療從而提高生存率以及縮短住院時(shí)間。PCT用于器官移植患者感染的診斷，免疫抑制療法嚴(yán)

12、重削弱了器官移植患者的抗感染能力。PCTW早在感染發(fā)生僅2小時(shí)即可提示有系統(tǒng)性感染的存在。感染早期PCT>0.1ng/ml ,其靈敏度77 % ,特異性100%,逐月的PCT濃度監(jiān)測(cè)可對(duì)抗微生物療法的療效作出可靠的評(píng)價(jià)。PCT應(yīng)用于器官排斥反應(yīng)，器官移植后監(jiān)測(cè)的主要任務(wù)之一就是能明確區(qū)分感染與器官排斥。因?yàn)镻CT的釋放不是由急性或慢性器官排斥反應(yīng)刺激引起的，所以高濃度的PCT即可認(rèn)為有感染存在。如果PCT濃度超過(guò)10 ng - ml,98 %的可能是感染而非器官排斥。5. 新生兒科-許多疾病在早產(chǎn)兒和新生兒中無(wú)特異性表現(xiàn)。血液學(xué)檢查和傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)和急性期蛋白對(duì)新生兒敗血癥均不能作出可

13、靠的診斷。微生物檢查的結(jié)果需要幾天的時(shí)間，而且陰性結(jié)果并不能排除臨床感染的存在以及與 此相關(guān)的高死亡率。與其他炎癥診斷指標(biāo)相比，PCT是一種改進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，它對(duì)新生兒出生后敗血癥的診斷具有高度的靈敏度和特異性。PCT也可用于對(duì)治療結(jié)果的評(píng)價(jià)。早產(chǎn)兒和新生兒 PCT年齡依賴性正常值：PCTT出生后24-30小時(shí)達(dá)其生理性高峰 21ng/ml ,但平均值僅為2ng/ml ,。 出生后第三天起，PCT正常參考值同成人。PCT是新生兒敗血癥高度特異性的指標(biāo)：早產(chǎn)兒和新生兒敗血癥感染，PCTM作出較傳統(tǒng)方法更早更具特異性的診斷，它對(duì)新生兒診斷的靈敏度和特異性可達(dá)100%。6. 兒科-小兒高熱用臨床手段

14、常常難以區(qū)分不同的感染源，這一問(wèn)題尤其會(huì)影響到因患血液、腫瘤疾病而給予免疫 抑制療法的患者的準(zhǔn)確診斷。而且許多疾病伴有繼發(fā)性免疫病理改變，如風(fēng)濕性發(fā)熱等，因此對(duì)患兒很難將其與原發(fā) 性細(xì)菌感染相區(qū)別。PCT對(duì)細(xì)菌和病毒感染的鑒別診斷有很高的靈敏度和特異性。由于細(xì)菌感染和病毒感染治療上存在本質(zhì)性的差別，因此PCT對(duì)具有非特異性感染癥狀的患者的治療可提供有價(jià)值的信息。檢測(cè)腦脊液中的蛋白和細(xì)胞無(wú)助于鑒別小兒細(xì)菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎，而且許多具有特異性的檢測(cè)指標(biāo)之間存在明顯的交叉現(xiàn)象。高濃度的PCT只出現(xiàn)于細(xì)菌性腦膜炎；而病毒性腦膜炎 PCT仍保持在正常范圍內(nèi)（腦脊液中檢測(cè)不到PCT。每天按時(shí)間對(duì)PC

15、T濃度進(jìn)行監(jiān)測(cè)，可對(duì)治療結(jié)果作出可靠的評(píng)價(jià)。7 .外科 敗血癥感染和多器官功能衰竭是術(shù)后致命的并發(fā)癥，盡管現(xiàn)代醫(yī)學(xué)有了長(zhǎng)足的進(jìn)步，但對(duì)此仍無(wú)良策。 術(shù)后能對(duì)并非由原有疾病或手術(shù)創(chuàng)傷本身引起的敗血癥感染作出早期和準(zhǔn)確的診斷是成功治療的關(guān)鍵。PCT濃度不受業(yè)已存在的疾病如癌癥、變態(tài)反應(yīng)或自身免疫性疾病的影響，PCT明顯優(yōu)于其他炎癥因子如 CRPm細(xì)胞因子，是一種客觀肯易檢測(cè)的指標(biāo)，有其獨(dú)特的診斷優(yōu)勢(shì)，甚至優(yōu)于那些帶有侵入性，風(fēng)險(xiǎn)性和造價(jià)均高的診斷方 法，如細(xì)針穿刺病理檢查法。術(shù)后PCT的應(yīng)用：PCT與嚴(yán)重細(xì)菌和敗血癥感染的發(fā)生及其過(guò)程有密切的關(guān)系，能準(zhǔn)確反應(yīng)引起病變（如腹膜炎）的感染源是否得到根除。每天對(duì)PCT濃度的監(jiān)測(cè)可對(duì)治療結(jié)果做出可靠的評(píng)價(jià)。P