78905975C現(xiàn)場培訓教材質譜gcms氣質聯(lián)用

1、Agilent 7890/ 5975C-GC/MSD(For 1701EA系列工作站）現(xiàn)場培訓教材安捷倫科技生命科學與化學分析儀器部培訓目的 初步了解Agilent 7890A氣相色譜儀和 5973c質譜儀的操作。正確地執(zhí)行儀器的開機、關機；初步掌握軟件中有關儀器參數設定、 分析方法的編輯、譜庫檢索及報告的打印。注意事項：1 .老化柱子分段老化。按溫度從低到高分段，程序升溫老化。這是最好的老化方法。如 HP-5柱，5-6 C/min至250C,反復數次； 再升至280 C,反復數次；接到MS上看基線，懵況。270 c以后基線提高為正常。再老化到300 c半小時。無論何種方式， 載氣必須充足。2

2、 .進樣口用灰色隔墊，減少隔墊流失。3 . GC/MS接口處必須用 vesper墊圈(5062-3508)。注意安裝方 向(大的一端朝向質譜)。4 .新柱子安裝時無方向性，但一旦使用過，再不要改變方向。保存柱子時注意將兩端密封好，避免水和空氣破壞柱子涂層儀器配置:1 .在操作系統(tǒng)桌面雙擊Config/配置圖標進入儀器配置界面2 .如下圖所示點擊所要配置的儀器配置MSD及GC :以下采用中文工作站界面，英文工作站請參考相應位置及圖標在出現(xiàn)的畫面中輸入儀器名稱、序列號等信息后，在質譜儀一欄中選擇MSD的型號，并輸入 MSD的IP地址，選擇DC極性（標注于MSD側板的中部金屬上部）；同樣配置GC后點

3、擊確定退出配置完成后桌面上應出現(xiàn)"Instrument # 1"和"Instrument # 1 Data如下圖所示Analysis ”的圖標（名稱由配置時輸入的儀器名稱決定）開機1 .打開載氣鋼瓶（He）控制閥，設置分壓閥壓力至0.5Mpa2 .打開計算機，登錄進入 Windows XP（SP2）系統(tǒng)，初次開機時建 議使用5975的小鍵盤LCPB入IP地址和子網掩碼，并使用新地 址重起，否則安裝并運行 Bootp Service3 .打開7890GC 5975Ms曲源（若MSlM空腔已無負壓則應在打開 MS匣源的同時用手向右側推真空腔的側板直至側面板被緊固 地吸

4、牢），等待儀器自檢完畢4 .在桌面雙擊"Instrument #1"圖標，進入MSDE學工作站5.在上圖I nstrument Control/儀器控制界面下，單擊 View/視圖菜單，選擇Tune and Vacuum Control/ 調諧及真空控制 進入調諧與真空控制界面，在Vacuum/真空菜單中選擇VacuumStatus/真空狀態(tài)，觀察真空泵運行狀態(tài)如果儀器真空泵配置為分子渦輪泵，狀態(tài)顯示渦輪泵轉速TurboPump Speed/渦輪泵轉速 應很快達到100 Percent ,否貝說明系 統(tǒng)有漏氣，應檢查側板是否壓正、放空閥是否擰緊、柱子是否接好；（如果儀器為5

5、973N擴散泵配置，請咨詢現(xiàn)場工程師的講解.狀態(tài)顯示壓力Pressure應很快達到100mToor左右，否則，說明系統(tǒng)有 漏氣，應進行上述檢查 ）。調諧調諧應在儀器至少開機2個小時后方可進行，若儀器長時間未開機或儀器為5975擴散泵配置，為得到好的調諧結果建議將此時間延 長至4小時。1 .首先確認打印機已連好并處于聯(lián)機狀態(tài)。2 .在操作系統(tǒng)桌面雙擊 Instrument #1圖標進入工作站系統(tǒng)。3 . 在上圖Instrument Control/ 儀器控制界面下，單擊 View/ 視圖菜單，選擇 Tune and Vacuum Control/調諧及真空控制進入調諧與真空控制界面。4,單擊Tu

6、ne/調諧菜單，選擇 Autotune/自動調諧 或Tune MSD/調 諧MSD,進行自動調諧，調諧結果自動打印。一般根據需要選擇所要進行的調諧，Autotune/自動調諧 為最大靈敏度調諧，而 Standard spectra tune/標準譜圖調諧為標準譜圖調諧， 其與Autotune/自動調諧 相比靈敏度稍低，但與譜庫中標準譜圖的 匹配度更高，適合于譜庫檢索與定性。此時儀器將自動完成整個調諧過程（約35分鐘）并將調諧結果由打印機輸出。調諧文件會 自動保存并覆蓋相應文件。如果要保存手動調諧中的參數如：修改燈絲1為燈絲2時注意要先將調諧文件保存。要手動保存或另存調諧參數，從 file/文件

7、中執(zhí)行以下操作：然后點擊view/視圖然后選擇instrument control/儀器控制 返回到儀器控 制界面。注意：自動調諧文件名為 ATUNE.U標準譜圖調諧文件名為STUNE.U其余調諧方式有各自的文件名.每次調諧之后會自動覆蓋上次相同方式的調諧文件7890A配置編輯：點擊"Instrument/儀器”菜單，選擇"GC Configuration /編輯 GC 軟配置”進入如圖所示畫面。在" Connection/連接”畫面下，輸入 GCName：如 “GC 7890”；可在 Notes 處輸入 7890A 的配置，如 “7890GC with 5975

8、C MSD "。點擊 “Get GC Configuration/ 獲彳G GC 配置”按鈕獲 取7890A的配置。ALS配置設定：點擊"Configuration/配置"按鈕點擊"ALS"子按鈕進入如下圖 所示畫面，輸入注射器的體積，如“ 10ul”；選擇溶劑清洗模式：如A, B。-若無ALS,則無此容模塊配置設定:點擊"Modules/模塊”按鈕進入下圖所示畫面，點擊下拉式箭頭,柱參數設定：點擊"Columns/色譜柱”按鈕，進入柱參數設定畫面。MH1HUNm1jFj E。 :“3 fig 曲整屏Fl.瘠a1u 

9、6;z n1I l 1 LlEl.G 1 0 lHIT15 Hill七 I4r fc-KD-iEl .m.FE*H ,Hit S" lAd* 目im川JR二小£."王1;.”1+/-"下方第一行空白按鈕處，雙擊進入" Install Column 1/從目錄中選擇色譜柱 1”畫面。Column to Local Inventory/向目錄中添加色譜柱 ”按鈕進入柱庫，從柱 子庫中選擇您安裝的柱子，如 19091S-433。然后點擊“Add Selected Column to Inventory/向目錄中添加色譜柱 安裝選定的色譜柱”。點擊該柱

10、對應下拉式箭頭選擇連接的進樣口、檢測器及加熱類型。如： Front Inlet/前進樣口、 Front Detector/前檢測器、MSD/真空、Oven/柱箱。同樣方法添加其它柱子。其它項設定點擊"Miscellaneous/其他”進入其他項設定，如：選擇壓力單位：psi;輸入柱子的最大耐高溫：如： 325c ( 19091S-433 柱)。將輔助加熱器類型配置為MSD Transfer line/MSD 傳輸線；若閥用于進樣或 DEAN SWITCH切割，在 Valve Type/閥類型 區(qū)域選擇閥 號，并選擇類型為Switching Valve/開關閥: (儀器上有幾個閥就選幾

11、個，與Time Table配合使用進行閥進樣/切換)。點擊“Ok”退出配置 畫面。數據采集方法編輯開始編輯完整方法從"Method/方法”菜單中選擇“Edit Entire Method/編輯完整方法項，如下圖所示，選中除"Data Analysis/數據分析”外的三項，點擊“OK/確定"，進入下一畫面。編輯關于該方法的注釋：然后點擊“ OK/確定”進樣器選擇如果未使用自動液體進樣器7683B ,則在“Select InjectionSource/Location/進樣方式”畫面中選擇"Manual /手動”，使用則選擇GC ALS點擊“ Ok/確定&q

12、uot;，進入下一畫面。柱模式設定如下圖，點擊圖標，進入柱模式設定畫面，在畫面中，點擊鼠標右鍵，選擇"Download method to GC/ 從GC下載方法”，再用同樣的方法選擇"Upload method from GC/ 從GC上傳方法"點擊"1" 處進行柱1設定，然后選中“ On”左邊方框；選擇控制模式，“flow/流速"或"pressure/壓力"。如： 選擇flow/流速，輸入1.2進樣器參數設定點擊""圖標，進入進樣器參數設定畫面。點擊"Front Injector/

13、前進樣器"或"Back Injector/后進樣器”按鈕，進入參數設定畫面。選 中進樣體積(如 1ul)Prelnj 一進樣前，PostInj -進樣后；Volume (ul)一清洗的體積Sample Wash 一用樣品洗針次數；Solvent A Wash -溶劑A洗針的次數；Solvent B Wash 一溶劑B洗針的次數；Pumps 一趕氣泡抽吸的次數, 5-6次左右即可。閥參數設定點擊圖標，進入閥設定畫面若閥用于進樣或 dean switch切換，在 Type區(qū)域選擇類型為 Switching Valve”,初始狀態(tài)：Off。（儀器上有幾個閥就選幾個 ， Time

14、Table配合使用進行閥進樣）。分流不分流進樣口參數設定? 點擊“'圖標，進入進樣口設定畫面。點擊“ SSL-Front/ SSL-前” 或“ SSL-Back/SSL-后” 按鈕進入毛細柱進樣口設定畫面。? 點擊“ Mode/模式”右方的下式箭頭，選擇進樣方式為不分流方式 Splitless/ 不分流"或"Split/ 分流”。? 在空白框輸入進樣口的溫度（如 250 C）,然后選中左邊的所有方 框；選擇 "Septum Purge Flow Mode/隔墊 吹掃流量模式a Standard/標準”，并輸入隔墊吹掃流量：如：3ml/min。對于特殊應用亦

15、可選擇"Switched/可切換的”，進行關閉。在“Purge Flow to Split Vent/分流出口吹掃流量 ”下邊的空白框輸 入吹掃流量（如0.75min后60ml/min ）;如圖所示，選擇分流方式 則要輸入分流比或分流流量。柱溫箱溫度參數設定點擊圖標，進入柱溫參數設定。在空白表框輸入溫度，選中"Oven Temp On/柱箱溫度為開 "左邊的方框；Ramp-升溫階次；C /min升溫速率；Hold min-保持的時間；輸入柱子的平衡時間（如1min）；下圖為一程序升溫的例子：75 c (0.5min)20 C/min190 C (3min)耳呱工憧

16、IX'節(jié)0 I/幅號 W U產« 1 LAUX參數設定點擊圖標，進行輔助參數設定。在輔組加熱區(qū)設定質譜的接口溫度如280 c時間表設定點擊圖標，進入時間表參數設定，在“ Time/時間”下方的空 白處輸入時間（如 0.01min ），點擊 Event type/ 事件類型”下方的下 拉式箭頭，選中事件（如，閥）；點擊"Position/ 位置”下方的下拉式箭頭，選中事件的位號（如閥 1）；點擊"Set point/設定值”下方的下拉式箭頭，選中事件的狀態(tài)（如 打開）。輸入完一行，依此輸入多行。點擊“OK/確定”鈕。19、信號參數設定：點擊" ”圖

17、標，進入信號參數設定畫面。點擊"Signal Source/信號源”下方下拉式箭頭， 選擇"Front Signal/ 前部信號”，本例中為FID ；點擊“ Data Rate/Min Peak Width/數據采集頻率/最小峰寬”下方的下拉式箭頭，選擇數據采集數率（如 5HZ）, 選擇“ Save Data/保存"，存儲所有的數據。點擊“，進行配置瀏覽。點擊“ OK/確定"，進入下一畫面以下采用英文工作站界面，中文工作站請參考相應位置及圖標若GC包含有其他檢測器且正在使用，在是否需要實時繪圖所使用的信號“ Display/顯示”前打鉤，然后點擊“ OK

18、/確定”，如果沒有 GC檢測器，直接按“ OK/確定”跳過此畫面。選擇所需的質譜調諧文件，然后點擊OK/確定”編輯掃描方式質譜參數點擊"Edit Scan Params/編輯掃描參數”編輯掃描參數根據分析需要設置掃描質量圍。如果對樣品不很熟悉不必分組:根據分析需要設置閾值和采樣速率設置實時繪圖參數：然后點擊“Close/關閉”完成掃描參數設定。f di| 3k：ran l3，da.i4mElerx5mMimj 用印逆目的gr TIlFSh iH SriTi% >9 阡4y Pl口后可Lur h1as±High Idwi卜 ghlJx?5mn B"rxp 2加

19、s iWumma"- cf S etttiis61nu050 T fi *f Lew Mm1* .山H國：訃叫的時T&h31X1aimtFflia1®21>Rtw Mid h*-力町xmlngnder 2 1 iTi son皿Hap編輯SIM質譜參數編輯SIM方式參數點擊“ Edit SIM Params/編輯SIM參數”編輯選擇離子參數編輯SIM參數:停留時間(dwell time)和分辨率參數適用于組里的每一個離子。在Dwell列中輸入的時間是消耗在選擇離子的采樣時間。它的缺省值是100毫秒。它適用于在一般毛細管GC峰中選擇2-3個離子的情況。如果多于3個

20、離子，使用短一點的時間(如 30或50毫秒)，編輯完SIM參數后，在“ Edit SIM Params”畫面點擊“ OK采集數據從Method/方法菜單下點擊 Run Method/運行方法 來運行一個方法。若儀器配有自動進樣器則將自動完成數據的采集若為手動進樣則依提示在GC面板上先按“ PreRun”鍵，待儀器準備好后進樣的同時按 GC面板上的“Start”鍵，以完成數據的采集。Ac(|uisiti()nOverride solzcnt delay 3.75 minutes)?Warning Overriding solve nt delay mayshorten fl lament lif

21、cilmepYesMo注意：當工作站詢問是否取消溶劑延遲時，回答NO或不選擇。如果回答YES則質譜開始采集，容易損壞燈絲。數據分析要想進行譜庫檢索您首先要購買并安裝好商業(yè)譜庫（如NIST 05譜庫）或已建立好自己的用戶譜庫。雙擊桌面上的"Instrument # 1 Data Analysis”圖標，打開 MSD 的 Data Analysis點擊下圖中圓圈中圖標調入數據文件選擇所要處理的數據文件，然后點擊“ OK/確定按下圖所示本底扣除執(zhí)行本底扣除操作。經過扣除本底的文件以原文件名保存在DATA/BSB文件夾中得到目標化合物的質譜。用右鍵雙擊化合物 TIC譜圖得到該化合物的質譜圖用

22、鼠標右鍵在目標化合物TIC譜圖區(qū)域拖拽可得到該化合物在所選時間圍的平均質譜圖，右鍵雙擊則得到單點的質譜圖。l4vk4 口碇. Rn均獸/ Kl/ LTAWilW D«ii Mt Qwirtd)"E* n9M cJmsikM(如Tfflt * rbsn Z®國H掣6 千餐n電比燈寄百口陰g星及&先科支 © BBBIBD i L ELfUil自電昌闔器司SM X 2 % E.PHPUk際Irf匚卜WF,白色 MT'國次W口 D由；）AE而UN。d 0的JUiwiniLmaftei選擇譜庫(AlUlSTlCd皿OBXttOC工按"Br

23、owse/瀏覽”在Database目錄下選擇所需的譜庫LHWQiM AnvJLl P*il»r l'宦.宜m 9 E辟卑， 峭區(qū),匕S 皿。等春 Kffi DG 士人.占黃宣。工M P.歸X即可得到該譜圖在所選中譜庫名后點擊“ OK/確定”在如圖所示的總離子流圖的峰位置雙擊右鍵得到該保留時間的質 譜圖；在得到的質譜圖區(qū)域任意位置雙擊鼠標右鍵, 選譜庫中的檢索結果忘蟲S 皿里加口田日山酊仁出盤產盤屠前篇。曲ED 立啟坨氣 施L國：3電金|E3 4度9 工將結構式加注在質譜圖上在上圖選擇合適的檢索結果，單擊“Done/完成”，然后在質譜圖的目標位置按住鼠標右鍵拖拽一個矩形即可將該

24、化合物的結構式加注到譜圖上。如果您購買了 NIST05譜庫，若在譜庫檢索過程中沒有結構式，使用 如下步驟解決：點擊"View/視圖”菜單，選擇"Parametric Retrieval/ 參數反檢索”產WX" “口ffla *2 由T iYiT； Ji J 年注15 （-4:口卬 福國）金,9通0基用制電后七用皿整豺空 B1ESEEH0 - A,ft£LkE&b- Ti 二TTTm: -T LI Lu=rT !一谷.下 rTIrlm >，會 >ViN* a二w w -二"nd mH :11',TBW«4 S

25、elect structure database/出現(xiàn)如下畫面后選擇“ Cancel/取消”點擊"Structure/結構”菜單，選擇 選擇結構庫”"晝珞辱 i ih 土的L也Idt，物白強白£器燮MSD ChemStation G1701EA E 01.00J37-JH出現(xiàn)如下畫面如果原先的文件為Dem曙庫中的結構式庫，選中該文件然后點擊"Removefrom List/從列表中刪除"，接下來點擊"Add NewFile/ 添加新文件”選中Database文件夾下的 Structures-NIST05文件夾，如下圖在Structur

26、es-NIST05 文件夾下選中STRUCT05.sdb文件，然后點擊"Open/打開“出現(xiàn)下圖后，單擊“OK/確定”，如果使用NIST 02,請選擇Molestruc 文件夾并做相應選擇。由于目前數據分析仍處于Parametric Retrieval/ 參數反檢索模式下，點擊" View/視圖”菜單然后選擇" Return to Data Analysis/返回到數據分析”返回到正常的數據分析模式。I I =rtfr d h ,fbd. I kt*- 1"日-Pf1t1bll J ,娟 y < K id*百分比報告在Method/方法下調入采集此

27、數據的方法，然后積分。T Ml,. Ml'iibi Alta .>,1 竹 4 I dtirJIi， h jHi -hih Ml 'iRilIrkMiV通過點擊"Auto Integrate/ 自動積分" 或"Integrate/ 積分"得 到積分結果，如果對自動積分的結果不滿意，可以到 Chromatogram/ 色譜圖菜單選擇 "Ms Signal IntegrationParameters/質譜信號積分參數”更改積分參數，然后選擇Integrate/ 積分”，直到得到滿意的積分結果。liipqi薄門，F(xiàn)v*r師0Ir

28、haJ Aiea Aq«t1IfihdKtd cc+ KdhJ.OJJShmJ ± rMEftirn"F1嘀nImtidThrchcidieoRdAt-na, e Siijnn TiN由笳 Suri OFF/用， Lead I Saws：一 | | 口二 5, 1 Hei?選擇百分比報告 £咨/R.vmvmll口 mm r I F-r - z . p -* |'TrHHi b (iVr*: B X在操作系統(tǒng)桌面雙擊Instrument #1圖標進入工作站系統(tǒng)進入結果顯示如下:du占4輛* INBmI E聞 JiilKriihMe占立，rk牌hi*

29、 MFu曰"1 lnUb i-hpli'UAdcrr啟事m 卡)平國口用 IT 口匹口 *走才/用 。等曹出 (II。書片.才達百田匚二/ 52J*二三F： J "-Ar” rw«i""1 frfiH tI irij 1 Jtta ： L ： !.rr.<rt>M jrb*i ibJge11" EhX4T"tq £ *通 1-K* It”VpwdiH- |Mrh Im1 -11RM4ll1 u:t 1 ik nq *rr rrwpi iwirt»l Vlrife I。卜 Mirif&#

30、39;llFiN- ： I'IW-ydliT f'r W4-IFFkIWLii.上：1 EBfKSE1«M，算內*LitHHkM-BMM ) .Hj Mflft fi rQswMUiHutfah . ir*，7-5 , ：*到安捷倫培訓部參加培訓培訓了解更多定量方式關機Tune and Vacuum Control/調諧和真空控制 界面選擇"Vent/放空"a* -si-h -iEK在跳出的畫面中點擊“ OK/確定”進入放空程序。MSD的接口溫度由7890控制，請手動降溫，或在放 空前調用一個預先編好的GC關機程序，避免燙傷！如果是渦輪泵系統(tǒng)，需要

31、等到渦輪泵轉速降至 0 percent左右，同 時離子源和四極桿溫度降至 100 c以下，大概 40分鐘后退出工作 站軟件，并依次關閉 GC MSD電源，最后關掉載氣。GC及MSD的維護與保養(yǎng)有關G吸MSD勺維護與保養(yǎng)請參閱 Agilent出版物：1、Agilent GC系統(tǒng)的維護出版號：5988-5847CHCN2、GC/M僚統(tǒng)的維護與保養(yǎng)出版號：5988-3960CHCN3、« Maintaining your Agilent GC and GC/MS Systems » 出版號: 5989-1925EN如需以上資料請致電Agilent化學分析部用戶服務中心免費專線：或

32、訪問我們的：.agilent./chem附：GC-MS化學電離源（CI）操作1 .注意事項使用純度高于99.99%的反應氣將甲烷反應氣接在 A通道；甲烷鋼瓶減壓閥輸出調至20Psi（或 0.14Mpa）軟件自動流量控制顯示的為總流量的百分比（甲烷反應氣總流量為 5ml/min ）當關閉A或B路反應氣而打開 B或A路反應氣時，系統(tǒng)設置 了 6min的延遲時間CI電離源可以在不放空的情況下當作EI電離源使用，請存為單獨的EI-CI調諧文件當從EI源換成CI源時，建議首先將系統(tǒng)設定為PCI模式。2 .化學電離源的安裝放空質譜真空系統(tǒng)，關閉儀器電源和化學工作站待質譜系統(tǒng)溫度降到接近室溫（放空設置為離子

33、源100 C）后，向左側翻轉質譜儀頂蓋，用VENT閥放空系統(tǒng)，斷開連接線，打開分析器的側板用干凈的鐐子斷開各種連接線，小心取出EI電離源，放置在電離源專用盒中從電離源專用盒中取出化學電離源，小心裝在分析器上， 用專用螺絲固定好離子源， 正確連接各種連接線， 安裝化學電 離源錐形密封帽到毛細管出口的接口上檢查各種連接線是否正確，關閉VENT閥和分析器側板打開側板后的所有操作均要戴干凈的手套進行，換下來的電離源 應放置在專用盒中，避免污染。3 .化學電離源的操作打開載氣、反應氣開關，確保各個接口不漏氣；打開GC MS汕源開關，（將真空腔側板向里推，防止側板漏氣）；打開MS化學工作站，進入調諧和真空

34、控制系統(tǒng)，PUMPDOWN質譜系統(tǒng)，依照以下步驟進行。確認CI接口處的彈簧已經放入，確認管線已經連接，確認Purge的時間。選擇調諧文件4.調諧調諧前烘烤整個系統(tǒng)至少兩小時，對NCI ,為獲得最好靈敏度，需要24小時；PCINCI離子源300 C;150 c四極桿150 c150 c調諧設置：如用甲烷做反應氣，調用 PCICH4.U調諧文件， 待系統(tǒng)達到穩(wěn)定態(tài)后，進入Tune and Vacuum Control界面，在 SETUP畫面依次進行各步驟，在 CI Tune Wizard 接受各步驟的缺省值， 依據您要分析的化合物的m/z選擇要優(yōu)化的質量數，以提高其靈敏度。Inst rum ent #1 Tune - PCI modeFile getup Tune Vacuum ExecuteCI Tune WizardMethane Flow SetupMethane Pre-TuneMethane Row AdjustMethane Flow SurveySet CI ValvesPurge LineAdmit CL Reagent 5hi_A 口FF Ci