內(nèi)毒素實(shí)驗(yàn)?zāi)z法

1、 細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 （凝膠法）（凝膠法） 蘇州大學(xué) 衛(wèi)生與環(huán)境技術(shù)研究所 內(nèi)內(nèi) 容容v基本概念基本概念v實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法v操作注意事項(xiàng)操作注意事項(xiàng)細(xì)菌內(nèi)毒素細(xì)菌內(nèi)毒素v 細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的產(chǎn)物細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的產(chǎn)物,它主它主要化學(xué)成分是脂多糖。細(xì)菌在生活狀態(tài)下不會釋放要化學(xué)成分是脂多糖。細(xì)菌在生活狀態(tài)下不會釋放出來，只有當(dāng)細(xì)菌死亡后才會表現(xiàn)出毒性。出來，只有當(dāng)細(xì)菌死亡后才會表現(xiàn)出毒性。一、概念及相關(guān)知識一、概念及相關(guān)知識v熱原反應(yīng)：病人在靜脈給藥熱原反應(yīng)：病人在靜脈給藥15分鐘后發(fā)生冷感、分鐘后發(fā)生冷感、寒戰(zhàn)、發(fā)熱、頭痛、惡心、嘔吐、昏迷、休克等寒戰(zhàn)

2、、發(fā)熱、頭痛、惡心、嘔吐、昏迷、休克等癥狀。癥狀。v熱原：任何可以導(dǎo)致肌體發(fā)熱的物質(zhì)。熱原：任何可以導(dǎo)致肌體發(fā)熱的物質(zhì)。v機(jī)理：外源性熱原質(zhì)通過內(nèi)源性熱原質(zhì)起作用。機(jī)理：外源性熱原質(zhì)通過內(nèi)源性熱原質(zhì)起作用。外源性外源性熱原質(zhì)熱原質(zhì)吞噬性吞噬性白細(xì)胞白細(xì)胞內(nèi)源性內(nèi)源性熱原質(zhì)熱原質(zhì)體溫調(diào)節(jié)體溫調(diào)節(jié)中心中心發(fā)發(fā) 熱熱新蛋白新蛋白合成合成新新mRNA翻譯翻譯v1942年，美國藥典首次收載熱原檢查法，中年，美國藥典首次收載熱原檢查法，中國藥典自第一版（國藥典自第一版（1953年版）起收載。年版）起收載。v所有注射用藥品（肌肉注射、靜脈注射）都所有注射用藥品（肌肉注射、靜脈注射）都要經(jīng)過熱原檢查。要經(jīng)過熱

3、原檢查。v熱原檢查法的局限性：熱原檢查法的局限性： 1、重現(xiàn)性差。、重現(xiàn)性差。 2、對藥物引起的增加、抑制作用無法控制。、對藥物引起的增加、抑制作用無法控制。 3、不同細(xì)菌產(chǎn)生的熱原質(zhì)的致熱域有差別。、不同細(xì)菌產(chǎn)生的熱原質(zhì)的致熱域有差別。 4、非定量反應(yīng)。、非定量反應(yīng)。v雖然不排除有其他熱原物質(zhì)存在，但細(xì)菌內(nèi)雖然不排除有其他熱原物質(zhì)存在，但細(xì)菌內(nèi)毒素是最主要的熱原物質(zhì)。毒素是最主要的熱原物質(zhì)。v細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)： 肽聚糖肽聚糖 脂蛋白脂蛋白革蘭氏陽性菌革蘭氏陽性菌 革蘭氏陰性菌革蘭氏陰性菌 外膜外膜 磷壁酸磷壁酸 脂多糖脂多糖v細(xì)菌內(nèi)毒素：革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁外膜中細(xì)菌內(nèi)毒素：革蘭氏陰性

4、細(xì)菌細(xì)胞壁外膜中的脂多糖（的脂多糖（LPS）。當(dāng)細(xì)胞壁外膜結(jié)構(gòu)完整）。當(dāng)細(xì)胞壁外膜結(jié)構(gòu)完整時不具備生物活性，只有當(dāng)細(xì)菌死亡，脂多時不具備生物活性，只有當(dāng)細(xì)菌死亡，脂多糖脫落才顯示出內(nèi)毒素活性。糖脫落才顯示出內(nèi)毒素活性。v脂多糖結(jié)構(gòu)：多糖脂多糖結(jié)構(gòu)：多糖O抗原核心多糖抗原核心多糖類脂類脂A致熱活性部分致熱活性部分細(xì)菌內(nèi)毒素的生物活性細(xì)菌內(nèi)毒素的生物活性v 1、致熱性。、致熱性。 2、致死性毒性。、致死性毒性。 3、白細(xì)、白細(xì)胞減少。胞減少。 4、激活凝血系統(tǒng)。、激活凝血系統(tǒng)。 5、降低血壓，、降低血壓，休克。休克。 6、 Shwartzman反應(yīng)。反應(yīng)。 7、刺激淋、刺激淋巴細(xì)胞有絲分裂，等等巴

5、細(xì)胞有絲分裂，等等 。細(xì)菌內(nèi)毒素的耐熱性細(xì)菌內(nèi)毒素的耐熱性v 細(xì)菌內(nèi)毒素具很強(qiáng)的耐熱性，一般的高壓滅菌細(xì)菌內(nèi)毒素具很強(qiáng)的耐熱性，一般的高壓滅菌不能去除細(xì)菌內(nèi)毒素，需不能去除細(xì)菌內(nèi)毒素，需250至少至少30分鐘以上的分鐘以上的干熱滅菌才能使其滅活干熱滅菌才能使其滅活 。 實(shí)驗(yàn)用器具的處理實(shí)驗(yàn)用器具的處理 內(nèi)毒素試驗(yàn)中使用的器皿都要經(jīng)過處理去除可內(nèi)毒素試驗(yàn)中使用的器皿都要經(jīng)過處理去除可能存在的外源性內(nèi)毒素。能存在的外源性內(nèi)毒素。v 耐高溫的玻璃器皿等置于電熱干烤箱內(nèi)耐高溫的玻璃器皿等置于電熱干烤箱內(nèi)180干烤至少干烤至少2h或者或者250干烤至少干烤至少30分鐘；分鐘；v 塑料器皿置于塑料器皿置于

6、30雙氧水中浸泡雙氧水中浸泡4h，再用細(xì)，再用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水充分沖洗，菌內(nèi)毒素檢查用水充分沖洗，60烘干備用。烘干備用。 細(xì)菌內(nèi)毒素的單位細(xì)菌內(nèi)毒素的單位v內(nèi)毒素的量值：1、內(nèi)毒素單位（EU） 1982年FDA將當(dāng)時美國代號為EC2的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)品規(guī)定為5EU/ng。1983年內(nèi)毒素單位（EU）被USP正式引用。2、國際單位（IU） WHO先后兩次組織協(xié)作標(biāo)定，建立內(nèi)毒素國際標(biāo)準(zhǔn)品，其中第二批內(nèi)毒素國際標(biāo)準(zhǔn)品適用于所有內(nèi)毒素檢查法，且明確1IU1EU。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法 凝膠法凝膠法 濁度法濁度法 光度法光度法 顯色基質(zhì)法顯色基質(zhì)法 重現(xiàn)性好重現(xiàn)性好 能定量能定量 能控制藥物的

7、增強(qiáng)能控制藥物的增強(qiáng)/抑制干擾抑制干擾 操作簡便。節(jié)省時間操作簡便。節(jié)省時間方法方法分類分類方法方法特點(diǎn)特點(diǎn)細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法概念細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法概念v 本方法是利用鱟試劑檢測由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌本方法是利用鱟試劑檢測由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法一種方法 。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法包括凝膠法和光度測定法，。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法包括凝膠法和光度測定法，由于凝膠法操作簡單快捷、靈敏度高，并且藥典規(guī)定當(dāng)不同由于凝膠法操作簡單快捷、靈敏度高，并且藥典規(guī)定當(dāng)不同試驗(yàn)方法的結(jié)果存在爭議時，除另有規(guī)定外，以凝膠

8、法為準(zhǔn)，試驗(yàn)方法的結(jié)果存在爭議時，除另有規(guī)定外，以凝膠法為準(zhǔn)，所以凝膠法被廣泛應(yīng)用。所以凝膠法被廣泛應(yīng)用。v鱟：一種古老的棲身于沿海的海洋生物，節(jié)鱟：一種古老的棲身于沿海的海洋生物，節(jié)肢動物門，在我國主要分布于浙江、福建及肢動物門，在我國主要分布于浙江、福建及兩廣的沿海一帶。兩廣的沿海一帶。v鱟試劑：利用鱟血液中的變性細(xì)胞，經(jīng)裂解鱟試劑：利用鱟血液中的變性細(xì)胞，經(jīng)裂解液和機(jī)械方式促使細(xì)胞破裂而提取到的一種液和機(jī)械方式促使細(xì)胞破裂而提取到的一種細(xì)胞溶解物，能與極微量的細(xì)菌內(nèi)毒素形成細(xì)胞溶解物，能與極微量的細(xì)菌內(nèi)毒素形成特異凝膠反應(yīng)，反應(yīng)的速度和凝膠的堅(jiān)固程特異凝膠反應(yīng)，反應(yīng)的速度和凝膠的堅(jiān)固程度

9、與內(nèi)毒素濃度有關(guān)，是體外檢測內(nèi)毒素的度與內(nèi)毒素濃度有關(guān)，是體外檢測內(nèi)毒素的敏感試劑。敏感試劑。凝膠法概念凝膠法概念v 凝膠法是通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的凝膠法是通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。原理來檢測或半定量內(nèi)毒素的方法。鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)機(jī)理鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)機(jī)理內(nèi)毒素內(nèi)毒素C因子因子活化的活化的C因子因子凝膠凝膠B因子因子凝固酶原凝固酶原凝固酶凝固酶活化的活化的B因子因子凝固蛋白原凝固蛋白原鱟凝血系統(tǒng)酶聯(lián)反應(yīng)鱟凝血系統(tǒng)酶聯(lián)反應(yīng)二、細(xì)菌內(nèi)毒素凝膠法二、細(xì)菌內(nèi)毒素凝膠法v實(shí)驗(yàn)程序?qū)嶒?yàn)程序1、試驗(yàn)準(zhǔn)備：試劑、儀器及用具、試驗(yàn)準(zhǔn)備：試劑、儀器及用具2、選擇鱟

10、試劑靈敏度，計(jì)算樣品稀釋度、選擇鱟試劑靈敏度，計(jì)算樣品稀釋度3、鱟試劑靈敏度復(fù)核、鱟試劑靈敏度復(fù)核4、供試品干擾試驗(yàn)（新藥或新方法）、供試品干擾試驗(yàn)（新藥或新方法）5、供試品內(nèi)毒素限量檢查、供試品內(nèi)毒素限量檢查凝膠法中用到的儀器 1. 超凈工作臺超凈工作臺v 凝膠法中用到的儀器v2. 恒溫培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)箱 v孵育樣品浸提液以及培養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果。孵育樣品浸提液以及培養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)果。凝膠法中用到的儀器v3.干烤箱干烤箱 v 用于實(shí)驗(yàn)用耐高溫器皿的去熱源，溫度范圍要求至少300凝膠法中用到的儀器v4. 移液器和無熱源的移液尖（或者去熱源的移液器和無熱源的移液尖（或者去熱源的刻度吸管）刻度吸管）v 5. 計(jì)時

11、器、漩渦混合器、電子天平等計(jì)時器、漩渦混合器、電子天平等凝膠法中用到的器皿器具分類器具名稱反應(yīng)試管玻璃試管（外徑1075mm）、試管架、小三角瓶或磨口瓶移液器具刻度吸管及洗耳球或移液器及無熱原吸頭其他酒精燈、脫脂棉球、鑷子、剪刀、砂輪、封口膜、記號筆凝膠法中用到的試劑v 1）鱟試劑）鱟試劑：具有國家頒發(fā)的批準(zhǔn)文號v 2）細(xì)菌內(nèi)毒素工作品）細(xì)菌內(nèi)毒素工作品v 3）細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（內(nèi)毒素含量小于）細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水（內(nèi)毒素含量小于0.015EU/ml的無菌水）的無菌水） v 4）75乙醇乙醇鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)v 當(dāng)使用新批號的鱟試劑或試驗(yàn)條件發(fā)生了任何當(dāng)使用新批號的鱟試劑

12、或試驗(yàn)條件發(fā)生了任何可能影響檢驗(yàn)結(jié)果的改變時，應(yīng)進(jìn)行鱟試劑靈敏度可能影響檢驗(yàn)結(jié)果的改變時，應(yīng)進(jìn)行鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)。復(fù)核試驗(yàn)。 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)v 根據(jù)鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值（根據(jù)鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值（）,將細(xì)菌內(nèi)毒將細(xì)菌內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解，在旋渦素工作標(biāo)準(zhǔn)品用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水溶解，在旋渦混合器上混勻混合器上混勻15分鐘分鐘, 然后制成然后制成2、1、0.5和和0.25四個濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每稀釋一步均四個濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每稀釋一步均應(yīng)在旋渦混合器上混勻應(yīng)在旋渦混合器上混勻30秒鐘。秒鐘。鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)v 取復(fù)

13、溶后的取復(fù)溶后的0.1ml/支規(guī)格的鱟試劑原安瓿支規(guī)格的鱟試劑原安瓿18支，支，其中其中16管分別加入管分別加入0.1ml不同濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶不同濃度的內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液，每一個內(nèi)毒素濃度平行做液，每一個內(nèi)毒素濃度平行做4管；另外管；另外2管各加入管各加入0.1ml細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對照。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水作為陰性對照。 v 將試管中溶液輕輕混勻后，封閉管口，垂直放將試管中溶液輕輕混勻后，封閉管口，垂直放入入371的適宜恒溫器中，保溫的適宜恒溫器中，保溫60分鐘分鐘2分鐘。分鐘。 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)v結(jié)果觀察結(jié)果觀察 v 將試管從恒溫器中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)將試管從恒

14、溫器中輕輕取出，緩緩倒轉(zhuǎn)180時，若管時，若管內(nèi)形成凝膠，且不從管壁滑脫者為陽性；若不形成凝膠，或內(nèi)形成凝膠，且不從管壁滑脫者為陽性；若不形成凝膠，或形成凝膠但倒轉(zhuǎn)形成凝膠但倒轉(zhuǎn)180后從管壁滑脫者為陰性。后從管壁滑脫者為陰性。v 保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到振動造成假陰性結(jié)果。保溫和拿取試管過程應(yīng)避免受到振動造成假陰性結(jié)果。 鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)鱟試劑靈敏度復(fù)核試驗(yàn)v 若最大濃度若最大濃度2.0管均為陽性，最低濃度管均為陽性，最低濃度0.25管管均為陰性，陰性對照管為陰性，試驗(yàn)方為有效。均為陰性，陰性對照管為陰性，試驗(yàn)方為有效。計(jì)算計(jì)算反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何平均值，即為鱟試劑靈反應(yīng)終點(diǎn)濃度的幾何

15、平均值，即為鱟試劑靈敏度的測定值（敏度的測定值（c），計(jì)算方法見中國藥典。，計(jì)算方法見中國藥典。v 反應(yīng)終點(diǎn)濃度是指系列遞減的內(nèi)毒素濃度中最反應(yīng)終點(diǎn)濃度是指系列遞減的內(nèi)毒素濃度中最后一個呈陽性結(jié)果的濃度。后一個呈陽性結(jié)果的濃度。v 當(dāng)當(dāng)c在在0.52.0（包括（包括0.5和和2.0）時，方）時，方可用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，并以標(biāo)示靈敏度可用于細(xì)菌內(nèi)毒素檢查，并以標(biāo)示靈敏度為該批為該批鱟試劑的靈敏度。鱟試劑的靈敏度。 凝膠法的試驗(yàn)步驟凝膠法的試驗(yàn)步驟v 下面我們結(jié)合中國藥典下面我們結(jié)合中國藥典2010、 GB 14233.2醫(yī)醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法用輸液、輸血、注射器具檢驗(yàn)方法 以及以及G

16、B 15810一次性無菌注射器一次性無菌注射器 來學(xué)習(xí)具體試驗(yàn)方法。來學(xué)習(xí)具體試驗(yàn)方法。 實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟v 浸提介質(zhì)（細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水）體積計(jì)算公示：浸提介質(zhì)（細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水）體積計(jì)算公示：v V浸提介質(zhì)體積，單位為（浸提介質(zhì)體積，單位為（ml）；）；v L產(chǎn)品細(xì)菌內(nèi)毒素限值（該產(chǎn)品允許含有的產(chǎn)品細(xì)菌內(nèi)毒素限值（該產(chǎn)品允許含有的細(xì)菌內(nèi)毒素的量），單位為細(xì)菌內(nèi)毒素的量），單位為EU/件；件；v 鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值，單位為鱟試劑靈敏度的標(biāo)示值，單位為EU/ml。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟v樣品處理方法：樣品處理方法：v a）管類和容器類器具用細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水浸泡器具內(nèi)腔，在（371）恒溫箱中孵育

17、不少于1h，取浸提液進(jìn)行試驗(yàn)；v b）小型配件或?qū)嶓w類樣品置無熱源玻璃器皿內(nèi)，加入細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水振蕩數(shù)次，在（371）恒溫箱中孵育不少于1h，取浸提液進(jìn)行試驗(yàn)。v 制備的供試液儲存不應(yīng)該超過2h。一般要求供試液的PH值在6.08.0之間，如不在該范圍內(nèi)，可用鱟試劑廠家提供的PH緩沖液調(diào)節(jié)浸提液的PH值。實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟結(jié)果觀察結(jié)果觀察 B、C溶液的反應(yīng)管必須要陽性，就是輕輕倒轉(zhuǎn)溶液的反應(yīng)管必須要陽性，就是輕輕倒轉(zhuǎn)180度過來，鱟試劑安瓿里的反應(yīng)溶液形成了凝膠體，度過來，鱟試劑安瓿里的反應(yīng)溶液形成了凝膠體，不滑落。不滑落。 而而D溶液，就是細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水那溶液，就是細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水那2

18、管，管，必須要陰性，必須要陰性，3個條件都滿足，就說明試驗(yàn)結(jié)果是可個條件都滿足，就說明試驗(yàn)結(jié)果是可信的。最后看信的。最后看A溶液的反應(yīng)情況：溶液的反應(yīng)情況：v 陽性就說明原套器具每件大于陽性就說明原套器具每件大于20EU，判定為不，判定為不合格；合格；v 陰性就說明小于陰性就說明小于20EU,結(jié)果是合格的；結(jié)果是合格的； v 1管陽性、管陽性、1管陰性則要重新復(fù)查，復(fù)試時，溶管陰性則要重新復(fù)查，復(fù)試時，溶液液A需做需做4支平行管，若所有平行管均為陰性則判斷支平行管，若所有平行管均為陰性則判斷合格；否則判斷為不合格。合格；否則判斷為不合格。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)v1. 每批鱟試劑在用于試驗(yàn)前首先要進(jìn)行

19、靈敏度的每批鱟試劑在用于試驗(yàn)前首先要進(jìn)行靈敏度的復(fù)核試驗(yàn)；復(fù)核試驗(yàn)；v 2. 安瓿開啟前應(yīng)先用砂石劃痕安瓿開啟前應(yīng)先用砂石劃痕(不管是色點(diǎn)或包環(huán)不管是色點(diǎn)或包環(huán)易折安瓿易折安瓿)，用手半拉半掰將頸部折斷，千萬不能用，用手半拉半掰將頸部折斷，千萬不能用鑷子敲擊，防止碎玻屑掉入安瓿。鑷子敲擊，防止碎玻屑掉入安瓿。 v3. 在鱟試劑的溶解、樣品的稀釋及加入時，取樣均在鱟試劑的溶解、樣品的稀釋及加入時，取樣均應(yīng)準(zhǔn)確，緩緩加入避免氣泡。應(yīng)準(zhǔn)確，緩緩加入避免氣泡。 v4. 保溫過程中不可隨時取出觀察，防止形成的凝膠保溫過程中不可隨時取出觀察，防止形成的凝膠受到振動后變形而誤判為陰性。受到振動后變形而誤判為

20、陰性。 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)v5. 凍干的鱟試劑應(yīng)存放在凍干的鱟試劑應(yīng)存放在2-8下；避免長時間放下；避免長時間放置在高于置在高于25的溫度條件下。已復(fù)溶的鱟試劑在間的溫度條件下。已復(fù)溶的鱟試劑在間歇使用過程中最好放在歇使用過程中最好放在2-8的冰箱里，可存放的冰箱里，可存放24小時，在小時，在-20以下，可存放四個星期，鱟試劑只以下，可存放四個星期，鱟試劑只能凍融一次。能凍融一次。 三、操作注意事項(xiàng)三、操作注意事項(xiàng)v試驗(yàn)前準(zhǔn)備：試驗(yàn)前準(zhǔn)備：1、玻璃器具應(yīng)規(guī)范化，便于除熱原、計(jì)量準(zhǔn)確、玻璃器具應(yīng)規(guī)范化，便于除熱原、計(jì)量準(zhǔn)確、清洗操作方便。清洗操作方便。洗凈洗凈 去污去內(nèi)毒素去污去內(nèi)毒素 去洗滌劑去

21、洗滌劑 精洗精洗 除外源性熱原：除外源性熱原：250250 干烤至少干烤至少1小時。小時。2、盡量用鋁制器具和不銹鋼用具，且用蒸餾水、盡量用鋁制器具和不銹鋼用具，且用蒸餾水沖洗后沖洗后250250 干烤至少干烤至少1小時。小時。3、用于內(nèi)毒素檢測的稀釋試管最好用玻璃試管；、用于內(nèi)毒素檢測的稀釋試管最好用玻璃試管；塑料用具只能為一次性且保證無內(nèi)毒素。塑料用具只能為一次性且保證無內(nèi)毒素。v實(shí)驗(yàn)環(huán)境：最好在潔凈室或潔凈工作臺內(nèi)進(jìn)實(shí)驗(yàn)環(huán)境：最好在潔凈室或潔凈工作臺內(nèi)進(jìn)行，保證環(huán)境溫度、濕度及通風(fēng)穩(wěn)定。行，保證環(huán)境溫度、濕度及通風(fēng)穩(wěn)定。v實(shí)驗(yàn)人員：用適宜的洗滌劑洗手，用實(shí)驗(yàn)人員：用適宜的洗滌劑洗手，用7575酒酒精棉球消毒，戴工作帽和口罩。精棉球消毒，戴工作帽和口罩。v實(shí)驗(yàn)過程：實(shí)驗(yàn)過程：1、內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)嚴(yán)格按要求低溫保存；、內(nèi)毒素工作標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)嚴(yán)格按要求低溫保存；工