病原微生物標(biāo)本采集、運(yùn)送

1、【精品文檔】如有侵權(quán)，請聯(lián)系網(wǎng)站刪除，僅供學(xué)習(xí)與交流病原微生物標(biāo)本采集、運(yùn)送.精品文檔.病原微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集、運(yùn)送操作規(guī)程正確的標(biāo)本采集，運(yùn)送，保存和處理對于微生物檢驗(yàn)工作質(zhì)量至關(guān)重要，為了準(zhǔn)確檢出病原菌，避免漏檢與誤診，臨床醫(yī)護(hù)人員和實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握微生物標(biāo)本的選擇，采集，運(yùn)送，保存及處理的一般原則。一、標(biāo)本采集的一般原則1.早期采集采集時間最好在病程早期，急性期，且必須在使用抗菌藥物之前采集，確保病原菌的檢出。2.無菌操作采集標(biāo)本時應(yīng)盡量減少或避免感染部位附近或皮膚黏膜正常菌群的污染，使病原菌與正常菌群混淆，造成臨床誤診。采集的標(biāo)本應(yīng)存放在無菌容器內(nèi)，容器不能使用消毒劑處理，標(biāo)本中也

2、不能添加防腐劑，以免降低病原菌的檢出。3.適量的標(biāo)本標(biāo)本量過少可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。4.適當(dāng)?shù)牟杉椒▽τ趨捬蹙?，需氧菌或兼性厭氧菌的采集方法是不同的，用于厭氧菌培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡量用注射器采集抽取物，室溫保存，不能冷藏和冷凍。5.盛放標(biāo)本的容器采集標(biāo)本應(yīng)存放在無菌，防漏，應(yīng)帶有螺旋蓋的容器內(nèi)。二、標(biāo)本的運(yùn)送1.標(biāo)本采集后立即送檢，若有延遲也應(yīng)在2小時內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，否則會影響病原菌的檢出，一般性的細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本若需延遲送檢時，應(yīng)置于4度冰箱保存，且不能超過24小時。2.臨床標(biāo)本最佳運(yùn)送時間取決于標(biāo)本的量，少量液體（小于1ml）或組織（小于1cm3）應(yīng)在1530分鐘內(nèi)送到實(shí)驗(yàn)室，較多量的標(biāo)本置于運(yùn)送培養(yǎng)

3、基中可放1224小時，厭氧培養(yǎng)標(biāo)本原則上是床邊接種，如延遲送檢，需保存在厭氧運(yùn)送培養(yǎng)基中，室溫保存，不得超過24小時。三、不同標(biāo)本的采集，運(yùn)送（一）血液標(biāo)本采集，運(yùn)送1.血培養(yǎng)指針征當(dāng)患者出現(xiàn)：發(fā)熱（大于38度）或低溫（小于36度），寒戰(zhàn)，白細(xì)胞增多,皮膚黏膜出血，休克，多器官衰竭，血壓降低，c反應(yīng)蛋白升高及呼吸加快，血液病患者出現(xiàn)粒細(xì)胞減少，血小板減少等，具備上述一種或幾種體征時，臨床懷疑菌血癥應(yīng)采集血液標(biāo)本進(jìn)行血培養(yǎng)，對入院危重感染患者應(yīng)在未使用抗菌藥物治療前，及時做血培養(yǎng)。2.對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集套以上血培

4、養(yǎng)標(biāo)本。成年患者：推薦同時采集套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本），采血量每瓶不少于5ml;嬰幼兒患者：推薦同時采集次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本,采血量每瓶不少于2ml。（少于病人總血容量的1%）.在采取血培養(yǎng)后的25天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。兩個例外：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和金黃色葡萄球菌菌血癥。 3.血標(biāo)本采集的量是影響檢出率的最重要的因素。檢出率與采血量成比例增長，每增加1ml的血液，病原菌的檢出率就會相應(yīng)增加。兒童患者血液中病原菌濃度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人。采用一對（需氧瓶+厭氧瓶）組合，比采用二個需氧瓶的組合可檢出更多的葡萄球菌、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌。采血量不

5、能滿足推薦的量時，應(yīng)首先滿足需氧瓶的需要。 推薦從外周靜脈采集血液標(biāo)本,不推薦靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本以幫助陽性結(jié)果的判讀。4.血標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)在采血之前，血培養(yǎng)瓶的橡皮塞需使用75%酒精消毒并干燥。然后再進(jìn)行穿刺部位的皮膚消毒。嚴(yán)格按照“酒精、含碘消毒劑、酒精”的消毒步驟操作，并等待足夠的消毒時間。嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手接觸靜脈，除非帶有無菌手套.不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭;采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時之內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室,血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏或冷凍。(二)痰培養(yǎng)標(biāo)本采集

6、，運(yùn)送1.痰培養(yǎng)指征上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，會咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子標(biāo)本培養(yǎng)。下呼吸道感染：凡是咳嗽，咳痰，痰呈膿性，粘稠或血性等都可采集痰標(biāo)本。2.標(biāo)本的采集采集前囑咐病人先用清水漱口，摘去牙托，因唾液中口咽部定植菌的濃度可達(dá)108-109/ml，去除表面的菌群。教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液。在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后12h內(nèi)送往實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo);無痰可用35NaCl 5ml霧吸約5min導(dǎo)痰；也可用物理療法、體位引流、鼻導(dǎo)管抽吸等方法取痰。3.正常的痰標(biāo)本低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞小于25個，白細(xì)胞大于10個。如果

7、低倍視野下鱗狀上皮細(xì)胞大于25個，白細(xì)胞小于10個應(yīng)不做或僅在特殊要求時做培養(yǎng)，如做培養(yǎng)，報(bào)告中注明“鏡檢結(jié)果表明標(biāo)本口咽分泌物污染明顯”。4痰培養(yǎng)方法的局限性多數(shù)引起肺炎的病原菌不能培養(yǎng)出，如病毒，軍團(tuán)菌，衣原體等。影響因素很多：如黏液包裹、定植菌污染。建議痰培養(yǎng)同時做血培養(yǎng)和痰涂片鏡檢。5.注意事項(xiàng)常規(guī)的痰培養(yǎng)需在2小時內(nèi)送檢，若懷疑嗜血桿菌，肺炎鏈球菌感染時必需隨留隨送;標(biāo)本中不能混入唾液與鼻咽分泌物等。（三）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集，運(yùn)送1.尿培養(yǎng)指征尿路感染，腎結(jié)核，泌尿系結(jié)石，膀胱排空功能受損或前列腺增生等患者，出現(xiàn)尿頻，尿急，尿痛等膀胱刺激癥狀，肉眼膿尿或血尿，尿常規(guī)檢查有白細(xì)胞或亞硝酸鹽

8、陽性，不明原因的發(fā)熱，尿道口有膿性分泌物等癥狀，需采集尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢。2.標(biāo)本的采集清潔中段尿液，囑咐患者用肥皂水清洗，棄去開始流出的尿液，以沖刷尿道口的細(xì)菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿；導(dǎo)尿管尿液，留置導(dǎo)管尿液標(biāo)本常通過專門的采樣端口采集，不能把導(dǎo)尿管與尿袋拔開后收集尿液，采樣端口用酒精消毒；必要時，可先夾住導(dǎo)尿管但不能超過30分鐘；將注射器針頭插入采樣端口，抽吸出尿液；注入無菌杯或試管中。膀胱穿刺尿，無菌操作，用無菌注射器刺入膀胱抽取510ml尿液送檢，主要用于厭氧菌的培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰幼兒標(biāo)本的采集，此法可避免尿液標(biāo)本的污染。3.標(biāo)本的采集量一般成人采集10-15ml,嬰幼兒不得

9、少于1ml。診斷癥狀明顯的病人（如尿急、尿頻、尿痛），一份標(biāo)本就已足夠，治療48-72小時后再采集第二份標(biāo)本。對于癥狀不明顯的病人，需采集2-3份標(biāo)本。懷疑腎結(jié)核時，應(yīng)連續(xù)3天采集晨尿。4.室溫都有利于病原菌和污染菌生長繁殖，標(biāo)本采集后立即送檢和接種，室溫下存放不能超過2小時，（夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏），4-8度冷藏保存時間也不能超過24小時，冷藏的尿液不能用于淋球菌的培養(yǎng)。5注意事項(xiàng)必須無菌操作，采用帶蓋防滲漏的無菌杯收集，多次收集或24小時尿不能用作培養(yǎng)。集尿袋內(nèi)的尿液不能用作培養(yǎng)。導(dǎo)尿管末端的尿液也不能用于培養(yǎng)，很難避免沒有尿道菌群污染。在使用抗菌藥物前留取標(biāo)本，尿液中不能加任何防

10、腐劑或消毒劑，抑制細(xì)菌的生長。（四）糞便標(biāo)本采集，運(yùn)送1.送檢指征當(dāng)患者出現(xiàn)腹瀉，大便每天大于或等于3次，糞便的性狀異常，可為稀便，水樣便，粘液便，膿血便或血便，伴有惡心，嘔吐，食欲不振，發(fā)熱，腹痛及全身不適等，大便鏡檢白細(xì)胞大于等于5個每高倍視野，抗菌藥物治療后的腹瀉等。 2.標(biāo)本的采集方法，時間與量盡可能在發(fā)病早期（急性期）或應(yīng)用抗菌藥物治療之前，采集新鮮的糞便，懷疑沙門菌感染時，應(yīng)在發(fā)病2周以后采集。自然排便法，排便后，挑取有膿血或粘液部位的大便，液狀糞便取絮狀物盛于無菌的容器內(nèi)；直腸拭子采集法，用于排便困難的患者或嬰幼兒。一般用拭子采集大于2g的標(biāo)本送檢，若標(biāo)本為水樣，采集大

11、于2ml的標(biāo)本于無菌容器中送檢。3標(biāo)本的運(yùn)送與保存標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢，室溫條件下不能超過2小時，如不能及時送檢可加入ph7.0磷酸鹽甘油緩沖保存液中或?qū)ｉT的大便運(yùn)送培養(yǎng)基中置4度冰箱保存，但不能超過24小時。高度懷疑霍亂弧菌感染的標(biāo)本必須符合特殊標(biāo)本的安全要求。4.注意事項(xiàng)最好在用藥前，采集新鮮的標(biāo)本盛裝在無菌容器內(nèi)，立即送檢，提高陽性檢測結(jié)果。厭氧菌的培養(yǎng)盡量避免與空氣接觸和正常的菌群污染。(五)膿液及創(chuàng)傷感染分泌物標(biāo)本的采集及運(yùn)送1.送檢指征凡是當(dāng)患者有外傷感染，術(shù)后切口感染，導(dǎo)管感染，臍帶殘端感染，有膿液和分泌物時，應(yīng)采集標(biāo)本培養(yǎng)。 2.標(biāo)本的采集時間和方法在使用抗生素前或停

12、用藥12天以后，或使用下一次抗生素前采集，對膿腫性分泌物應(yīng)先用生理鹽水或75%的酒精沖洗潰瘍表面滲出物，盡可能抽取膿液于無菌杯內(nèi)送檢。對于封閉性膿腫時，應(yīng)無菌操作抽取膿液310ml于無菌試管內(nèi)或血培養(yǎng)瓶內(nèi)送檢，懷疑厭氧菌感染時，應(yīng)做床旁接種或注入?yún)捬跗績?nèi)（310ml）送檢，最佳方法是采集組織送檢。3.標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后應(yīng)于2小時內(nèi)送微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理，若不能及時送檢，需氧培養(yǎng)的標(biāo)本除對環(huán)境敏感的淋病奈瑟菌，腦膜炎奈瑟菌和流感嗜血桿菌外，可保存在4度冰箱中，但保存時間不能超過24小時;厭氧培養(yǎng)時，需用厭氧瓶或厭氧袋在室溫下保存，但不能超過24小時。 4.注意事項(xiàng)盡可能在用抗生素前采集，若患者也用藥，應(yīng)在檢驗(yàn)單上注明抗菌藥名，并在下次用藥前采集；對于開放性的傷口，采集前應(yīng)先除去表面污染菌，以防帶入與感染無關(guān)的皮膚定值菌。干燥結(jié)痂的標(biāo)本一般不做培養(yǎng)，除非有滲出物。采集標(biāo)本時應(yīng)無菌操作。（六）穿刺液標(biāo)本的采集與運(yùn)送穿刺液主要包括腦脊液，胸腹水，心包液，膽汁，關(guān)節(jié)液及鞘膜液，在正常標(biāo)本中，上述液體是無菌的，