臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)復(fù)習(xí)題

1、臨床分子生物學(xué)檢驗(yàn)練習(xí)題及答案一，名詞解釋1、基因能夠表達(dá)和產(chǎn)生蛋白質(zhì)和RNA的DNA序列,是決定遺傳性狀的功能單位.2、端粒：以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒.該結(jié)構(gòu)br是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細(xì)胞染色體末端存在.3、啟動(dòng)子：是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列.4、增強(qiáng)子：位于真核基因中遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)，能明顯增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄效率的特殊DNA序列.它可位于被增強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄基因的上游或下游，也可相距靶基因較遠(yuǎn).5、基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄，翻譯等一系列過(guò)程，合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能

2、和生物學(xué)效應(yīng)的全過(guò)程.6、信息分子：調(diào)節(jié)細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì).其中由細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)靶細(xì)胞生命活動(dòng)的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞間信息分子；而在細(xì)胞內(nèi)傳遞信息調(diào)控信號(hào)的化學(xué)物質(zhì)稱為細(xì)胞內(nèi)信息分子.7、受體：是存在于靶細(xì)胞膜上或細(xì)胞內(nèi)能特異識(shí)別生物活性分子并與之結(jié)合，進(jìn)而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì).8、分子克?。涸隗w外對(duì)DNA分子按照即定目的和方案進(jìn)行人工重組，將重組分子導(dǎo)入合適宿主，使其在宿主中擴(kuò)增和繁殖，以獲得該DNA分子的大量拷貝.9、載體：能在連接酶的作用下和外源DN*段連接并運(yùn)送DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞的DNA分子.10、 轉(zhuǎn)化：指質(zhì)粒DNA或以它為載體構(gòu)建的重組DNA導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程.11、 感染

3、：以噬菌體，粘性質(zhì)粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA分子，在體外經(jīng)過(guò)包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴(kuò)增.12、 轉(zhuǎn)導(dǎo)：指以噬菌體為載體，在細(xì)菌之間轉(zhuǎn)移DNA的過(guò)程，有時(shí)也指在真核細(xì)胞之間通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)移和獲得細(xì)胞DNA的過(guò)程.13、 轉(zhuǎn)染：指病毒或以它為載體構(gòu)建的重組子導(dǎo)入真核細(xì)胞的過(guò)程.14、 DNA變性：在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響.15、 DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成16、 癌基因：是細(xì)胞內(nèi)控制細(xì)胞生長(zhǎng)的基因，具有潛在的誘導(dǎo)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化

4、的特性.當(dāng)癌基因17、 核酶：是一種可以催化RNA切割和RNA剪接反應(yīng)的由RNA組成的酶，可以作為基因表達(dá)和病毒復(fù)制的抑制劑.18、 DNA變性：在物理或化學(xué)因素的作用下，導(dǎo)致兩條DNA鏈之間的氫鍵斷裂，而核酸分子中的所有共價(jià)鍵則不受影響.19、 反義RNA:堿基序列正好與有意義的mRNA互補(bǔ)的RNA稱為反義RNA.可以作為一種調(diào)控特定基因表達(dá)的手段20、 DNA復(fù)性：當(dāng)促使變性的因素解除后，兩條DNA鏈又可以通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合形成DNA雙螺旋結(jié)構(gòu).21、 退火：指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈.22、 定量PCR:基因表達(dá)涉及的轉(zhuǎn)錄水平的研究常需要

5、對(duì)mRNA進(jìn)行定量測(cè)定，對(duì)此采用的PCR技術(shù)就叫定量PCR.23、 基因表達(dá)：是指生物基因組中結(jié)構(gòu)基因所攜帶的遺傳信息經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄，翻譯等一系列過(guò)程合成特定的蛋白質(zhì)，進(jìn)而發(fā)揮其特定的生物學(xué)功能和生物學(xué)效應(yīng)的全過(guò)程.24、 基因治療：一般是指將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定的靶細(xì)胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的治療方法.25、 管家基因：在生物體生命的全過(guò)程都是必須的，且在一個(gè)生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)的基因.26、 SD序列：轉(zhuǎn)錄出的mRNA要進(jìn)入核糖體上進(jìn)行翻譯，需要一段富含喋吟的核甘酸序列與大腸桿菌16SrRNA3,末端富含喀噬的序列互補(bǔ)，是核糖體的識(shí)別位點(diǎn).27、 核酸探針：探針

6、是指能與某種大分子發(fā)生特異性相互作用，并在相互作用之后可以檢測(cè)出來(lái)的生物大分子.核酸探針是指能識(shí)別特異堿基順序的帶有標(biāo)記的一段DNA或RNA分子.28、 周期蛋白：是一類呈細(xì)胞周期特異性或時(shí)相性表達(dá)，累積與分解的蛋白質(zhì)，它與周期素依賴性激酶共同影響細(xì)胞周期的運(yùn)行.二，問(wèn)答題1、影響DNA穩(wěn)定性的因素有哪些氫鍵，磷酸酯鍵，堿基堆積力，疏水作用力2、受體的特點(diǎn)有哪些？1,高度專一性；2,高度親和性；3,可逆性;4,可飽和性;5,特定的作用模式3、什么是基因組？細(xì)胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和.4、基因工程的定義是什么？有目的的通過(guò)分子克隆技術(shù)，人為的操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列

7、過(guò)程.5、請(qǐng)問(wèn)哪些條件可促使DNA復(fù)性（退火）降低溫度.pH值和增加鹽濃度可以促進(jìn)DNA復(fù)性（退火）6、原核基因組的特點(diǎn)有哪些？為一條環(huán)狀雙鏈DNA;只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；具有操縱子結(jié)構(gòu)；絕大部分為單拷貝;基因一般是連續(xù)的，無(wú)內(nèi)含子：重復(fù)序列很少.7、病毒基因組的特點(diǎn)有哪些種類單一：?jiǎn)伪扼w基因組：每個(gè)基因組在病毒中只出現(xiàn)一次；形式多樣；大小不一；基因重疊；動(dòng)物/細(xì)菌病毒與真核/原核基因相似：內(nèi)含子;具有不規(guī)則的結(jié)構(gòu)基因;基因編碼區(qū)無(wú)間隔：通過(guò)宿主及病毒本身酶切；無(wú)帽狀結(jié)構(gòu)；結(jié)構(gòu)基因沒(méi)有翻譯起始序列.8、真核基因組的特點(diǎn)有哪些真核生物基因組遠(yuǎn)大于原核生物基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因數(shù)龐大，具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)

8、;基因組DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合成染色體，儲(chǔ)存于細(xì)胞核內(nèi)；真核基因?yàn)閱雾樂(lè)醋?而細(xì)菌和病毒的結(jié)構(gòu)基因多為多順?lè)醋?；基因組中非編碼區(qū)多于編碼區(qū)；真核基因多為不連續(xù)的斷裂基因，由外顯子和內(nèi)含子鑲嵌而成；存在大量的重復(fù)序列;功能相關(guān)的基因構(gòu)成各種基因家族；存在可移動(dòng)的遺傳因素；體細(xì)胞為雙倍體，而精子和卵子為單倍體.9、乳糖操縱子的組成有哪些？大腸桿菌乳糖操縱子含Z,Y,A三個(gè)結(jié)構(gòu)基因，分別編碼半乳糖甘酶，透酶和半乳糖甘乙酰轉(zhuǎn)移酶，此外還有一個(gè)操縱序列O,一個(gè)啟動(dòng)子P和一個(gè)調(diào)節(jié)基因I.10、什么是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物？是指用人工方法將外源基因?qū)牖蛘系交蚪M內(nèi)，并能穩(wěn)定傳代的一類動(dòng)物11、什么是限制性核酸內(nèi)切酶是細(xì)

9、菌產(chǎn)生的一類能識(shí)別和切割雙鏈DNA分子內(nèi)特定的堿基順序的核酸水解酶.12、基因突變的類型有哪些？點(diǎn)突變:DNA大分子上一個(gè)堿基的變異.分為轉(zhuǎn)換和顛換.缺失:一個(gè)堿基或一段核甘酸鏈從DNA大分子上消失.插入:一個(gè)原來(lái)沒(méi)有的堿基或一段原來(lái)沒(méi)有的核甘酸鏈插入到DNA大分子中問(wèn).倒位:DNA鏈內(nèi)重組，使其中一段方向倒置.12、簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的主要應(yīng)用有哪些(1)建立用于研究外源基因表達(dá)調(diào)控體系；(2)建立醫(yī)學(xué)中常用的疾病模型；(3)培育動(dòng)物新品種；13、什么是細(xì)胞癌基因？存在于正常的細(xì)胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，分化和發(fā)育等生理功能.在正常細(xì)胞內(nèi)未激活的細(xì)胞癌基因叫原

10、癌基因，當(dāng)其受到某些條件激活時(shí)，結(jié)構(gòu)和表達(dá)發(fā)生異常，能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化.14、什么是病毒癌基因？存在于病毒(大多是逆”$錄病毒)基因組中能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因.它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分，對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作用，但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)月中瘤發(fā)生的作用.15、RFLP的定義是什么？RFLP即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性，個(gè)體之間DNA的核甘酸序列存在差異，稱為DNA多態(tài)性.若因此而改變了限制性內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)則可導(dǎo)致相應(yīng)的限制性片段的長(zhǎng)度和數(shù)量發(fā)生變化，稱為RFLP.三、綜合題1、實(shí)時(shí)PCR中兩種熒光檢測(cè)方法各有什么優(yōu)缺點(diǎn)？(1)染料技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：成本較低，無(wú)須對(duì)引物或探針進(jìn)行特殊的熒光標(biāo)記，操作

11、亦比較簡(jiǎn)單。缺點(diǎn)：特異性不夠，染料分子會(huì)結(jié)合到非特異性擴(kuò)增產(chǎn)生的雙鏈分子和引物二聚體中，使反應(yīng)體系中的熒光本底較高。(2)探針技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：高度特異性；重復(fù)性好；靈敏度高；可進(jìn)行多重定量缺點(diǎn)：只適合一個(gè)特定的目標(biāo)；委托公司標(biāo)記，價(jià)格較高；不易找到本底低的探針。2、簡(jiǎn)述真核生物轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控機(jī)制答1),5，端力口帽和3,端多聚腺甘酸化的調(diào)控意義：5,端加帽和3,端多聚腺甘酸化是保持mRNA穩(wěn)定的一個(gè)重要因素，它至少保證mRNA在轉(zhuǎn)錄過(guò)程中不被降解.(2),mRNA選擇性剪接對(duì)基因表達(dá)調(diào)控的作用(3),mRNA運(yùn)輸?shù)目刂?、簡(jiǎn)述良好載體具有的條件1,必須有自身的復(fù)制子；2,載體分子上必須有多克隆位點(diǎn)

12、，以供外源DNA插入；3,載體應(yīng)具有可供選擇的遺傳標(biāo)志，以區(qū)別陽(yáng)性重組子和陰性重組子；4,載體分子必須有足夠的容量；5,可通過(guò)特定的方法導(dǎo)入細(xì)胞；6,對(duì)于表達(dá)載體還應(yīng)具備與宿主細(xì)胞相適應(yīng)的啟動(dòng)子等DNA調(diào)控元件.4、簡(jiǎn)述核酸分子雜交的原理答:具有互補(bǔ)序列的兩條單鏈核酸分子在一定的條件下(適宜的溫度及離子強(qiáng)度等)堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，重新形成雙鏈；在這一過(guò)程中，核酸分子經(jīng)歷了變性和復(fù)性的變化，以及在復(fù)性過(guò)程中個(gè)分子間鍵的形成和斷裂.雜交的雙方是待測(cè)核酸和已知序列.5、簡(jiǎn)述探針的種類和優(yōu)缺點(diǎn)答:1)cDNA探針:通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA后,將其克隆于適當(dāng)?shù)目寺≥d體，通過(guò)擴(kuò)增重組質(zhì)粒而使cDNA得到大量的

13、擴(kuò)增.提取質(zhì)粒后分離純化作為探針使用.它是目前應(yīng)用最為廣泛的一種探針.2）基因組探針：從基因組文庫(kù)里篩選得到一個(gè)特定的基因或基因片段的克隆后，大量擴(kuò)增，純化，切取插入片段，分離純化為探針.3）寡核甘酸探針：根據(jù)已知的核酸順序，采用DNA合成儀合成一定長(zhǎng)度的寡核昔酸片段作為探針.4） RNA探針:采用基因克隆和體外轉(zhuǎn)錄的方法可以得到RNA或反義RNA作為探針.6、簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)的原理及步驟PCR反應(yīng)，是體外合成特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。反應(yīng)分為三步：1 .變性：在高溫條件下，DNA雙鏈解離形成單鏈2 .退火：溫度突然降低，引物與其互補(bǔ)的模板在局部形成雜交鏈3 .延伸：聚合酶催化以引物為起始

14、點(diǎn)的DNA鏈延伸反應(yīng)。7、簡(jiǎn)述轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念，原理概念:是指用人工方法將外源基因?qū)牖蛘系交蚪M內(nèi)，并能穩(wěn)定傳代的一類動(dòng)物.它的特點(diǎn)是"分子及細(xì)胞水平操作，組織及動(dòng)物整體水平表達(dá)".基本原理：將目的基因或基因組片段用顯微注射等方法注入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的受精卵或著床前的胚胎細(xì)胞中，使目的基因整合到基因組中，然后將此受精卵或著床前的胚胎細(xì)胞再植入受體動(dòng)物的輸卵管或子宮中，使其發(fā)育成攜帶有外源基因的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，人們可以通過(guò)分析轉(zhuǎn)基因和動(dòng)物表型的關(guān)系，揭示外源基因的功能；也可以通過(guò)轉(zhuǎn)入外源基因培育優(yōu)良的動(dòng)物品種.8、簡(jiǎn)述突變的遺傳效應(yīng)遺傳密碼的改變：錯(cuò)義突變，無(wú)義突變，同義突變，移碼突變對(duì)mRNA剪接的影響：一是使原來(lái)的剪接位點(diǎn)消失；二是產(chǎn)生新的剪接位點(diǎn).蛋白質(zhì)肽鏈中的片段缺失：9、簡(jiǎn)述三種RNA在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中的作用RNA有三種mRNA、tRNA、