藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗(yàn)證ppt課件

1、第三節(jié) 藥質(zhì)量量規(guī)范分析方法驗(yàn)證 一、目的 證明所采用的分析方法適宜于相應(yīng)的檢測(cè)要求。 二、用途一藥質(zhì)量量規(guī)范起草時(shí)，分析方法需閱歷證。二藥物消費(fèi)方法變卦、制劑的組分變卦、原分析方法進(jìn)展修訂時(shí)，分析方法需閱歷證。三、需驗(yàn)證的分析工程 1. 鑒別實(shí)驗(yàn)； 2. 雜質(zhì)定量或限制檢查； 3. 原料或制劑中有效成分含量測(cè)定； 4. 制劑中其它成分降解產(chǎn)物、防腐劑等的測(cè)定； 5. 溶出度、釋放度等功能檢查中的溶出量等的測(cè)試方法。 四、驗(yàn)證內(nèi)容 驗(yàn)證內(nèi)容有：準(zhǔn)確度、精細(xì)度反復(fù)性、中間精細(xì)度和重現(xiàn)性、專屬性、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍和耐用性 一 準(zhǔn)確度accuracy 準(zhǔn)確度是指用該方法測(cè)定的結(jié)果與真實(shí)值或

2、參考值接近的程度，用百分回收率表示。 測(cè)定回收率Rrecovery的詳細(xì)方法可采用“回收實(shí)驗(yàn)法和“加樣回收實(shí)驗(yàn)法。 回收實(shí)驗(yàn) 空白+知量A的對(duì)照品或規(guī)范品測(cè)定，測(cè)定值為M%100AMR空白回收率 加樣回收實(shí)驗(yàn) 已準(zhǔn)確測(cè)定藥物含量P的真實(shí)樣品+知量A的對(duì)照品或規(guī)范品測(cè)定，測(cè)定值為M%100APMR 數(shù)據(jù)要求 規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，如制備高、中、低三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次。1. 1. 含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度含量測(cè)定方法的準(zhǔn)確度 原料藥可用知純度的對(duì)照品或樣原料藥可用知純度的對(duì)照品或樣品進(jìn)展測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已品進(jìn)展測(cè)定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)建立準(zhǔn)

3、確度的另一方法測(cè)定的結(jié)果進(jìn)展比較。展比較。 制劑可用含己知量被測(cè)物的各組制劑可用含己知量被測(cè)物的各組分混合物進(jìn)展測(cè)定，即采用在空白輔分混合物進(jìn)展測(cè)定，即采用在空白輔料中參與原料藥對(duì)照品的方法。料中參與原料藥對(duì)照品的方法。 如不能得到制劑的全部組分，可向如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中參與知量的被測(cè)物進(jìn)展測(cè)定，制劑中參與知量的被測(cè)物進(jìn)展測(cè)定，或與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較或與另一個(gè)已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。結(jié)果。 中藥分析的準(zhǔn)確度普通用加樣回中藥分析的準(zhǔn)確度普通用加樣回收實(shí)驗(yàn)衡量。中藥回收率普通要求在收實(shí)驗(yàn)衡量。中藥回收率普通要求在95105%范圍內(nèi)，有些方法操作步驟范圍內(nèi)，有些方法操作

4、步驟繁多時(shí)，可要求在繁多時(shí)，可要求在90110%范圍內(nèi)。范圍內(nèi)。RSD普通在普通在2%以內(nèi)。以內(nèi)。 2 2雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度雜質(zhì)定量測(cè)定的準(zhǔn)確度 可向原料藥或制劑中參與知量雜可向原料藥或制劑中參與知量雜質(zhì)進(jìn)展測(cè)定。假設(shè)不能得到雜質(zhì)或降質(zhì)進(jìn)展測(cè)定。假設(shè)不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成解產(chǎn)物，可用本法測(cè)定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)展比較。熟的方法進(jìn)展比較。 二精細(xì)度precision 精細(xì)度是指在規(guī)定條件下，同一個(gè)均勻樣品，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏向d、規(guī)范偏向(SD)、相對(duì)規(guī)范偏向(RSD)變異系數(shù)，CV表示。 偏向d：丈量值與平均值之差xxdi相對(duì)偏向允許差：容

5、量分析中和法、非水滴定法、銀量法、絡(luò)合滴定法、重氮化法、氧化復(fù)原法0.3%；分量法 0.5%；氧瓶熄滅法 0.5%；儀器分析 3%、凱氏定氮法 1%00BAB-A00100100平均值平均值A(chǔ)規(guī)范偏差SD或S12nxxSi相對(duì)規(guī)范偏差RSD，也稱變異系數(shù)CV%100 xSRSD 1. 反復(fù)性(repeatability):在一樣條件下，由同一個(gè)分析人員測(cè)定所得結(jié)果的精細(xì)度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)，如制備三個(gè)不同濃度樣品各測(cè)三次或把被測(cè)物濃度當(dāng)作100%，至少測(cè)6次進(jìn)展評(píng)價(jià)。 2. 中間精細(xì)度 同一實(shí)驗(yàn)室，不同時(shí)間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精細(xì)度。 3. 重現(xiàn)性(repr

6、oducibility)不同實(shí)驗(yàn)室，不同分析人員測(cè)定結(jié)果的精細(xì)度。 數(shù)據(jù)要求：需報(bào)告RD，RSD和可信限。 三檢測(cè)限limit of detection， LOD 檢測(cè)限系指試樣在確定的實(shí)驗(yàn)條件下，被測(cè)物能被檢測(cè)出的最低濃度或含量。 是限制檢驗(yàn)效能目的，無需定量測(cè)定，只需指出高于或低于該規(guī)定濃度即可。 1 1非儀器分析目視法非儀器分析目視法 用知濃度的被測(cè)物，實(shí)驗(yàn)出能被用知濃度的被測(cè)物，實(shí)驗(yàn)出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量?？煽康貦z測(cè)出的最低濃度或量。 2信噪比法 用于能顯示基線噪音的分析方法儀器分析方法，是把知低濃度試樣測(cè)出的信號(hào)與空白樣品測(cè)出的信號(hào)進(jìn)展比較，算出能被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或

7、量。普通以信噪比S/N3 1或2 1時(shí)的相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測(cè)限。 1空白值0時(shí)；測(cè)定背景10次以上，求出規(guī)范差b。將b乘以三倍；在任務(wù)曲線上求出3b相對(duì)應(yīng)的濃度Xb；即為方法的檢出值；2空白值不等于0；測(cè)定背景10次以上，求出規(guī)范差b ；將b 乘以三倍；在任務(wù)曲線上求出3 b 相對(duì)應(yīng)的濃度Xb ；將求得的對(duì)應(yīng)濃度值加上空白值即得該方法的檢出限。四定量限1imit of quantitation，LOQ 指樣品中被測(cè)物能被定量測(cè)定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精細(xì)度要求。 常用信噪比法確定定量限，普通以信噪比S/N為10 1時(shí)相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進(jìn)展確定，也可按1984年國際純粹

8、和運(yùn)用化學(xué)結(jié)合會(huì)(IVPAC)規(guī)定：用儀器所測(cè)空白背景呼應(yīng)規(guī)范差SD的10倍為估計(jì)值，再經(jīng)實(shí)驗(yàn)確定方法的實(shí)踐測(cè)定下限。 儀器分析：經(jīng)過測(cè)定一組空的樣品的背景信號(hào)后計(jì)算規(guī)范差S。以1OS來估算定量限制。以定量限制制備的樣品來驗(yàn)證 非儀器分析：經(jīng)過分析己知被測(cè)物濃度的樣品并確定一個(gè)樣品中被測(cè)物可被準(zhǔn)確和精細(xì)測(cè)定出的最低濃度量。 五專屬性specificity 選擇性： 指有其他成分雜質(zhì)、降解物、輔料等能夠存在情況下采用的方法能準(zhǔn)確測(cè)定出被測(cè)物的特性，能反映該方法在有共存物時(shí)對(duì)供試物準(zhǔn)確而專屬的測(cè)定才干，是指該法用于復(fù)雜樣品分析時(shí)能否遭到相互關(guān)擾程度的度量。 通常經(jīng)過分析含有加了雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、有關(guān)

9、化學(xué)物質(zhì)或撫慰劑成分的樣品，將所獲分析結(jié)果與未加前述成分之樣品的測(cè)試結(jié)果進(jìn)展比較，兩組測(cè)試結(jié)果之差即專屬性。1鑒別反響 應(yīng)能與能夠共存的物質(zhì)或構(gòu)造類似化合物區(qū)別，不含被分析的樣品，以及構(gòu)造類似或組分中的有關(guān)化合物，均應(yīng)呈負(fù)反響。2含量測(cè)定和雜質(zhì)測(cè)定 色譜法和其他方法，應(yīng)附代表性圖譜，亦闡明專屬性。圖中應(yīng)標(biāo)明各組份的位置，色譜法中的分別度應(yīng)符合要求。 六 線性Linearity 在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)試結(jié)果與試樣中被測(cè)物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。 線形通常用最小二乘法處置數(shù)據(jù)求得回歸曲線的斜率Slope來表示。數(shù)據(jù)要求：至少需求五個(gè)濃度調(diào)查線形，需提供相關(guān)系數(shù)、y截距是檢定的能夠偏向、回歸斜率及方差

10、等參數(shù)，應(yīng)列出回歸方程數(shù)和線性圖。 七范圍Range： 指到達(dá)一定精細(xì)度、準(zhǔn)確度和線性的條件下，測(cè)試方法適用的高、低限濃度或量的區(qū)間。 范圍確實(shí)定可因測(cè)定工程不同而有不同要求： 含量測(cè)定范圍為80%-120%；含量均勻度范圍為70%-130%；雜質(zhì)測(cè)定應(yīng)為被測(cè)雜質(zhì)限制的50%-120%；溶出度應(yīng)為測(cè)定范圍的20%。 八八 耐用性耐用性 指測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，指測(cè)定條件稍有變動(dòng)時(shí)，結(jié)果不受影響的接受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)提結(jié)果不受影響的接受程度，為常規(guī)檢驗(yàn)提供根據(jù)。是衡量實(shí)驗(yàn)室和任務(wù)人員之間在供根據(jù)。是衡量實(shí)驗(yàn)室和任務(wù)人員之間在正常情況下實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。正常情況下實(shí)驗(yàn)結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。 分析方法

11、重現(xiàn)性的測(cè)定是經(jīng)分析方法重現(xiàn)性的測(cè)定是經(jīng)過在不同的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同的實(shí)驗(yàn)者對(duì)同一過在不同的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不同的實(shí)驗(yàn)者對(duì)同一樣品的分別測(cè)試而獲得的。獲得的這種樣品的分別測(cè)試而獲得的。獲得的這種再與正常檢定下的精細(xì)度進(jìn)展比較，從而再與正常檢定下的精細(xì)度進(jìn)展比較，從而確定該法的耐用性，或稱粗放度確定該法的耐用性，或稱粗放度 九運(yùn)用 1. 鑒別實(shí)驗(yàn)除專屬性、耐用性外，其它都不要求。 2. 雜質(zhì)的限量檢查除專屬性、檢測(cè)限、耐用性外，其它都不要求。 雜質(zhì)的含量測(cè)定除檢測(cè)限外，其它都要求。 3. 含量測(cè)定及溶出量測(cè)定除檢測(cè)限、定量限外，其它都要求。十各種含量測(cè)定方法對(duì)效能目的的要十各種含量測(cè)定方法對(duì)效能目的的要求求

12、1. 1. 容量分析法：用原料藥精制品容量分析法：用原料藥精制品( (含量含量99.599.5) )或?qū)φ掌氛{(diào)查方法的精細(xì)度，相或?qū)φ掌氛{(diào)查方法的精細(xì)度，相對(duì)規(guī)范差普通應(yīng)不大于對(duì)規(guī)范差普通應(yīng)不大于0.20.2；進(jìn)展回收；進(jìn)展回收率實(shí)驗(yàn)?；厥章势胀ㄔ诼蕦?shí)驗(yàn)?；厥章势胀ㄔ?9.799.7100.3100.3之之間。間。 2. UV 2. UV法：用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)展法：用適當(dāng)濃度的精制品進(jìn)展測(cè)定，其測(cè)定，其RSDRSD普通不大于普通不大于1 1。制劑的。制劑的測(cè)定，回收率普通應(yīng)在測(cè)定，回收率普通應(yīng)在9898102102之間。之間。 線性：吸光度線性：吸光度A普通在普通在0.20.7，濃度點(diǎn)濃度點(diǎn)

13、n5。用濃度。用濃度c對(duì)對(duì)A作線性回歸作線性回歸處置，得不斷線方程，處置，得不斷線方程，r應(yīng)到達(dá)應(yīng)到達(dá)0.9999(n5)，方程的截距應(yīng)近于零。，方程的截距應(yīng)近于零。 3. HPLC法：要求法：要求RSD2，回收，回收率率98102之間。之間。 線性范圍：用精制品配制一系列線性范圍：用精制品配制一系列規(guī)范溶液，濃度點(diǎn)規(guī)范溶液，濃度點(diǎn)n應(yīng)為應(yīng)為57，用濃，用濃度度c對(duì)峰高對(duì)峰高h(yuǎn)或被測(cè)物的呼應(yīng)值之比進(jìn)或被測(cè)物的呼應(yīng)值之比進(jìn)展回歸處置，建立回歸方程，展回歸處置，建立回歸方程，r應(yīng)大應(yīng)大于于0.999，截距應(yīng)趨于零。，截距應(yīng)趨于零。99：73. 精細(xì)度是指B A. 測(cè)得的丈量值與真值接近的程度 B.

14、 測(cè)得的一組丈量值彼此符合的程度 C. 表示該法丈量的正確性 D. 在各種正常實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)同一樣品分析所得結(jié)果的準(zhǔn)確程度 E. 對(duì)供試物準(zhǔn)確而專屬的測(cè)定才干99x：76精細(xì)度是指該法D A. 測(cè)得的丈量值與真值接近的程度 B. 測(cè)得的丈量值與回收率接近的程度 C. 丈量的正確性 D. 測(cè)得的一組丈量值彼此符合的程度 E. 對(duì)供試物準(zhǔn)確而專屬的測(cè)定才干 96：在藥物分析中，精細(xì)度是表示該法的BD A. 丈量值與真值接近程度 B. 一組丈量值彼此符合程度 C. 正確性 D. 重現(xiàn)性 E. 專屬性 95：106110應(yīng)要求的效能目的： A. 檢測(cè)限 B. 定量限 C. 兩者均要求 D. 兩者均不要

15、求95：106. 含量測(cè)定方法評(píng)價(jià)D95：107. 雜質(zhì)限量檢查A95：108. 雜質(zhì)定量測(cè)定B95：109. 溶出度測(cè)定D95：110. 中間體含量測(cè)定D97：126藥物雜質(zhì)檢查所要求的效能目的為CDE A. 準(zhǔn)確度 B. 精細(xì)度 C選擇性 D. 檢測(cè)限 E. 耐用性 98：評(píng)價(jià)藥物分析所用的測(cè)定方法的效能目的有BCD A. 含量均勻度 B. 精細(xì)度 C. 準(zhǔn)確度 D. 粗放度 E. 溶出度例例1155A A精細(xì)度精細(xì)度 B B定量限定量限C C兩者皆是兩者皆是 D D兩者皆不是兩者皆不是1. 1. 某法測(cè)得一組丈量值間彼此符合程度某法測(cè)得一組丈量值間彼此符合程度A A2. 2. 丈量值和真

16、值接近的程度丈量值和真值接近的程度D D3. 3. 測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性測(cè)定結(jié)果的重現(xiàn)性A A4. 4. 可定量測(cè)得被測(cè)藥物的最低程度參數(shù)可定量測(cè)得被測(cè)藥物的最低程度參數(shù)B B5. 5. 藥物分析方法的效能目的藥物分析方法的效能目的C C 例例6. 6. 相對(duì)規(guī)范差表示相對(duì)規(guī)范差表示C CA. A. 準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度B. B. 回收率回收率C. C. 精細(xì)度精細(xì)度D. D. 純真度純真度E. E. 限制限制例例7. 7. 精細(xì)度的普通表示方法有精細(xì)度的普通表示方法有(AE)(AE)A. A. 相對(duì)規(guī)范差相對(duì)規(guī)范差B. B. 相對(duì)平均偏向相對(duì)平均偏向C. C. 相對(duì)誤差相對(duì)誤差D. D. 絕對(duì)誤差絕對(duì)誤

17、差E. E. 規(guī)范差規(guī)范差 例例8. 8. 檢測(cè)限的表示方法有檢測(cè)限的表示方法有ABCABCA. A. 百分?jǐn)?shù)百分?jǐn)?shù) B. ppm B. ppm C. ppbC. ppbD. D. g g E. ngE. ng例例9. 9. 用信噪比法表示檢測(cè)限時(shí)，信噪用信噪比法表示檢測(cè)限時(shí)，信噪比普通應(yīng)為比普通應(yīng)為BCBCA. 11 A. 11 B. 21 B. 21 C. 31C. 31D. 41 D. 41 E. 51E. 51例例10. 10. 用碘量法測(cè)定維生素用碘量法測(cè)定維生素C C原料藥原料藥時(shí)，要求碘量法應(yīng)具備時(shí)，要求碘量法應(yīng)具備ACDACDA. A. 選擇性選擇性 B. B. 定量限定量限C. C.