第八章血液與成分制備和保存一

1、血液及血液成分的制備和保存血液及血液成分的制備和保存臨床檢驗學教研室臨床檢驗學教研室 曾濤曾濤TELmail: Chapter 82022-4-182承擔課題承擔課題 國家自然科學基金國家自然科學基金, Kin17 在非小細胞肺癌中的表達、作用及分在非小細胞肺癌中的表達、作用及分子機制研究子機制研究, 批準號批準號81201831, 經費經費23萬元，萬元，2013.012015.12； 廣東省自然科學基金廣東省自然科學基金，Kin17對乳腺癌細胞致瘤性的影響及其分對乳腺癌細胞致瘤性的影響及其分子機制研究，編號子機制研究，編號S2012040006310，1萬元，萬元

2、，2012.102014.10； 廣東省醫(yī)學科學技術研究基金廣東省醫(yī)學科學技術研究基金，Kin17在肺癌中的表達及其與患在肺癌中的表達及其與患者預后關系的研究，編號者預后關系的研究，編號B2012266，1萬元，萬元，2012.012013.12； 廣東醫(yī)學院科研基金項目廣東醫(yī)學院科研基金項目， Kin17在肺癌中的表達、作用及其在肺癌中的表達、作用及其分子機制研究，編號分子機制研究，編號B2011021, 經費經費10萬元，萬元，2012.062014.06； 廣東醫(yī)學院大學生創(chuàng)新實驗項目廣東醫(yī)學院大學生創(chuàng)新實驗項目, Kin17在肺癌中的表達及其與在肺癌中的表達及其與患者預后關系的研究患者

3、預后關系的研究, 2011ZYDC005 , 0.15萬元萬元,2011.092012.122022-4-183OUTLINE 全血輸注與成分血輸注的優(yōu)缺點全血輸注與成分血輸注的優(yōu)缺點 全血制備和保存全血制備和保存 血液成分制備和保存血液成分制備和保存 概述 紅細胞制備和保存 粒細胞制備和保存 血小板制備和保存 冰凍血漿、冷沉淀、血漿制品制備和保存2022-4-184臨床用血的流程：臨床用血的流程：獻血者獻血者血站血站醫(yī)療機構醫(yī)療機構患者患者2022-4-185臨床使用的血液制品臨床使用的血液制品 全血全血：將血液采入含有保養(yǎng)液的血袋中，不作任何加工。將血液采入含有保養(yǎng)液的血袋中，不作任何加工

4、。 血液成分血液成分/ /成分血成分血（Blood componantBlood componant）：）：指用物理或化指用物理或化學的方法，將采集的全血中的各種有效成分分離出來，分學的方法，將采集的全血中的各種有效成分分離出來，分別制成高濃度、高純度、臨床療效好的單一血液成分制品別制成高濃度、高純度、臨床療效好的單一血液成分制品如紅細胞、血小板、血漿等。如紅細胞、血小板、血漿等。2022-4-186國內外血液輸注概況國內外血液輸注概況 上海上海: : 紅細胞紅細胞 37.01%37.01%血小板血小板 20.22%20.22% 血血 漿漿 36.02% 36.02% 冷沉淀冷沉淀 4.11%

5、4.11% 白細胞白細胞 0.61%0.61%全全 血血 2.03%2.03% 日本：日本： 紅細胞紅細胞 29.26%29.26%血小板血小板 40.77%40.77% 血血 漿漿 28.09% 28.09% 全全 血血 1.88%1.88% 美國：美國： 紅細胞紅細胞 42.89%42.89%血小板血小板 39.96%39.96% 血血 漿漿 11.96%11.96%冷沉淀冷沉淀 4.69%4.69% 全全 血血 0.5%0.5%2022-4-1873 3606083830 02020404060608080100100 % % 高高HDIHDI 中中HDIHDI 低低HDIHDI全血輸注

6、的現(xiàn)狀全血輸注的現(xiàn)狀2022-4-188全血輸注輸注減少的原因全血輸注輸注減少的原因 全血并不全：全血并不全：目前的血液保養(yǎng)液和保存溫度目前的血液保養(yǎng)液和保存溫度44是是針對存儲紅細胞而設計的，其他的成分（粒細胞、針對存儲紅細胞而設計的，其他的成分（粒細胞、血小板、凝血因子特別是血小板、凝血因子特別是和和）都未在最佳環(huán)境）都未在最佳環(huán)境下保存，很快喪失其應有的生理功能；下保存，很快喪失其應有的生理功能； 血液成分在全血中的濃度不高：血液成分在全血中的濃度不高：治療效果不佳；治療效果不佳； 血液成分在全血中的不純而產生副作用：血液成分在全血中的不純而產生副作用：增加患者增加患者的代謝負擔和心臟負

7、擔，引發(fā)心力衰竭、肺水腫甚的代謝負擔和心臟負擔，引發(fā)心力衰竭、肺水腫甚至死亡；而且容易產生同種免疫，不良反應多。至死亡；而且容易產生同種免疫，不良反應多。2022-4-189成分輸血優(yōu)點成分輸血優(yōu)點 濃度高、療效好；濃度高、療效好； 容量小、純度高、使用安全，不良反應少；容量小、純度高、使用安全，不良反應少； 后續(xù)處理程序可以減少輸血傳播疾病的發(fā)生；后續(xù)處理程序可以減少輸血傳播疾病的發(fā)生； 可滿足血液成分的最佳保存條件，保存時間最長；可滿足血液成分的最佳保存條件，保存時間最長； 一血多用，節(jié)約血液資源；一血多用，節(jié)約血液資源； 血小板血小板2022-4-1810成份血輸注的比例逐漸升高成份血輸

8、注的比例逐漸升高 美國在美國在2020世紀世紀7070年代初成分輸血量只占總輸血量的年代初成分輸血量只占總輸血量的50%50%，8888年至今已升至年至今已升至98%98%以上；以上； 加拿大已達加拿大已達90%90%； 法國法國92.9%92.9%； 日本日本7575年占年占35%35%，20022002年亦達年亦達95%95%以上；以上； 臺灣臺灣7979年只占年只占2%2%到到9999年提高到年提高到90%90%以上；以上； 我國我國19981998年年19.019.0，部分省市達，部分省市達9090以上。以上。2022-4-1811 全血全血：將血液采入含有保養(yǎng)液：將血液采入含有保養(yǎng)液

9、的血袋中，不作任何加工；的血袋中，不作任何加工； 我國已廣泛使用密閉式無菌塑我國已廣泛使用密閉式無菌塑料血袋采集系統(tǒng)；料血袋采集系統(tǒng)； 1u=200ml1u=200ml第一部分、全血制備和保存第一部分、全血制備和保存2022-4-1812全血采集注意事項全血采集注意事項 嚴格無菌操作，穿刺部位需徹底消毒；嚴格無菌操作，穿刺部位需徹底消毒； 采集的血液應無凝塊、無溶血、無乳糜，采血量應為采集的血液應無凝塊、無溶血、無乳糜，采血量應為標示量的標示量的10%10%； 采血速度：采血速度：200ml 3min200ml 3min內采完，內采完，400ml 6min400ml 6min內采完；內采完；

10、采血中血流不暢，不能用于制備血小板濃縮物采血中血流不暢，不能用于制備血小板濃縮物; ;2022-4-1813全血的保存和運輸全血的保存和運輸 保存條件保存條件不分離血小板：不分離血小板：4422保存。保存。分離血小板：在分離血小板：在20202424條件保存至分離成分。條件保存至分離成分。 運輸運輸：發(fā)往臨床時，溫度：發(fā)往臨床時，溫度2 21010，最長時間不超過，最長時間不超過2424小時。小時。 隨著儲存時間的延長，全血中的有效成分（隨著儲存時間的延長，全血中的有效成分（2,3-DPG2,3-DPG、ATPATP、血小板等）會逐漸減少或失活，而一些有害成分（氨血小板等）會逐漸減少或失活，而

11、一些有害成分（氨、游離游離血紅蛋白血紅蛋白、鉀等）又會逐漸增加。鉀等）又會逐漸增加。2022-4-1814ACD-AACD-BCPDCP2DCPDA-1CPDA-2枸櫞酸鈉22.013.226.326.326.326.3枸櫞酸8.04.83.273.273.273.27葡萄糖24.514.725.551.131.844.6磷酸二氫鈉2.222.222.222.22腺嘌呤0.2750.550比率1.5:102.5:101.4:10 1.4:101.4:101.4:10保存天數(shù)212121213542血液保存液配方（血液保存液配方（g/L）與保存時間）與保存時間抗凝抗凝防氧化防氧化供能供能減緩減緩

12、2,3-DPG下降下降促進促進ATP合成合成2022-4-18152022-4-1816第二部分、血液成分的制備第二部分、血液成分的制備 狹義狹義：指使用物理方法提取并在臨床使用的血液成分，：指使用物理方法提取并在臨床使用的血液成分，如血細胞成分、血漿、冷沉淀等，稱為血液制劑；如血細胞成分、血漿、冷沉淀等，稱為血液制劑； 廣義廣義：指采用精細的物理或化學方法對血液成分進一步：指采用精細的物理或化學方法對血液成分進一步地提煉精制而得到的高度濃縮地提煉精制而得到的高度濃縮、純化的血液成分制品，純化的血液成分制品，如血漿衍生物如血漿衍生物、血漿蛋白制品（、血漿蛋白制品（白蛋白、免疫球蛋白、白蛋白、免

13、疫球蛋白、凝血因子濃縮物等凝血因子濃縮物等），稱為血液制品。），稱為血液制品。2022-4-1817血液產品血液產品人血液成份分類人血液成份分類血液制劑血液制劑全血全血成分血成分血紅細胞紅細胞粒細胞粒細胞血漿血漿血小板血小板冷沉淀冷沉淀血漿制品：血漿制品：造血干細胞造血干細胞凝血因子凝血因子VIIIVIII白蛋白白蛋白免疫球蛋白免疫球蛋白凝血酶原復合物凝血酶原復合物纖維蛋白原纖維蛋白原2022-4-1818血液成分的制備原理血液成分的制備原理物理方法物理方法：通過密度梯度離心、過濾等方法將血液：通過密度梯度離心、過濾等方法將血液分離成純度較高的單一成分。分離成純度較高的單一成分。血小板密度為血

14、小板密度為1.030-1.0601.030-1.060，體積為，體積為16161010-15-15/L/L；淋巴細胞密度為淋巴細胞密度為1.050-1.0781.050-1.078，體積為，體積為2302301010-15-15/L/L；中性粒細胞密度為中性粒細胞密度為1.080-1.0951.080-1.095，體積為，體積為4504501010-15-15/L/L；紅細胞密度為紅細胞密度為1.090-1.1111.090-1.111，體積為，體積為87871010-15-15/L/L；血漿密度為血漿密度為1.025-1.0301.025-1.030。化學方法化學方法：低溫乙醇法，：低溫乙醇

15、法，19461946年由年由CohnCohn和他的同事和他的同事發(fā)明的，現(xiàn)被一些血液制品企業(yè)采用。發(fā)明的，現(xiàn)被一些血液制品企業(yè)采用。2022-4-1819血液成分的制備原理血液成分的制備原理2022-4-1820血液成分的制備方法血液成分的制備方法手工法手工法：用多聯(lián)袋采集全血，利用血液低溫離心機離心、過：用多聯(lián)袋采集全血，利用血液低溫離心機離心、過濾后，將血液的不同成分分離出來。（紅細胞、血漿、血小濾后，將血液的不同成分分離出來。（紅細胞、血漿、血小板、白細胞）板、白細胞） 采血袋：依照用途不同，可分為單聯(lián)袋、二聯(lián)袋、三聯(lián)采血袋：依照用途不同，可分為單聯(lián)袋、二聯(lián)袋、三聯(lián)袋、四聯(lián)袋以及雙二聯(lián)袋

16、等；用三通管并聯(lián)起來，其規(guī)格分袋、四聯(lián)袋以及雙二聯(lián)袋等；用三通管并聯(lián)起來，其規(guī)格分為采血為采血200200400ml400ml不等。用塑料聯(lián)袋采集血液，使血液成分不等。用塑料聯(lián)袋采集血液，使血液成分可以在密閉無菌的條件下進行分離。可以在密閉無菌的條件下進行分離。單采機法單采機法：直接用血細胞分離機采集各種成分。（血小板）：直接用血細胞分離機采集各種成分。（血小板）2022-4-1821大容量冷凍離心機大容量冷凍離心機2022-4-18222022-4-1823血細胞單采機血細胞單采機2022-4-1824血液成分單采機的血液成分單采機的種類及工作原理種類及工作原理 離心式：用于分離細胞，如血小

17、板、造血干細胞離心式：用于分離細胞，如血小板、造血干細胞 膜過濾式（血漿）：膜過濾式（血漿）：血液進入單采機后，全血在一定壓力下流經一特定孔徑大小的濾膜，比濾膜孔徑小得血漿穿過濾膜進入濾液，未能穿越過膜孔的血細胞部分回輸給獻血者，以此使血液不同成分分離。 吸附式（血漿）：吸附式（血漿）：該類機具有特異性吸附柱。當患者血液流經此柱時，可以吸附病理性抗體、蛋白質抗原和免疫復合物，經凈化的血液則回輸給患者。2022-4-1825離心式血細胞分離機離心式血細胞分離機 原理：機器內部有一個離心分離杯，全血通過管道原理：機器內部有一個離心分離杯，全血通過管道進入分離杯后在一定轉速下旋轉，通過離心力的作進入

18、分離杯后在一定轉速下旋轉，通過離心力的作用，相對密度不同的成分進入不同的分層，所需成用，相對密度不同的成分進入不同的分層，所需成分被保留，其余成分通過管道回輸獻血者體內。分被保留，其余成分通過管道回輸獻血者體內。 分分連續(xù)流動式：雙靜脈通路連續(xù)流動式：雙靜脈通路 斷續(xù)流動離心式：單靜脈通路斷續(xù)流動離心式：單靜脈通路2022-4-1826a. 連續(xù)流動式血細胞分離機連續(xù)流動式血細胞分離機2022-4-1827b. 斷續(xù)流動離心式血細胞分離機斷續(xù)流動離心式血細胞分離機2022-4-1828血液及血液成分的貯存溫度與時間血液及血液成分的貯存溫度與時間（重點）（重點）全血和紅細胞制劑：全血和紅細胞制劑

19、：26，35天；濃縮血小板：濃縮血小板：2024 ，震蕩條件下保存，頻率為60次/分，振幅為4cm，5天；濃縮粒細胞：濃縮粒細胞： 2024 ，最多24小時；新鮮冰凍血漿、冷沉淀物新鮮冰凍血漿、冷沉淀物 ：20 ，1年；普通普通冰凍血漿冰凍血漿:20 ，5年；冰凍紅細胞：冰凍紅細胞：甘油終濃度為40%，-80 可保存3年；低濃度甘油速凍，可保存10年。2022-4-1829血液成分單位的概念血液成分單位的概念名稱名稱 容量容量 單位單位全血 200ml 1U濃縮RBC 120ml 1U血漿 100/200ml 1U機采血小板 150-200 1U/1治療量手工分血小板 20-30ml 2U/4

20、00ml全血冷沉淀 20-30ml 1U/200ml全血白細胞 150-200ml 1U/袋2022-4-1830一一. 紅細胞制品紅細胞制品 濃縮紅細胞濃縮紅細胞 懸浮紅細胞懸浮紅細胞 洗滌紅細胞洗滌紅細胞 冰凍紅細胞冰凍紅細胞 少白細胞的紅細胞少白細胞的紅細胞 輻照紅細胞輻照紅細胞 年輕紅細胞年輕紅細胞2022-4-18311.1.濃縮紅細胞濃縮紅細胞 將采集到多聯(lián)袋內的全血中的大部分血漿，在全封閉的將采集到多聯(lián)袋內的全血中的大部分血漿，在全封閉的條件下分離出后，剩余的部分所制成的紅細胞成分血；條件下分離出后，剩余的部分所制成的紅細胞成分血； 濃縮紅細胞可以在全血有效保存期內任何時間分離出

21、部濃縮紅細胞可以在全血有效保存期內任何時間分離出部分血漿制備而成；分血漿制備而成； 一般用二聯(lián)袋采集的全血制備濃縮紅細胞。一般用二聯(lián)袋采集的全血制備濃縮紅細胞。一只含有抗一只含有抗凝保養(yǎng)液（主袋），還有一只是空袋；凝保養(yǎng)液（主袋），還有一只是空袋； 制備過程：離心（制備過程：離心（ 4422）將部分血漿分入空的轉將部分血漿分入空的轉移袋內移袋內熱合切斷塑料袋間的連接管。熱合切斷塑料袋間的連接管。2022-4-18322022-4-18332. 懸浮紅細胞懸浮紅細胞（suspended RBC）-又稱添加劑紅細胞又稱添加劑紅細胞 將全血中絕大部分將全血中絕大部分(90%)(90%)血漿在全封閉的

22、條件下分離出后，血漿在全封閉的條件下分離出后，向剩余的部分加入紅細胞添加劑制成的紅細胞成分；向剩余的部分加入紅細胞添加劑制成的紅細胞成分； 三聯(lián)袋：一只含有抗凝保存液（主袋），一只含有添加劑，三聯(lián)袋：一只含有抗凝保存液（主袋），一只含有添加劑，還有一只是空袋；還有一只是空袋； 制備過程：離心（制備過程：離心（ 4422）將部分血漿分入空的轉將部分血漿分入空的轉移袋內（血漿袋）移袋內（血漿袋）將添加液加入主袋內。將添加液加入主袋內。2022-4-1834AS-1AS-1AS-3AS-3AS-5AS-5葡萄糖葡萄糖2200220011001100900900腺嘌呤腺嘌呤272730303030磷酸

23、二氫鈉磷酸二氫鈉0 02762760 0甘露醇甘露醇7507500 0525525氯化鈉氯化鈉900900410410877877枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉0 05885880 0枸櫞酸枸櫞酸0 042420 0幾種紅細胞添加液的組成（幾種紅細胞添加液的組成（mg/100ml）2022-4-1835懸浮紅細胞懸浮紅細胞 是目前國內外臨床應用最廣泛的一種紅細胞制劑；是目前國內外臨床應用最廣泛的一種紅細胞制劑； 原因：添加劑延長了紅細胞壽命，保存期長；紅細原因：添加劑延長了紅細胞壽命，保存期長；紅細胞被添加劑稀釋了，輸注更流暢；大部分血漿已移胞被添加劑稀釋了，輸注更流暢；大部分血漿已移去，不良反應的發(fā)生率明

24、顯減少。去，不良反應的發(fā)生率明顯減少。添加液的種類與紅細胞保存期限添加液的種類與紅細胞保存期限添加液種類添加液種類CPDA-1CPDA-1MAPMAPSAGMSAGMAS-1AS-1 AS-3AS-3 AS-5AS-5紅細胞保存紅細胞保存期限（天）期限（天）3535353535354242424242422022-4-1836 將全血、濃縮紅細胞或懸浮紅細胞在無菌條件下將全血、濃縮紅細胞或懸浮紅細胞在無菌條件下用生理鹽水洗滌，并將紅細胞懸浮在生理鹽水中用生理鹽水洗滌，并將紅細胞懸浮在生理鹽水中所制成的成分血。所制成的成分血。 未超過保存期的紅細胞均可洗滌。未超過保存期的紅細胞均可洗滌。 比較徹

25、底的去除血漿和白細胞：血漿清除率比較徹底的去除血漿和白細胞：血漿清除率 98%98%；白細胞清除率；白細胞清除率80%80%，紅細胞回收率，紅細胞回收率70%70%。 保存溫度保存溫度 ：2 26 6 ，有效期：，有效期：2424小時。小時。3. 洗滌紅細胞洗滌紅細胞2022-4-1837洗滌紅細胞制備方法洗滌紅細胞制備方法 鹽水聯(lián)袋式洗滌紅細胞：三聯(lián)、四聯(lián)鹽水聯(lián)袋式洗滌紅細胞：三聯(lián)、四聯(lián) 開放式洗滌紅細胞開放式洗滌紅細胞 機器洗滌紅細胞機器洗滌紅細胞2022-4-1838開放式洗滌紅細胞開放式洗滌紅細胞機器洗滌紅細胞機器洗滌紅細胞2022-4-18394. 冰凍紅細胞冰凍紅細胞 將保存時間在

26、將保存時間在6 6日內的全血、濃縮紅細胞或懸浮紅日內的全血、濃縮紅細胞或懸浮紅細胞中的紅細胞分離出來，采用甘油作為冰凍保細胞中的紅細胞分離出來，采用甘油作為冰凍保護劑深低溫存，根據(jù)臨床需要再進行解凍、洗滌護劑深低溫存，根據(jù)臨床需要再進行解凍、洗滌去甘油處理的特殊紅細胞制劑。去甘油處理的特殊紅細胞制劑。 是長期保存紅細胞的一種理想方法，主要用于稀是長期保存紅細胞的一種理想方法，主要用于稀有血型血液的保存。有血型血液的保存。2022-4-1840冰凍紅細胞制備方法冰凍紅細胞制備方法 高濃度甘油慢凍法高濃度甘油慢凍法：鹽水洗滌法和糖漿洗滌法：鹽水洗滌法和糖漿洗滌法40%40%甘油，在甘油，在-80-

27、80保存，保存期為保存，保存期為3 3年。年。 低濃度甘油速凍法低濃度甘油速凍法：28%28%甘油，超低溫冰箱保存，保存期為甘油，超低溫冰箱保存，保存期為1010年以上。年以上。l 冰凍細胞解凍后在冰凍細胞解凍后在4 422保存，保存，2424小時內輸注。小時內輸注。2022-4-18415. 年輕紅細胞年輕紅細胞（了解）（了解） 是一種具有較多的網(wǎng)織紅細胞是一種具有較多的網(wǎng)織紅細胞、酶活性相對增高酶活性相對增高、平均細胞年齡較小的紅細胞成分。平均細胞年齡較小的紅細胞成分。 制備方法制備方法 手工法：利用年輕紅細胞比老年紅細胞體積大，手工法：利用年輕紅細胞比老年紅細胞體積大，重量輕來離心分離；重量輕來離心分離； 血細胞分離機法：血細胞分離機法： 26，CPD-1保養(yǎng)液保存保養(yǎng)液保存35天。天。2022-4-1842 患者女，患者女，5050歲，因患結腸癌行選擇性結腸切除術。歲，因患結腸癌行選擇性結腸切除術。手術期間給病人輸手術期間給病人輸400ml400ml保存保存2424小時之內的新鮮全小時之內的新鮮全血（病人女兒捐獻，未輻照）血（病人女兒捐獻，未輻照）?；颊呙庖吖δ苷?，。患者免疫功能正常，未用免疫抑制藥。輸血后未用免疫抑制藥。輸血后1111天，出現(xiàn)高熱，天，出現(xiàn)高熱，1212天全天全身皮膚出現(xiàn)紅色斑丘疹，皮疹日益加重，身皮膚出現(xiàn)紅色斑丘疹，皮疹日益加重，1414天肝