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文檔簡介
1、假定你正在研究原核生物轉(zhuǎn)座子Tn10,并已設(shè)計(jì)出一個(gè)很好的方法來確定Tn10在轉(zhuǎn)座期間是否是通過復(fù)制還是不干預(yù)DNA復(fù)制直接移動(dòng)。你的想法是根據(jù)這兩種機(jī)制的主要不同點(diǎn):如果不復(fù)制那么轉(zhuǎn)座子的兩條親鏈將同時(shí)移動(dòng);如果復(fù)制那么有一條親鏈移動(dòng)如圖8. 1你打算把來自兩個(gè)不同 Tn職的鏈經(jīng)退火后都標(biāo)記上。為了把這些雜種 Tn10雙螺旋足夠地分配到細(xì)胞中。你用了含有Tn10的入噬菌體DNA它既能在體外操作又能包在病毒殼成為有侵染力的噬菌體。你決定使用一個(gè)因?yàn)槠渌蛔兌セ钚缘氖删w基因 組,因此它就不會(huì)復(fù)制整合,而且最終可被除去,這樣噬菌體基因組可被忽略。你的噬菌體DNA在同樣位點(diǎn)插入了稍微不同的 T
2、n10o兩種Tn10都含有四環(huán)素抗性基因和乳糖代基因lacZ,但其中一種由于突變使lacZ基因失。這種差異為追蹤兩種Tn10提供了一個(gè)很方便的方法,因?yàn)閘acZ+細(xì)菌克隆與適當(dāng)?shù)牡孜锕灿龝r(shí)會(huì)變藍(lán),而lacZ-克隆那么還是白色。你把兩種噬菌體DNA的混合物變性后退火,得到兩份相等的雜交雙鏈與純合雙鏈的混合物 圖 8. 2 然后你將混合物包裝到噬菌體外殼中,侵染 lacZ- 細(xì)菌, 并把被侵 染細(xì)菌涂布在含四環(huán)素和可產(chǎn)生有色底物的平板上。一旦噬菌體DNA進(jìn)入了細(xì)菌,轉(zhuǎn)座子將進(jìn)入細(xì)菌基因組頻率很低,給細(xì)菌帶來四環(huán)素抗性。獲得一個(gè)Tn10的稀有野生細(xì)菌,可以在選擇條件下生存并形成克隆。統(tǒng)計(jì)大量這樣的克
3、隆會(huì)發(fā)現(xiàn)有25%為白色,25%為藍(lán)色,50%為藍(lán)色局部與白.色局部的混合物;1解釋每種細(xì)菌克隆的來源并確定結(jié)果是否能說明 Tn10 復(fù)制或不復(fù)制的轉(zhuǎn)座機(jī)制 2 你使用了一種無法修 復(fù)DNA錯(cuò)配的細(xì)菌苗株作為受體,來做這些實(shí)驗(yàn)。如果你用可以修復(fù)錯(cuò)配的細(xì)菌苗株作為受體那么結(jié)果會(huì) 有什么不同? 3入 噬菌體DNA通過位點(diǎn)專一重組整合到細(xì)菌基因組上要比轉(zhuǎn)座更常見,如果你用能復(fù)制 但不能整合的入噬菌體突變體結(jié)果有什么不同 ?-類型:分析題-答案:答:1所有菌落肯定是由Tn10轉(zhuǎn)座進(jìn)入細(xì)菌基因組產(chǎn)生的,因?yàn)榇婊钜蕾囉赥n10所攜帶四環(huán)素抗性基因的存在。主要觀察到的是出現(xiàn)了藍(lán)色和白色的混合菌落,因?yàn)榛旌暇?/p>
4、的機(jī)率很高而轉(zhuǎn)座機(jī)率 很低,所以混合菌落在單轉(zhuǎn)座中是很常見的??蓮?fù)制機(jī)制每次只能轉(zhuǎn)移親代雙螺旋中的一條鏈,產(chǎn)生藍(lán)色 或白色菌落,這全看哪條鏈被轉(zhuǎn)移,而非復(fù)制機(jī)制可轉(zhuǎn)移雜合雙鏈的兩條鏈,并復(fù)制別離成姐妹細(xì)菌,產(chǎn) 生混合菌落 一旦細(xì)菌在細(xì)菌培養(yǎng)基中被別離,最初被感染細(xì)胞的子代被限制在鄰近地方共同生長形成菌 落。如果第一次分裂產(chǎn)生不同姐妹細(xì)菌,那它們的子代會(huì)長在一起產(chǎn)生一個(gè)包含兩種不同細(xì)菌的單一菌落o純的藍(lán)色或白色菌落是由同源雙鏈參與轉(zhuǎn)座產(chǎn)生的。藍(lán)色,白色和混合菌落的比例和從異源雙鏈?zhǔn)够旌暇鋽?shù)增加與同源雙鏈?zhǔn)辜兙鋽?shù)增加混合物的比例所預(yù)計(jì)到的一樣。2每個(gè)雜合雙鏈對應(yīng)lacZ基因突變的位置都含有一個(gè)
5、錯(cuò)配DNA區(qū)域。如果這些雜合雙鏈被導(dǎo)入可修復(fù)這種錯(cuò)誤的細(xì)菌,那么混合菌落數(shù)將下降。關(guān)鍵是,一次修復(fù)可將一個(gè)雜合雙鏈轉(zhuǎn)變成一個(gè)純合雙鏈。如果錯(cuò)配修復(fù)對兩條鏈的修復(fù)時(shí)機(jī) 是等同的,那白色與藍(lán)色菌落的出現(xiàn)頻率同樣上升。3如果你用了整合態(tài)的噬菌體基因組,那么存活的菌落來自位點(diǎn)專一重組,這是比轉(zhuǎn)座更有效的一種重組。位點(diǎn)專一重組可整合噬菌體基因組的雙鏈。這樣,藍(lán)色,白色和混合菌落的比例和非復(fù)制轉(zhuǎn)座一樣。事實(shí)上,在實(shí)際確定轉(zhuǎn)座機(jī)制的實(shí)驗(yàn)中,整合態(tài)的入噬菌體被作為正對照和轉(zhuǎn)座結(jié)果相比擬,兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果一致。- 題目圖片: picture-p8.1.jpg -題目圖片: picture-以下關(guān)于VSG基因轉(zhuǎn)錄活
6、性的表達(dá)是正確的有:-類型:選擇題-選擇:a只有在表達(dá)位點(diǎn)的 VSG基因被轉(zhuǎn)錄b ELCexpression linked copy總是位于端粒附近c(diǎn)將部的VSG基因拷貝復(fù)制到表達(dá)位點(diǎn)可以改變表達(dá)位點(diǎn)的 VSG基因d不需經(jīng)過基因復(fù)制,端粒附近的VSG基因就可以被激活e少數(shù)情況下,通過不同的VSG基因拷貝在表達(dá)位點(diǎn)組裝可以產(chǎn)生一個(gè)新的VSG基因f以上都正確- 答案: F;位于ELC的VSG基因有一個(gè)不尋常的結(jié)構(gòu),包括: -類型:選擇題-選擇:a不含限制性切酶切割 位點(diǎn)的 5'無義區(qū) b 由一個(gè)簡單序列重復(fù)屢次組成的3'無義區(qū) c 以上都正確 d 以上都不正確- 答案: C;哪些有
7、關(guān)免疫球蛋白基因重排的表達(dá)是正確的?-類型:選擇題-選擇:a所有物種中V基因的數(shù)目是一樣的b J是恒定區(qū)的一局部c各局部連接時(shí),將產(chǎn)生缺失或重排d當(dāng)一個(gè)等位基因中發(fā)生有意義的重排時(shí),另一個(gè)等位基因也發(fā)生重排- 答案: C;分析比擬細(xì)菌轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)與特點(diǎn)。 - 類型:簡答題- 答案: 答: 1974 年,隨著發(fā)現(xiàn)與抗生素抗性有關(guān)的基因可以在質(zhì)粒與細(xì)菌的染色體之間轉(zhuǎn)移,科學(xué)家 發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)座子。轉(zhuǎn)座子比 IS 元件大很多 一般為 220kb ,它們至少含有一個(gè)基因,給宿主帶來可遺傳的 標(biāo)記,一般是對一種或多種抗生素的抗性。 這是一種非常有用的性質(zhì), 因?yàn)槊糠N質(zhì)??梢杂靡环N轉(zhuǎn)座子“標(biāo) 記,這樣通過對藥物
8、的抗性表型可以簡單地檢測質(zhì)粒的存在和轉(zhuǎn)移;同樣,可以輕易地觀察到轉(zhuǎn)座。轉(zhuǎn)座子Tn5圖A8.2長5.7kb,是一種結(jié)構(gòu)最簡單的轉(zhuǎn)座子;它由三個(gè)成分組裝而成:一個(gè)長中心區(qū)2 7kb, 含有卡那霉素的抗性基因,兩端為一對 IS 元件,每個(gè)長 1.5kb ,方向相反。其他的轉(zhuǎn)座子兩端為不同的IS元件,有時(shí)兩個(gè)IS同向。這些轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座類似IS元件,轉(zhuǎn)座過程中宿主的一個(gè)序列或DNA靶位點(diǎn)被復(fù)制。發(fā)生轉(zhuǎn)座首先是因?yàn)槿我庖粋€(gè) IS 序列或兩個(gè) IS 序列同時(shí)起作用,編碼一個(gè)轉(zhuǎn)座酶在某些元件中,如Tn5, 個(gè)IS只有局部功能,不能編碼一個(gè)有活性的轉(zhuǎn)座酶;其次,轉(zhuǎn)座子兩端通常有一對與IS特異相應(yīng)的反向重復(fù)序列:
9、無論 IS 元件是正向還是反向的,這些末端重復(fù)序列都存在。還有一種可能性:任一對 IS 元件可以相互作用使它們之間的任意序列轉(zhuǎn)座,這樣任一個(gè)基因都可以在兩端連上兩個(gè)同樣的IS元件成為轉(zhuǎn)座子;這個(gè)性質(zhì)已被用構(gòu)建重組 DNA分子。Tn5因?yàn)槠浣M件的組成被稱為集成轉(zhuǎn)座子。其他轉(zhuǎn) 座子, 如復(fù)雜的轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)是不同的; 它們兩端不是一對 IS 而是一對反向重復(fù),編碼轉(zhuǎn)座所需蛋白的基 因位于轉(zhuǎn)座子的中心區(qū)。- 答案圖片: picture-以下關(guān)于抗體類型轉(zhuǎn)變的表達(dá)哪些是正確的?-類型:選擇題-選擇:a每種重鏈具有不同的功能 b類型轉(zhuǎn)變的次序按染色體上重鏈排列順序進(jìn)行 c 一旦一種類型轉(zhuǎn)換發(fā)生,其他的轉(zhuǎn)換
10、將不再進(jìn)行 d 也 可通過可變剪接改變重鏈- 答案: a,b,d鋅指蛋白與鋅的結(jié)合-類型:選擇題-選擇:a是共價(jià)的b必須有DNA勺存在c通過保守的胱 氨酸和組氨酸殘基間協(xié)調(diào)進(jìn)行d位于蛋白質(zhì)的a螺旋區(qū)域- 答案: c ;鋅指蛋白與DNA的結(jié)合- 類型:選擇題-選擇:a位于DNA大溝b通過“鋅指的C端進(jìn)行c 利用蛋白的一螺旋區(qū)域 d每個(gè)“指通過形成兩個(gè)序列特異的 DNA接觸位點(diǎn)e通過“指中保守的氨 基酸同DNA結(jié)合- 答案: a,b,c,d甾醇類受體轉(zhuǎn)錄因子-類型:選擇題-選擇:a結(jié)合的激素都是相同的 b與DNA勺結(jié)合不具序列 特異性c與鋅結(jié)合的保守序列不同于鋅指蛋白 d通過第二“指 C 端的氨基
11、酸形成二聚體 e參與轉(zhuǎn) 錄激活,與DNA和激素結(jié)合分別由不同的結(jié)構(gòu)域完成- 答案: c, e;糖皮質(zhì)激素類的甾醇受體- 類型:選擇題-選擇:a是同源二聚體b所結(jié)合的DNA回文序列都不 相同c結(jié)合的回文序列相同,但組成回文序列兩段DNA間的序列不同dRXR受體通過形成異源二聚體后與同向重復(fù)序列結(jié)合 e 這類受體存在于細(xì)胞核中- 答案: a , c,e;同源異型域蛋白-類型:選擇題-選擇:a形成具有三個(gè)a螺旋的結(jié)構(gòu)b主要通過a螺旋3 和N端的臂與DNA接觸c與原核生物螺旋一轉(zhuǎn)角一螺旋蛋白如阻遏物的結(jié)構(gòu)很相似d通常存在于細(xì)胞核中 e 在果蠅早期發(fā)育調(diào)控中起重要作用- 答案: a,b,c,e;HLH蛋
12、白-類型:選擇題-選擇:a在序列組成上與原核生物螺旋一轉(zhuǎn)角一螺旋蛋白具有相關(guān)性b通過環(huán)區(qū)與DNA結(jié)合c形成兩個(gè)a螺旋與DNA的大溝結(jié)合d由形成兩性螺旋,其中疏水殘基位于螺 旋的一側(cè) e 以上都不是- 答案: d ;bHLH蛋白-類型:選擇題-選擇:a在環(huán)中含有保守的堿性氨基酸 b不能形成同源二聚體c非 誘導(dǎo)表達(dá)d通過它們堿性區(qū)與 HLH相互作用e只有與HLH形成異源二聚體后才與 DNA吉合f以上都 不是- 答案: F;以下關(guān)于亮氨酸拉鏈蛋白的表達(dá)哪一項(xiàng)為哪一項(xiàng)正確的 ? - 類型:選擇題 - 選擇: a 它們通過保守的亮氨酸 殘基與DNA結(jié)合b它們與HLH蛋白相似之處是:它們都具有相鄰的DNA
13、結(jié)合結(jié)構(gòu)域和二聚化結(jié)構(gòu)域cJun 蛋白可以形成同源二聚體而 Fos 蛋白不可以 d 由 FosJun 復(fù)合物與 Jun/Jun 復(fù)合物結(jié)合的 DNA序列不同(e)Fos /Jun與DNA的結(jié)合比Jun/Jun牢固- 答案: b,c,e;選出所有正確的選項(xiàng): ( ) - 類型:選擇題 - 選擇: (a) 基因必須經(jīng)過完全的甲基化才能表達(dá) (b) 具有活 性的DNA是非甲基化的(c)隨著發(fā)育階段的改變,DNA的甲基化也要發(fā)生變化(d)在DNA復(fù)制過程中,通 過識別半甲基化的酶,甲基化得以保存- 答案: b,c,d;以下哪些轉(zhuǎn)錄因子含有 TBP?()-類型:選擇題-選擇:(a) B (b) A (c
14、)SLI (d) TFD D (e) TF山B (f)UBFI - 答案: c ,d,e;以下哪些轉(zhuǎn)錄因子是裝配因子?()- 類型:選擇題-選擇:(a)SPl (b) TF山B (c) TF UH (d)以上都不是- 答案: d;以下關(guān)于TBP的述哪些是正確的?()-類型:選擇題-選擇:(a)TBP誘導(dǎo)DNA發(fā)生彎曲(b)TBP結(jié)合于DNA雙螺旋的大溝(c)TBP通過與不同的蛋白結(jié)合來識別不同的啟動(dòng)子(d)TBP與聚合酶I、聚合酶H和聚合酶的共同亞基作用TATA框存在于-類型:選擇題-選擇:a聚合酶H識別的所有啟動(dòng)子中 b聚合酶H識別的大局部 啟動(dòng)子中c聚合醇U識別的極少數(shù)啟動(dòng)子中 d聚合酶山
15、識別的所有啟動(dòng)子中 e聚合酶山識別的大部 分啟動(dòng)子中f聚合酶山識別的極少數(shù)啟動(dòng)子中- 答案: b , fRNA聚合酶H的C端結(jié)構(gòu)域CTD的磷酸化與相關(guān)-類型:選擇題-選擇:a與起始前復(fù)合體的結(jié)合bTF IIH的激酶活性c TFDD中特異TAF蛋白的存在d從起始聚合酶到延伸聚合酶的轉(zhuǎn)換e起始因子TFIA TFIB 及TFID的釋放- 答案: b , d, e;以下哪個(gè) 些情況能解釋為什么一些基因在它們的轉(zhuǎn)錄因子存在時(shí)并不總是處于活性狀態(tài)? - 類型:選擇題 - 選擇: a 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的鄰近序列 b 有其他蛋白的結(jié)合 c 轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的染色質(zhì)結(jié) 構(gòu)狀態(tài) d 缺少共激活蛋白 e 以上都是-
16、 答案: e真核細(xì)胞中的RNA聚合酶僅在細(xì)胞核中有活性。-類型:判斷題 - 答案: 錯(cuò)誤類型:判斷題在RNA的合成過程中,RNA鏈沿3'到5'方向延長。- 答案: 錯(cuò)誤候選三磷酸核苷通過對生長中RNA鏈的a磷酸的親和攻擊加到鏈上。-類型:判斷題- 答案: 正確。核不均一 RNA是 mRNA和rRNA的前體而不是tRNA的前體.-類型:判斷題- 答案: 錯(cuò)誤。密碼子AUG專門起mRNA分子編碼區(qū)的終止作用。-類型:判斷題- 答案: 錯(cuò)誤。fMet的tRNA的反密碼子是 TAG -類型:判斷題- 答案: 錯(cuò)誤。細(xì)菌細(xì)胞用一種 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄所有的 RNA而真核細(xì)胞那么有三種不同的
17、 RNA聚合酶。-類型:判斷題轉(zhuǎn)錄因子具有獨(dú)立的 DNA吉合和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域。-類型:判斷題- 答案: 正確。- 類型:判斷題每個(gè)轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)被單個(gè)轉(zhuǎn)錄因子識別。- 答案: 錯(cuò)誤。糾正以下一段話中的錯(cuò)誤:在E.coli中,通過RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互補(bǔ)的dNTP同5亞基結(jié)合,然后是第二個(gè) dNTP通過與第一個(gè)dNTP形成2' 5'磷酸 二酯鍵而結(jié)合 上。當(dāng)生成的RNA鏈約有12個(gè)核苷酸長度時(shí),B 亞基脫離DNA聚合酶,RNA鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。 當(dāng)DNA聚合酶在RNA鏈上遇到終止密碼子時(shí),轉(zhuǎn)錄作用停止。-類型:判斷題-答案:此段表達(dá)中的
18、錯(cuò)誤局部用下劃線標(biāo)出,并在后面進(jìn)行更正:在E.coli中,通過RNA聚合酶同操縱基因的結(jié)合來起始轉(zhuǎn)錄。 與轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)堿基互補(bǔ)的 dNTP同5亞基結(jié)合,然后是第二個(gè)dNTP通過與第一個(gè) dNTP形成2't5'磷酸二酯鍵而結(jié)合上。當(dāng)生成的RNA鏈約有12個(gè)核苷酸長度時(shí) B'亞基脫離DNA聚合酶,RNA鏈在全酶的作用下繼續(xù)延伸。當(dāng)DNA聚合酶在RNA鏈上遇到終止密碼時(shí),轉(zhuǎn)錄作用停止。操縱基因啟動(dòng)子;dNTP>NTP 5 亞基亞基;dNTP>NTP2 -5' 3' - 5'DNA>RNA 全酶核心酶;DNRNA RNDNA終止密碼終止信號
19、真核生物的mRNA加工過程中,5'端加上,在3'端加上,后者由催化。如果被轉(zhuǎn)錄基因是不 連續(xù)的,那么,一定要被切除,并通過過程將連接在一起。這個(gè)過程涉及許多RNA分子,如Ul 和 U2 等,它們被統(tǒng)稱為 。它們被統(tǒng)稱為 。它們分別與一組蛋白質(zhì)結(jié)合形成 ,并進(jìn)一步地組成40S或60S的結(jié)構(gòu),叫。-類型:填空題 -答案: 帽子結(jié)構(gòu);多腺苷化尾;po1yA聚合酶; 含子; 剪接;外顯子;snRNA snRNp剪接體膠原蛋白通過在不同的脯氨酸殘基上添加基團(tuán)而被化學(xué)修飾。這個(gè)反響是由兩種酶催化的,它們是 和。其他的一些蛋白質(zhì)被磷酸化。蛋白質(zhì)上添加寡聚糖的過程叫 而添加脂肪酸鏈那么叫 。
20、O 寡聚糖是一種同或殘基上氧連接的寡聚糖,而N寡聚搪是通過與上的氮原子連接而成。N寡聚糖又是從同一種叫做脂的前體寡聚糖衍生而來。- 類型:填空題- 答案: 羥基; 脯氨酰 3羥基化酶;脯氨酰 4羥基化酶; 蛋白激酶; 糖基化作用;?;饔?; 絲氨酸; 氨酸; 天冬酰胺; 長醇阿黑皮素原是被切割以后可以產(chǎn)生很多活性蛋白質(zhì)的一個(gè)例予。如之類的RNA病毒也能合成類似的結(jié)構(gòu)物。蛋白水解過程也涉及細(xì)胞外毒素的活性,如蜜蜂的和動(dòng)物激素的活性,如和。 -類型:填空題- 答案: 多聚蛋白;脊髓灰質(zhì)炎病毒;布魯菌素;胰島素; 胰高血糖素剪接小體是-類型:選擇題-選擇:a由多種snRNP組成的結(jié)構(gòu)b大小為40S
21、 60S c 一種在拼接中起作用的結(jié)構(gòu) d 以上都不正確 eRNA 加工的一種形式- 答案: b,c在C連接寡聚糖中,直接同多肽相連的糖基是-類型:選擇題-選擇:a甘露糖bN 乙酰葡糖胺cC 半乳糖或N乙酰半乳糖胺d半乳糖或N乙酰葡萄糖胺e葡萄糖正常情況下,同乙酰化蛋白質(zhì)氨基末端的甘氨酸相連的脂肪酸是 ( ) - 類型:選擇題 - 選擇: (a) 軟脂酸(b) 油酸 (c) 十四酸鹽 ( 肉豆蔻酸鹽 ) (d) 乙?;?(e) 以上都對- 答案: c ;在阿黑皮素原中被識別和切割的氨基酸殘基是 ()-類型:選擇題-選擇:(a)賴氨酸和精氨酸(b)谷氨 酰胺和甘氨酸(c)賴氨酸和天冬酰胺(d)
22、a 和b,其中a是丙氨酸,天冬氧酸或甘氨酸,b是丙氨酸或脯氨酸 (e) 天冬酰胺和賴氨酸- 答案: c;哪些有關(guān)剪接位點(diǎn)的表達(dá)是正確的?()-類型:選擇題-選擇:(a)剪接位點(diǎn)含有長的保守序列(b)5 '與 3'剪接位點(diǎn)是互補(bǔ)的 (c) 幾乎所有的剪接位點(diǎn)都遵從GTAG 規(guī)律 (d) 剪接位點(diǎn)被保存在成熟的 mRNA中 (e) 含子 3'與 5'剪接位點(diǎn)間的距離可以很大(f) 一個(gè)含子的 5'剪接位點(diǎn)只能與同一個(gè)含子的3'剪接位點(diǎn)作用,雜合含子不能被剪接- 答案: c,e分支位點(diǎn)核苷酸()- 類型:選擇題-選擇:(a)總是A ( b)的位置在含子
23、是隨機(jī)的(c)位于一個(gè)非嚴(yán)格保守的序列 (d) 通過與 3'剪接位點(diǎn)作用起始剪接的第一步(e) 在剪接的結(jié)于步完成后與含子中另外三個(gè)核苷酸共價(jià)連接轉(zhuǎn)酯反響:- 類型:選擇題-選擇:a不需要ATP b拆開一個(gè)化學(xué)鍵后又形成另一個(gè)化學(xué)鍵c涉及對糖磷骨架 0H 基團(tuán)的親核攻擊 d 以上都正確- 答案: d ;選出所有有關(guān)snRNA的正確表達(dá):-類型:選擇題-選擇:asnRNA只位于細(xì)胞核中b大多數(shù)snRNA 是高豐度的c snRNA在進(jìn)化的過程中是高度保守的d某些snRNA可以與含子中的保守序列進(jìn)行堿基配對 e 以上都正確- 答案: e ;參與前體mRNA剪接的snRNP-類型:選擇題-選擇
24、:a與一組Sm蛋白結(jié)合b含有獨(dú)特的蛋白即 不存在任何其他snRNP的蛋白c其RNA和蛋白組分都是其作用不可缺少的d主要通過蛋白組分與前體mRNA吉合e以上都正確- 答案: a,b,c ;剪接小體的組裝-類型:選擇題-選擇:a按有序的途徑一步步完成 b涉及snRNP與水溶性蛋白即 不是任何snRNP組分的蛋白c不需要ATP d伴隨著屢次snRNP的重組合e以上都正確 - 答案: a,b,d ;SR蛋白-類型:選擇題-選擇:a家族中的成員都具有一個(gè)或多個(gè)精氨酸和絲氨酸豐富區(qū)b分別與特異的RNA序列結(jié)合c形成一個(gè)蛋白質(zhì)連接橋 U2AF和UlsnRNP d都需要UlsnRNP e可幫助識別外 顯子 f
25、 以上都正確- 答案: a , c,d,e;H型剪接與前體mRNA剪接的相似之處是-類型:選擇題-選擇:a兩種含子具有相似的剪接位點(diǎn):b它們都通過向樣的機(jī)制進(jìn)行剪接,其中涉及套索中間體c都由肋A催化進(jìn)行d都需要Ul snRNPe都可以在沒有蛋白的情況下進(jìn)行 f 兩種含子都形成精細(xì)的二級結(jié)構(gòu)- 答案: a , b, c;可變剪接 - 類型:選擇題 - 選擇: a 與“組成型剪接的機(jī)制完全不同 b 可以從單個(gè)基因產(chǎn)生 多種同功蛋白, 即添加或缺失少數(shù)氨基酸的變異蛋白 c 涉及不同的 5'和 3'剪接位點(diǎn) d 被用于在不同 組織和不同的發(fā)育階段產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì) e 可以跨越外顯子,也
26、涉及可變外顯子或保存含子- 答案: b , c, d, e;多數(shù)情況下,剪接發(fā)生在同一個(gè)RNA分子部。但反式剪接-類型:選擇題-選擇:a已被證實(shí)存在于天然和合成的含子中b涉及前體mRNA與獨(dú)立的SLRNA間的剪接c與順式剪接的機(jī)制完全不同d有時(shí)是錐蟲與線蟲的剪接方式e將同一個(gè) 5'外顯子SLRNA剪接到所有 mRNA上f 只需要 U1與U5snRNP- 答案: a , b, d, e ;tRNA中的含子-類型:選擇題-選擇:a通過兩步轉(zhuǎn)酯反響被切除 b具有與反密碼子互補(bǔ)的序列c都形成相似的二級結(jié)構(gòu)d由蛋白酶核酸切酶和連接酶切除e在5f和3P剪接位點(diǎn)的序列是保守的- 答案: b ,c,d
27、在前體 mRNA上加多聚腺苷酸尾巴- 類型:選擇題-選擇:a涉及兩步轉(zhuǎn)酯機(jī)制b需要保守的 AAUAAA序列c在AAUAAA序列被轉(zhuǎn)錄后馬上開始 d通過一個(gè)多組分復(fù)合物的逐步組裝進(jìn)行 e由依賴 于模板的RNA聚合酶催化- 答案: b , d ;真核細(xì)胞 mRNA前體的長度由- 類型:選擇題-選擇:a轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)形成的莖環(huán)結(jié)構(gòu)決定其b其3'末端的聚腺苷酸化位點(diǎn)所決定,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在此位點(diǎn)被切割并加上polyA c在終止位點(diǎn)與。RNA聚合酶H結(jié)合的終止蛋白決定d將所有初始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加工成最終長度的前體mRNA的核酸外切酶決定e加帽、聚腺苷酸化及含子的剪接所決定- 答案: b ;以下關(guān)于mRNA降解
28、的正確表達(dá)是-類型:選擇題-選擇:a原核mRNA勺降解由核酸切酶從核糖體 翻譯的后面5'端開始b原核mRNA勺降解通常由核酸外切酶從3't5'進(jìn)行c真核mRNA勺降解依賴于末端序列中多個(gè)特異性失活元件d真核mRNA勺降解依賴于po1yA核糖核酸酶的作用e所有的mRNA在 5'末端的降解通常涉及核糖核酸切酶活性 - 答案: a , b, c, d, e; 可變剪接能增加轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,這些轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物問的區(qū)別在于 ( ) - 類型:選擇題 - 選擇: (a)mRNA 的 5'非轉(zhuǎn) 錄區(qū)(b)mRNA的編碼區(qū)(c)mRNA的3'非轉(zhuǎn)錄區(qū)(d)上述全是(e)上述
29、全不是- 答案: d ;在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,RNA編輯()-類型:選擇題-選擇:(a)可以在轉(zhuǎn)錄后水平改變一個(gè)基因的編碼能力(b)能在小腸細(xì)胞中的apo B mRNA勺中部插入一個(gè)終止密碼子, 在肝細(xì)胞中卻不能(c)通常使每個(gè)mRNA 都發(fā)生很大的變化 (d) 通過脫氨基可以改變特定的核苷酸- 答案: a , b, d;在錐蟲的線粒體中,RNA編輯()-類型:選擇題-選擇:(a)被廣泛用于改變許多 mRNA勺編碼能力(b) 只在每個(gè)MRNAk改變單個(gè)核苷酸(c)只加上G和缺失G (d)由向?qū)NA旨導(dǎo)進(jìn)行,其中向?qū)敲?A與編輯前 mRNAh被編輯區(qū)域相鄰的堿基互補(bǔ) (e)所用的向?qū)NA上有一
30、小段區(qū)域與被編輯的 mRN短補(bǔ)。(f)進(jìn)行 的方向與轉(zhuǎn)錄方向相同- 答案: a , d, e產(chǎn)生單個(gè)堿基變化的突變叫( )突變,如果堿基的改變產(chǎn)生一個(gè)并不改變氨基酸殘基編碼的(),并不會(huì)造成什么影響,這就是( )突變。如果改變了氨基酸殘基的密碼,這就是( )突變。這種突變對蛋白質(zhì) 功能影響程度要根據(jù)被改變的氨基酸殘基在蛋白質(zhì)( ) 或( )結(jié)構(gòu)中的重要程度,或是與酶的( )的 密切性來決定,活性變化圍可從( )到接近正常。 - 類型:填空題- 答案: 點(diǎn);密碼子;同義;錯(cuò)義;二級的;三級的;活性位點(diǎn);零一種由于蛋白質(zhì)序列中喪失了 ( ) 殘基引起的突變將會(huì)阻止 ( ) 橋的形成, 這種蛋白質(zhì)更
31、容易 ( ) 。如果在 ( ) 溫度是穩(wěn)定的而在( )溫度是不穩(wěn)定的,將它稱為( )突變,是( )突變的一個(gè)例子。 - 類型:填空 題- 答案: 半胱氨酸; 二硫; 變性; 較低的; 較高的; 溫度敏感;條件致死無義突變是將一種氨基酸的 ( )轉(zhuǎn)變成 ( )密碼子, 結(jié)果使蛋白質(zhì)鏈 ( )。一個(gè)堿基的插入或 ( )叫( ) 突變。由于三聯(lián)( )的移動(dòng),突變位置( )的整個(gè)氨基酸序列都會(huì)被改變。上述兩種類型的突變 ( 插入和 缺失)所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)同( )的不同,通常是完全( ) - 類型:填空題- 答案: 密碼子;終止;變短;缺失;移碼;可讀框;下游;野生型; 失活下面所列的是由突變而產(chǎn)生的一些
32、異常表型(A) ,同時(shí)也列出了表型由突變而造成的缺陷的可能原因(B) 。請盡可能地將A項(xiàng)所列的異常表型同 B項(xiàng)所列的可能原因配對。A異常表型:B缺陷可能出現(xiàn)在:(a)細(xì)人的鐮狀細(xì)胞貧血癥菌的營養(yǎng)缺陷型 (t) 合成途徑 (b) 細(xì)菌溫度敏感突變體 (u) 降解途徑 (c) 細(xì)菌的誘導(dǎo)酶變成組成酶 (v) DNA 的修復(fù) (d) 果蠅的紅眼變成白眼 (w) 轉(zhuǎn)錄控制 (e) 果蠅形成兩個(gè)胸節(jié) (x) 細(xì)胞分裂控制 (f)(y) 胚胎發(fā)育控制 (g) 人的原葉啪癥 (z) 蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性 (h) 人著色性干皮病(i) 苯丙酮尿癥 (j)人腫瘤的發(fā)生 - 類型:填空題-答案:(a)與(b)與(c)與
33、(w) (d)與(t) (e)與(y) (f)與(g)與(t) (h)與(v) (i)與(u) (j) 與(x)下面各句是對不同誘變劑作用的表達(dá), 寫出相應(yīng)情況的誘變劑的名稱: (1) 通過同雙螺旋的結(jié)合, 引起變 構(gòu),并激活修復(fù)性切核酸酶的誘變劑是: ( ) (2) 引起總?cè)旧w的損傷如斷裂和轉(zhuǎn)位的誘變劑是: ( ) (3) 取代正常的堿基而摻入到 DNA中,并通過互變異構(gòu)引起復(fù)制錯(cuò)誤的誘變劑是:()(4)只能夠除去胞哦暖和甲基密嘧啶胞的氨基基團(tuán)的誘變劑是: ( ) (5) 主要是引起同一條鏈上的相鄰嘧啶間的交聯(lián)的誘變劑是:()(6)主要是在 DNA雙螺旋的形變和鏈的錯(cuò)排過程中引起插入或缺失
34、的誘變劑是()。(7)可以除去DNA中任何一個(gè)帶有氨基基團(tuán)的堿基上氨基基團(tuán)的誘變劑是:()。-類型:填空題-答案:(1) 丫啶類染料(2) a、B、或y輻射(3)5 溴尿嘧啶;2 氨基嘌吟(4)羥胺(5)紫外線照射 (6) 丫啶類染料 (7) 亞硝酸原核生物的核糖體 RNA和tRNA相對較穩(wěn)定并且半衰期長,而 mRNA卻不穩(wěn)定,很快被降解、請解釋這種穩(wěn)定性的差異。- 類型:簡答題- 答案: 答:如果轉(zhuǎn)錄物的壽命很長, 就不可能通過控制 mRNA的合成速率來調(diào)節(jié)基因的活性。另一方面,如果tRNA和rRNA的壽命長的話,就更合算。列舉兩種受調(diào)控蛋白控制的、與氨基酸的生物合成有關(guān)的操縱子。 - 類型
35、:簡答題- 答案: 答:色氨酸, 精氨酸。什么是撫慰誘導(dǎo)物 ? - 類型:簡答題- 答案: 答:撫慰誘導(dǎo)物是一種與天然誘導(dǎo)物結(jié)構(gòu)相似的化合物,它雖然能誘導(dǎo)操縱子表達(dá),但是它不能被操縱子基因產(chǎn)生的酶分解。在 lac 操縱子中異丙基硫代半乳糖苷 (IPTG) 是乳糖的類似物能代替異乳糖 作為誘導(dǎo)物,但不能作為3-半乳糖苷酶的底物進(jìn)入代途徑。葡萄糖是如何影響涉及糖代的操縱子 (葡萄糖敏感型操縱子 )的表達(dá) ? - 類型:簡答題-答案:答:在缺乏葡萄糖時(shí),CAMP的水平升高,CAP蛋白同每一個(gè)葡萄糖敏感操縱子中啟動(dòng)子的CAP位點(diǎn)結(jié)合,轉(zhuǎn)錄作用協(xié)同起始。如果有葡萄糖,CAMP的水平下降,CAP蛋白不再結(jié)
36、合,轉(zhuǎn)錄的速率協(xié)同下降。在大多數(shù)細(xì)菌操縱子中, 結(jié)構(gòu)基因通常緊 * 在一起并由單個(gè)操縱序列啟動(dòng)子區(qū)調(diào)控, 而在一些例子中結(jié)構(gòu) 基因分散在染色體上。請問這些基因是如何以簡單的方式到達(dá)協(xié)同調(diào)節(jié)的。 - 類型:簡答題- 答案: 答: 每一個(gè)結(jié)構(gòu)基因都有它自己的啟動(dòng)子和通用的操縱基因序列。闡述原核生物的轉(zhuǎn)錄終止。 1 轉(zhuǎn)錄終止的兩種主要的機(jī)制是什么 ? 2 描述翻譯怎樣能調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄終止。 3 為什么在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄終止中很少涉及到Rho因子? 4怎樣能阻止轉(zhuǎn)錄的終止?-類型:問答題-答案: 答:原核生物中的轉(zhuǎn)錄終止作用概要如下:1原核生物中兩種不同的轉(zhuǎn)錄終止機(jī)制:在某一位點(diǎn)不需要其他因子協(xié)助僅依賴于在終止子的
37、終止機(jī)制;依賴于肋b因子的終止機(jī)制。2翻譯可通過弱化作用調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄終止,例如發(fā)生在氨基酸生物合成基因的表達(dá)中。前導(dǎo)肽的翻譯可以調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因下 游的轉(zhuǎn)錄。這種調(diào)節(jié)的重要性充分表達(dá)在氨基酸的生物合成中 例如色氨酸 。原核細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄和翻譯是同 時(shí)發(fā)生的,正在翻譯的核糖體就像在追趕正在轉(zhuǎn)錄的RNA聚合酶。具有所需氨酰tRNA時(shí),核糖體可將前導(dǎo)序列翻譯成前導(dǎo)肽,而在前導(dǎo)開放讀碼框的終止密碼子處終止翻譯。新生的mRNAl由形成3-4莖環(huán)完全配對終止結(jié)構(gòu),所以阻礙了 DNA旨導(dǎo)的RNA聚合酶的前進(jìn),結(jié)構(gòu)基因的下游轉(zhuǎn)錄終止,即發(fā)生弱化現(xiàn)象。 假設(shè)某種氨基酸短缺,那么會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的氨酰tRNA短缺,核糖體終止在前導(dǎo)
38、可讀框中所短缺的氨基酸密碼子上。 2-3 莖環(huán)形成抗終止子,這一莖環(huán)不是聚合酶的終止信號,它可以防止3-4 莖環(huán)的形成,使結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄進(jìn)行下去。3在原核生物中、轉(zhuǎn)錄與翻譯是同時(shí)進(jìn)行的,意味著核糖體追趕著DNA旨導(dǎo)的RNA聚合酶。Rho因子是一個(gè)依賴于 RNA的 ATP水解酶,能夠在轉(zhuǎn)錄過程中將在轉(zhuǎn)錄泡中的RNA-DNA雜合體分開。因此它順著轉(zhuǎn)錄的方向5't3'追趕 DNA指指導(dǎo)的RNA聚合酶。假設(shè)核糖體正好阻礙了它的前進(jìn),那么依賴于 肋 b 因子的終止反響不會(huì)發(fā)生。 4最為常見的機(jī)制是抗終止 參見噬菌體遺傳學(xué) ??菇K止于是一種能 識別終止序列上游抗終止序列例如入噬菌體的nut
39、位點(diǎn)的蛋白質(zhì),它幫助抗終止子所利用的底物如入噬菌體基因表達(dá)中的 Nus蛋白與依賴DNA的 RNA聚合酶的相互作用,通讀下游的終止子序列。復(fù)制DNA的聚合酶DNA依賴的DNA聚合酶也有校正功能,解釋為什么RNA聚合酶沒有這種功能。-類型: 問答題- 答案:答在DNA水平保持遺傳信息的忠實(shí)性是至關(guān)重要的,因此DNA旨導(dǎo)的DNA聚合酶具有校正功能是必不可少的。轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物與 RNA復(fù)制及RNA分子通常半衰期較短,所以轉(zhuǎn)錄中的錯(cuò)誤可以通過具有天然降 解活性的RNA酶進(jìn)行修復(fù)。無功能的產(chǎn)物可以被正確的副本所替換。討論原核生物基因表達(dá)的聚合作用反響定向的重要性。假設(shè)核糖體從3'端到5'端讀它的
40、模板 mRNA勺話,那么將會(huì)發(fā)生什么情況 ? - 類型:問答題- 答案: 答:原核基因表達(dá)在空間和時(shí)間上是復(fù)雜和高度精細(xì)的過程。為了保持反響的自由碰撞,轉(zhuǎn)錄和翻坪的定向是相當(dāng)重要的。同時(shí)發(fā)生在兩條鏈的5' -3'方向的環(huán)狀 DNA的復(fù)制開始減慢,最后停止在特殊的終止序列上。翻譯過程中,核糖體總是追趕著 RNA聚合酶。由于mRNA!單鏈分子而且容易被降解, 因此翻譯不可能發(fā)生在 3' -5'的方向。概括細(xì)菌細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過程。 - 類型:問答題-答案:答:轉(zhuǎn)錄是通過RNA聚合酶RP的作用,以一條DNA鏈為模板產(chǎn)生一條單鏈 RNA的 過程。步驟 如下:1與RP全酶的結(jié)合
41、:一個(gè)RP全酶分子與待轉(zhuǎn)錄的 DNA編碼序列上游的啟動(dòng)子序列松弛地結(jié)合。圖A7.1 2起始:RP往下游移動(dòng)了幾個(gè)核苷酸到達(dá)啟動(dòng)子的另一段短序列 Pribnow框,緊密地與DNA結(jié)合。DNA上的啟動(dòng)子區(qū)域解鏈,RNA便從Pribnow框下游的幾個(gè)核苷酸處開始合成,通常是 DNA 的反義鏈作為模板。合成幾個(gè)核苷酸后,b因子被釋放并被循環(huán)使用,以下的步驟不再需要 b因子圖A7.2.延伸:四核心酶沿著DNA模板移動(dòng),使DNA解鏈,與DNA模板的下一堿基互補(bǔ)的核苷三磷酸聚合到鏈上。RP繼續(xù)在DNA上移動(dòng),RNA鏈從模板鏈被釋放出來, DNA雙螺旋重新形成圖A7.3。4終止:當(dāng)所有編 碼序列被轉(zhuǎn)錄后,RP
42、移到一個(gè)終止序列,即終止子。轉(zhuǎn)錄復(fù)合體解體,RP和新合成的RNA從 DNA模板脫落下來。- 答案圖片:picture-a7.1.jpg - 答案圖片:picture- 類型:問答題概括典型原核生物啟動(dòng)子的結(jié)構(gòu)和功能,并解釋什么是保守序列40 個(gè)核苷酸并-答案:答:啟動(dòng)于是與RP結(jié)合和轉(zhuǎn)錄起始的特殊序列。典型的原核生物啟動(dòng)子大約長有兩個(gè)重要的序列圖A7.4 1-35 區(qū) 位于復(fù)制起點(diǎn) 什1上游35個(gè)核苷酸處的6核苷酸序列,能被 RNA 聚合酶全酶識別并結(jié)合。其中b亞基在識別中起關(guān)鍵作用。因?yàn)闆]有b亞基的核心酶只能隨機(jī)地結(jié)合到DNA上。Pribnow 或-10區(qū) 另一個(gè)位于-10處的6核苷酸序列。
43、RP松散地結(jié)合到-35區(qū)后,它沿著DNA 移動(dòng)幾個(gè)核苷酸使 Pribnow框區(qū)域約10bp解鏈,形成一個(gè)緊密結(jié)合的 RP-DNA復(fù)合體。Pribnow .框使RP 能夠識別DNA雙鏈中的反義鏈,確保轉(zhuǎn)錄的鏈和方向無誤。于是,RP在反義鏈的+1堿基的相對處插入一個(gè)核糖核苷三磷酸,起始RNA的合成。Pribnow框具有的保守序列:5' -TATAAT-3'有義鏈 3' -ATATTA-5' 反義鏈 通常簡寫為TATAAT保守序列指所有啟動(dòng)子的該部位都有這一序列或十分相似的序列3僅在極少啟動(dòng)子中,Pribnow框有1個(gè)或2個(gè)核苷酸不同。與此相似,-35區(qū)有nGAcA的
44、保守序列- 答案圖片: picture-轉(zhuǎn)錄如何在基因或基因組末端終止 ? - 類型:問答題-答案:答:RNA合成在一段特定的序列一一終止子停止,終止子存在于DNA模板和RNA專錄產(chǎn)物中。檢測RNA的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物它與反義鏈互補(bǔ)時(shí)發(fā)現(xiàn)終止子含有兩個(gè)特殊序列 圖A7.5 : 1富含G-C的反向重 復(fù)序列,使新合成的 RNA形成穩(wěn)定的莖環(huán)結(jié)構(gòu)。23 '端5 6個(gè)尿嘧啶殘基。注意轉(zhuǎn)錄是在DNA上 A-T堿基配對的序列終止的。終止子作用機(jī)理如下:1當(dāng)RNA核心酶RP達(dá)終止子序列,移動(dòng)的速度減低。因?yàn)榻K止子序列富含 G-C,而G-C堿基對的轉(zhuǎn)錄速度比 A-T慢得多。2終止子被轉(zhuǎn)錄后,DNA-RNA-R
45、P復(fù) 合物馬上形成莖環(huán)結(jié)構(gòu),阻礙了 RP分子繼續(xù)向前移動(dòng)。3新合成的RNA只以5 6個(gè)弱的rU-dN鍵與DNA模板鏈相連,rU dA堿基對的穩(wěn)定性是其他 rN-dN堿基對的二百分之一,使以弱鍵連接的RNA-DNA雜合。區(qū)域解體,釋放mRNA DNA和RP。- 答案圖片:1如何區(qū)分由啟動(dòng)子起始轉(zhuǎn)錄的RNA片段與5'端被加工過的RNA片段;2證明多肽是從氨基端到羧基端方向合成的。 - 類型:問答題-答案:答:1轉(zhuǎn)錄中,5'核苷三磷酸聚合到 RNA鏈的3' -0H端,這過程包括釋放焦磷酸即兩個(gè)磷 酸基和形成磷酸二酯鍵。因此,只有5'端第一個(gè)核苷酸會(huì)有三磷酸基團(tuán)。假設(shè)R
46、NA被加工,那么5'端的核苷酸會(huì)被取代,剩下核苷單磷酸末端。2讓E.coli細(xì)胞與14C標(biāo)記的甲硫氨酸或其他標(biāo)記氨基酸共培 養(yǎng),該氨基酸只被摻人延伸中多肽的末端。提取多肽進(jìn)行檢測,標(biāo)記物能顯示最后合成的區(qū)域。研究發(fā) 現(xiàn)羧基端往往有很高濃度的標(biāo)記,而氨基端很低。比擬E.coli rRNA 和tRNA的轉(zhuǎn)錄和加工。-類型:問答題-答案: 答:E.coli有組緊密連鎖的rrn基因,可大量轉(zhuǎn)錄rRNA以滿足細(xì)胞的需要。每個(gè)轉(zhuǎn)錄單位包 括一個(gè)16S, 個(gè)23S和一個(gè)5SrRNA基因。另外,還有一 tRNA基因在16S和23S基因之間,一個(gè)或兩個(gè) tRNA基因在5S基因外圖A7.6i剩下的大約有5
47、0個(gè)tRNA基因或單獨(dú)或成串地位于基因組的其他位置上。每一轉(zhuǎn)錄單位復(fù)合物轉(zhuǎn)錄成超過5500個(gè)核苷酸的前體rRNA圖A7.6ii或前體tRNA,這些前體必須經(jīng)過加工。加工的第一步是核酸切酶切割前體分子。因此,前體rRNA被切割成前體16S,前體23S和前體5SrRNA和前體tRNA圖A7.6iii。第二步由核酸外切酶切割前體末端,形成16S,23S, 5SrRNA和tRnA。獨(dú)立轉(zhuǎn)錄的前體tRNA分子被類似地切割圖A7. 6iv。修飾是加工中經(jīng)常出現(xiàn)的。16S和23SrRNA的某些核苷酸被甲基化,而 tRNA 的修飾那么更為復(fù)雜 .tRNA 中有 10到 17的核苷酸被修飾,如甲基化或脫氨基,有
48、超 過 50 種不同的修飾堿基和稀有堿基, 它們都不能正常地進(jìn)行堿基配對。 這也是它們功能的一局部, 因而形 成三葉草結(jié)構(gòu)的非配對環(huán)。tRNA分子都有5'CCA OH3末端。這一序列非常重要,因?yàn)槟┒说腁是與氨 基酸結(jié)合的位點(diǎn)。有時(shí),這一序列是初級轉(zhuǎn)錄物的一局部,有時(shí)那么在完全加工后通過酶促添加。- 答案圖片: picture-區(qū)別可誘導(dǎo)和可阻遏的基因調(diào)控。 - 類型:問答題- 答案: 答: 在可誘導(dǎo)的系統(tǒng)中,操縱子只有在誘導(dǎo)物存在時(shí)才開放,沒有誘導(dǎo)物時(shí)阻礙物結(jié)合在操縱子上阻止結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄。存在誘導(dǎo)物時(shí),它與阻遏物結(jié)合,使之變構(gòu)不再與操縱子結(jié)合,翻開操縱子。 酶的誘導(dǎo)是分解途徑特有的
49、, 誘導(dǎo)物就是酶的底物或者底物的類似物。 在可阻礙系統(tǒng)中操縱子被終產(chǎn)物所 關(guān)閉。不存在終產(chǎn)物時(shí),阻礙物不能結(jié)合到操縱子上,因此操縱子開放;存在終產(chǎn)物時(shí),它結(jié)合到阻礙物 上,改變后者的構(gòu)象,使其能結(jié)合到操縱子上,關(guān)閉操縱子。酶阻礙是合成代的特點(diǎn)。衰減作用如何調(diào)控 E.coli 中色氨酸操縱子的表達(dá) ? - 類型:問答題-答案: 答:衰減作用根據(jù)tRNATrp的數(shù)量去調(diào)節(jié)Trp操縱子的表達(dá),而tRNATrp的數(shù)量又取決于細(xì)胞 中Trp的水平.Trp操縱子mRNA前導(dǎo)序列很長,包括了編碼一個(gè)長14個(gè)氨基酸的多肽所需的全部遺傳信息(包括一個(gè)AUG起始密碼和一個(gè) UGA終止密碼)。這個(gè)多肽含有兩個(gè)相鄰的
50、 Trp殘基,因此色氨酰-tRNA對 前導(dǎo)肽的翻譯是必不可少的。 衰減作用發(fā)生的必要條件是: (1) 翻譯產(chǎn)生前導(dǎo)多肽; (2)轉(zhuǎn)錄和翻譯的偶聯(lián)。 這樣,當(dāng)RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄前導(dǎo)序列的同時(shí)核糖體就緊接著結(jié)合到新生的mRNAh翻譯產(chǎn)生前導(dǎo)肽。mRNA勺前導(dǎo)序列包括兩對相似的反向重復(fù)序列(圖A7.7中用1,2, 3和4表示)。序列2與序列1和3局部互補(bǔ),這樣 1+2 或 2+3 或 3+4 或 1+2 和 3+4 都能通過堿基配對形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)。 由序列 3 和 4 配對形成的莖環(huán)結(jié)構(gòu) 與Trp操縱子的終止子根本相同。和終止子一樣,在其莖的3' 側(cè)具有7個(gè)連續(xù)的U形成的尾巴。當(dāng)形成這種衰減子結(jié)
51、構(gòu)時(shí),它就能像終止子一樣使轉(zhuǎn)錄終止。注意到兩個(gè)Trp 密碼位于序列 1 ,而且前導(dǎo)肽的終止密碼在序列 l 和 2 之間。這樣,如果色氨酸的量是充足的,那么, tRNATrp 的含量也能夠使前導(dǎo)肽的 翻譯進(jìn)行到終止密碼 UGA結(jié)合的核糖體覆蓋了 I和2兩個(gè)區(qū)域,這樣1和2、2和3兩個(gè)序列就不能形成 莖環(huán)結(jié)構(gòu),這就使3,4兩個(gè)序列形成衰減子環(huán)并起到終止子的作用,導(dǎo)致RNA聚合酶分子脫離DNA模板。另一方面,如果色氨酸缺乏,那么存在的色氨酰 -tRNA 也很少,導(dǎo)致核糖體停止在兩個(gè) Trp 密碼之前,這 樣核糖體僅蓋住區(qū)域 I ,并在序列 4 被轉(zhuǎn)錄之前,序列 2 和序列 3 形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)。這個(gè)結(jié)構(gòu)
52、的形成阻止了 序列3與序列4形成終止子結(jié)構(gòu)。于是,出現(xiàn)通讀,切操縱子的其他局部被繼續(xù)轉(zhuǎn)錄。事實(shí)上,是mRNAh核糖體所在的位置決定 mRNA勺二級結(jié)構(gòu)和衰減作用是否發(fā)生。- 答案圖片: picture-試證明一個(gè)基因中只有一條DNA鏈作為模板被轉(zhuǎn)錄。-類型:分析題-答案:答:假設(shè)基因兩條鏈均被轉(zhuǎn)錄,而RNA聚合酶只能以5' -3'方向合成,所以兩條DNA鏈會(huì)以相反方向轉(zhuǎn)錄。兩信使攜帶著彼此互補(bǔ)的反向核苷酸序列,編碼不同的多肽。雖然某些DNA順序能被雙方向轉(zhuǎn)錄,但這不是常見現(xiàn)象。最早的明確證據(jù)是通過研究噬菌體SP8感染枯草桿菌Bacillus subtilis 得到的。SP8的D
53、N/很特別:一條鏈重鏈富含嘌吟,另一鏈輕鏈那么富含嘧啶。假設(shè)把雙鏈 DNA溫和加熱,兩 條鏈別離即DNA變性,可用密度梯度離心別離兩條鏈。1963年,Julius Marmur和Paul Doty用SP8感染枯草桿菌細(xì)胞后提取RNA發(fā)現(xiàn)它只能與噬菌體DNA勺“重鏈雜交即互補(bǔ)配對形成DNA-RNA雜合分子。 而不會(huì)與輕鏈雜交。顯而易見,信使只可以與一條DNA鏈重鏈互補(bǔ),因而DNA雙鏈中只有一條鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板圖A7.8。Marmur和Doty很幸運(yùn)地選用SP8做實(shí)驗(yàn),因?yàn)樗娜炕蚨际峭粭lDNA1中轉(zhuǎn)錄而來。而另一些噬菌體,包括T4和入噬菌體,局部基因由一條鏈轉(zhuǎn)錄而其他基因那么由另一條鏈轉(zhuǎn)錄
54、;因此假設(shè)用這些噬菌體而不是SP8做實(shí)驗(yàn),那么不能成功地說明問題。- 答案圖片:picture-經(jīng) 過 測 序 分 析 , 欲 克 隆 的 一 段 DNA 序 列 如 下 :GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACAAGGGGCTCCTATAATAGGTGCATTTGTAGGGGATGTGGCCAC GATAGCGCGTCGAGGCATTCAGGACCGATATTGTCATATTGCCAGCATGCTGCAGCGCGCCAACTTAGTTACAACTTATACGATGATTTTA AAAAAAGAATATAAATAGCCATCCACCCGA
55、AAGACCACCGCAAGTATCGGTACGATCGTACCAGCACACACCACAGTCGCCAGTCTGTTAC AAATAATAAAGTTGATAATTAATTCACATCTACCTGGGTAACCCAGGTAGATGTGAAT這段 TAG被克 TC到某多拷貝質(zhì)粒的一個(gè) EcoRI 限制性位點(diǎn), 并表達(dá)了一個(gè)小肽, 請找出這段序列中所含有的以下幾個(gè)功能位點(diǎn):(1)兩個(gè) EcoRI 位點(diǎn) (2) 一個(gè)啟動(dòng)子 (3) 一個(gè)轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn) (4)一個(gè)轉(zhuǎn)錄終止子 (5) 一個(gè)核糖體結(jié)合位點(diǎn) (6) 一個(gè)翻譯起始密碼子 (7) 一個(gè)翻譯終止子 另請標(biāo)出相應(yīng)的調(diào)控序列及編碼區(qū)的氨基酸。 - 類型:分析題- 答 案 :答 :這 些 序 列 及 編 碼 區(qū) 的 氨 基 酸 序 列 是 :GAATTCCGGCGGCGGGGTTTTCATTATTATGATCGTTGACATGGGACAAGGGGCTCCETcAoTRAIATA-4G3GTG-3C5 -10 ATTTGTAGGGGATGTGGCCACATGATAGCGCGTCGAGGCATTCAGGACCGA
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