病原生物學教研室Department of pathogenic Biology of ...

1、病原生物學教研室病原生物學教研室Department of pathogenic Biology of Gannan Medical University醫(yī)學微生物學醫(yī)學微生物學Medical Microbiology第二十一章第二十一章 腸道病毒腸道病毒 (enterovirus) Enterovirus是小是小RNA病毒科病毒科 的一個屬。的一個屬。它們在人類消化道細胞繁殖，然后通過血液侵它們在人類消化道細胞繁殖，然后通過血液侵犯其他器官，引起各種臨床綜合病癥。犯其他器官，引起各種臨床綜合病癥。 人類腸道病毒有：人類腸道病毒有： 1、脊髓灰質炎病毒，、脊髓灰質炎病毒，3個血清型個血清型 2

2、、Coxsackie 病毒，病毒，A組組23個血清型，個血清型，B組組6個血清型個血清型 3、ECHO 病毒，病毒，31個血清型個血清型 4、新型腸道病毒，、新型腸道病毒，68、69、70、71腸道病毒的腸道病毒的共同特性共同特性：病毒體呈球形，病毒體呈球形，27nm,為為20面體對稱結構面體對稱結構,無包膜。無包膜?；蚪M為單股正鏈基因組為單股正鏈RNA。在宿主細胞漿內增殖，迅速引起細胞病在宿主細胞漿內增殖，迅速引起細胞病變。變。耐乙醚，耐酸耐乙醚，耐酸,5630min可使病毒滅，可使病毒滅，對紫外線、干燥敏感。對紫外線、干燥敏感。主要經(jīng)糞口途徑傳播，臨床表現(xiàn)多樣。主要經(jīng)糞口途徑傳播，臨床表

3、現(xiàn)多樣。 脊髓灰質炎病毒脊髓灰質炎病毒 (poliovirus)(poliovirus)脊髓灰質炎病毒是脊髓灰質炎病原體，引起脊髓灰質炎病毒是脊髓灰質炎病原體，引起小兒麻痹癥。小兒麻痹癥。1840年德國的年德國的Heiner描述了脊髓灰質炎。描述了脊髓灰質炎。1909年年Landsteiner和和Popper首次感染猴子獲首次感染猴子獲得成功，得成功，1949年年Enders等用組織培養(yǎng)法分離脊髓灰質等用組織培養(yǎng)法分離脊髓灰質炎病毒，確定有三個血清型。炎病毒，確定有三個血清型。1953年第六次國際微生物大會上病毒委員會年第六次國際微生物大會上病毒委員會推薦正式命名為脊髓灰質炎病毒。推薦正式命名

4、為脊髓灰質炎病毒。1955年年Salk滅活疫苗（滅活疫苗（IPV），），1961年年Sabin減毒活疫苗（減毒活疫苗（OPV）一、生物學特性一、生物學特性（一）形態(tài)結構（圖）（一）形態(tài)結構（圖） 1、病毒體呈球形，無包膜。、病毒體呈球形，無包膜。2730nm，20面體立體對稱。面體立體對稱。 2、外殼由、外殼由3242個殼微粒（個殼微粒（VP1、VP2、VP3、VP4）組成，）組成，VP1、VP2、VP3位于病位于病毒衣殼表面（中和抗原），毒衣殼表面（中和抗原），VP4位于衣殼的位于衣殼的內部。內部。 3、基因組為單股正鏈、基因組為單股正鏈RNA，其，其5端的端的Vpg與與RNA合成與基因組裝

5、配有關；合成與基因組裝配有關； 3端帶有端帶有polyA尾，加強其感染性。尾，加強其感染性。 病毒病毒RNA為感染性核酸為感染性核酸 Polyprotein 結構蛋白結構蛋白 功能蛋白功能蛋白 （ VP1-VP4） （酶及其它）（酶及其它） 降解真核細胞核糖體帽降解真核細胞核糖體帽 結合蛋白，封閉細胞結合蛋白，封閉細胞 mRNA的翻譯的翻譯（二）培養(yǎng)特性（二）培養(yǎng)特性腸道病毒在靈長類上皮樣細胞中生長最腸道病毒在靈長類上皮樣細胞中生長最好。常用的有猴腎、人胚腎、人胚肺、人好。常用的有猴腎、人胚腎、人胚肺、人羊膜和羊膜和HeLa細胞等。病毒在胞漿內復制，細胞等。病毒在胞漿內復制，迅速（迅速（24小

6、時）引起小時）引起細胞病變細胞病變，致使細胞，致使細胞變圓、壞死、脫落。變圓、壞死、脫落。（三）抗原組成與血清型（三）抗原組成與血清型 脊髓灰質炎病毒有脊髓灰質炎病毒有三個血清型（三個血清型（I、II、III）。用補體結合試驗查出病毒有兩種抗原，一種稱用補體結合試驗查出病毒有兩種抗原，一種稱為為D（致密）抗原，存在于成熟的、有感染性（致密）抗原，存在于成熟的、有感染性的病毒顆粒中，是該病毒的中和抗原的病毒顆粒中，是該病毒的中和抗原,具型的特具型的特異性。另一種稱為異性。另一種稱為C（無核心）抗原（無核心）抗原,存在于經(jīng)存在于經(jīng)過過56滅活或未成熟的空心病毒顆粒，與三型滅活或未成熟的空心病毒顆粒

7、，與三型病毒的抗血清均呈補體結合陽性反應。病毒的抗血清均呈補體結合陽性反應。 （四）抵抗力（四）抵抗力 病毒對理化因素的抵抗力較強，在胃腸病毒對理化因素的抵抗力較強，在胃腸道能耐受胃酸、蛋白酶和膽汁的作用，在室道能耐受胃酸、蛋白酶和膽汁的作用，在室溫下可存活數(shù)日，但溫下可存活數(shù)日，但50可迅速破壞病毒?？裳杆倨茐牟《?。二、致病性與免疫性二、致病性與免疫性 人是脊髓灰質炎病毒的唯一天然宿人是脊髓灰質炎病毒的唯一天然宿主。這是因為在人細胞膜表面有一種受主。這是因為在人細胞膜表面有一種受體（免疫球蛋白超家族的細胞粘附分子體（免疫球蛋白超家族的細胞粘附分子），與病毒衣殼上的結構蛋白），與病毒衣殼上的結

8、構蛋白VP1具有具有特異的親和力，使病毒得以吸附到細胞特異的親和力，使病毒得以吸附到細胞上。上。 （一）傳染源與傳播途徑（一）傳染源與傳播途徑 傳染源：患者或無癥狀帶毒者，感染后病毒傳染源：患者或無癥狀帶毒者，感染后病毒在咽喉部持續(xù)存在在咽喉部持續(xù)存在13周，通過糞便排毒周，通過糞便排毒118周周 糞糞-口途徑是主要的傳播方式口途徑是主要的傳播方式 流行季節(jié)主要在夏、秋季，一般呈散發(fā)流行流行季節(jié)主要在夏、秋季，一般呈散發(fā)流行或地區(qū)性暴發(fā)流行?；虻貐^(qū)性暴發(fā)流行。 （二）發(fā)病過程（二）發(fā)病過程Polio咽、腸道淋巴組織中初步增殖咽、腸道淋巴組織中初步增殖糞口糞口機體免疫力較強，可表機體免疫力較強，

9、可表現(xiàn)為輕癥或隱性感染現(xiàn)為輕癥或隱性感染第一次病毒血癥第一次病毒血癥至單核吞噬細胞系統(tǒng)增至單核吞噬細胞系統(tǒng)增殖，大量病毒再次入血殖，大量病毒再次入血第二次病毒血癥第二次病毒血癥神經(jīng)系統(tǒng)感染神經(jīng)系統(tǒng)感染病毒數(shù)量和毒力與機體免疫病毒數(shù)量和毒力與機體免疫力的強弱顯著影響其結局力的強弱顯著影響其結局（三）臨床表現(xiàn)（三）臨床表現(xiàn) 絕大多數(shù)人（絕大多數(shù)人（9095%）呈隱型感染）呈隱型感染 輕型：病癥似流感輕型：病癥似流感 非麻痹型（無菌性腦膜炎型）非麻痹型（無菌性腦膜炎型） 麻痹型：暫時性肌肉麻痹、永久性肢體麻痹型：暫時性肌肉麻痹、永久性肢體麻痹、延髓麻痹麻痹、延髓麻痹 上述臨床表現(xiàn)的嚴重程度取決于多種

10、因素，上述臨床表現(xiàn)的嚴重程度取決于多種因素，如毒株的毒力、感染病毒的相對數(shù)量、機體如毒株的毒力、感染病毒的相對數(shù)量、機體免疫功能狀態(tài)等。免疫功能狀態(tài)等。（四）免疫性（四）免疫性 1、感染后對同型病毒產(chǎn)生持久牢固免疫、感染后對同型病毒產(chǎn)生持久牢固免疫力，對異型病毒有交叉免疫作用。力，對異型病毒有交叉免疫作用。 2、保護性免疫以體液免疫為主。、保護性免疫以體液免疫為主。SIgA，血液中的血液中的IgM、IgA、IgG抗體抗體 3、六個月內嬰兒有母體抗體的保護而較、六個月內嬰兒有母體抗體的保護而較少感染。少感染。三、微生物學檢查三、微生物學檢查（一）病毒分離與鑒定（一）病毒分離與鑒定 可以從患者鼻咽

11、部、血、腦脊液及糞便中可以從患者鼻咽部、血、腦脊液及糞便中分離病毒分離病毒（二）血清學試驗（二）血清學試驗 用發(fā)病早期和恢復期雙份血清進行中各試用發(fā)病早期和恢復期雙份血清進行中各試驗，若血清抗體有驗，若血清抗體有4倍或以上增長，則有診斷倍或以上增長，則有診斷意義。意義。（三）快速診斷（三）快速診斷 核酸雜交、核酸雜交、PCR、ELISA、IFA等。等。 四、防治原則四、防治原則（一）主動免疫（一）主動免疫 Sabin疫苗是減毒活疫苗，口服疫苗是減毒活疫苗，口服 接種對象：接種對象：2個月個月7歲兒童歲兒童 用法：用法：2月齡開始連服三次月齡開始連服三次OPV，每次間隔，每次間隔一個月，一個月，

12、4歲時加強一次的免疫程序可保持持歲時加強一次的免疫程序可保持持久免疫力。久免疫力。 Salk疫苗為滅活疫苗，肌肉注射疫苗為滅活疫苗，肌肉注射 目前世界上大多數(shù)國家（包括我國）采用目前世界上大多數(shù)國家（包括我國）采用三價活疫苗免疫法三價活疫苗免疫法（二）被動免疫（二）被動免疫 人免疫球蛋白，免疫效果保持人免疫球蛋白，免疫效果保持35周。周。OPVIPV優(yōu)點優(yōu)點1、方法簡單、方法簡單2、免疫效果好、免疫效果好3、具間接免疫作、具間接免疫作用用1、安全、安全2、易于保存，適應、易于保存，適應用熱帶地區(qū)使用用熱帶地區(qū)使用3、可與百白破三聯(lián)、可與百白破三聯(lián)制劑聯(lián)用制劑聯(lián)用缺點缺點1、不易保存，在、不易保

13、存，在熱帶地區(qū)使用受限熱帶地區(qū)使用受限2、毒力回升、毒力回升3、可受腸道病原、可受腸道病原體干擾體干擾1、兒童不易接受、兒童不易接受2、無間接免疫作用、無間接免疫作用3、效果不及、效果不及OPV 1、脊髓灰質炎病毒致病特點和免疫、脊髓灰質炎病毒致病特點和免疫學特點？學特點？ 2、脊髓灰質炎、脊髓灰質炎Salk疫苗及疫苗及Sabin疫疫苗的來源及優(yōu)缺點？苗的來源及優(yōu)缺點？ （一）柯薩奇病毒（一）柯薩奇病毒(Coxsakievirus)柯薩奇病毒可以分為柯薩奇病毒可以分為A、B兩組。兩組。A組有組有23型病毒，型病毒，B組有組有6型病毒。型病毒。（二）埃可病毒（二）?？刹《?ECHO virus)

14、?？刹《咀钤缭诩顾杌屹|炎流行期間從人的糞便?？刹《咀钤缭诩顾杌屹|炎流行期間從人的糞便中分離，目前共有中分離，目前共有31個血清型。個血清型。 (三三)新型腸道病毒新型腸道病毒新分離的腸道病毒不再歸屬于柯薩奇病毒或?？尚路蛛x的腸道病毒不再歸屬于柯薩奇病毒或?？刹《?，從病毒，從68號開始編號命名，目前已編號到號開始編號命名，目前已編號到72型，型，第第72型是甲型肝炎病毒。型是甲型肝炎病毒。 柯薩奇病毒、?？刹《?、新型腸道病毒柯薩奇病毒、?？刹《?、新型腸道病毒的流行病學特點和致病機理與脊髓灰質炎的流行病學特點和致病機理與脊髓灰質炎病毒相似，但各自攻擊的靶器官不同。柯病毒相似，但各自攻擊的靶器官不同

15、?？滤_奇病毒、?？刹《竞托滦湍c道病毒薩奇病毒、?？刹《竞托滦湍c道病毒感染感染組織更為廣泛組織更為廣泛，致病特點是病毒在腸道增，致病特點是病毒在腸道增殖卻很少引起腸道疾病。人體受感染后，殖卻很少引起腸道疾病。人體受感染后，約約60%呈隱性感染。呈隱性感染。出現(xiàn)臨床癥狀時，由出現(xiàn)臨床癥狀時，由于侵犯的器官組織不同而表現(xiàn)各異。于侵犯的器官組織不同而表現(xiàn)各異。（一）無菌性腦膜炎（一）無菌性腦膜炎（二）麻痹（二）麻痹（三）皰疹性咽峽炎（三）皰疹性咽峽炎（四）心肌炎和心包炎（四）心肌炎和心包炎（五）肌痛或肌無力（五）肌痛或肌無力（六）急性出血性結膜炎（六）急性出血性結膜炎 腸道病毒血清型別繁多，不同腸道病

16、毒血清型別繁多，不同型別病毒可以引起相同的病癥，而型別病毒可以引起相同的病癥，而同樣型別的病毒在不同條件下也可同樣型別的病毒在不同條件下也可引起不同的臨床病癥引起不同的臨床病癥，因此確定任，因此確定任何一個型別作為某種病癥的病原是何一個型別作為某種病癥的病原是困難的。困難的。 無特效的預防和治療無特效的預防和治療方法方法,對有感染性的病人對有感染性的病人應當隔離。應當隔離。第二節(jié)第二節(jié) 輪輪 狀狀 病病 毒毒 (Rotavirus)(Rotavirus)人類輪狀病毒歸類于呼腸孤病毒人類輪狀病毒歸類于呼腸孤病毒科科 (Reoviridae) 輪狀病毒屬，是輪狀病毒屬，是嬰幼兒腹瀉的主要病原體嬰幼

17、兒腹瀉的主要病原體。 一、生物學性狀一、生物學性狀（一）形態(tài)結構（一）形態(tài)結構病毒體呈圓球形，有雙層衣殼，每層衣殼病毒體呈圓球形，有雙層衣殼，每層衣殼呈二十面體對稱。內衣殼的殼微粒沿著病呈二十面體對稱。內衣殼的殼微粒沿著病毒體邊緣呈放射狀排列，形同車輪輻條呈毒體邊緣呈放射狀排列，形同車輪輻條呈車輪狀（如圖）車輪狀（如圖） 。具雙層衣殼的病毒體有。具雙層衣殼的病毒體有傳染性。病毒體的核心為傳染性。病毒體的核心為雙股雙股RNA，由，由11個基因片段組成。個基因片段組成。 結構蛋白（結構蛋白（VP1、 VP2、 VP3、 VP4、 VP6、 VP7）：）： VP1- VP3位于核心，位于核心， VP

18、6 位于內衣殼，位于內衣殼，VP4 與與VP7位于外衣殼；位于外衣殼； VP7 是中和抗原、決定其血清型；是中和抗原、決定其血清型；VP4為病為病毒血凝素毒血凝素(吸附吸附)，亦是中和抗原。，亦是中和抗原。 非結構蛋白（非結構蛋白（NSP1NSP5） 為病毒為病毒酶或調節(jié)蛋白，復制中起作用。酶或調節(jié)蛋白，復制中起作用。（二）分型（二）分型 輪狀病毒據(jù)輪狀病毒據(jù)VP6的抗原性分為的抗原性分為7個組個組（AG）。）。A-C組能引起動物與人類腹組能引起動物與人類腹瀉，瀉，D-G組只引起動物腹瀉。組只引起動物腹瀉。A組最為組最為常見。常見。 A組據(jù)組據(jù)VP4與與VP7可分可分19個個P 血清型血清型

19、和和14個個G血清型血清型（三）病毒培養(yǎng)（三）病毒培養(yǎng)需選用特殊的細胞株培養(yǎng)（如恒河猴胚腎細需選用特殊的細胞株培養(yǎng)（如恒河猴胚腎細胞胞MA104株和非洲綠猴腎傳代細胞株和非洲綠猴腎傳代細胞CV-1株）株）（四）抵抗力（四）抵抗力 對理化因子的作用有較強的抵抗力，在糞對理化因子的作用有較強的抵抗力，在糞便中可存活數(shù)天便中可存活數(shù)天/數(shù)周。數(shù)周。 病毒經(jīng)乙醚、氯仿、酸、堿、反復凍融、病毒經(jīng)乙醚、氯仿、酸、堿、反復凍融、超聲、超聲、371小時或室溫（小時或室溫（25）24小時等處小時等處理，仍具有感染性。理，仍具有感染性。95%的乙醇是最有效的病的乙醇是最有效的病毒滅活劑，毒滅活劑，56加熱加熱30

20、分鐘也可滅活病毒分鐘也可滅活病毒二、致病性與免疫性二、致病性與免疫性 （一）流行環(huán)節(jié)（一）流行環(huán)節(jié) 傳染源是病人和無癥狀帶毒者傳染源是病人和無癥狀帶毒者 主要通過糞主要通過糞-口途徑傳播，呼吸道傳口途徑傳播，呼吸道傳播播 主要在冬季流行主要在冬季流行（二）發(fā)病機制（二）發(fā)病機制 1、病毒侵犯小腸細胞的絨毛，病毒在、病毒侵犯小腸細胞的絨毛，病毒在胞漿內增殖，造成腸微絨毛萎縮、變短、胞漿內增殖，造成腸微絨毛萎縮、變短、脫落，導致機體吸收功能障礙脫落，導致機體吸收功能障礙 2、腺窩細胞增生，分泌增多、腺窩細胞增生，分泌增多 3、對雙糖酶的破壞，致乳糖及其他雙、對雙糖酶的破壞，致乳糖及其他雙糖吸收不良

21、，引起滲透性腹瀉糖吸收不良，引起滲透性腹瀉 4、NSP4具毒素樣作用，影響鈣離子具毒素樣作用，影響鈣離子通道而影響水的吸收通道而影響水的吸收（三）臨床表現(xiàn)（三）臨床表現(xiàn) 1、A組輪狀病毒：是引起組輪狀病毒：是引起6個月個月2歲歲嬰幼嬰幼兒嚴重胃腸炎的主要病原體兒嚴重胃腸炎的主要病原體，潛伏期，潛伏期24天。天。病人最主要的癥狀是腹瀉，一般為病人最主要的癥狀是腹瀉，一般為自限性自限性，也，也可危及生命?？晌＜吧?。 2、B組輪狀病毒：引起年長兒童和成人腹組輪狀病毒：引起年長兒童和成人腹瀉，可暴發(fā)性流行瀉，可暴發(fā)性流行 3、C組輪狀病毒：致病性類似組輪狀病毒：致病性類似A組組（四）免疫性（四）免疫性 分泌型分泌型IgA 、IgM、IgG抗體，對同型病毒抗體，對同型病毒感染有作用，對異型只有部分保護作用感染有作用，對異型只有部分保護作用三、微三、微 生生 物物 學學 診診 斷斷（一）檢測病毒或病毒抗原（一）檢測病毒或病毒抗原 腹瀉糞便液直接作電鏡或免疫電鏡檢查腹瀉糞便液直接作電鏡或免疫電鏡檢查 ELISA雙抗體夾心法（檢測病毒抗雙抗體夾心法（檢測病毒抗 體）體）（二）分子生物學技術（二）分子生物學技術 聚丙烯酰胺凝膠電泳法和核酸雜交技術聚丙烯酰胺凝膠電泳法和核酸雜交技術重視飲用水衛(wèi)生，并注意防止醫(yī)源重視飲用水衛(wèi)生，并注意防止醫(yī)源性傳播。性傳播。目前尚無特異有效治療藥物，目