食品免疫學(xué)重點(diǎn)

1、免疫：指機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物，維持自身穩(wěn)定和平衡的一種生理功能，通常對(duì)機(jī)體有利，某些條件下也可以對(duì)機(jī)體造成損害。食品免疫學(xué)：專門研究食源性疾病與免疫學(xué)，食品營養(yǎng)，保健食品與人體免疫，檢測技術(shù)。免疫學(xué)：是研究機(jī)體免疫系統(tǒng)組織結(jié)構(gòu)和生理功能的一門基礎(chǔ)科學(xué)，內(nèi)容包括免疫系統(tǒng)的組成、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與免疫系統(tǒng)的生理功能。抗原：Ag是指能夠誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體和細(xì)胞免疫應(yīng)答，并能與所產(chǎn)生的抗體和致敏淋巴細(xì)胞在體內(nèi)外發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。佐劑：佐劑不是抗原，沒有免疫原性，但是它與抗原混合在一起可以提高機(jī)體的應(yīng)答能力，增強(qiáng)對(duì)抗原的免疫應(yīng)答。抗體：免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后，由漿細(xì)胞產(chǎn)生的能與刺激其產(chǎn)生的抗原發(fā)生特異性結(jié)

2、合的球狀糖蛋白。補(bǔ)體：對(duì)抗體具有補(bǔ)充作用的物質(zhì)稱為補(bǔ)體。是正常血清的一種組分，可與抗體一起產(chǎn)生溶菌或溶胞現(xiàn)象，單獨(dú)作用時(shí)不能引起細(xì)胞的溶解。免疫器官：指完成免疫功能的器官或組織，可以分為中樞免疫器官（包括骨髓胸腺、鳥類法氏囊或同功能器官，主導(dǎo)免疫活性細(xì)胞的產(chǎn)生、增殖、分化、成熟）和外周免疫器官（包括淋巴結(jié)、脾和粘膜相關(guān)淋巴組織，是免疫細(xì)胞聚集和免疫應(yīng)答反應(yīng)發(fā)生的場所。）超敏反應(yīng)：指異常的、過高的免疫應(yīng)答。即機(jī)體與抗原物質(zhì)在一定條件下相互作用，產(chǎn)生了致敏淋巴細(xì)胞或特異性抗體，若與再次進(jìn)入的抗原相結(jié)合，導(dǎo)致機(jī)體生理功能紊亂和組織損害的免疫病理反應(yīng)，又稱變態(tài)反應(yīng)。食物過敏：人體對(duì)食物中抗原產(chǎn)生的。由

3、免疫介導(dǎo)的不良反應(yīng)，又稱食物超敏反應(yīng)。變應(yīng)原：指能誘發(fā)機(jī)體產(chǎn)生IgE類抗體并導(dǎo)致變態(tài)反應(yīng)的抗原。凝集反應(yīng)：顆粒性抗原（完整的細(xì)菌細(xì)胞或紅細(xì)胞等）與相應(yīng)的抗體在適當(dāng)條件下反應(yīng)，并出現(xiàn)凝集的現(xiàn)象。凝集反應(yīng)中的抗原又稱凝集原，抗體又稱凝集素。沉淀反應(yīng)：可溶性抗原（蛋白質(zhì)、多糖或類脂溶液，血清，細(xì)菌提取液，組織浸出液等）與相應(yīng)抗體在電解質(zhì)存在的合適條件下反應(yīng)并出現(xiàn)沉淀物的現(xiàn)象。沉淀反應(yīng)中的抗原又稱沉淀原，抗體又稱沉淀素。6、免疫學(xué)的基本技術(shù)有哪些？免疫學(xué)檢測技術(shù)：是根據(jù)抗原、抗體特異性反應(yīng)的原理，利用已知的抗原檢測未知抗體或利用已知抗體檢測未知抗原（1）細(xì)胞融合技術(shù)（2）T細(xì)胞克隆技術(shù)（3）免疫印跡法

4、免疫學(xué)治療技術(shù)：一種是免疫細(xì)胞的治療，一種是免疫分子的治療免疫預(yù)防技術(shù)：通過人工免疫使人增強(qiáng)或獲得對(duì)某些病原體或細(xì)胞特異性抵抗力的方法，包括人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫。7、影響抗原特性的因素有哪些？抗原特性：（1）免疫原性：刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答能力的特性，又叫抗原性（2）免疫反應(yīng)性：是指具有免疫應(yīng)答反應(yīng)的特性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。只有免疫反應(yīng)性而無免疫原性的物質(zhì)稱為半抗原。影響抗原特性的因素：（1）異己性（2）理化性質(zhì):a分子質(zhì)量大.b結(jié)構(gòu)復(fù)雜.c物理性質(zhì)(3)佐劑8、淋巴細(xì)胞再循環(huán)功能和途徑是什么？淋巴細(xì)胞再循環(huán)：各種免疫器官中的淋巴細(xì)胞并不是定居不動(dòng)的群體，而是通過血液和淋巴液循環(huán)進(jìn)行

5、有規(guī)律的遷移，這種規(guī)律性的遷移稱為淋巴細(xì)胞再循環(huán)。功能：增加淋巴細(xì)胞與抗原接觸的機(jī)會(huì)，更有效的激發(fā)免疫應(yīng)答，并不斷更新和補(bǔ)充循環(huán)池的淋巴細(xì)胞。途徑：血液中的淋巴細(xì)胞在流經(jīng)外周免疫器官時(shí)，在副皮質(zhì)區(qū)與皮質(zhì)區(qū)的連接處穿過高內(nèi)皮毛細(xì)血管后靜脈進(jìn)入淋巴結(jié)，T細(xì)胞定位于副皮質(zhì)B細(xì)胞主要定位于皮質(zhì)區(qū)，以后均通過淋巴結(jié)髓竇遷移至輸出淋巴管，進(jìn)入高一級(jí)淋巴結(jié)，經(jīng)過類似的路徑，所有外周免疫器官輸出的細(xì)胞最后都匯集于淋巴導(dǎo)管，身體下部和左上部的匯集到胸腺導(dǎo)管，從左鎖骨下靜脈角返回血循環(huán)。右側(cè)上部的匯集到右淋巴管，從右鎖骨下靜脈返回血循環(huán)。再循環(huán)一周需24-48h9、何為單克隆抗體和多克隆抗體？單克隆抗體和多克隆抗

6、體相比有哪些優(yōu)點(diǎn)？圖示單克隆抗體的制備流程人工制備抗體a單克隆抗體b多克隆抗體c基因工程抗體。單克隆抗體：是指由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、只作用于單一抗原表位的高度均一的特異性抗體制備流程：制備抗原-免疫動(dòng)物-免疫脾細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的制備-細(xì)胞融合-雜交瘤細(xì)胞的選擇培養(yǎng)-雜交瘤細(xì)胞的篩選-雜交瘤細(xì)胞的克隆化-單克隆抗體的鑒定-雜交瘤細(xì)胞系的建立-單克隆抗體的大量制備（動(dòng)物體內(nèi)誘生法和體外培養(yǎng)法）優(yōu)點(diǎn)：a結(jié)構(gòu)均一。特異性強(qiáng)，避免了多克隆抗體的交叉反應(yīng)性。B效價(jià)高，具有高度的可重復(fù)性。C制備時(shí)不需純化抗原就可得到純抗體d產(chǎn)量高且可連續(xù)生產(chǎn)。多克隆抗體（第一代抗體）：用體內(nèi)免疫方法獲得的由多個(gè)B淋巴細(xì)胞

7、克隆產(chǎn)生的，針對(duì)不同抗原表位的多種抗體的混合物。應(yīng)用：目前應(yīng)用的多克隆抗體主要來源于動(dòng)物免疫血清、恢復(fù)期病人血清或免疫接種人群。特點(diǎn)是來源廣泛，制備容易，但這種抗體是針對(duì)多種抗原表位的，因此特異性不高，常出現(xiàn)交叉反應(yīng)，同時(shí)也不易大量制備。10、列舉7種常見的基因工程抗體基因工程抗體的主要類型：a嵌合抗體b重構(gòu)抗體或CDR移植抗體c雙特異性抗體d Fab抗體e Fv抗體f單鏈抗體g單域抗體h噬菌體抗體i最小識(shí)別單位11、抗體的多樣性是由什么決定的？（1） Ig基因庫抗體的合成受B細(xì)胞內(nèi)位于不同染色體上的三組Ig基因庫控制，k鏈基因庫，鏈基因庫和一組H鏈基因庫，每個(gè)基因庫均由數(shù)目不等的一組基因組成

8、。（2） V（D）J重組重鏈基因庫中含有V基因D基因J基因C基因，B細(xì)胞在骨髓內(nèi)成熟過程中，胞內(nèi)重組酶活性增高，會(huì)按照一定的規(guī)律發(fā)生重排形成V-D-J重組片段，然后與一個(gè)C基因重組，共同轉(zhuǎn)錄。（3）抗體多樣性的遺傳學(xué)基礎(chǔ)：抗體多樣性主要由基因調(diào)控，尤其是編碼H、L鏈V區(qū)的基因重排決定。A抗體多樣性的胚系基因:在胚系中，尚未重排的Ig基因片段數(shù)量相當(dāng)多，Ig的H鏈和L鏈都可以由多種胚系V基因所編碼，產(chǎn)生不同序列不同特異性的抗體B重排產(chǎn)生多樣性：IgDNA重組使不同的V、D、J基因片段相連，因而產(chǎn)生大量不同特異性的抗體。C連接產(chǎn)生多樣性：同一套V、D、J基因在他們的連接處也會(huì)產(chǎn)生不同的氨基酸序列。

9、D體細(xì)胞突變：有人提出體細(xì)胞基因突變可導(dǎo)致抗體產(chǎn)生多樣性E、H鏈和L鏈蛋白質(zhì)的組合，不同H和L鏈蛋白質(zhì)的組合也有利于產(chǎn)生多樣性。12、簡述補(bǔ)體的生物學(xué)作用？（1）靶細(xì)胞溶解：即細(xì)胞毒作用，補(bǔ)體無論經(jīng)何種途徑激活，都在靶細(xì)胞表面形成MAC，造成穿膜小孔，導(dǎo)致靶細(xì)胞溶解。（2）調(diào)理作用：即吞噬作用，能夠促進(jìn)吞噬細(xì)胞對(duì)病原體或免疫復(fù)合物的吞噬作用。（3）免疫復(fù)合物的清除，抗原抗體在體內(nèi)結(jié)合形成免疫復(fù)合物IC，IC沉積于組織中激活補(bǔ)體通過一定的作用，可造成組織損傷，在免疫復(fù)合物形成初期C3b與C4b共價(jià)結(jié)合到IC之上，可以防止IC之間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成，因而可阻止IC之間網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的形成，可阻止IC沉積，減

10、輕組織損傷。（4）病毒中和作用：補(bǔ)體系統(tǒng)主要有以下幾種病毒中和機(jī)制a：通過使病毒形成大的聚集物而降低病毒的感染性b：抗體和/或補(bǔ)體結(jié)合到病毒表面，形成一層很薄的外衣，阻斷病毒的吸附和穿入，中和了病毒的感染性。C：抗體和補(bǔ)體在病毒顆粒表面沉積可促進(jìn)病毒與具有Fc受體或C3b受體的細(xì)胞結(jié)合，如果結(jié)合的為吞噬細(xì)胞則起到調(diào)理作用。D：MAC可介導(dǎo)大多數(shù)囊膜病毒的溶解，導(dǎo)致病毒囊膜的裂解與核衣殼蛋白的解離。（5）炎癥介質(zhì)作用：補(bǔ)體裂解片段以炎癥反應(yīng)方式調(diào)動(dòng)機(jī)體的各種防御因素，協(xié)同作戰(zhàn)消滅病原微生物a。激肽樣作用：C2a、C3a具有細(xì)胞激肽樣作用，可增高血管通透性，引起炎性滲出水腫，稱為補(bǔ)體激活肽。B：過

11、敏毒素：過敏毒素就是補(bǔ)體活化過程中產(chǎn)生的某些水解片段，可使肥大細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞釋放組胺以及其他具有藥理作用的物質(zhì)，引起血管擴(kuò)張毛細(xì)血管通透性增加，使機(jī)體表現(xiàn)出相應(yīng)的過敏癥狀。C：趨化作用：C5a、C3a能吸引吞噬細(xì)胞向炎癥部位聚集，是一種趨化因子。（6）免疫調(diào)節(jié)作用：補(bǔ)體可對(duì)免疫應(yīng)答的各個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。a參與捕捉固定抗原，使抗原容易被抗原遞呈細(xì)胞處理與遞呈b補(bǔ)體成分可以與多種免疫細(xì)胞相互作用，調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖分化。C補(bǔ)體參與調(diào)節(jié)多種免疫細(xì)胞的效應(yīng)功能。13、特定抗原刺激機(jī)體后的體液免疫應(yīng)答有哪些規(guī)律？（初次應(yīng)答和再次應(yīng)答規(guī)律）初次應(yīng)答：抗原初次刺激機(jī)體所引起的應(yīng)答稱為初次免疫應(yīng)答。初次應(yīng)答

12、主要產(chǎn)生IgM（后期可產(chǎn)生IgG），所產(chǎn)生的抗體總量及其與抗原的親和力均較低初次免疫應(yīng)答中抗體產(chǎn)生的四個(gè)階段：（1）潛伏期：指抗原刺激后至血清中檢測出特異性抗體前的階段，持續(xù)數(shù)小時(shí)數(shù)周，取決于抗原性質(zhì)、抗原進(jìn)入機(jī)體途徑、所用佐劑類型，受體情況等。（2）對(duì)數(shù)期：此期抗體量成指數(shù)增長?？乖瓌┝考靶再|(zhì)是決定抗體產(chǎn)量增高速度的重要因素。（3）平臺(tái)期：此期血清中抗體濃度基本上不發(fā)生變化，到達(dá)平臺(tái)期的時(shí)間、平臺(tái)高度和持續(xù)時(shí)間依抗原不同而異，從數(shù)天至數(shù)周不等。（4）下降期：由于抗體被降解或者與抗原結(jié)合而被清除，此期抗體合成率小于降解速度，血清中抗體濃度緩慢下降?？沙掷m(xù)幾天或幾周。再次應(yīng)答：初次應(yīng)答形成的記憶

13、T細(xì)胞和B細(xì)胞具有長期壽命而得以保存，一旦再次遇到相同抗原刺激，記憶性淋巴細(xì)胞可以迅速、高效、特異性的產(chǎn)生應(yīng)答，即再次應(yīng)答或回憶應(yīng)答。其應(yīng)答過程及所產(chǎn)生的抗體具有以下特征：（1）潛伏期短，約為初次應(yīng)答潛伏期的一半（2）抗體合成快速到達(dá)平臺(tái)期，平臺(tái)高（比初次應(yīng)答高十倍以上）且持續(xù)時(shí)間長（3）下降期持久（抗體可以長期合成）（4）誘發(fā)再次應(yīng)答所需抗原劑量?。?）再次應(yīng)答所產(chǎn)生的主要為IgG類抗體，且抗體親和力高較均一。再次應(yīng)答的強(qiáng)弱取決于兩次抗原刺激間隔時(shí)間的長短，間隔過短則應(yīng)答弱，因?yàn)槌醮螒?yīng)答后存留的抗體可與再次刺激抗原結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物被迅速清除，間隔過長則應(yīng)答也弱，因記憶細(xì)胞并非永生。1

14、4、在機(jī)體抗感染免疫機(jī)制中，由抗體介導(dǎo)的免疫應(yīng)答會(huì)產(chǎn)生哪些效應(yīng)？體液免疫應(yīng)答主要由抗體所介導(dǎo)。（1）中和作用：高親和力的IgG、IgA可與細(xì)菌病毒表面蛋白結(jié)合，通過阻止其侵入宿主細(xì)胞而發(fā)揮中和作用（2）調(diào)理作用：指促進(jìn)吞噬細(xì)胞的吞噬作用，一方面抗體的Fab段與病原體表面的抗原表位結(jié)合，抗體的Fc段與吞噬細(xì)胞表面的特定部位結(jié)合，從而促進(jìn)對(duì)病原體的吞噬，另一方面抗體與病原體表面的抗原表位結(jié)合可以激活補(bǔ)體附著于病原體的補(bǔ)體裂解片段可以與吞噬細(xì)胞表面結(jié)合，促進(jìn)其吞噬作用（3）免疫溶解作用：IgG、IgM抗體與抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，可通過激活補(bǔ)體經(jīng)典途徑形成膜功復(fù)合物，并發(fā)揮補(bǔ)體介導(dǎo)的殺菌溶菌作用，主

15、要作用于革蘭氏陽性細(xì)菌（4）抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用：抗體的IgG的Fab片段與抗原特異性結(jié)合，其Fc片段與NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞等表面結(jié)合，介導(dǎo)效應(yīng)細(xì)胞殺傷攜帶特異性抗原的靶細(xì)胞，產(chǎn)生ADCC效應(yīng)（5）分泌型IgA的局部抗感染作用：呼吸道、消化道和生殖道黏膜表面可產(chǎn)生IgA，從而有效組織病原體入侵（6）免疫損傷作用：B細(xì)胞應(yīng)答產(chǎn)生的抗體也可能參與某些病理過程的發(fā)生，主要是型超敏反應(yīng)和自身免疫病。15、以胸腺依賴性抗原為例，試述CD4+Th細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答的基本過程。在胸腺依賴性抗原的（TD抗原）刺激下，B細(xì)胞應(yīng)答依賴Th細(xì)胞的輔助（通常為Th2細(xì)胞），在非胸腺依賴性抗原的（TI抗

16、原）刺激下，B細(xì)胞直接產(chǎn)生應(yīng)答，B細(xì)胞與Th細(xì)胞須識(shí)別同一抗原分子的不同表位才能相互作用，1：BCR特異性結(jié)合抗原，由Ig、Ig向B細(xì)胞內(nèi)傳遞特異性抗原刺激信號(hào)即啟動(dòng)第一信號(hào)，2：B細(xì)胞活化的第二信號(hào)由B細(xì)胞和Th細(xì)胞表面多個(gè)黏附分子對(duì)相互作用所提供，其中最重要的是CD40L。BCR結(jié)合特異性抗原，通過內(nèi)化作用將其攝入胞內(nèi)，并將抗原降解為肽段，形成抗原肽-MHC類分子復(fù)合物，供特異性Th細(xì)胞識(shí)別，Th細(xì)胞的TCR特異性識(shí)別并結(jié)合抗原肽-MHC類分子復(fù)合物，誘導(dǎo)Th細(xì)胞表面表達(dá)多個(gè)黏附分子，最重要的是CD40L，可與B細(xì)胞表面的CD40結(jié)合，向B細(xì)胞提供刺激信號(hào)。同時(shí)效應(yīng)Th細(xì)胞與B細(xì)胞表面的多

17、個(gè)粘附分子對(duì)相互作用，是T細(xì)胞和B細(xì)胞的特異性結(jié)合更為牢固。3、活化的B細(xì)胞表面表達(dá)多種細(xì)胞因子受體，發(fā)揮Th細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子的作用，促進(jìn)B細(xì)胞增殖或者分化為能產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞?？乖禺愋訠細(xì)胞活化和增殖后，按兩條途徑分化a：部分B細(xì)胞遷移至淋巴組織髓質(zhì)，繼續(xù)增殖分化為可產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞;b:部分B細(xì)胞遷移至附近的B細(xì)胞區(qū)，繼續(xù)增殖并形成生發(fā)中心。生發(fā)中心大部分B細(xì)胞分化為漿細(xì)胞，部分B細(xì)胞可分化為記憶性B細(xì)胞，他們離開生發(fā)中心后參與淋巴細(xì)胞再循環(huán)，一旦再次遇到同一特異性抗原，即迅速活化增殖、分化，產(chǎn)生大量高親和力特異性抗體。16、細(xì)胞免疫應(yīng)答的生物學(xué)意義？1、抗感染：T細(xì)胞效應(yīng)主要針對(duì)胞內(nèi)

18、寄生病原體，包括某些細(xì)菌病毒真菌以及寄生蟲等2、抗腫瘤：T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫具有重要的抗腫瘤作用，機(jī)制為：CTL特異性殺瘤效應(yīng)，誘導(dǎo)并增強(qiáng)巨噬細(xì)胞及NK細(xì)胞的殺瘤效應(yīng)，細(xì)胞因子直接或間接的殺瘤效應(yīng)3、免疫損傷作用：Th1細(xì)胞可參與遲發(fā)型超敏反應(yīng)，移植排斥反應(yīng)某些自身免疫病的發(fā)生和發(fā)展17、影響食物過敏的因素有哪些？（1）食物種類：決定食物過敏的首要因素是食物本身。致敏食物是引起食物過敏的直接誘因，或稱激活因子，各種食物的致敏性是不同的。（2）進(jìn)食數(shù)量：對(duì)某種食物敏感的人，即使進(jìn)食很少量亦可引起疾病，另一方面，食物過敏與進(jìn)食數(shù)量有密切關(guān)系，食物抗原只在累積到一定閾值才引起發(fā)病，癥狀輕重與食用量往

19、往成正比。（3）遺傳因素：食物過敏癥狀表現(xiàn)的嚴(yán)重程度與陽性過敏性疾病家族史有關(guān)。（4）個(gè)體因素（5）解剖因素（6）烹飪因素：加熱過程可使大多數(shù)食物的變應(yīng)原性降低。（7）儲(chǔ)藏條件：食物的儲(chǔ)藏時(shí)間長短可以影響食物的變應(yīng)原性，通常儲(chǔ)藏時(shí)間越長，食物新鮮程度越差，變應(yīng)原性越強(qiáng)。同時(shí)儲(chǔ)藏過程中可以受到微生物以及寄生蟲的污染，在食品本身腐化變質(zhì)，變應(yīng)原性增強(qiáng)的同時(shí)，變應(yīng)原成分也可發(fā)生改變使之更為復(fù)雜。（8）環(huán)境條件：環(huán)境污染對(duì)食物的影響也可導(dǎo)致食物變應(yīng)原性的變化。（9）消化道功能：消化道炎癥使胃腸黏膜損傷，增加了其通透性，使過多食物抗原被吸收，而發(fā)生變態(tài)反應(yīng)。18、食物過敏主要由IgE介導(dǎo)的I型過敏反應(yīng)闡

20、述I型超敏反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制及其常見的臨床表現(xiàn)。又稱為速發(fā)型超敏反應(yīng)，主要特點(diǎn)：（1）反應(yīng)發(fā)生快，消退也快（2）多種血管活性物質(zhì)參與反應(yīng)（3）以生理功能紊亂為主，無明顯組織損傷（4）有明顯個(gè)體差異和遺傳傾向。主要參與因子：a變應(yīng)原bIgE抗體：是引起速發(fā)型超敏反應(yīng)的主要抗體，由呼吸道、消化道黏膜固有層淋巴組織中的漿細(xì)胞合成。c效應(yīng)細(xì)胞：肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞：是高親和力的IgE受體，在抗原再次進(jìn)入機(jī)體與致敏細(xì)胞表面的IgE特異性結(jié)合時(shí)，細(xì)胞可脫顆粒釋放出組胺等生物活性介質(zhì)。d活性介質(zhì)反應(yīng)基本過程：（1）致敏階段：變應(yīng)原初次進(jìn)入過敏體質(zhì)的機(jī)體，刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性IgE抗體，并與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞

21、結(jié)合，形成致敏肥大細(xì)胞和致敏嗜堿性粒細(xì)胞，此時(shí)機(jī)體處于致敏狀態(tài)，這種狀態(tài)可維持半年至數(shù)年，若此階段沒有相應(yīng)變應(yīng)原再次進(jìn)入體內(nèi)，致敏狀態(tài)可逐漸消失。（2）觸發(fā)階段：相應(yīng)變應(yīng)原再次進(jìn)入處于致敏狀態(tài)的機(jī)體，與致敏肥大細(xì)胞、致敏嗜堿性粒細(xì)胞表面緊密相鄰的特異性IgE橋聯(lián)結(jié)合，使致敏細(xì)胞脫顆粒，釋放組胺、白三烯、激肽等一系列生物活性介質(zhì)，介質(zhì)作用于效應(yīng)器官和組織，產(chǎn)生一系列臨床癥狀。（3）效應(yīng)作用：組胺等脫顆粒之后可使血管擴(kuò)張、平滑肌收縮、通透性增加、滲出液增加、腺體分泌增多等。反應(yīng)癥狀：常發(fā)生于呼吸、消化、皮膚等系統(tǒng)，癥狀主要有a過敏性休克：累及全身血管的過敏反應(yīng)。b表現(xiàn)于黏膜的過敏反應(yīng)，呼吸道的哮喘

22、和變應(yīng)性鼻炎，消化道的過敏性胃腸炎。c皮膚過敏反應(yīng)：皮膚紅腫、蕁麻疹、濕疹、紫19、抗原抗體反應(yīng)的一般規(guī)律是什么？（1）特異性：抗原抗體之間具有高度特異性，特異性的物質(zhì)基礎(chǔ)是抗原決定簇和抗體分子可變區(qū)的各種分子引力。（2）可逆性：抗原抗體的結(jié)合僅僅是表面的結(jié)合，在一定條件下是可逆的。（3）定比性：在一定的濃度范圍內(nèi)，只有把二者的比例調(diào)節(jié)在最適合溫度，才能出現(xiàn)可見反應(yīng)。（抗體過量形成不溶性復(fù)合物，抗原過量形成可溶性復(fù)合物）（4）階段性：抗原抗體的結(jié)合具有明顯的階段性，可分為特異性結(jié)合階段和可見反應(yīng)階段。（5）條件依賴性：抗原抗體之間出現(xiàn)可見的反應(yīng)常常需要提供最適條件pH68，溫度3745保溫，以

23、及提供適當(dāng)?shù)恼袷幰栽黾涌乖贵w之間的接觸機(jī)會(huì)，以及提供適當(dāng)?shù)碾娊赓|(zhì)（一般用生理鹽水做稀釋液）等。21、酶聯(lián)免疫技術(shù)在食品檢測中有哪些應(yīng)用？1、食品中農(nóng)藥殘留的檢測：酶免疫技術(shù)用于食品農(nóng)藥殘留檢測，所需設(shè)備簡單或不需檢測設(shè)備，樣品前處理程序簡化，液體食品如牛奶、果汁中常不需前處理可以直接取樣。2、食品中獸藥殘留的測定：抗生素、氨基糖苷類、氯霉素、四環(huán)素、磺胺類、激素、-興奮劑等3、食品中生物毒素的檢測：黃曲霉毒素、嘔吐毒素、T-2毒素可采用ELISA檢測。4、食品中有害微生物的檢測5、酶免疫分析20、敘述免疫熒光技術(shù)的原理和類型？將結(jié)合有熒光素的熒光抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的技術(shù)稱為免疫熒光技術(shù)。將

24、含有可疑病原菌的材料涂片與一種特異性的熒光抗體反應(yīng)，然后用熒光顯微鏡觀察，若病原菌含有熒光抗體對(duì)應(yīng)的抗原，細(xì)胞將發(fā)出熒光，若不是特異性病原體或陰性對(duì)照就不發(fā)生或者僅發(fā)生微弱反應(yīng)。熒光的產(chǎn)生和強(qiáng)度可以判斷抗原的存在、定位和分布情況。特異性強(qiáng)，靈敏度高，反應(yīng)速度快，容易觀察具體的免疫熒光技術(shù)有直接熒光法（抗體自身具有熒光）和間接熒光法（抗體的抗體即抗抗體具有熒光）22、什么是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)?如何用已知的大豆過敏原來檢測過敏患者是否為大豆過敏，請(qǐng)寫出檢測步驟？酶免疫技術(shù)最初是用酶代替熒光素標(biāo)記抗體作為生物組織中抗原的鑒定和定位。固相免疫測定法的代表技術(shù)是酶免疫吸附技術(shù)（ELISA），

25、其基本過程是將抗原或抗體吸附于固相載體，在載體上進(jìn)行免疫酶染色，底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果。ELISA基本操作步驟：（1）固相載體：最常用的固相載體用聚苯乙烯制備，可制成微量反應(yīng)板或小試管，小株，現(xiàn)多用微量反應(yīng)板其吸附性能好，空白值低，孔底透明度高，批間穩(wěn)定性好，價(jià)格低廉且易與自動(dòng)化儀器配套。（2）包被：將被包被的抗原或抗體牢固的吸附在固相載體的表面，并保持其免疫活性。制備方法可以是吸附或化學(xué)偶聯(lián)。用聚苯乙烯做載體包被抗原或抗體常用吸附法，4過夜或3726小時(shí)經(jīng)清洗即可應(yīng)用。（3）洗滌:在ELISA的整個(gè)過程中需要進(jìn)行多次洗滌，目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)，以及在

26、反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。（4）底物顯色:底物溶液應(yīng)新鮮配制，顯色以室溫2030min為宜，反應(yīng)結(jié)束要終止反應(yīng)。常用的底物是鄰苯二胺（OPD），產(chǎn)物呈棕色，可溶，敏感性高，但是對(duì)光敏感應(yīng)避光進(jìn)行顯色反應(yīng)。（5）結(jié)果判定：可用肉眼觀察也可用酶標(biāo)儀測定。23、免疫傳感器在食品檢測中有哪些應(yīng)用？免疫生物傳感器:是根據(jù)生物體內(nèi)抗原抗體特異性結(jié)合并導(dǎo)致化學(xué)變化而設(shè)計(jì)的生物傳感器，主要由感受器，轉(zhuǎn)換器和放大器組成。利用生物活性物質(zhì)選擇性的識(shí)別和測定各種生物化學(xué)物質(zhì)。應(yīng)用：1.微生物檢測中的應(yīng)用：（1）大腸桿菌和腸道細(xì)菌的檢測（2）沙門菌的檢測2.在有毒物質(zhì)檢測中的應(yīng)用：（1）肉毒桿菌毒素

27、的檢測（2）蓖麻毒素的檢測（3）葡萄球菌腸毒素檢測（4）肉毒素的檢測3.在農(nóng)藥、獸藥殘留檢測中的應(yīng)用4.在環(huán)境污染物、重金屬檢測中的應(yīng)用：24、在食品檢測中免疫新技術(shù)有哪些？并解釋每一種新技術(shù)的定義？1.免疫PCR：是一種檢測微量抗原的高靈敏度技術(shù)，該技術(shù)把抗原抗體反應(yīng)的高特異性和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的高靈敏度有機(jī)結(jié)合在一起，其本質(zhì)是一種以PCR擴(kuò)增一段DNA報(bào)告分子代替酶反應(yīng)來放大抗原抗體結(jié)合率的一種改良型ELISA2.分子印跡技術(shù)：是利用化學(xué)手段合成一種高分子聚合物分子印跡聚合物（MIP），MIP能夠特異性吸附作為印跡分子的待測物，在免疫分析中可以取代生物抗體，被科學(xué)家譽(yù)為塑料抗體。與生物抗體比

28、較具有穩(wěn)定性好、制備周期短、費(fèi)用低、易于保存和可在復(fù)雜環(huán)境中應(yīng)用等優(yōu)勢。3.免疫微粒技術(shù)：是利用高分子材料合成一定粒度大小的固相微粒作為載體，包被上具有特異性親和力的各種免疫活性物質(zhì)（抗原或抗體），使其致敏為免疫微粒，用于免疫學(xué)及其他生物學(xué)檢測和分離的一項(xiàng)技術(shù)。（1）膠體微粒免疫檢測技術(shù)：是在膠乳凝集定性試驗(yàn)基礎(chǔ)上發(fā)展建立的一種非放射性均相免疫測定法，可對(duì)各種微量的抗原物質(zhì)和小分子半抗原進(jìn)行精確定量。根據(jù)特異性抗體致敏的膠乳微粒與待測標(biāo)本中相應(yīng)抗原相遇發(fā)生凝集反應(yīng)，膠乳凝集程度與被測物濃度呈函數(shù)關(guān)系。（2）免疫磁性微粒分離與純化技術(shù)：磁性微粒是用高分子材料和金屬離子為原料，聚合而成的一種以金屬

29、離子為核心，外層均勻包裹高分子聚合體的固相微粒，在液相中，受外加磁場的吸引作用，MMS可以快速沉降而自行分離，無需離心沉淀，可以簡化操作過程。經(jīng)特異性抗體包被制成免疫M(jìn)MS，與檢樣中的抗原結(jié)合成免疫M(jìn)MS-靶分子（或靶細(xì)胞）復(fù)合體，通過外加磁場作用可與其他組分分離出來。再以適當(dāng)方式使復(fù)合體解離，在磁場吸引下除去游離的免疫M(jìn)MS，即可獲得純化的靶分子或細(xì)胞4.脂質(zhì)體免疫檢測;大量的免疫標(biāo)記物（熒光物、酶等）包埋在脂質(zhì)體腔內(nèi)或結(jié)合在膜表面。免疫化學(xué)反應(yīng)發(fā)生時(shí)，脂質(zhì)體裂解，釋放出標(biāo)記物，產(chǎn)生擴(kuò)增的檢測信號(hào)。脂質(zhì)體結(jié)合的特點(diǎn)是體表面積大，體腔容量大，具有能與多種生物識(shí)別物結(jié)合的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)。脂質(zhì)體

30、是信號(hào)放大的工具。5.納米技術(shù)：納米生物傳感器是指能夠選擇性結(jié)合靶分子的生物探針的納米傳感器。納米材料本身就是非常敏感的化學(xué)和生物傳感器，納米技術(shù)與生物學(xué)結(jié)合可使檢測更加高效、簡便。25、常見的免疫標(biāo)記技術(shù)有哪些（寫出3種以上）？請(qǐng)用任何一種免疫標(biāo)記技術(shù)檢測食品中農(nóng)藥或獸藥的殘留，寫出檢測步驟。三大標(biāo)記技術(shù)：熒光素、放射性同位素、酶標(biāo)記。免疫標(biāo)記技術(shù)是指將抗原或抗體用熒光素、放射性同位素、酶或電子致密物質(zhì)加以標(biāo)記，以提高檢測靈敏度的一項(xiàng)新技術(shù)。免疫熒光技術(shù)：將結(jié)合有熒光素的熒光抗體進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)的技術(shù)，稱為免疫熒光技術(shù)或熒光抗體法。有直接熒光法（抗體自身具有熒光）和間接熒光法（抗體的抗體具有熒光，優(yōu)點(diǎn)是不需要為每一種待測的抗原都制備一種熒光抗體）酶標(biāo)技術(shù)：將酶共價(jià)連