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文檔簡介

1、教學內容:知識點可溶性還原糖 脂肪 蛋白質實驗原理幻燈片實驗步驟 幻燈片7 幻燈片8 幻燈片9 成功關鍵注意事項 幻燈片10 幻燈片11 幻燈片12 幻燈片13討論練習 幻燈片14 幻燈片16作業(yè) 幻燈片19.實驗一 生物組中可溶性復原糖、脂肪、蛋白質的鑒定江蘇省大豐市南陽中學 周維燕.教學目的: 知識目的:闡明實驗原理顏色反響,識記和區(qū)分用于可溶性復原糖、脂肪、蛋白質鑒定的試劑及產(chǎn)生的特定顏色,初步掌握鑒定上述化合物的根本方法,學會描畫實驗景象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的運用方法。 才干目的:培育學生自動獲取知識,運用知識分析景象,歸納總結的才干,培育學生實踐操作的才干及從景象出發(fā)探

2、求事物本質的才干。 情感與價值目的:經(jīng)過親手實驗體驗科學家嚴謹治學的科學態(tài)度,培育實事求是的世界觀。.一、實驗原理1.可溶性復原糖 生物組織中普遍存在的可溶性糖類較多,有葡萄糖、果糖、麥芽糖和蔗糖。前三種糖的分子內都含有游離的具復原性的半縮醛羥基,因此叫做復原糖;蔗糖分子內沒有,為非復原糖。實驗中所用的斐林試劑,只能鑒定生物組織中可溶性復原糖,而不能鑒定可溶性非復原糖及不能溶解的糖。斐林試劑為0.1g/mL的NaOH和 0.05g/mL的CuSO配制而成的淡藍色Cu(OH)2沉淀的懸濁液,葡萄糖溶液在參與斐林試劑后,在加熱條件下Cu(OH)2被復原為磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸

3、。其反響式為:-CHO+Cu(OH)2-COOH+Cu2O磚紅色.2.脂肪的鑒定 蘇丹(蘇丹)為一種脂肪染色劑(易溶解于酒精,不溶解于水)。蘇丹染液遇脂肪的顏色反響為橘黃色,蘇丹染液遇脂肪的顏色反響為紅色。其反響式為: 脂肪蘇丹 蘇丹 橘黃色紅色.3.蛋白質的鑒定 將尿素加熱,兩分子尿素放出一分子氨而縮合成雙縮脲。反響式為: 雙縮脲在堿性環(huán)境中能和硫酸銅結合成紅紫色的絡化物。蛋白質分子中含有的肽鍵構造與雙縮脲構造類似,因此,蛋白質可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反響:-CO NH -類似雙縮尿H2NOC - NH - CONH2構造酸性條件下與Cu2+作用構成紫色絡合物雙縮尿反響.選材:含糖量較高的白色

4、或近于白色,蘋果、梨最好 。 二、實驗步驟與景象1.可溶性復原糖 制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨過濾:用單層紗布取液:mL顯色反響 mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL景象: 呈現(xiàn)藍色開水加熱min變成磚紅色.2.脂肪的鑒定 取材:花生種子浸泡h,去皮,將子葉削成薄片 制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加蘇丹 染液2 3滴,染色min滴加體積分數(shù)為50%的酒精溶液12滴,洗去浮色吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片察看:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡察看結果:有被染成橘黃色的脂肪微粒.3.蛋白質的鑒定 選材與制備組織樣液:黃豆組織樣液或雞蛋白稀釋液黃豆浸泡 去皮切片研磨

5、過濾濾液 顯色反響mL組織樣液雙縮脲試劑mL景象:無色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色.三、實驗勝利的關鍵與本卷須知:1.實驗勝利的關鍵在于實驗資料的選擇: 在做可溶性復原糖的鑒定實驗中,最理想的實驗資料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,最好是白色或近于白色的植物組織,這樣可以防止資料本身顏色對實驗變化顏色的掩蓋。經(jīng)實驗比較,顏色反響的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。 在做脂肪的鑒定實驗中,實驗資料最好選用富含脂肪的種子,且徒手切片要勝利,要務虛驗技藝較高,無妨改成刮取花生子葉泥制造暫時裝片,易做,效果又好。 在做糖和蛋白質的實驗時,最好選用富含蛋白質的生物組織,植物資

6、料常用的是大豆,動物資料常用的是雞蛋,鑒定之前需求留出一部分樣液,以便與鑒定后的樣液的顏色做比較,這樣可加強壓服力。 . (1)斐林試劑很不穩(wěn)定,故應將組成斐林試劑的甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)和乙液(0.05g/mL的CuSO溶液)分別配制、儲存,運用時,再暫時配制,將45滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立刻便用。切勿將甲液和乙液分別參與組織樣液中。 (2) 鑒定可溶性復原糖,加熱試管時,應該用試管夾夾住試管上部,放入怒放水的大燒杯加熱;留意試管底部不接觸燒杯底部,同時試管口不要朝向實驗者,以免試管內溶液沸騰時沖出試管,呵斥燙傷。假設試管內溶液過于沸騰,可以提起試管夾,使試管與沸水接觸

7、面減少,以免溶液溢出。 A.可溶性復原糖 2.本卷須知:. (3) 在鑒定脂肪的實驗中,假設用花生種子作實驗資料,必需提早浸泡34小時,浸泡時間短了,不容易切片,浸泡時間過長,那么組織太軟,切下的薄片不易成形,切片要盡能夠的薄。 (4) 染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色時間不宜過長否那么酒精將脂肪溶解影響實驗效果,察看時找最薄處最好只需12層細胞。B.脂肪的鑒定 . (5)在蛋白質的鑒定實驗中,假設用蛋白質作實驗資料,必需稀釋,假設稀釋不夠,與雙縮脲試劑發(fā)生反響后會粘固在試管內壁上,使反響不徹底,且試管不易洗刷干凈。 (6)雙縮脲試劑的運用,應先雙縮脲加試劑A(0.1g/m

8、L的NaOH溶液),呵斥堿性的反響環(huán)境,再加試劑B(0.01g/mL的CuSO溶液)。C.蛋白質的鑒定 . 1結論:上述實驗證明蘋果果肉中、花生種子中、黃豆組織中各存在什么樣物質? 答: 。 2討論:為什么根據(jù)某些化學反響可以使生物組織中的有關有機物產(chǎn)生固定的顏色反響可以鑒定生物組織有糖、脂肪、蛋白質的存在? 四、討論與練習:可溶性復原糖、脂肪、蛋白質 由于某些化學試劑與生物組織中的化合物發(fā)生一定的化學反響后,可產(chǎn)生新的化合物,而這種化合物是有固定的顏色的。因此,根據(jù)待檢測物與某些化學試劑反響的固有顏色,如磚紅色、橘黃色、紫色等??梢澡b定生物組織中存在有糖、脂肪、蛋白質。. 各種可供實驗的材料

9、梨黃桃胡蘿卜黃豆花生種子小麥種子 其中適宜于鑒定糖的是 ,理由是梨的組織細胞 ,他計劃用什么試劑鑒定? 。 小麥種子不如花生種子更適宜用來鑒定脂肪,這是由于 ,他計劃用什么試劑鑒定? . 適宜于鑒定蛋白質的是 ,理由是 ,鑒定所用的試劑是 。 3. 討論: 做生物組織中可溶性復原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗時,需求根據(jù)實驗需求選擇不同的實驗資料。清根據(jù)下表所列各種資料回答以下問題:梨 顏色為白色,并且糖含量較高 斐林試劑或班氏試劑脂肪含量不如花生高,也不容易做切片 用蘇丹或蘇丹試劑黃豆和花生 蛋白質含量高 雙縮脲試劑.1、某些單子葉植物,如韭菜、鳶尾的葉子內含有大量的可溶性復原糖,但這些單子葉植

10、物的葉子不宜作實驗資料,緣由是:這些葉子的顏色較深,對復原性糖與斐林試劑的顏色反響起遮蓋作用 、以下哪組試劑在運用過程中,必需加熱:A.斐林試劑鑒定可溶性復原糖的過程中B.蘇丹染液在鑒定動物組織中的脂肪時C.雙縮脲試劑鑒定蛋白質時D.碘化鉀溶液鑒定淀粉時 課堂練習:.、某學生在鑒定脂肪的實驗中,在顯微鏡下察看花生子葉切片,當轉動細調理器時,有一部分細胞看的清楚,另一部分較模糊,這是由于 A.反光鏡未調理好 B.標本切的厚薄不均C.細調理器未調理好D.顯微鏡物鏡損壞 、蘇丹溶液的配制的方法是: 稱取0.1g蘇丹干粉,溶于100mL酒精的體積分數(shù)為95溶液中,待全部溶解后再運用,為什么用酒精而不用

11、蒸餾水?蘇丹染液易溶解于酒精中 ,不易溶解于水。.、鑒定蛋白質樣品時加雙縮脲試劑的正確做法是A先加A液,混合后再加B液搖勻察看B先加B液,混合后再加A液搖勻察看CA、B混合后參與,搖勻察看DA、B液同時參與樣液,搖勻后察看 、在生物組織中可溶性復原糖、脂肪、蛋白質的鑒定實驗中,對實驗資料的選擇中,錯誤的選項是A、甘蔗莖的薄壁組織、甜菜的塊根等,都含有較多的糖且近于白色,因此可用于進展可溶性復原糖的鑒定B、花生種子含脂肪多且子葉肥厚,適用于脂肪鑒定C、大豆種子蛋白質含量高,可用于蛋白質的鑒定D、 雞蛋清含蛋白質多,是蛋白質鑒定的理想資料 .五、作業(yè): 1將可溶性糖、脂肪、蛋白質鑒定原理及結淪填寫在上。 2斐林試劑主要用來鑒定可溶性復原糖,其主要成分為NaOH和CuSO4的混合液,用他已有的化學知識判別,這兩種物質混合以后能發(fā)

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