植株全氮、全磷、全鉀含量的測定(定1)(1)分解

1、精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)植株全氮、全磷、全鉀的測定一、待測液的制備（H2SO4H2O2消煮法）二、植株全氮的測定（H2SO4H2O2消煮，蒸餾法）三、植株全磷的測定（H2SO4H2O2消煮，釩鉬黃比色法）四、植株全鉀的測定（H2SO4H2O2消煮，火焰光度法一、待測液的制備（H2SO4H2O2消煮法）1 H2SO4H2O2消煮原理植物樣品在濃H2SO4溶液中，經過脫水、碳化、氧化等一系列的作用后，易分解的有機物則分解，然后再加入H2O2 ，H2O2在熱的濃H2SO4溶液中會分解出新生態(tài)氧，具有

2、強烈的氧化作用，可繼續(xù)分解沒被H2SO4破壞的有機物，使有機態(tài)氮全部轉化為無機銨鹽。同時，樣品中的有機磷也轉化為無機磷酸鹽，故可用同一消煮液分別測定N、P、K（植株中K以離子態(tài)存在）。2 主要儀器：萬分之一電子天平、0.5 mm篩、三角瓶（50ml）或消煮管、移液管（5、10ml）+吸耳球、彎頸小漏斗、消煮爐、吸管、漏斗、無磷鉀濾紙、容量瓶（100ml）2 試劑：濃硫酸（GB T625）：化學純、比重1.8430%H2O2（GB 6684）：陰涼處存放3 操作步驟稱取烘干、磨細的植物樣品(過0.5 mm篩)0.19g，置于50ml三角瓶（或消煮管）底部（勿將樣品粘附在瓶頸上），加濃硫酸5mL，

3、搖勻（最好放置過夜），瓶口蓋一彎頸小漏斗，在電爐上先緩緩加熱，待濃硫酸分解冒大量白煙時再升高溫度（在消煮爐上先250消煮溫度穩(wěn)定后計時，時間約30min，待濃硫酸分解冒大量白煙時再升高溫度至400）。消煮至溶液呈均勻的棕黑色時，取下三角瓶，稍冷后提起彎頸漏斗，滴加30%H2O210滴，并不斷搖動三角瓶。再加熱(微沸)約7-10 min，取下，稍冷后重復滴加30%H2O2 510滴，再消煮。如此反復進行3-5次，每次添加的H2O2應逐次減少，消煮至溶液呈無色或清亮后，再加熱5-10min（以趕盡剩余的H2O2 )，取下三角瓶冷卻，用少量水沖洗漏斗，洗液流入三角瓶中。將消煮液無損地洗入100 ml

4、容量瓶中，用水定容，搖勻。過濾或放置澄清后供氮、磷、鉀測定。二、植株全氮的測定（H2SO4H2O2消煮，蒸餾法）1、方法原理 蒸餾過程的反應：（NH4)2SO4 + NaOH Na2SO + 2NH3 + 2H2O NH3 + H2O NH4OH NH4OH + H3BO3 NH4H2BO3 + H2O 滴定過程的反應： NH4H2BO3 + H2SO4 （NH4)2SO4 + 2H3BO32、主要儀器、試劑（1）主要儀器：萬分之一電子天平、移液槍(2ml)、移液管（5、10ml）、三角瓶（50、150ml）、容量瓶（100、1000ml）、量筒、研缽、酸式滴定管、pH儀、定氮儀（2）需用的試

5、劑：40%NaOH溶液（10mol/L氫氧化鈉溶液）：稱取40g氫氧化鈉（GB 629分析純）溶于100ml水中硫酸（GB 62577）：分析純，0.005mol/L硫酸（將0.01mol/L硫酸標準溶液用水稀釋一倍）或0.01mol/L鹽酸標準溶液0.02mol/L硫酸標準溶液：量取濃硫酸（C.R）2.83ml，加蒸餾水稀釋至5000ml，此為0.02mol/L的（1/2H2SO4）標準溶液，然后用標準堿或硼砂標定之，將0.02mol/L的（1/2H2SO4）標準溶液用水稀釋4倍。硼酸指示劑溶液：硼酸-指示劑混合液：每升A溶液中加20ml B混合指示劑，并用稀堿調節(jié)至紅紫色（pH值約4.5）

6、。此液放置時間不宜過長，如在使用過程中pH值有變化，需隨時用稀酸或稀堿調節(jié)之。A 2硼酸溶液：20g硼酸（GB 628-78分析純）溶于1L約60去離子水中。B 甲基紅-溴甲酚綠混合指示劑：0.5g溴甲酚綠（HG 3-1220-79）和0.1g甲基紅（HG 3-958 -76）于研缽中，加入少量95乙醇，研磨至指示劑全部溶解后，加95乙醇至 100ml。pH4.5的水3、測定步驟在150ml三角瓶中，加入2硼酸-指示劑混合液5ml，放在定氮儀冷凝管末端，管口置于硼酸液面以上34cm處。之后吸取待測液10.00 mL（含NH4+-N約1mg）置于蒸餾器的定氮內室中，于定氮儀相應位置上，蓋上具塞并

7、密封使之不漏氣。然后從加液漏斗處向蒸餾室內緩緩加入20ml 10mol/L氫氧化鈉溶液，立即關緊蒸汽發(fā)生器上排氣口的旋鈕，同時打開蒸汽發(fā)生器和定氮冷凝管連接橡皮管上的夾子。通入蒸汽蒸餾，蒸餾約15min左右，餾出液體積約50ml時，即蒸餾完畢。取下三角瓶，關閉蒸汽發(fā)生器和定氮冷凝管連接橡皮管上的夾子，并打開蒸汽發(fā)生器上排氣口的旋鈕。用少量已調節(jié)至pH4.5的水洗滌冷凝管的末端，取下三角瓶。之后，用氣壓差的原理，倒吸的方法洗蒸餾瓶中的廢液，洗凈蒸餾瓶。用0.005 mol/L硫酸（或0.01mol/L鹽酸）標準溶液滴定餾出液由藍綠色至剛變?yōu)樽霞t色。記錄所用酸標準溶液的體積（ml）。空白測定所用酸

8、標準溶液的體積，一般不得超過0.4ml。4、結果計算植株中N（%）=（V1-V0）C14D10-3 100/m式中： V1 樣品測定所消耗標準酸mL數； V0 空白試驗所消耗標準酸mL數； C標準酸（H+1）的濃度molL-1； 14 氮原子的摩爾質量（gmol）； 10-3 mL換算為L； D分取倍數，定容體積/分取體積，100/10 m 干樣品質量（g）。5、注意事項（1）堿液要過量。要求中和完硫酸后再過量2mL；（2）蒸餾裝置不能漏氣；（3）硼酸要足量。估算方法：按1mL濃度為10.0gL-1的硼酸能吸收0.46mg的N計算；（4）指示劑和硼酸最好分開配置保存。因二者混合過久，有指示終點

9、不明顯的可能。（5）指示劑和硼酸的pH要調到4.5（變色點）。（6）定氮儀參數設置中，加堿量設置為3S；定氮儀開機預熱后，要多空蒸幾次，等讀數穩(wěn)定后再進行樣品測定。三、植株全磷的測定（H2SO4H2O2消煮，釩鉬黃比色法）1、方法原理在酸性條件下，正磷酸能與偏釩酸和鉬酸發(fā)生反應，形成黃色的三元雜多酸釩鉬磷酸。溶液黃色穩(wěn)定，黃色的深淺與磷的含量成正相關，所以，可用比色法測定溶液中磷的含量。2、主要儀器、試劑（1）主要儀器：萬分之一電子天平、電磁爐、移液管（1、5、10ml 2個）、吸耳球、容量瓶（50ml 8個、100、1000ml）、量筒吸管、塑料瓶、棕色瓶、pH試紙、烘箱 722或723型分

10、光光度比色計（2）試劑 濃硝酸(分析純)0.2%二硝基酚指示劑（0.25g 2,6-二硝基酚或2,4-二硝基酚溶于100ml水中，其變色范圍是pH 2.4（無色）4.0（黃色），變色點是pH 3.1）6mol/LNaOH溶液（24g NaOH(分析純)溶于水，稀釋至100ml）磷標準液50ugmL-1（準確稱取經105烘干的KH2PO4(分析純) 0.2195g溶于水，移入1L容量瓶，加水約400ml，加入5ml濃H2SO4（或濃硝酸），用水定容，裝入塑料瓶中低溫保存）。 釩鉬酸銨試劑：A液：將25.0g的鉬酸銨(NH4)6Mo7O244H2O，分析純溶于400mL水中。B液：將1.25g的偏

11、釩酸銨(NH4VO3，分析純)溶于300mL沸水中，冷卻后，加入250mL濃硝酸(分析純)，冷卻至室溫。將A液緩緩注入B液中，不斷攪勻，加水稀釋到1L，貯入棕色瓶中。3、測定步驟吸取消煮好的待測液20.00 mL（含P 0.051.0mg）置于50ml容量瓶中，加2,6-二硝基酚（或2,4-二硝基酚)指示劑2滴，用6molL-1NaOH 調pH至剛顯黃色，準確加入釩鉬酸銨試劑10.00mL，用水定容，搖勻。同時做空白實驗。15min后，用分光光度計在450nm處比色，以空白液調節(jié)吸光值的零點。標準曲線制作：準確吸取50ugmL-1的P標準溶液0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0m

12、L，于50mL容量瓶中，加與吸取的待測液等量的空白消煮液，同上述操作步驟顯色和比色。該標準系列P的濃度分別為0、1.0、2.5、5、7.5、10.0、15.0 ugmL-1 P。4、結果計算植株全P(%)=V分取倍數10-4 /m 式中：從標準曲線查得顯色液P的質量濃度(ug/mL) V 顯色液體積(mL)分取倍數：定容體積/分取體積，100/10 m 烘干樣品質量（g） 104將ug/L濃度單位換算為百分含量的換算因數5、注意事項顯色液的酸度要求在0.041.6mol.L -1H+ 內，酸度過高時，顯色不完全或不顯色，酸度太低時則可能生成沉淀或其它物質的顏色；比色要在15min后、24h內完

13、成。四、植株全鉀的測定（H2SO4H2O2消煮，火焰光度法）1、方法原理植物體內的鉀幾乎全部以離子狀態(tài)存在于植物組織中，樣品經消煮或浸提，并經稀釋后，待測液中的K可用火焰光度法測定。2、主要儀器、試劑（1）主要儀器：容量瓶（50ml 8個、1000ml）；移液管(1.0、5.0、10ml)+吸耳球、火焰光度計。（2）試劑：100 ugmL-1K標準溶液（準確稱取在105干燥2h后的0.1907gKCl，溶于水，于1L容量瓶中定容，存于塑料瓶中。 3、測定步驟吸取消煮好的待測液5.000mL（含K 10 mg/L50 mg/L），置于50 mL容量瓶，用水定容，搖勻，直接在火焰光度計上測定，讀取

14、檢流計讀數。標準曲線制作：準確吸取100 ugmL-1標準溶液0，0.5，1.0，2.5，5.0，10，20ml，分別放入50ml容量瓶中，加入與吸取的待測液等量的空白消煮液，加水定容即得0，1，2，5，10，20，40mg/L K的標準系列溶液。以濃度最高的標準溶液定火焰光度計檢流計的滿度，然后從稀到濃依次進行測定，記錄檢流計讀數，以檢流計讀數為縱坐標繪制標準曲線。4、結果計算植株全鉀(%)=V分取倍數10-4 /m 式中：從標準曲線查得顯色液K的質量濃度(ugmL-1)V：測定液體積(mL) 50ml分取倍數：定容體積/分取體積，100/10m：烘干樣質量（g)104：將ug/L濃度單位換

15、算為百分含量的換算因數5、注意事項(1)按要求制作標準曲線； (2)標準溶液和待測液的組成要基本相同。因為，溶液組成的改變（包括酸堿、陰、陽離子的濃度）對測定結果有影響；(3)儀器狀態(tài)（如空氣壓力、火焰的狀態(tài)等）對測定結果有影響。植物全氮、磷、鉀的測定植物中氮、磷、鉀的測定包括待測液的制備和氮磷鉀的定量兩大步驟。植物全氮待測液的制備通常用開氏消煮法(參考有機肥料全氮的測定)。植物全磷、鉀可用干灰化或其他濕灰化法制備待測液。本書介紹H2SO4H2O2消煮法，可用同一份消煮液分別測定氮、磷、鉀以及其它元素(如鈣、鎂、鐵、錳等)。一、植物樣品的消煮(H2SO4H2O2法)方法原理植物中的氮磷大多數以

16、有機態(tài)存在，鉀以離子態(tài)存在。樣品經濃H2SO4和氧化劑H2O2消煮，有機物被氧化分解，有機氮和磷轉化成銨鹽和磷酸鹽，鉀也全部釋出。消煮液經定容后，可用于氮、磷、鉀等元素的定量。本法采用H2O2加速消煮劑，不僅操作手續(xù)簡單快速，對氮磷鉀的定量沒有干擾，而且具有能滿足一般生產和科研工作所要求的準確度，但要注意遵照操作規(guī)程的要求操作，防止有機氮被氧化成N2或氮的氧化物而損失。試劑：(1)硫酸(化學純、比重1.84)(2)30%H2O2（分析純) 操作步驟：(1)常規(guī)消煮法 稱取植物樣品(0.5mm)0.30.5g(準確至0.0002g)裝入100ml開氏瓶的底部，加濃硫酸5ml，搖勻(最好放置過夜)

17、，在電爐上先小火加熱，待H2SO4 發(fā)白煙后再升高溫度，當溶液呈均勻的棕黑色時取下，稍冷后加6 滴H2O2，再加熱至微沸，消煮約710 分鐘，稍冷后重復加H2O2 再消煮，如此重復數次，每次添加的H2O2 應逐次減少，消煮至溶液呈無色或清亮后，再加熱約10 分鐘，除去剩余的H2O2，取下冷卻后，用水將消煮液無損轉移入100ml 容量瓶中，冷卻至室溫后定容(V1)。用無磷鉀的干燥濾紙過濾，或放置澄清后吸取清液測定氮、磷、鉀。每批消煮的同時，進行空白試驗，以校正試劑和方法的誤差。(2)快速消煮法 稱取植物樣品(0.5mm)0.30.5g(稱準至0.0002g)，放入100ml 開氏瓶中，加1ml水

18、潤濕，加入4ml 濃H2SO4搖勻，分兩次各加入H2O2 2ml，每次加入后均搖勻，待激烈反應結束后，置于電爐上加熱消煮，使固體物消失成為溶液，待H2SO4發(fā)白煙，溶液成褐色時，停止加熱，此過程約需10 分鐘。待冷卻至瓶壁不燙手，加入H2O22ml，繼續(xù)加熱消煮約510分鐘，冷卻，再加入H2O2 消煮，如此反復一直至溶液呈無色或清亮后(一般情況下，加H2O2總量約8-10ml)再繼續(xù)加熱5-10分鐘，以除盡剩余的H2O2。取下冷卻后用水將消煮液定量地轉移入100ml 容量瓶中，定容(V1)。同時做空白試驗，校正試劑和方法誤差。注釋：植物體內的鉀以離子態(tài)存在于細胞液或與有機成分呈現松散結合態(tài)。因

19、此，若只測定鉀時，可采用簡易的浸提法制備待測液。浸提劑可用0.5mol/LHCl或2mol/LNH4AC0.2mol/LMg(OAC)2 溶液，也可用熱水。所用的H2O2 應不含氮和磷。H2O2在保存中可能自動分解，加熱和光照能促其分解，故應保存于陰涼處。在H2O2中加少量H2SO4 酸化，可阻止H2O2分解。二、 植物全氮的測定(半微量蒸餾法和擴散法)方法原理 植物樣品經開氏消煮、定容后，吸取部分消煮液堿化，使銨鹽轉變成氨，經蒸餾和擴散，用H3BO3 吸收，直接用標準酸滴定，以甲基紅溴甲酚綠混合指示劑指示終點。試劑：(1)40%(m/v)NaOH 溶液稱取工業(yè)用氫氧化鈉(NaOH)400g，

20、加水溶解不斷攪拌，再稀釋定容至1000ml 貯于塑料瓶中。(2)2% H3BO3指示劑溶液稱取20g 硼酸加入熱蒸餾水(60)溶解，冷卻后稀釋定容至1000ml，最后用稀鹽酸(HCl)或稀氫氧化鈉(NaOH)調節(jié)pH 至4.5(定氮混合指示劑顯葡萄酒紅色)。(3)取標準溶液C(HCl 或1/2 H2SO4)=0.01mol/L(4)堿性溶液(5)定氮混合指示劑。稱取0.1g 甲基紅和0.5g 溴甲酚綠指示劑放入瑪瑙研缽中，加入100ml95%酒精研磨溶解，此液應用稀鹽酸(HCl)或氫氧化鈉(NaOH)調節(jié)pH 至4.5。(6)0.02mol/L 鹽酸標準溶液。取濃鹽酸(HCl)(比重1.19)

21、1.67ml，用蒸餾水稀釋定容至1000ml，然后用標準堿液或硼砂標定。操作步驟：(1)蒸餾法 吸取定容后的消煮液5.0010.00ml，(V2，含NH4N 約1ml)，注入半微量蒸餾器的內室，另取150ml 三角瓶，內加入5ml2% H3BO3指示劑溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3 液面以下，然后向蒸餾器內室慢慢加入約3ml40%(m/v)NaOH 溶液，通入蒸氣蒸餾，(注意開放冷凝水，勿使餾出液的溫度超過40)待餾出液體積約達5060ml 時，停止蒸餾，用少量已調節(jié)至pH 為4.5 的水沖洗冷凝管末端。用酸標準溶液滴定餾出液至由藍綠色突變?yōu)樽霞t色(終點的顏色應和空白測定的終點相同)

22、。用酸標準溶液，同時進行空白液的蒸餾測定，以校正試劑和滴定誤差。(2)擴散法 吸取定容后的消煮液200500ml(V2，含NH4N0.050.5mg)于10 厘米的擴散皿外室。內室加入2%H3BO3指示劑溶液3ml，參照土壤堿解氮測定的操作步驟進行擴散和滴定，但中和H2SO4 需用40%NaOH 溶液2ml，擴散可在室溫下進行，不必恒溫，室溫在20以上時，放置約24h，低于20時，須放置較長時間。在擴散期間，可將擴散皿內容物小心轉動混勻23 次，加速擴散，可縮短擴散時間。在測定樣品的同時，須在同一條件下做空白試驗。結果計算全N%=C(V-V0)0.041100/(mV2/V1)式中 C酸標準溶

23、液濃度，mol/L；V滴定試樣所用的酸標準液，ml；V0滴定空白所用的酸標準液，ml；0.041N 的毫摩爾質量，g/mmol；m稱樣量，g；V1消煮液定容體積，ml；V2吸取測定的消煮液體積ml。三、植物全磷的測定(釩鉬黃吸光光度法)方法原理 植物樣品經濃H2SO4 消煮使各種形態(tài)的磷轉變成磷酸鹽。待測液中的正磷酸與偏釩酸和鉬酸能生成黃色的三元雜多酸，其吸光度與磷濃度成正比，可在波長400490nm處用吸光光度法測定磷。磷濃度較高時選用較長的波長，較低時選用較短的波長。此法的優(yōu)點是操作簡便，可在室溫下顯色，黃色穩(wěn)定。在HNO3，HCl,HClO4 和H2SO4 等介質中都適用，對酸度和顯色劑

24、濃度的要求也不十分嚴格，干擾物小。在可見光范圍內靈敏度較低，適測范圍廣(約為120mg/L，P)，故廣泛應用于含磷較高而且變幅較大的植物和肥料樣品中磷的測定。試劑：(1)釩鉬酸銨溶液 25.0g 鉬酸銨(NH4)6Mo7O244H2O 分析純溶于400ml 水中，另將25g 偏釩酸銨(NH4VO3，分析純)溶于300ml 沸水中，冷卻后加入250ml 濃HNO3(分析純)。將鉬酸銨溶液緩緩注入釩酸銨溶液中，不斷攪勻，最后加水稀釋到1L，貯入棕色瓶中。(2)6mol/LNaOH 溶液 24gNaOH 溶于水，稀釋至100ml；(3)0.2%二硝基酚指示劑0.2g 2，6二硝基酚或2，4二硝基酚溶

25、于100ml 水中；(4)磷標準液C(P)50mg/L0.2195g 干燥的KH2PO4(分析純)溶于水，加入5ml 濃HNO3，于1L 容量瓶中定容。操作步驟：吸取定容、過濾或澄清后的消煮液10.00ml(V2 含磷0.050.75mg)放入50ml容量瓶中，加2 滴二硝基酚指示劑，滴加6mol/LNaOH中和至剛呈黃色，加入10.00ml 釩鉬酸銨試劑，用水定容(V3)。15分鐘后用1cm 光徑的比色杯在波長440mm 處進行測定，以空白溶液(空白試驗消煮液按上述步驟顯色)調節(jié)儀器零點。標準曲線或直線回歸方程 準確吸取50mg/L P 標準液0，1，2.5，5，7.5，10，15ml 分別

26、放入50ml 容量瓶中，按上述步驟顯色，即得0，1.0，2.5，5.0，7.5，10，15mg/LP 的標準系列溶液，與待測液一起測定，讀取吸光度，然后繪制標準曲線或求直線回歸方程。結果計算全P%C(P)(V1/m)(V3/V2)104式中 C(P)從校準曲線或回歸方程求得的顯色液中磷濃度，mg/L；V3顯色液體積，ml；V2吸取測定的消煮液體積，ml；V1消煮液定容體積，ml；m稱樣量，g；104將mg/L 濃度單位換算為百分含量的換算因數。注釋顯色液中(CP)1-5mg/L 時，測定波長用420nm；520mg/L，用490nm。待測液中Fe3+濃度高的選用450nm，以消除Fe3+干擾。

27、校準曲線也應用同樣波長測定繪制。一般室溫下，溫度對顯色影響不大，但室溫太低(如15時，需顯色30分鐘，穩(wěn)定時間可達24小時；如試液為HCl，HClO4 介質，顯色劑應用HCl 配制；試液為H2SO4介質，顯色劑也用H2SO4配制。顯色液酸的適宜濃度范圍為0.21.6mol/L，最好是0.51.0mol/L，酸度高顯色慢且不完全，甚至不顯色，低于0.2mol/L，易產生沉淀物，干擾測定。鉬酸鹽在顯色液中的終濃度適宜范圍為1.610-310-2mol/L，鋇酸鹽為810-52.210-3mol/L。此法干擾離子少，干擾離子是Fe3+，當顯色液中Fe3+濃度超過0.1%時，它的黃色有干擾?？捎每鄢?/p>

28、白法消除。UV254測定一、實驗儀器：紫外分光光度計、1cm 石英比色皿。真空抽濾機。過濾裝置：孔徑為0.45m 的濾膜。清洗濾膜和過濾裝置時應保證至少50mL 不含有機物的清洗水通過濾膜。清洗水：DOC 含量低于0.3mg/L 的雙蒸餾水。二、操作過程水樣的制備：將水樣通過過濾裝置,去除水中懸浮物質和非溶解性有機物。分光光度法測定：以去離子水作為空白對照，在254nm 波長、室溫下測定。色度測定一、主題內容與適用范圍1、本標準規(guī)定了兩種測定顏色的方法。本標準測定經15min澄清后樣品的顏色。pH值對顏色有較大影響，在測定顏色時應同時測定pH值。 1.1 鉑鈷比色法參照ISO 78871985

29、水質顏色的檢驗和測定。鉑鈷比色法適用于清潔水、輕度污染并略帶黃色調的水，比較清潔的地面水、地下水和飲用水等。 1.2 稀釋倍數法適用于污染較嚴重的地面水和工業(yè)廢水。 兩種方法應獨立使用，一般沒有可比性。 樣品和標準溶液的顏色色調不一致時，本標準不適用。 2、定義:本標準定義取自國際照明委員會第17號出版物（CIE publication No.17），采用下述幾條。 2.1 水的顏色 :改變透射可見光光譜組成的光學性質。 2.2 水的表觀顏色 :由溶解物質及不溶解性懸浮物產生的顏色，用未經過濾或離心分離的原始樣品測定。 2.3 水的真實顏色 :僅由溶解物質產生的顏色。用經0.45m濾膜過濾器過

30、濾的樣品測定。 2.4 色度的標準單位，度：在每升溶液中含有2mg六水合氯化鈷()和1mg鉑以六氯鉑()酸的形式時產生的顏色為1度。二、鉑鈷比色法1、原理 :用氯鉑酸鉀和氯化鈷配制顏色標準溶液，與被測樣品進行目視比較，以測定樣品的顏色強度，即色度。 樣品的色度以與之相當的色度標準溶液的度值表示。 注：此標準單位導出的標準度有時稱為“Hazen際”或“PtCo標”GB 3143液體化學產品顏色測定法(Hazcn單位鉑鈷色號）、或毫克鉑/升。 2、試劑 :除另有說明外，測定中僅使用光學純水及分析純試劑。 2.1 光學純水：將0.2m。濾膜(細菌學研究中所采用的)在100mL或去離子水中浸泡1h，用

31、它過濾250mL蒸餾水或去離子水，棄去最初的250mL，以后用這種水配制全部際準溶液并作為稀釋水。 2.2 色度標準儲備液，相當于500度：將1.2450.001g六氯鉑()酸鉀(K2PtC16)及1.0000.001g六水氯化鈷()(CoCl26H2O)溶于約500mL水中，加1001mL(=1.18g/mL)并在1000mL的容量瓶內用水稀釋下標線。 將溶液放在密封的玻璃瓶中，存放在暗處，溫度不能超過30。個溶液至少能穩(wěn)定6個月。 2.3 色度標準溶液：在一組250mL的容量瓶中，用移液管分別加入2.50、5.00、7.50、10.00、12.50、15.00、17.50、20.00、30

32、.00及35.00mL儲備液，并用水稀釋至標線。溶液色度分別為：5、10、15、20、25、30、35、40、50、60和70度。 溶液放在嚴密益好的玻璃瓶中，存放于暗處。溫度不能超過30。這些溶液至少可穩(wěn)定1個月。 3、儀器 常用實驗室儀器和以下儀器。 具塞比色管，50mL。規(guī)格一致，光學透明玻璃底部無陰影。 pH計，精度0.1pH單位。 容量瓶，250mL。 4、采樣和樣品 所用與樣品接觸的玻璃器皿都要用鹽酸或表面活性劑溶液加以清洗，最后用蒸餾水或去離了水洗凈、瀝干。 將樣品采集在容積至少為1L的玻璃瓶內，在采樣后要盡早進行測定。如果必須貯存，則將樣品貯于暗處。在有些情況下還要避免樣品與空

33、氣接觸。同時要避免溫度的變化。 5、步驟 5.1 試料 :將樣品倒入250mL(或更大)量筒中，靜置15min，傾取上層液體作為試料進行測定。 5.2 測定 :將一組具塞比色管用色度標準溶液充至標線。將另一組具塞比色管用試料充至標線。 將具塞比色管放在白色表面上，比色管與該表面應呈合適的角度，使光線被反射自具塞比色管底部向上通過液柱。 垂直向下觀察液柱，找出與試料色度最接近的標準溶液。 如色度70度，用光學純水將試料適當稀釋后，使色度落入標準溶液范圍之中再行測定。 另取試料測定pH值。 6、的表示 以色度的際準單位報告與試料最接近的標準溶液的值，在040度(不包括40度)的范圍內，準確到5度。

34、4070度范圍內，準確到10度。 在報告樣品色度的同時報告pH值。 稀釋過的樣品色度(A0)，以度計，用下式計算： 式中：V1樣品稀釋后的體積，mL； V0樣品稀釋前的體積，mL； A1稀釋樣品色度的觀察值，度。 三、稀釋倍數法1、 原理 :將樣品用光學純水稀釋至用目視比較與光學純水相比剛好看不見顏色時的稀釋倍數作為表達顏色的強度，單位為倍。 同時用目視觀察樣品，檢驗顏色性質：顏色的深淺(無色，淺色或深色)，色調(紅、橙、黃、綠、藍和紫等)，如果可能包括樣品的透明度(透明、混濁或不透明)。用文字予以描述。 結果以稀釋倍數值和文字描述相結合表達。 2、試劑 2.1 光學純水。 3、 儀器 3.1

35、 實驗室常用儀器及具塞比色管、pH計。 4、采樣和樣品 同3.4條 5、步驟 5.1 試料 同第3.5.l條。 5.2 測定 分別取試料和光學純水于具塞比色管中，充至標線，將具塞比色管放在白色表面上，具塞比色管與該表面應呈合適的角度，使光線被反射自具塞比色管底部向上通過液柱。垂直向下觀察液柱，比較樣品和光學純水，描述樣品呈現的色度和色凋，如果可能包括透明度。 將試料用光學純水逐級稀釋成不同倍數，分別置于具塞比色管井充至標線。將具塞比色管放在白色表面上，用上述相同的方法與光學純水進行比較。將試料稀釋至剛好與光學純水無法區(qū)別為止，記下此時的稀釋倍數值。 稀釋的方法：試料的色度在50倍以上時，用移液

36、管計量吸取試料于容量瓶中，用光學純水稀至標線，每次取大的稀釋比，使稀釋后色度在50倍之內。 試料的色度在50倍以下時，在具塞比色管中取試料25mL，用光學純水稀至標線，每次稀釋倍數為2。 試料或試料經稀釋至色度很低時，應自具塞比色管倒至量筒適量試料并計量，然后用光學純水稀至標線，每次稀釋倍數小于2。記下各次稀釋倍數值。 另取試料測定pH值。 6、結果的表示將逐級稀釋的各次倍數相乘，所得之積取整數值，以此表達樣品的色度。 同時用文字描述樣品的顏色深淺、色調，如果可能，包括透明度。 在報告樣品色度的同時，報告pH值。植物氮、磷、鉀全量分析植物中氮、磷、鉀測定包括待測液制備和氮、磷、鉀定量2大步驟。

37、1植物全氮、磷、鉀含量測定待測液制備（ H2SO4+H2O2消煮法）1.1適用范圍： 本方法不包括硝態(tài)氮的植物全氮測定，適合于含硝態(tài)氮低的植物樣品的測定。1.2方法提要植物中的氮、磷大多數以有機態(tài)存在，鉀以離子態(tài)存在。樣品經濃H2SO4和氧化劑H2O2消煮，有機物被氧化分解，有機氮和磷轉化成銨鹽和磷酸鹽，鉀也全部釋出。消煮液經定容后，可用于氮、磷、鉀等元素的定量。采用H2O2為加速消煮的氧化劑，不僅操作手續(xù)簡單快速，對氮、磷、鉀的定量沒有于擾，而且具有能滿足一般生產和科研工作所要求的準確度。但要注意遵照操作規(guī)程的要求操作，防止有機氮被氧化成N2氣或氮的氧化物而損失。1.3試劑1.3.1硫酸(化

38、學鈍，比重1.84)； +1.3.2 30H2O2 (分析純)。1.4主要儀器設備1.4.1消煮爐1.5 操作步驟稱取植物樣品(0.5mm)03 g 05g（稱準至00002g）裝入100mL凱氏瓶或消煮管的底部，加濃H2SO4 5mL，搖勻，放置過夜。第二天在電爐或消煮爐上先小火加熱，待H2SO4發(fā)白煙后再升高溫度，當溶液呈均勻的棕黑色時取下。稍冷后加10滴H2O2，再加熱至微沸，消煮約710min，稍冷后重復加H2O2，再消煮。如此重復數次，每次添加的H2O2應逐次減少，消煮至溶液呈無色或清亮后，再加熱約10min，除去剩余的H2O2。取下冷卻。用水將消煮液無損地轉移入100mL容量瓶中，

39、冷卻至室溫后定容(V1)。用無磷鉀的干濾紙過濾，或放置澄清后吸取清液測定氮、磷、鉀。每批消煮的同時，進行空白試驗，以校正試劑和方法的誤差。1.注意事項1.6.1所用的H2O2應不含氮和磷。H2O2在保存中可能自動分解，加熱和光照能促使其分解，故應保存于陰涼處。在H2O2中加入少量H2SO4酸化，可防止H2O2分解。1.6.2 稱樣量決定于NPK含量，健狀莖葉稱05g，種子03g，老熟莖叫可稱1g，若新鮮莖葉樣，可按干樣的5倍稱樣。稱樣量大時，可適當增加濃H2SO4用量。1.6.3 加H2O2時應直接滴入瓶底液中，如滴在瓶頸內壁上，將不起氧化作用，若遺留下來還會影響磷的顯色。2 植物全氮測定半微

40、量蒸餾法2.1 適用范圍：適合于各種植物樣品消煮液中氮的定量。2.2 方法原理：植物樣品經開氏消煮、定容后，吸取部分消煮液堿化，使銨鹽轉變成氨，經蒸餾，用H3BO3吸收，硼酸中吸收的氨可直接用標準酸滴定，以甲基紅溴甲酚綠混合指示劑指示終點。2.3試劑2.3.1 NaOH溶液：400gL。2.3.2 H3BO3指示劑溶液：20g L。2.3.3酸標準溶液(c(HCI或12 H2SO4)：0.01molL。標定見HG/T 2843.2.4儀器設備2.4.1蒸餾裝置或半自動蒸餾儀。2.5蒸餾: 檢查蒸餾裝置是否漏氣和管道是否潔凈后，打開蒸餾儀開關，空蒸30分鐘。準確吸取定容后的消煮液5.0010.0

41、0mL(V2，含NH4-N約1mg)，注入半微量蒸餾器的消化管內。另取150mL三角瓶，內加5mL 2H3BO3，指示劑溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3液面以上34cm處，然后向蒸餾器內慢慢加入約3mL 400gLNaOH溶液，通入蒸氣蒸餾(注意開放冷凝水，勿使餾出液的溫度超過40C)。待餾出液體積約達5060mL時，停止蒸餾，用少量已調節(jié)至P4.5的水沖洗冷凝管末端。用酸標準溶液滴定餾出液至由藍綠色突變?yōu)樽霞t色(終點的顏色應和空白測定的滴定終點相同)。與此同時進行空白測定的蒸餾、滴定，以校正試劑和滴定誤差。2.6結果計算 全(N)，=c (HCl)X (VV0)X0.014XDXl0

42、0m； 式中：c (HCl)酸標準溶液的濃度，molL； V滴定試樣所用的酸標準液體積，mL； V0滴定空白所用的酸標準液，mL： 0.014N的摩爾質量，kgmol； m稱樣量，g： D分取倍數(即消煮液定容體積V1吸取測定的體積V2)。3 植物全磷的測定（釩鉬黃吸光光度法）3.1適用范圍：適合于含磷量較高的植物樣品的測定(如籽粒樣品)。3.2方法原理： 植物樣品經濃H2SO4消煮使各種形態(tài)的磷轉變成磷酸鹽。待測液中的正磷酸與偏釩酸和鉬酸能生成黃色的三元雜多酸，其吸光度與磷濃度成正比，可在波長400490nm處用吸光光度法測定。磷濃度較高時選用較長的波長，較低時選用較短波長。 此法的優(yōu)點是操

43、作簡便，可在室溫下顯色，黃色穩(wěn)定。在HNO3、HCIO4，和H2SO4等介質中都適用，對酸度和顯色劑濃度的要求也不十分嚴格，干擾物少。在可見光范圍內靈敏度較低，適測范圍廣(約為120mgL P)，故廣泛應用于含磷較高而且變幅較大的植物和 肥料樣品中磷的測定。3.3試劑3.3.1釩鉬酸銨溶液：25.0g鉬酸銨(NH4)6Mo7O2.4H2O，分析純)溶于400mL水中，必要時可適當加熱，但溫度不得超過60。另將1.25g偏釩酸銨(NH4VO3，分析純)溶于300mL沸水中，冷卻后加入250mL濃HNO3（分析純）。將鉬酸銨溶液緩緩注入釩酸銨溶液中，不斷攪勻，最后加水稀釋至1L，貯于棕色瓶中。3.

44、3.2 NaOH溶液(c=6 molL)：24g NaOH溶于水，稀釋至100mL。3.3.3二硝基酚指示劑(p=2 g/L)：0.2 g 2,6-二硝基酚或2.4-二硝基酚溶于100 mL水中。3.3.4磷標準溶液(P=50mgL)：0.2195g (干燥的KH2PO4(分析純)溶于水，加入5mL 濃HNO3，于1 L容量瓶中定容。3.4主要儀器設備3.4.1分光光度計。3.5分析步驟 準確吸取定容、過濾或澄清后的消煮液520mL(V2：，含P 0.050,75mg)放入50 mL容量瓶中，加2滴二硝基酚指示劑，滴加6molL NaOH中和至剛呈黃色，加入10.00 mL釩鉬酸銨試劑，用水定

45、容(V3)。15min后，用1cm光徑的比色槽在波長440nm處進行測定，以空白溶液(空白試驗消煮液按上述步驟顯色)，調節(jié)儀器零點。校準曲線或直線回歸方程：準確吸取50mgLP標準液0，1，2.5，7.5，10，15mL分別放入50mL容量瓶中，按上述步驟顯色，即得0，1.0，2.5，5.0，7.5，10，15mgL P的標準系列溶液，與待測液一起進行測定，讀取吸光度。然后繪制校準曲線或求直線回歸方程。.結果計算 全 ()，= P XV X （V3V2）)X10-4m； 式中： P從校準曲線或回歸方程求得的顯色液中磷的質量濃度，mgL： V消煮液定容體積，mL； V2吸取測定的消煮液體積，mL

46、； ， V3顯色液體積，mL： m稱樣量，： 10-4將mgL濃度單位換算為百分含量的換算因數。3.7注意事項3.7.1顯色液中P15mgL時，測定波長用420nm；520mgL，用490nm。待測液中Fe+濃度高應選用450nm，以清除Fe+干擾。校準曲線也應用同樣波長測定繪制。3.7.2一般室溫下，溫度對顯色影響不大，但室溫太低(如15)時，需顯色30min。穩(wěn)定時間可達24 h。3.7.3如試液為HCI、HClO4介質，顯色劑應用HCl配制；試液為H2SO4介質，顯色劑也用H2SO4配制。顯色液酸的適宜濃度范圍為0.21.6molL，最好是0.51.0 molL。酸度高顯色慢且不完全，甚至不顯色：低于0.2moIL易產生沉淀物，干擾測定。鉬酸鹽在顯色液中的終濃度適宜范圍為1.6X10-310-2molL，釩酸鹽為8X10-5一2.2X10-3molL。3.7.4此法干擾離子少。主要干擾離子是鐵，當顯色液中Fe3+濃度超過0.1時，它的黃色有干擾，可用扣除空白消除。 植物全磷的測定（鉬銻抗吸光光度法）4.1適用范圍：適合于含磷量較低的植物樣品的測定(如莖稈樣品等)。4.2方法提要：植物樣品經濃H2SO4消煮使各種形態(tài)的磷轉變成磷酸鹽。在一定酸度下，待測液中的正磷酸與鉬酸銨和酒石酸銻鉀生成一種三元雜多酸，后者在室溫下能迅速被抗壞血酸